CC BY
62
Орипнальы досл1дження
Original Researches
УДК 616-078.33:577.21
МАЛЫЙ В.П.1, ЛЯДОВА Т.И.2, ГОЛОЛОБОВА О.В.1, БОЙКО В.В.3 Харьковская медицинская академия последипломного образования 2Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина 3Харьковский военно-медицинский госпиталь
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПИРОВАНИЯ ОБЛИГАТНО-ГЕПАТОТРОПНЫХ ВИРУСОВ. ВЛИЯНИЕ ГЕНОТИПОВ ВИРУСОВ НА КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ И ИСХОДЫ БОЛЕЗНИ
Введение
Проблема вирусных гепатитов (ВГ) занимает доминирующее место среди всех заболеваний печени и является одной из наиболее актуальных в современной гепатологии. С этими инфекциями связано большинство случаев летальных исходов у больных с острыми вирусными гепатитами, а также случаи развития хронических заболеваний печени, включая цирроз и гепатоцеллюлярную карциному [1, 2]. Нельзя не принимать во внимание тот факт, что длительное течение болезни с затяжным периодом реконвалесценции и серьезными остаточными явлениями обусловливает существенный материальный ущерб, связанный с затратами на непосредственное лечение данного заболевания [2]. Такая ситуация обусловлена, с одной стороны, факторами хозяина, в частности, особенностями реагирования иммунной системы, с другой — факторами вируса, которые позволяют ему противостоять механизмам иммунитета, выживать в макроорганизме, влиять на исходы заболевания и эффективность проводимой противовирусной терапии.
За последнее время достигнуты значительные успехи в выявлении маркеров вирусных гепатитов, в раскрытии патогенетических механизмов, обеспечивающих санацию организма от гепатотропных вирусов через цитолиз собственных клеток, пораженных вирусами [3—5]. Существенным достижением современной клинической медицины является широкое использование и внедрение в лабораторную практику новых высокоинформативных диагностических технологий. Новые молекулярно-генетические и иммунологические методы диагностики, такие как индикация специфических антител к вирусам гепатитов с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), выявление нук-леотидных последовательностей РНК и ДНК вирусов с последующим определением генотипа не только в крови, но и в различных биологических тканях, значительно расширили существующие представления об этиологии и патогенезе ВГ [6, 7]. Это позволяет на
более ранних стадиях выявить инфицированных лиц, установить клиническую форму и характер течения заболевания [4]. Результаты генотипирования характеризуются большой однозначностью по сравнению с другими методами исследования и предоставляют непосредственную информацию для выявления эволюционных и эпидемиологических связей различных изолятов ВГ [6, 7].
В настоящее время молекулярно-генетические методы типирования ВГ составляют основу молекулярной эпидемиологии вирусных гепатитов, целью которой является изучение циркуляции отдельных генетических вариантов возбудителей и их причинной связи с возникновением и распространением инфекционных заболеваний.
Существующие изоляты вируса гепатита А (ГА, НАУ) подразделяют на 7 генотипов, которые обозначаются римскими цифрами от I до VII [4, 5]. Генотипы вируса I, II, III и VII вызывают заболевание у человека, а генотипы IV, V, VI — у обезьян. Отличия между изо-лятами НАХ выделенными в разных регионах мира по нуклеотидным последовательностям геномной РНК, составляют 15—25 %, а на уровне генотипов и субтипов — 7,5 % соответственно. При этом аминокислотные последовательности изолятов НА\" достаточно консервативны, что объясняет наличие всего одного серотипа у данного вируса. По данным исследователей [19], наиболее тяжелое течение заболевания отмечается у лиц с генотипом ГО, ША, тогда как среднетяжелые формы наблюдаются при генотипе ¡А.
