CC BY
79
© С.М.Лазарев, К.В.Фетисов, 2007 УДК 616.12-005.4-08:611.013.395
С.М.Лазарев, К.В.Фетисов
КЛЕТОЧНАЯ ТЕРАПИЯ В ЛЕЧЕНИИ ИшЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА
Кафедра хирургических болезней МПФ с курсом малоинвазивной хирургии, эндоскопии и лазерных медицинских технологий (зав. — проф. С.М.Лазарев) Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И.Мечникова
Ключевые слова: ишемия миокарда, клеточная терапия, кардиомиопластика, мезенхимальные клетки, мононуклеары.
Клеточная терапия ишемической болезни сердца (ИБС) вступила в фазу клинических испытаний во многих клиниках по всему миру. Первые положительные и обещающие результаты открыли новые горизонты в лечении ИБС, хотя точный механизм эффективности окончательно не установлен. Основные спорные положения современной клеточной терапии в клинической практике — это способы доставки и типы вводимых клеток при различных формах ИБС.
Клеточная кардиомиопластика привлекательна по многим причинам — доступность, клиническая эффективность, безопасность [12]. При многих патологических состояниях, включая онкогенез, сахарный диабет, ретинопатию, течение заболевания зависит от ангио-генеза, поэтому внутривенное введение ангиогенных клеток костного мозга может оказать нежелательные эффекты. Эндотелиальный фактор роста VEGF-A и мононуклеары в эксперименте усиливают формирование атероматозных масс [32].
Внутривенное введение мононуклеаров, меченных 3Н-тимидином, показало, что накопление клеток в скелетной мускулатуре и миокарде было примерно равным 1-2% от введенной массы клеток, в то время как интрамиокардиальная инъекция показала сохранение клеточной массы на уровне 30-35% в миокарде даже через сутки [5]. Поэтому оптимальной является доставка терапевтических клеток непосредственно в ишемизированный орган.
Мононуклеары костного мозга не восстанавливают миокард, однако они способны стимулировать процесс образования новых сосудов, тем самым улучшая окси-генацию миокарда, но не устраняя рубцовую ткань [5].
Необходимо учитывать фактор времени. Острый инфаркт миокарда (ОИМ) исключает возможность культивирования клеток, на которое требуется 2-3 сут,
в таком случае возможно применение клеток костного мозга или клеток периферической крови в качестве источников аутологичных мононуклеаров [9, 11, 21, 33, 39, 44]. Так как в периферической крови циркулируют, как правило, зрелые клетки, не участвующие в репарации инфаркта, то необходимо выделять клетки из костного мозга, культивировать до эндотелиальных предшественников. С другой стороны — можно мобилизовать стволовые клетки костного мозга и клетки-предшественницы с помощью введения цитокинов, для обогащения периферической крови и выделения клеток простой флеботомией [21].
Клинические исследования сфокусировались на двух типах клеток: скелетные миобласты, или сател-литные клетки [19, 24, 25, 31, 35, 36], и стромальные клетки костного мозга, или мезенхимальные стволовые клетки [14, 18, 42]. Скелетные миобласты могут быть изолированы из мышечной ткани, далее ex vivo необходимо накопление достаточного для трансплантации количества клеток. In vivo и in vitra миобласты спаиваются друг с другом и формируют миотубы. Мезенхимальные стволовые клетки необходимо аспи-рировать из костного мозга. Мезенхимальные клетки могут дифференцироваться в клетки, морфологически напоминающие фибробласты [16], экспрессировать миогенные маркеры [43] и могут дать рост клеткам, подобным кардиомиоцитам [23]. Кроме того, в качестве источника кардиомоцитов в эксперименте использовали гладкие мышцы стенки сосуда [22].
