ЭФФЕКТИВНОЕ № 2 март ЖИВОТНОВОДСТВО 2021
DOI 10.24412/cl-33489-2021-2-97-99
УДК: 619:616.98:578.831.11:615.371
Фролов С. В. - ведущий научный сотрудник,
e-mail: [email protected]
Мороз Н.В. - заведующий лабораторией профилактики болезней птиц
Кулаков В.Ю. - ведущий научный сотрудник Ирза В.Н. - главный специалист по птицеводству Федеральное государственное бюджетное учреждение всероссийский институт защиты животных (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
КЛИНИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ НОВОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР
Аннотация: В условиях бройлерной птицефабрики показана безопасность, иммуногенность и эффективность новой живой вакцины против инфекционного бронхита кур из штамма «ВНИИЗ-Ж793/В». Вакцина вызывает формирование поствакцинальных антител в титрах 1283 - 2166 в ИФА и обеспечивает высокий уровень производственных показателей в привитых партиях птиц.
Ключевые слова: инфекционный бронхит кур, живая вакцина, безвредность, титры антител, производственные показатели.
Abstract: Tests of new live ARRIAH793V strain-based vaccine against infectious bronchitis carried out on the broiler poultry farm demonstrated its safety, immunogenicity and effectiveness. The vaccine induces after 3 wk postvaccinal ELISA antibody responses at titres of 1,283 - 2,166, ensures the absence of clinical signs of the disease and high level of production performance in vaccinated flocks .
Keywords: infectious bronchitis, live vaccine, safety, antibody titres, production performance.
Введение
В промышленном птицеводстве инфекционный бронхит кур (ИБК) является одной из наиболее экономически значимых болезней. Обусловленные ИБК прямые убытки могут выражаться в виде летальности молодняка или потерей яичной продуктивности.
Возбудителем болезни является РНК-содержащий вирус порядка Nidovirales, сем. Coronaviridae, рода Coronavirus, который может быстро мутировать по причине отсутствия механизмов коррекции во время репликации генома, т.е. способен генерировать новые штаммы вируса. Идентифицированный в 1990 г. в Англии штамм 4/91 серотипа 793/В, обладающий существенными генетическими и фенотипическими отклонениями от штаммов вируса ИБК европейского происхождения [1], к 2011 г. стал одним из наиболее распространенных в Европе, в РФ [2] и сопредельных государствах [3]. Рядом исследователей (Дж. Кук, Р. Джоунс и др.) установлена выраженная защита птиц от вновь появляющихся полевых вариантных вирусов ИБК путем чередования применения вакцин на основе классических штаммов серотипа Массачусетс и вакцины
из штамма 4/91 [4]. На этом основании разработка вакцины на основе российского штамма вируса ИБК генотипа 793/В представлялась актуальной.
В качестве иммуногенного компонента вакцины был использован производственный штамм «ВНИИЗЖ793/В, который относится к серотипу /генотипу 793/В вируса ИБК. В настоящей статье изложены результаты клинических испытаний новой вакцины против ИБК на основе данного штамма. Препарат разработан и производится в ФГБУ «ВНИИЗЖ». Исследования были проведены в январе - июле 2020 г. на одной из бройлерных птицефабрик РФ.
Материалы и методы
Вакцина. Были использованы две экспериментальные серии вакцины против ИБК из штамма «ВНИИЗЖ793/В» живой сухой: серия №2, дата выпуска 06.2019г. и серия №3, дата выпуска 07.2019г.
Птица. Цыплята бройлеры кросса «Росс 308». Тип содержания -клеточный и напольный. Испытания продолжались в течение четырех производственных туров. Общее количество птиц, иммунизированных экспериментальной вакциной, составило около 2,0 млн голов.
Порядок применения вакцины. В течение 4-ёх производственных туров, с января по июнь, птицу в группе «Опыт» прививали с использованием следующей схемы вакцинации: в суточном возрасте применяли вакцину Нобилис МА5, в 7-ми суточном вакцину из штамма «ВНИИЗЖ793/В».
Поголовье птицы в группе «Контроль» прививали с использованием двух схем вакцинации: первая - в суточном возрасте применяли вакцину «Севак АйБерд» и в 7-ми суточном вакцину Нобилис МА5, другая - в суточном возрасте применяли вакцину Нобилис Ма5 и в 7-ми суточном вакцину Нобилис 4/91.
Схемы вакцинации представлены в табл. 1.