О гетерогенности популяции гепатита В (ГВ, НВХ) стало известно еще в середине 70-х годов прошлого столетия, когда экспериментально серологическими методами было доказано существование субтипов
© Малый В.П., Лядова Т.И., Гололобова О.В., Бойко В.В., 2013
© «Актуальная инфектология», 2013 © Заславский А.Ю., 2013
поверхностного антигена вируса — HBsAg. При этом была найдена одна общая детерминанта «а», которая в комбинации с 2 дополнительными детерминантами ё/у и -/г образовывала 4 субтипа HBsAg: аё— ау— аёг, ауг. Позже были описаны новые варианты детерминант, и общее количество субтипов достигло 9. На основании анализа нуклеотидных последовательностей S-гена изоляты НВУ, выделенные в разных регионах мира, объединили в 8 основных генотипов, которые назвали заглавными буквами латинского алфавита: А, В, С, D, Е, F, G и Н. Следует отметить, что полное соответствие между генотипами НВУ и серотипами HBsAg не установлено. Так, изоляты НВУ, которые относятся к четырем абсолютно разным генотипам А, В, С и F, могут иметь один и тот же серотип аё—2 [5, 12, 16].
Вирус гепатита С (ГС, НСУ) среди других ВГ характеризуется наибольшей генетической вариабельностью генома. Согласно классификации, все изоляты НСУ группируются в 6 главных генотипах, которые обозначаются арабскими цифрами от 1 до 6. Внутри каждого генотипа выделяют субтипы, которые включают изоляты, состоящие из квазивидов. На принадлежность изолята к определенному субтипу указывают прописные латинские буквы, которые пишутся вслед за арабской цифрой: НСУ1а, НСУ1Ь, НСУ1с, НСУ2а и т.д. В настоящее время известно более 100 субтипов НСУ [14, 21].
Известные изоляты HDV сгруппированы в 3 генотипа, которые обозначаются римскими цифрами — I, II, III [14, 21].
К настоящему времени предложено выделять 5 генотипов вируса гепатита G (ГG), у которых установлена закономерность территориального распространения. Второй генотип ГG преобладает в Северной Америке, Европе, Азии и Северной Африке, первый встречается только в Западной Африке, пятый — в Южной Америке, третий и четвертый — в Юго-Восточной Азии. По данным исследователей, на территории Украины, России и стран СНГ доминирует второй генотип [6].
У верифицированного в 1997 году ДНК-содержа-щего вируса ТТУ различают 16 генотипов — G1—G16, роль которых в патологии печени изучается [1].
Таким образом, популяции ВГ насчитывают сотни генетических вариантов. В связи с этим использование рутинных лабораторных методов диагностики ВГ, основанных на определении антигенов и антител, не может дать информацию об особенностях циркуляции разных вариантов ВГ среди населения, о наличии связи между изолятами ВГ, выделенными как от отдельных пациентов, так и групп пациентов, вовлеченных во вспышки, количество которых за последние годы значительно возросло.
К сожалению, изучение генотипов облигатно-ге-патотропных вирусов, циркулирующих на территории Украины, и их влияния на течение и исходы заболевания является крайне слабым звеном в работе лабораторной службы Украины.
Цель исследования: на основании генодиагностических исследований изучить клиническое течение, тя-
жесть и последствия вирусных гепатитов с разнообразными механизмами передачи инфекции.
Основные задания исследования:
1. Провести генотипирование HAV, HBV, HDV, HCV и выявить РНК И ДНК HGV и TTV, определить циркулирующие генотипы и их субтипы в исследуемых регионах.
2. Выявить возможные различия в клинических проявлениях заболевания в зависимости от установленных генотипов и геновариантов вирусов.
3. Установить связь с клиническими проявлениями болезни у больных ВГ.
Материалы и методы
Результаты нашей работы базируются на обследовании 141 больного ГА в различных регионах Украины; 163 больных острым ГВ (ОГВ) в Харьковском регионе, 76 больных ОГВ и 54 больных хроническим ГВ (ХГВ) в Закарпатском регионе; 155 больных HCV-инфекцией: острый ГС (ОГС) установлен у 37 больных, хронический ГС (ХГС) — у 117.
Диагноз устанавливался соответственно с учетом комплекса клинико-эпидемиологических, лабора-торно-инструментальных данных обследования и подтверждался выявлением в сыворотке крови специфических серологических маркеров ВГ (анти-HAV IgM, HBsAg, анти-HBcIgM, анти-HBcIgG, HBeAg, анти-НВе, анти-HCV (сум.), анти-HCV IgM и IgG, анти-HCV core и анти-HCV NS-3, NS-4, NS-5, анти-HDV IgM) методом ИФА (ELISA) посредством тест-систем НПО «Диагностические системы» (Россия) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) (РНК HAV, ДНК MV и РНК HDV, PHK HCV, РНК HGV и ДНК TTV). Клинико-патогенетические варианты течения, форму и степень тяжести ВГ определяли согласно общепринятым в клинической практике критериям (МКБ-10).