Первое сообщение о клеточной терапии при ОИМ было опубликовано в 2002 г. [39]. Авторы вводили мононуклеары костного мозга 10 пациентам при ОИМ в коронарную артерию после ее стентирова-ния, в бассейне которой произошел инфаркт. Спустя 3 мес выявлено улучшение насосной функции сердца и геометрии без отрицательного эффекта. Данное клиническое исследование показало, что клеточная терапия выполнима в клинике, безопасна и, возможно, эффективна. В том же 2002 г. немецкие исследовате-
ли из г. Франкфурта сообщили о своих результатах сравнительного клинического исследования пациентов, которым вводили клетки костного мозга и предшественники из периферической крови TOPCARE-AMI [9, 11, 33]. В самом первом своем исследовании [9] 20 пациентам вводили клетки-предшественницы из циркулирующей крови, с предварительным 3-дневным культивированием и мононуклеары костного мозга без культивирования. Через 4 мес исследуемую группу сравнили с нерандомизированной контрольной группой, в которой пациенты получали медикаментозную терапию и интервенционное лечение: в обеих группах с клеточной терапией фракция выброса возросла с 0,516 до 0,601 по результатам желудочковой ангиографии, в то время как в контрольной группе значительного улучшения выявлено не было. Стресс-тест с добутамином и индексы подвижности стенки желудочка подтвердили результаты ангиографии. В то же время конечный диастолический объем (КДО) достоверно различался в группах, предполагая, что функциональное преимущество было связано с усилением сократительной способности, а не с ремоделированием желудочков. Разницы между клеточными группами выявлено не было.
В 2004 г. авторы опубликовали результаты наблюдения за расширенной группой пациентов с интра-коронарной инфузией клеток, срок наблюдения — 1 год [9]. Контрастная МРТ продемонстрировала увеличение абсолютного значения фракции выброса 0,08 [(50±10)% до (58±10)%; p<0,001], уменьшение конечного систолического объема [(54±19) мл до (44±20) мл; p<0,001], уменьшение зоны инфаркта (p<0,001), увеличение фракции выброса (p<0,001) у пациентов с клеточной терапией. Неблагоприятных осложнений не выявлено, частота рестеноза стентов была на допустимом уровне. На базе этих обещающих результатов группа из Франкфурта была включена в мультицентровое рандомизированное, плацебо контролируемое, двойное слепое клиническое исследование (REPAIR-AMI).
В первом рандомизированном, но не слепом исследовании авторы доложили о 60 пациентах с ОИМ с подъемом сегмента ST, которых рандомизировали на пациентов с интракоронарным введением аутологич-ных клеток костного мозга и без введения клеток [44]. Через 6 мес по результатам МРТ фракция выброса у пациентов с клеточной терапией возросла (с 0,50 до 0,567), в контрольной группе фракция выброса мало изменилась (от 0,513 до 0,52), при этом было выявлено максимальное улучшение в сегментах, прилежащих к инфаркту. В течение 6 мес не выявлено отрицательных эффектов клеточной терапии. Исследование схожего типа провела группа во главе с S.L.Chen [14]. Пациентам с инфарктом интракоронарно вводили аутологичные клетки костного мозга, культивируемые в течение 10 дней в одной группе и плацебо в другой группе, всего в исследовании приняли участие 69 пациентов. Через 3 мес исследователи также доложили об
увеличении фракции выброса в сравнении с плацебо группой без отрицательных эффектов.
Безопасность клеточной терапии на сегодняшний день остается главной задачей. Сообщений о возникновении желудочковых аритмий после трансплантации костного мозга пока не получено, в отличие от пересадки скелетных миобластов, при которой вентрику-лярные аритмии не редкость и требуется установка кардиовертера-дефибриллятора [27].
Группа исследователей во главе с H.J.Kang [21] обратила внимание на повышение риска стеноза стен-тов при одновременной подсадке клеток костного мозга с коронарным стентированием почти на 70%. Авторы использовали стенты 3 мм в диаметре и 22,8 мм в длину со значительно меньшей ожидаемой частотой стеноза. Объясняя увеличение частоты сте-нозирования стентов, исследователи указали на травму и воспалительную реакцию за счет установки стента, а доставка клеток, богатых цитокинами, колониестиму-лирующими факторами, только усиливает имеющееся воспаление. Другое осложнение клеточной терапии при интракоронарном введении — эмболизация коронарной сети и развитие микроинфарктов. Однако коллеги из Франкфурта и Ганновера не выявили значимого увеличения частоты рестенозов и концентрации кардио-тропных ферментов в крови пациентов [9, 33, 39, 44].