Оценка безвредности вакцины. В каждом туре в группе «Опыт» в течение 14 суток после вакцинации оценивали клиническое состояние иммунизированной птицы. Проводили ежедневный выборочный клинический осмотр 100 голов цыплят, отобранных в случайном порядке. При этом учитывали поствакцинальную реакцию, проявлявшуюся в виде респираторных признаков (хрипы, ринит, конъюнктивит), также падёж, который не должен превышать
Птицеводство
www.agroyug.ru
98
предусмотренных технологических показателей.
Оценка антигенного действия вакцины. В каждом туре на 5-е, 35-е и 42-е сутки в группе «Опыт» проводили выборочный отбор проб крови для серологических исследований. Соответственно заданным интервалам времени, в случайном порядке, отбирали не менее 20 проб (n > 20) для определения титра сывороточных антител к вирусу ИБК.
Сыворотки крови цыплят исследовали в ИФА с использованием набора «Infectious bronchitis virus antibody test kit» (производитель Zoetis, США).
Производственные показатели. По завершению каждого тура в птицепоголовье раздельно по группам «Опыт» и «Контроль» определяли следующие показатели: сохранность поголовья, среднесуточный привес птицы, индекс эффективности производства.
Обработка результатов исследований. Использованы стандартные процедуры обработки выборок варьирующих переменных и определения существенности различий средних оценок. Вычислительные процедуры и графические построения выполняли с помощью приложения Microsoft Office Excel.
Результаты
В результате исследований не было установлено какого-либо реактогеного действия вакцины. В течение 14 сут. наблюдений лишь у 0,33% цыплят отмечали незначительную респираторную реакцию, а падеж цыплят не превышал технологическую норму. За период наблюдений гибели цыплят с признаками ИБК не отмечено.
Исследовали антигенное действие экспериментальной вакцины. Через 28 и 35 дн. после вакцинации на каждом туре выращивания в сыворотках крови цыплят определяли титры антител к вирусу ИБК. Полученные результаты представлены в табл. 2.
Из данных табл. 2 следует, что на всех турах выращивания до применения тестируемой вакцины цыплята в возрасте 5 суток обладали достаточно напряженным гуморальным иммунитетом. В границах стандартной ошибки измерения среднегеометрический титр сывороточных антител находился в диапазоне 4185 + 5092. Очевидно, что до возраста 35 суток (т.е. в течение 28 суток после вакцинации) происходило снижение величины титра. На данный период значение титра находилась в границах
Таблица 1
Схема вакцинации птиц против ИБК на период проведения клинических испытаний вакцины из штамма «ВНИИЗЖ793/В».
Группа Срок и способ вакцинации Наименование вакцины
Туры 1 - 3 Тур 4
Контроль 1 сут (инкубатор, спрей) Севак АйБерд Нобилис Ма5
7 сут (выпойка) Нобилис Ма5 Нобилис 4/91
Опыт 1 сут (инкубатор, спрей) Нобилис Ма5 Нобилис Ма5
7 сут (выпойка) ВНИИЗЖ793/В ВНИИЗЖ793/В
Таблица 2
Средние логарифмические оценки титров антител к вирусу ИБК (1дТ), установленные в экспериментальной группе цыплят соответственно их возраста в четырех турах выращивания.
Тур Возраст цыплят в сутках
5 35 42
I 3,667 (4645)* 3,143 (1391) 3,298 (1985)
II 3,545 (3507) 3,184 (1528) 3,408 (2556)
III 3,741 (5512) 3,160 (1444) 3,263 (1833)
IV 3,704 (5057) 3,057 (1140) 3,201 (1590)
ig'T±s** 3,664±0,043 3,136±0,028 3,292±0,043
("T-) - ("T+)*** 4185 - 5092 1283 - 1458 1775 - 2166
Примечания:
* - в скобках указана среднегеометрическая величина (ап1Нд(1дТ)); ** - 1дТ=(ИдТ)/п; s = л/(0/(п-1)п), где Q = ИдТ2 - (ИдТ)2/п; *** -("Т-)=атПд (1д'Т^); ("Т-)=ап1Нд (lд'T+s).
Таблица 3
Сравнение производственных показателей, установленных в группах «Опыт» и «Контроль» по четырем турам выращивания цыплят бройлеров.
Показатель Тур «Опыт» «Контроль» Результат сравнения*
Ср-суточ. привес (г) I 64,04 64,61 -
II 61,83 61,05 +
III 62,35 61,93 +
IV 62,61 62,33 +
Сохранность (%) I 97,26 96,76 +
II 94,40 95,05 -
III 97,01 97,13 -
IV 95,15 95,08 +
Индекс эффективности I 380,9 385,9 -
II 340,5 348,5 -
III 340,9 340,1 +
IV 353,7 355,9 -
Примечание: * - знаком «+» отмечали позицию, где показатель в группе «Опыт» превосходил аналогичную оценку в группе «Контроль»
1283 ■ 1458. В возрасте 42 сутки (т.е. через 35 суток после вакцинации) наблюдали возрастание значений титров до 1775^2166. По четырем турам выращивания средняя логарифмическая величина прироста титра составила оценку Д±э = 0,156±0,025. Полученная оценка по Стьюденту для f=n-1=3 имела
высокий уровень значимости (р<0,01), поскольку отношение Д/э=6,29.