Материалом для наших исследований была сыворотка крови больных в разные периоды заболевания (разгара, реконвалесценции).
Молекулярно-биологические исследования включали определение репликативной активности ВГ на основании выявления в сыворотке крови РНК и ДНК исследуемых вирусов методом ПЦР с использованием тест-систем ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ. Геноти-пирование вирусов проводилось с использованием ре-стрикционного анализа по методу М. Mizokami с соавт. (1999) в модификации ЦНИИЭ г. Москвы.
Полученные результаты исследований статистически обработаны с использованием методов вариационной статистики, что осуществлялось посредством программ Ехсе1-2002 и Statistka for Windows (Statsoft Inc., США) на компьютере с процессором CPU Athlon 64-3200 Tray.
Результаты и их обсуждение
Выявление и обследование больных ГА, как отмечалось, проводилось в различных регионах Украины. Среди обследованных больных (n = 141) у 16 % была
выявлена микст-инфекция (НА\" и НВ\" — у 9,6 % и НА¥ и НС¥ — у 6,4 %).
При генотипировании вируса ГА в 75 % случаев (105 больных) был выявлен генотип 1А вируса ГА, у 36 пациентов — генотип 3А, что составило 25 % (рис. 1). Удельный вес разных генотипов ГА у больных в разных регионах Украины представлен на рис. 2. Следует отметить, что в Закарпатской, Полтавской и Николаевской областях среди спорадических случаев ГА был выявлен только доминирующий генотип 1А.
Важно отметить, что при изучении тяжести течения ГА в зависимости от выявленного генотипа нами было установлено, что у лиц с генотипом ЗА отмечается более тяжелое течение болезни по сравнению с таковым у больных с генотипом 1А (рис. 3).
Таким образом, генотипирование вируса ГА у больных с разным течением заболевания позволило выявить два генотипа: 1А и 3А. Генотип 1А является доминирующим среди спорадических случаев заболевания ГА, поскольку его частота составляет 75 %, а генотип 3А встречался значительно реже — у 25 % больных.
Клинически у пациентов с установленным генотипом 1А НА\" заболевание протекало циклически с различной степенью тяжести, однако превалировали легкие формы (61 и 39 %), тогда как у больных с генотипом 3А регистрировался больший процент среднетя-желых форм болезни (42 и 58 % соответственно).
При генотипировании вируса ГВ у 84,5 % больных (п = 208) был установлен генотип D вируса ГВ, у 17 па-
1А (п = 105) ЗА (п = 36)
Генотип НАУ
■ Легкое течениеГА ШСреднетяжелое течениеГА
Рисунок 3. Тяжесть течения ГА в зависимости от генотипа HAV
Рисунок 2. Удельный вес установленных (п = 141) генотипов ГА в различных регионах Украины
циентов — генотип А, что составило 8,4 %. Количество больных, у которых была выявлена ДНК НВХ но генотип вируса установить не удалось, — 14 чел. (7,1 %) (рис. 4).
По результатам генодиагностических исследований с определением генотипов вируса ГВ у пациентов с ОГВ установлено значительное преобладание как в Харьковском, так и в Закарпатском регионах генотипа D (90,8 и 71,1 %) и редкая встречаемость генотипа А (2,5 и 19,7 % соответственно).
Следует отметить, что частота выявления генотипа А НВ\" в Закарпатском регионе значительно превышала таковую среди пациентов с острой НВ¥-инфекцией в Харьковском регионе — 19,7 и 2,5 % соответственно, что свидетельствует об особенности территориального распространения генотипов НВ\" в Украине.