Обширные экспериментальные исследования по подсадке миобластов на протяжении десятилетий открыли путь клеточной терапии в клиническую практику. Результаты этих исследований суммированы в работе [6]. Старт был дан в Париже в 2001 г., P.Menasche начал первую фазу исследования у пациентов с ишемической кардиомиопатией и дисфункцией левого желудочка: 10 пациентам выполнялось аорто-коронарное шунтирование (АКШ) и имплантации мио-бластов интрамиокардиально [25]. Клетки предварительно культивировали, инъекция миобластов выполнялась в нежизнеспособные зоны левого желудочка. Результаты первой клеточной терапии в клинике показали улучшение региональной функции сердца, но прямая реваскуляризация — АКШ — маскирует результат клеточной терапии. У одного пациента, умершего через 17 мес от инсульта, при гистологическом исследовании миокарда миобласты были выявлены в зоне подсадки, клетки жили длительное время, интегрировались в локальную зону, но остались изолированы от остального миокарда [19]. У 4 пациентов развилась желудочковая аритмия, правда до операции такой риск прогнозировался, но сразу встал вопрос о пересадке миобластов у пациентов с риском аритмии. Далее последовала вторая фаза рандомизированного многоцентрового клинического исследования возможностей пересадки клеточных миобластов (MAGIC). С целью наблюдения и предупреждения угрожающих жизни желудочковых аритмий всем пациентам имплантировали кардиовертер-дефибриллятор в соответствии с критериями (MADIT) (multi-center automatic defibrillator
implantation trial) [27]. Исследование MAGIC выполняется в настоящий момент. В 2004 г. Н.Матцубара [24] сообщил об удачной трансплантации мононуклеаров костного мозга через катетер в 20 различных участков миокарда 3 пациентам с ишемизированным миокардом в состоянии гибернации. Результатом явилось резкое снижение количества приступов стенокардии, повысилась подвижность стенок желудочков в зоне бывшей ишемии по результатам вентрикулографии при локальной перфузии, за период наблюдения 1,5 года у пациентов отсутствовали признаки аритмии.
В клинике выполнялась доставка скелетных мио-бластов без предварительной реваскуляризации ише-мизированного миокарда — трансэндокардиально, зоны введения определяются по результатам электромеханического картирования [36] с наблюдением после операции в течение 6 мес и с помощью катетера, вводимого в коронарный синус, для интрамиокардиальной доставки [35]. Результаты обоих исследований показали выполнимость клеточной терапии, но надежность метода доставки ни в одном из этих исследований не оценивалась, а это остается главной проблемой и преградой для всех методов внутрисосудистой доставки с помощью катетеров.
Группа пациентов, которая может выиграть от трансплантации клеток, — пациенты с вспомогательным насосом левого желудочка. Под руководством F.D.Pagani в 2003 г. выполнена трансплантация скелетных миобластов пациентам с вспомогательным насосом [31]. В дальнейшем при пересадке сердца исследовалось эксплантированное сердце, где авторы продемонстрировали выживаемость и интеграцию миобластов в миокард. Правда влияние на функцию сердечной мышцы остается невыясненным.
C.Stamm в 2003 г. во время АКШ выполнили ин-трамиокардиальную инъекцию клеток костного мозга [38]. Исследователи продемонстрировали безопасность и выполнимость прямой инъекции клеток костного мозга во время АКШ. M.Galinanes доложил об эффективности пересадки клеток костного мозга без предварительного культивирования [18]. В исследовании 14 пациентов с АКШ авторы разделили их на 3 группы: изолированная инъекция клеток костного мозга, АКШ и сочетание методик. Клетки костного мозга забирали из грудины сразу после выполнения стерно-томии, выполняли инъекцию непосредственно в стенку желудочков. Выявлено улучшение сократительной способности в сегментах, где выполнялась инъекция клеток костного мозга и АКШ, процедура безопасна и не вызвала осложнений.
В последние три года получила развитие концепция сочетания клеточной и генной терапии пока в эксперименте. В эксперименте трансплантировали кардиомиоциты, трансфецированные VEGF (смесь преимущественно кардиомиоцитов, гладкомышечных клеток, эндотелиальных клеток и фибробластов) [41]. Исследователи добились большего ангиогенеза и улуч-
шения функции в отличие от применения клеток без предварительной модификации. Последовали другие исследования, направленные на усиление ангиогенеза в эксперименте за счет избытка синтеза VEGF [45], Ь FGF [28] или фактора роста гепатоцитов HGF [26]. Эти исследования подтвердили более выраженный ангиогенез в сравнении с изолированной клеточной терапией [28, 41]. Другие исследователи провели сравнение изолированной генной терапии VEGF и сочетание клеточной и генной терапии, в которых доказали более выраженный ангиогенез при сочетании методов [13]. С другой стороны — Т.Sugimoto не смог добиться значительного увеличения плотности сосудов после имплантации 5х105 миобластов, экспрессирующих VEGF, в сравнении с изолированной генной терапией VEGF [40].