Далее был проведен сравнительный анализ производственных показателей,установленных по четырем турам выращивания в опытной и контрольной группах. Полученные результаты представлены в табл.3
ЭФФЕКТИВНОЕ № 2 март ЖИВОТНОВОДСТВО 2021
Данные, представленные в табл. 3, позволяют считать, что производственные показатели, установленные соответственно туров в группах «Опыт» и «Контроль», имели близкие значения. Сравнение выборок всех показателей с использованием критерия знаков не обнаружило существенных различий между группами.
Обсуждение
Вирус ИБК активно эволюционирует. Возрастание числа различных антигенных вариантов вируса ИБК в мире требует создания новых препаратов специфической профилактики и корректирования программ вакцинации на птицефабриках. В этой связи комбинирование вакцин с целью расширения сферы иммунного ответа птицы представляется наиболее рациональным. Прецеденты последовательного использования вакцин на основе генотипов Массачусетс и 793/В (4/91) показали высокую эффективность. При этом возрастает степень перекрестной защиты птиц от различных в антигенном отношении изолятов [5].
Результаты клинических испытаний вакцины против ИБК из штамма «ВНИИЗЖ 793/В» позволили сделать следующие заключения:
- реактогенность препарата в производственных условиях не установлена. Минимальное проявление респираторных клинических признаков (0, 33%), если даже они связаны с поствакцинальной реакцией, убедительно демонстрирует безвредность вакцины;
- вакцина обладает выраженным антигенным действием и способна через 28-35 суток после применения
индуцировать титры антител в пределах 1283 ■ 2166 в ИФА;
- производственные показатели в виде среднесуточных привесов, сохранности и коэффициентов эффективности, установленные после применения тестируемой вакцины и у птиц, иммунизированных по стандартной схеме, существенных различий не имели.
ЛИТЕРАТУРА
1. Gough RE, Randall CJ, Dagless M, Alexander DJ, Cox WJ, Pearson D. A 'new' strain of infectious bronchitis virus infecting domestic fowl in Great Britain. Vet Rec. 1992 May 30;130(22):493-4.
2. Ovchinnikova, EV, Bochkov, YA, Shcherbakova, LO, Nikonova, ZB, Zinyakov, NG, Elatkin, NP, Mudrak, NS, Borisov, AV and Drygin, VV (2011). Molecular characterization of infectious bronchitis virus isolates from Russia and neighbouring countries: identification of intertypic recombination in the S1 gene. Avian Pathology 40: 507-514.CrossRef I Google Scholar I PubMed.
3. Щербакова, Л. Генетическая характеристика изолятов вируса инфекционного бронхита кур, выявленных на территории стран СНГ в 2015-2017 гг. [Текст]{ = Genetic characterization of avian infectious bronchitis virus isolates recovered in cis countries in 2015-2017 : научное издание / Л. О. Щербакова, С. Н. Колосов, З. Б. Никонова [и др.]} // Ветеринария сегодня. - 2018. -№ 3. - С. 30-39.
4. Cook, J. Breadth of protection of the respiratory tract provided by different live-attenuated infectious bronchitis vaccines against challenge with infectious bronchitis viruses of heterologous serotypes / Cook, J.K.A., Orbell, S.J., Woods, M.A. & Huggins, M.B. /Avian Pathology, 1999, 28, 477-485.
5. Cross protection studies after the use of live attenuated IBV vaccines Nobilis**R IB 4-91 and Nobilis**R IB Ma5 (Massachusetts type) [2003] Kuehne, P.J.G. (Intervet International BV, Boxmeer (Netherlands)).
IX СПЕЦИАЛИЗИРОВАННАЯ АГРАРНАЯ ВЫСТАВКА
АгроЭкспоКрым
20-22 АПРЕЛЯ 2021 Отель «Ялта-Интурист» # ^^
М и и исел ьхозтех н и ка
Системы полива, орошение Растениеводство Средства защиты растений
Животноводство
Ч^1 Пчеловодство
Виноделие и виноградарство
/
Ш Готовая сельхоз продукция
■¡"Г
хги
X
ш
9
с>м>
ФЬ
Ш ^ч
Ш
> il
>a.v
expocrimea.com © +7 (978) 900 90 90