При обследовании больных ХГВ была зарегистрирована почти одинаковая частота как генотипа А, так и генотипа D НВ\" — 41,8 и 39,2 % соответственно. Некоторые специалисты считают, что генотип А вируса ГВ имеет более низкую антигенность по сравнению с генотипом D и вследствие этого — более низкую способность чем генотип D, индуцировать иммунный ответ, поэтому данный генотип ассоциируется с большим риском развития хронического гепатита.
Для выявления возможной взаимосвязи между клиническими проявлениями болезни и генотипом НВ¥ нами проводилось сравнение частоты отдельных клинических симптомов в зависимости от установленного генотипа вируса (табл. 1).
Данные табл. 1 показывают, что у пациентов с генотипом А чаще встречалась тяжесть в эпигастрии — в 80 %, тогда как у лиц с генотипом D — в 46,3 % случаев (р < 0,05). Кожный зуд — в 46,7 и 18,5 % случаев соответственно (р < 0,05). Также значительно чаще у больных с генотипом А по сравнению с генотипом D отмечались: тошнота — в 93,3 % случаев (р > 0,05), артралгии — в 20 % случаев (р > 0,05), повышение температуры тела — в 33 % случаев (р > 0,05), однако указанные значения не отличались статистической достоверностью.
Анализируя данные некоторых биохимических показателей у пациентов с ОГВ в зависимости от вы-
■ 8,40 %
7,10 %
□ 84,50 %
■ Генотип А ОГВ Я Генотип не установлен □ Генотип В ОГВ
□ 41,8 %
■ 19,0 %
139,2 %
■ ГенотипАХГВ
■ Генотип не установлен □ Генотип О ХГВ
Рисунок 4. Частота выявления отдельных генотипов НВУ у пациентов с ОГВ (п = 202) и ХГВ (п = 79)
явленного генотипа, было установлено, что для лиц с генотипом А НВУ свойственно более выраженное повышение активности трансаминаз (аланинамино-трансфераза (АлАТ) в остром периоде повышалась до 7,5 ± 0,4 ммоль/л • ч, в то время как у больных с генотипом D — до 5,3 ± 0,2 ммоль/л • ч; р < 0,05) (табл. 2). Уровень общего белка в группе больных с генотипом А имел тенденцию к снижению (60,9 ± 3,2 г/л) по сравнению с соответствующим показателем у больных с генотипом D (69,5 ± 2,9 г/л) (р < 0,05).
При сравнении частоты клинических проявлений ХГВ в зависимости от установленного генотипа НВУ у лиц, которые находились под нашим наблюдением, также были выявлены некоторые различия (табл. 3).
Проявления диспептического синдрома чаще встречались у лиц с генотипом А НВУ по сравнению с таковыми у пациентов с генотипом D: снижение аппетита (96,8 % против 69,7 %), тошнота (54,8 % против 18,2 %), тяжесть в правом подреберье (93,5 % против 54,5 % случаев) (р < 0,05).
У больных с генотипом А НВУ также значительно чаще отмечались боли при пальпации в правом подреберье, при этом средние показатели отличались статистической достоверностью (р < 0,05). Это коррели-
ровало с жалобами этих больных на тяжесть в правом подреберье (р > 0,05). Кроме того, у больных ХГВ с генотипом А НВУ желтуха проявлялась в 2,5 раза чаще, чем у пациентов с генотипом D, — 22,6 % против 9,1 % (р < 0,05). У всех пациентов с ХГВ с установленными генотипами А и D НВУ отмечались общая слабость и гепатомегалия.
Изучая биохимические показатели сыворотки крови у больных ХГВ в зависимости от установленных генотипов НВУ, было выявлено (табл. 4), что показатели активности АлАТ превышали у лиц с генотипом А (5,6 ± 0,8 ммоль/л • ч) таковые при генотипе D, которые в среднем составляли 3,7 ± 0,4 ммоль/л • ч (р < 0,05).
У пациентов с генотипом А уровень общего билирубина превышал таковой у пациентов с генотипом D — 85,9 ± 10,5 мкмоль/л и 58,4 ± 9,2 мкмоль/л (р < 0,05) соответственно.