Однозначного мнения относительно механизма эффективности пока не высказано. Широко обсуждаются 4 теории: трансдифференцировка, или слияние с клетками хозяина, мобилизация клеток-предшественниц, находящихся в самом миокарде, ангиогенез, стабилизация внеклеточного матрикса.
Трансдифференцировка и слияние. Концепция, что клетки костного мозга могут дать начало новым карди-омиоцитам, была предложена в 2001 г., что дало начало клиническим исследованиям [30]. В исследовании 2004 г. взгляд резко изменился, высказывается предположение о том, что клетки не трансдифференцируют-ся в кардиомиоциты, а сливаются с существующими зрелыми кардиомиоцитами и передают свои маркеры миоцитам [29]. Результаты этих исследований противоречат результатам J.Kajstura [20], где вновь авторы докладывают именно о дифференцировке клеток костного мозга в зоне инфаркта независимо от клеточного слияния. В любом случае совершенно очевидно, что ни трансдифференцировка, ни слияние клеток костного мозга со зрелыми кардиомиоцитами не оказывают значительного эффекта на сократительную способность миокарда, так как не происходит интеграция клеток в «родной» синцитий.
Мобилизация клеток-предшественниц, находящихся в самом миокарде. Имплантированные клетки не становятся функционально полноценными кардио-миоцитами, возможно, они индуцируют дифференци-ровку других клеток или усиливают ее. Первые сообщения о выделении из миокарда клеток, обладающих характеристиками стволовых, представлены в работах 2003 г. [10]. Данные клетки поддерживали свою популяцию, могли дифференцироваться в кардиомиоциты, эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки и улучшали насосную функцию сердца при их трансплантации в зону инфаркта. Клетки культивировали в присутствии 5-азацитидина, под действием которого клетки дифференцировались в кардиомиоциты, а после внутривенного введения клетки переносились в инфар-цированный миокард. Данное исследование проводи-
лось в эксперименте на животных, но представляет основу для клинического исследования.
Ангиогенез. Если другие концепции оспариваются по механизмам эффективности, то ангиогенез, вследствие трансплантации клеток, не вызывает сомнений [7]. Пути индукции формирования новых сосудов полностью еще не изучены, но имеют в своей основе парак-ринный механизм. В опыте на крысах скелетные мио-бласты, клетки сердца, экспрессирующие трансгенный VEGF, увеличивают содержание рецепторов йк-1, в клетках хозяина, максимальное количество — в сроки через 1 нед и 2 нед соответственно, проявляя паракринный механизм [45]. Сами мононуклеары костного мозга или эндотелиальные предшественники играют непосредственную роль в формировании сосудов за счет встраивания или в слой эндотелия, или в слой гладкомышечных клеток капилляров или артериол. Степень ангиогенеза строго коррелирует со степенью улучшения насосной функции сердца, что заставляет принимать аргументы авторов, указывающих на анги-огенез, как неоспоримый механизм эффективности клеточной терапии.
Стабилизация внеклеточного матрикса. Приобретенная сердечная недостаточность связана с прогрессирующей дилатацией левого желудочка. Потеря кардио-миоцитов происходит совместно с нарушением баланса матричных ферментов и деградацией архитектуры сердечной ткани. Экстраклеточный матрикс включает в себя высокомолекулярные белки — коллаген, эластин, ламинин, фибронектин, а также множество протео-гликанов и гликопротеинов [37]. Роль внеклеточного матрикса становится понятной в процессах ремодели-рования [17]. Внеклеточный матрикс является основой функционального синцития, а прогрессирующая деградация при остром инфаркте миокарда ведет к глубокой перестройке с развитием систолической дисфункции [15]. Имплантированные клетки за счет цитокинов могут предотвратить дальнейшую деградацию внеклеточного вещества, следовательно, оказать клиническое действие на насосную функцию сердца.
Если посмотреть глобально на проблему ишемии миокарда и подходы к методам доставки клеток, следует выделить острую ишемию — острый инфаркт миокарда и хроническую ишемию. Острый инфаркт миокарда (ОИМ), по причине острого коронарного тромбоза, в случае успешной тромболитической терапии или удачных перкутанных коронарных вмешательств с последующей реперфузией ведет к острой воспалительной реакции. В зоне ишемии миокардиоциты погибают и от некроза, и от апоптоза, причиной которого явились ишемия и инфильтрация ткани макрофагами и лейкоцитами. Поврежденные миокардиоциты выделяют цитокины и факторы хемотаксиса, которые вызывают перемещение клеток воспалительной реакции в зону некроза. Таким же образом прилежащий эндотелий активируется с целью обеспечения адгезии и миграции клеток крови. В течение острой фазы инфаркта
интракоронарное введение клеток, вероятно, будет адекватным за счет проницаемости эндотелия. Острое воспаление резко увеличивает концентрацию сигнальных молекул прикрепления и миграции через порозный эндотелий, что способствует встраиванию в инфар-цированный сегмент. А прямая интрамиокардиальная инъекция со стороны эпикарда или с помощью катетера со стороны эндокарда в острую фазу не желательна, так как зона инфаркта имеет минимальную механическую прочность [1, 3, 9, 11, 14, 21, 33, 39, 44].
В отношении хронической ишемии наблюдается тенденция сочетания клеточной терапии и реваскуля-ризации зоны ишемии. Пораженные области не имеют тенденции к васкуляризации и жизнеспособный миокард, поэтому никакого явного преимущества от одной реваскуляризации не будет. В то же время вокруг зоны инфаркта находится кольцо гибернированного миокарда, реваскуляризация которого должна улучшить функцию миокарда. Но доставка клеток интракоронарно не может привести к точному встраиванию клеток в область гибернации, где ожидается ответ на клеточную терапию [34].
Возможна доставка клеток с помощью эндо-кардиального доступа по результатам электромеханического картирования с помощью катетера NOGA (Biosense Webster, Diamond Bar, CA). Метод картирования может выявить зоны с отсутствием механической и электрической активности, которые являются зоной нежизнеспособного миокарда, куда показана имплантация клеток [36]. Доставка клеток через эндокард в зону инфарцированного миокарда осложняется тем, что структура поверхности эндокарда неоднородна, так как образована папиллярными мышцами и трабекулами желудочков.
Другой путь доставки клеток — канюлирование коронарного синуса и трансвенозная интрамиокардиа-льная инъекция под внутрисосудистым УЗИ-контро-лем [35, 42]. Преимущества данного метода — относительно надежный способ доставки клеток. Но надо понимать, что зона введения клеток ограничена венозной системой сердца, через которую можно ввести катетер.
На сегодняшний день наиболее надежный способ доставки клеток — непосредственная интрамиокарди-альная инъекция [1, 2, 18, 19, 25, 31, 38]. Явный недостаток данной техники — необходимость стернотомии или торакотомии, поэтому данная техника комбинируется с АКШ. Разработка методов малоинвазивной интрамиокардиальной доставки может создать изолированную клеточную терапию [8].
После десятка лет экспериментальных исследований клеточная терапия вошла в фазу клинических испытаний, уже доказала свою эффективность у пациентов с ОИМ, хронической ишемией. Необходимы не только накопление результатов клинических исследований, но прежде всего, минимизация травматичности методик доставки клеток и изучение их выполнимости,
эффективности, надежности, разработка показаний к
методам доставки.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Ахмедов Ш.Д., Бабокин В.Е., Чернов В.И. и др. Клеточная терапия в лечении больных ИБС и дилятационной кардиомио-патии// Сердечно-сосудистые заболевания—Приложение.— 2005.—Т. 6, № 5.—С. 295.
2. Бокерия Л.А., Бузиашвили Ю.И, Мацкеплишвили С.Т. и др. Применение мононуклеарных клеток костного мозга в терапии сердечной недостаточности у больных с ИБС // Там же .—С. 298.