Диспротеинемия при воспалительно-некротических процессах печеночной ткани также была несколько выше в группе больных с генотипом А. Так, концентрация гамма-глобулина у больных с данным генотипом составляла 31,4 ± 2,6 г/л, а с генотипом D — 28,2 ± 1,8 г/л (р > 0,05). Полученные результаты
Таблица 1. Частота основных клинических симптомов у больных ОГВ в зависимости от генотипа НВV (%)
Клинические проявления Генотип А Генотип D
(П = 15) (П = 54)
Общая слабость 100 100
Снижение аппетита 100 100
Тошнота 93,3 85,2
Тяжесть в правом подреберье 100 90,7
Тяжесть в эпигастрии 80* 46,3
Кожный зуд 46,7* 18,5
Артралгии 20 16,7
Повышение температуры тела 33,3 29,6
Желтуха 100 100
Гепатомегалия 100 100
Примечание: здесь и в табл. 2-4: * — р < 0,05 между данными среди различных генотипов.
Рисунок 5: А — частота выявления РНК НDVу больных с НБУ-инфекцией; Б — тяжесть течения болезни у больных с микст-гепатитами + HDV
биохимических исследований поражения печени свидетельствуют о более высокой активности инфекционного процесса у больных ХГВ с генотипом А в отличие от пациентов с генотипом D.
Изучение особенностей клинических проявлений острой и хронической НВ¥-инфекции в зависимости от установленного генотипа показало, что у больных, инфицированных генотипом D НВХ наблюдалось более мягкое течение как острого, так и хронического ГВ с менее выраженной клинической симптоматикой, с умеренным проявлением ме-зенхимально-воспалительного и цитолитического
синдромов и умеренными биохимическими изменениями в сыворотке крови больных. И наоборот, у пациентов с генотипом А НВ¥ отмечается более выраженное течение болезни с преобладанием ди-спептических проявлений, с большей активностью некробиотических и воспалительных процессов в печени. Все это подчеркивает более высокую вирулентность и иммуногенность генотипа А НВХ с более частым развитием хронизации процесса у этой группы больных.
Для изучения генотипов HDV нами было обследовано 155 больных с НВ¥-инфекцией: 76 больных — с
Таблица 2. Уровни отдельных биохимических показателей в сыворотке крови больных ОГВ в зависимости от генотипа НВV
Генотипы HBV Общий билирубин, мкмоль/л АлАТ, ммоль/л ■ ч Общий белок, г/л
Генотип А (п = 15) 223,3 ± 9,2* 7,5 ± 0,4* 60,9 ± 3,2
Генотип D (п = 54) 211,4 ± 7,3 5,3 ± 0,2 69,5 ± 2,9*
Таблица 3. Частота основных клинических симптомов у больныхХГВ в зависимости от генотипа НВV (%)
Клинические проявления Генотип А Генотип D
(п = 15) (п = 54)
Общая слабость 100 100
Снижение аппетита 96,8* 69,7
Тошнота 54,8* 18,2
Тяжесть в правом подреберье 93,5* 54,5
Тяжесть в эпигастрии 32,3* 12,1
Кожный зуд 16,1* 3,1
Артралгии 3,2 3,1
Повышение температуры 22,6* 9,1
Желтуха 100 100
Гепатомегалия 100 100
Таблица 4. Уровни отдельных биохимических показателей в сыворотке крови больных ХГВ в зависимости от генотипа НВV
Генотипы HBV Общий билирубин, мкмоль/л АлАТ, ммоль/л ■ ч Гамма-глобулин, г/л
Генотип А (п = 31) 85,9 ± 10,5* 5,6 ± 0,8* 31,4 ± 2,6
Генотип D (п = 33) 58,4 ± 9,2 3,7 ± 0,4 28,2 ± 1,8
Рисунок 6. Частота выявления генотипов HCV (%)
ОГВ и 79 — с ХГВ. Среди обследованных у 18 больных (11,6 %) была выявлена РНК HDV, из них 7 мужчин (38,8 %) и 11 женщин (61,2 %) (рис. 5).
Анализ полученных результатов показал, что среди пациентов с ОГВ РНК HDV была выявлена у 7 больных, что составило 9,2 %, тогда как среди пациентов с ХГВ РНК HDV верифицирована в 13,9 % (11 пациентов). При этом был установлен I генотип вируса, субтип а. Согласно данным исследователей, именно этот генотип обусловливает легкие формы инфекции с высокой частотой хронизации процесса, тогда как генотип II отличается менее патогенными свойствами. Генотип III связывают с развитием фульминантных форм HDV-инфекции.