3. Немков А.С., Седов В.М., Афанасьев Б.В. и др. Возможности использования аутологичных стволовых клеток костного мозга для лечения больных с дилятационной кардиомиопа-тией // Там же.—С. 298.
4. Седов В.М., Немков А.С., Афанасьев Б.В. и др. Эффективность использования аутологичных мононуклеаров костного мозга в лечении больных с ишемической болезнью сердца // Вестн. хир.—2006.—№ 4.—С. 11-14.
5. Шахов В.П., Попов С.В. Стволовые клетки и кардиомиогенез в норме и патологии.—Томск: STT, 2004.
6. Al Radi O.O., Rao V., Li R.K., Yau T., Weisel R.D. Cardiac cell transplantation: closer to bedside // Ann. Thorac. Surg.—2003.— Vol. 75, Suppl.—P. 674-677.
7. Angoulvant D., Fazel S., Li R.K. Neovascularization derived from cell transplantation in ischemic myocardium // Mol. Cell Biochem.—2004.—Vol. 264.—P. 133-142.
8. Arom V.K., Ruengsakulrach P., Patel N.A. Thoracoscopic intra-myocardial autologous angiogenic progenitor cell transplantation // Interact. Card. Vasc. Thorac. Surg.—2006.—Vol. 5, № 11-14.—P. 31.
9. Assmus B., Schachinger V., Teupe C. et al. Transplantation of progenitor cells and regeneration enhancement in acute myocardial infarction (TOPCARE-AMI) // Circulation.—2002.—Vol. 106.— P. 3009-3017.
10. Beltrami A.P., Barlucchi L., Torella D. et al. Adult cardiac stem cells are multipotent and support myocardial regeneration // Cell.—2003.—Vol. 114.—P. 763-776.
11. Britten M.B., Abolmaali N.D., Assmus B. et al. Infarct remodeling after intracoronary progenitor cell treatment in patients with acute myocardial infarction (TOPCARE-AMI): mechanistic insights from serial contrast-enhanced magnetic resonance imaging // Circulation.—2003.—№ 108.—P. 2212-2218.
12. Chachques J.C., Carpentier A. .Reply // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.—2002.—Vol. 123.—P. 583-584
13. Chachques J.C., Duarte F., Cattadori B. et al. Angiogenic growth factors and/or cellular therapy for myocardial regeneration: a comparative study // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.—2004.— Vol. 128.—P. 245-253.
14. Chen S.L., Fang W.W., Ye F. et al. Effect on left ventricular function of intracoronary transplantation of autologous bone marrow mesenchymal stem cell in patients with acute myocardial infarction // Am. J. Cardiol.—2004.—Vol. 94.—P. 92-95.
15. Cleutjens J.P., Creemers E.E. Integration of concepts: cardiac extracellular matrix remodeling after myocardial infarction // J. Card. Fail.—2002.—№ 8, Suppl.—P. 344-348.
16. Friedenstein A.J., Deriglasova U.F., Kulagina N.N. et al. Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by the in vitro colony assay method // Exp. Hematol.— 1974.—№ 2.—P. 83-92.
17. Fedak P.W., Altamentova S.M., Weisel R.D. et al. Matrix remodeling in experimental and human heart failure: a possible regulatory role for TIMP-3 // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol.—2003.— Vol. 284.—P. 626-634.
18. Galinanes M., Loubani M., Davies J. et al. Autotransplantation of unmanipulated bone marrow into scarred myocardium is safe and enhances cardiac function in humans // Cell Transplant.—2004.— № 13.—P. 7-13.
19. Hagege A.A., Carrion C., Menasche P. et al. Viability and differentiation of autologous skeletal myoblast grafts in ischaemic cardiomyopathy // Lancet.—2003.—Vol. 361.—P. 491-492.
20. Kajstura J., Rota M., Whang B. et al. Bone marrow cells differentiate in cardiac cell lineages after infarction independently of cell fusion // Circ. Res.—2005.—Vol. 96.—P. 127-137.
21. Kang H.J., Kim H.S., Zhang S.Y et al. Effects of intracoronary infusion of peripheral blood stem-cells mobilised with granulo-cyte colony stimulating factor on left ventricular systolic function and restenosis after coronary stenting in myocardial infarction: the MAGIC cell randomised clinical trial // Lancet.—2004.— Vol. 363.—P. 751-756.