Для определения циркулирующих генотипов НСУ было обследовано 155 больных НСУ-инфекцией, среди них ОГС установлен в 23,9 % случаев, ХГС — в 76,1 % случаев. Частота выявления отдельных генотипов НСУ представлена на рис. 6.
Анализируя результаты молекулярно-генетических исследований, установили, что РНК НСУ определялась в крови всех больных ОГС и у 77,89 % больных ХГС. Генотип НСУ 1Ь оказался наиболее распространенным среди больных как ОГС (50 %), так и ХГС (43,3 %). Второе место занял генотип 3а, который регистрировался у 30 и 38,3 % больных ОГС и ХГС соответственно. У больных ОГС с одинаковой частотой встречались комбинация 1Ь/3а и 2 генотипов НСУ — у
85,5 %
□ HGV + HBV
ОГВ
14,5 %
■ HBV
5 %
95 %
□ HGV + HBV □ HBV
ХГВ
18,2 %
72,8 %
■ HBV + TTV
□ HBV
40
30
1 | 20 10
Шйш 31
14
5
Легкое течение Среднетяжелое течение
■ DNA HBV
□ DNA HBV + TTV Б
Рисунок 8: А — частота выявления ДНК ТIV среди больных ОГВ (п = 70); Б — частота выявления ТIV у больных с различным течением ОГВ
0
Рисунок 7. Частота индикации РНК HGVу больных с разными формами HBV-инфекции
10 % больных соответственно. Комбинация генотипов 1а/3а и изолированный моногенотип 1а среди больных ОГС не определялся. В то же время у больных ХГС комбинация генотипов 1Ь/3а — у 6,7 %. С одинаковой частотой (5,0 %) регистрировались комбинации генотипов 1а/3а и 3а моногенотип. Частота регистрации 2 генотипа была наиболее редкой — всего у 1,7 % больных ХГС.
Состояние иммунной регуляции у больных HGV-инфекцией, как известно, зависит от репликативной активности вируса, его генотипа, цитолитической активности ГС. В результате проведенных иммунологических исследований установлено, что у больных ОГС и ХГС с генотипом 3а HCV наблюдается превалирование клеточного звена иммунитета, тогда как при генотипе 1b — гуморального.
В крови больных ХГС по мере роста степени биохимической активности отмечается статистически достоверное снижение уровней клеточных иммунных показателей наряду с одновременным повышением показателей гуморального звена иммунитета.
На предмет инфицирования HGV- и TTV-вируса-ми в Украине нами были обследованы больные острыми и хроническими формами HBV-инфекции.
При обследовании 76 больных ОГВ в 14,47 % (11 пациентов) методом ПЦР была выявлена РНК HGV. В то время как из 79 больных ХГВ данный вирус был выявлен только в 5 % случаев (4 больных) (рис. 7).
Проведенный анализ на наличие ДНК TTV методом ПЦР позволил выявить среди больных острой НВV-инфекцией вирус TTV в 72,8 % (51 больной) (рис. 8).
Следует отметить, что при сравнении отдельных данных клинических проявлений болезни и биохимических изменений, а также длительности стационарного лечения достоверных отличий между TTV-позитивными и TTV-негативными группами больных ОГВ выявлено не было, что требует более детального изучения этого явления на большем количестве пациентов.
Выводы
1. Генетические особенности вирусов гепатитов могут определять течение и исходы инфекционного процесса.
2. Генотипические особенности вирусов могут являться маркерами прогноза эффективности противовирусной терапии и стойкости вирусов к используемым препаратам.
3. Для более полного понимания патогенеза заболевания необходимо изучение генетических особенностей возбудителя на разных уровнях гетерогенности.
Список литературы
1. Винницкая Е.В. TTV-инфекция. Современное состояние проблемы // Сучаст тфекци. — 2005. — № 3—4. — С. 87-91.
2. Жданов К.В. Латентные формы вирусных гепатитов В и С у лиц молодого возраста: Автореф. дис... д-ра мед. наук. — СПб, 2000. — 42 с.
3. Ивашкин В.Г., Маммаев С.Н., Буеверов А.О., Шульпе-кова Ю.О. и др. Механизмы иммунного «.ускользания» при вирусных гепатитах // Рос. журн. гастроэнтерол, гепатол. и колопроктол. — 2000. — № 5. — С. 7-12.
4. Каретный Ю.В., Каганов Б.С., Добротворский И.Л. Вирусный гепатит А: состояние проблемы // Вопросы современной педиатрии. — 2004. — Т. 3, приложение № 4. — С. 70-78.
5. Мукомолов С.Л., Калинина О.В. Молекулярная эпидемиология вирусных гепатитов//Мир вирусных гепатитов. — 2003. — № 11. — С. 2-7.
6. Новиков Д., Мохонов В. GV вирус С/вирус гепатита G// Мир вирусных гепатитов. — 2001. — № 2. — С. 2-4.
7. Сучков С.В., Москалец О.В, Черепахина Н.Е., Бурдако-ва Ю.А. и др. Современные подходы иммуно- и генодиагностики в клинической практике// Тер. арх. — 2004. — № 4. — С. 78-83.
8. Acute renal failure complicating nonfulminant hepatitis А in HLA-B27positive patient/N. Brncic, D. Matic-Glazar, I. Viskovic [et аl.J//Renal. Failure. — 2000. — Vol. 22, № 5. — P. 635-640.
9. Allain J.P. Genomic screening for blood-borne viruses in transfusion setting // Clin. Lab. Haematol. — 2000. — № 22. — P. 1-10.
10. Fredericks D.N., Relman D.A. Application of polymerase chaine reaction to the diagnosis of infectious diseases// Clin. Infect. Dis. — 1999. — № 29. — P. 475-488.
11. Fulminant hepatitis A in indigenous children in north Queensland / J.N. Hanna, T.H. Warnock, R.W. Shepherd [et а1.]//Med. J. Aust. — 2000. — Vol. 172, № 1. — P. 19-21.
12. Grandjacques С., PradatP., Stuyver L. et al. Rapid defection of genotypes and mutations in the pre-core promoter and the pre-core region of hepatitis B virus genome: correlation with viral persistence and disease severity // J. of Hepatology. — 2000. — № 33. — P. 430-439.
13. Guo J.-T., Zhou H., Liu C., Aldrich C., Saputell J., Whita-ker T., Barrasa M.-I., Mason W.-S., Seeger C. Apoptosis and regeneration of hepatocytes during recovery from transient hepadna-virus infections// J. Virol. — 2000. Feb. — 74(3). — Р. 1495-1505.
14. Guttmacher A.E., Collins F.S. Welcome to the genomic era //N. Engl. J. Med. — 2003. — 349(10). — P. 996-998.
15. Heid C.A., Stevens J., Livac K.J. et al. Real time quantitative PCR// Genome Res. — 1996. — № 6. — P. 986-994.
16. Kao J.H., Chen P.J., Lai M.Y. et al. Hepatitis B genotypes correlate with clinical outcomes in patients with chronic hepatitis B//Gastroenterology. — 2000. — Vol. 118, №3. — P. 554-559.
17. Kilian M.. Biological activities of Ig A / M. Kilian, M.E. Lamm, M.W. Russell//Mucosal. Immunology. — 1998. — Vol. 31. — P. 124-158.
18. Mayerat C., Mantegani A., Frei P.C. Does hepatitis B virus (HBV) genotype influence the clinical outcome of HBV infection? // J. of Viral Hepatitis. — 1999. — № 6. — P. 299-304.
19. Seelig R., Renz M., Seelig H.P. PCR in diagnosis of viral hepatitis//Ann. Med. — 1992. — Vol. 24. — P. 225-230.
20. Wolk D., Mitchell S., Patel R. Principles of molecular microbiology testing methods // Infect. Dis. Clin. N. Am. — 2001. — 15(4). — P. 1157-1204.
21. Xheng X., Persing D. Genetic amplification techniques for diagnosis infectious diseases// Clin. Chem. — 1997. — 43(11). — P. 2021-2038.
Получено 11.09.13 □