22. Li R.K., Jia Z.Q., Weisel R.D. et al. Smooth muscle cell transplantation into myocardial scar tissue improves heart function // J. Mol. Cell Cardiol.—1999.—Vol. 31.—P. 513-522.
23. Makino S., Fukuda K., Miyoshi S. et al. Cardiomyocytes can be generated from marrow stromal cells in vitro // J. Clin. Invest.— 1999.—Vol. 103.—P. 697-705.
24. Matsubara H. Cell therapy for patients with ischemic heart diseases // Cardiovascular Cell and Gene Therapy / Conference II — Cambridge, 2004, April 13-16.
25. Menasche P., Hagege A.A., Vilquin J.T. et al. Autologous skeletal myoblast transplantation for severe postinfarction left ventricular dysfunction // J. Am. Coll. Cardiol.—2003.—Vol. 41.—P. 10781083.
26. Miyagawa S., Sawa Y, Taketani S. et al. Myocardial regeneration therapy for heart failure: hepatocyte growth factor enhances the effect of cellular cardiomyoplasty // Circulation.—2002.— Vol. 105.—P. 2556-2561.
27. Moss A.J. Zareba W., Hall W.J., et al. Prophylactic implantation of a defibrillator in patients with myocardial infarction and reduced ejection fraction // N. Engl. J. Med.—2002.—Vol. 346.—P. 877883.
28. Ninomiya M. Koyama H., Miyata T. et al. Ex vivo gene transfer of basic fibroblast growth factor improves cardiac function and blood flow in a swine chronic myocardial ischemia model // Gene Ther.—2003.—Vol. 10.—P. 1152-1160.
29. Nygren J.M., Jovinge S., Breitbach M. et al. Bone marrow-derived hematopoietic cells generate cardiomyocytes at a low frequency through cell fusion, but not trans differentiation // Nat. Med.— 2004.—№ 10.—P. 494-501.
30. Orlic D., Kajstura J., Chimenti S. et al. Mobilized bone marrow cells repair the infarcted heart, improving function and survival // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.—2001.—Vol. 98.—P. 10344-10349.
31. Pagani F.D., DerSimonian H., Zawadzka A. et al. Autologous skeletal myoblasts transplanted to ischemia-damaged myocardium in humans. Histological analysis of cell survival and differentiation // J. Am. Coll. Cardiol.—2003.—Vol. 41.—P. 879-888.
32. Raffi S., Lyden D. Therapeutic stem and progenitor cell transplantation for organ vascularization and regeneration // NAT. Med.—2003.—№ 9.—P. 712.
33. Schachinger V., Assmus B., Britten M.B. et al. Transplantation of progenitor cells and regeneration enhancement in acute myocar-dial infarction: final one-year results of the TOPCARE-AMI Trial // J. Am. Coll. Cardiol.—2004.—Vol. 44.—P. 1690-1699.
34. Shafie Fazel, Gilbert H.L. et al. Current status of cellular therapy for ischemic heart disease // Ann. Thorac. Surg.—2005.—Vol. 79, Suppl.—P. 2238-2247.
35. Siminiak T., Fiszer D., Jerzykowska O. et al. Percutaneous autolo-gous myoblast transplantation in the treatment of post-infarction myocardial contractility impairment—report on two cases // Kardiol. Pol.—2003.—Vol. 59.—P. 492-501.
36. Smits P.C., van Geuns R.J., Poldermans D. et al. Catheter-based intramyocardial injection of autologous skeletal myoblasts as a primary treatment of ischemic heart failure: clinical experience with six-month follow-up // J. Am. Coll. Cardiol.—2003.— Vol. 42.—P. 2063-2069.
37. Spinale F.G. Matrix metalloproteinases: regulation and dysregula-tion in the failing heart // Circ Res.—2002.—Vol. 90.—P. 520530.
38. Stamm C., Westphal B., Kleine H.D. et al. Autologous bone-marrow stem-cell transplantation for myocardial regeneration // Lancet.—2003.—Vol. 361.—P. 45-46.
39. Strauer B.E., Brehm M., Zeus T. et al. Repair of infarcted myocardium by autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in humans // Circulation.—2002.—Vol. 106.— P. 1913-1918.
40. Sugimoto T., Inui K., Shimazaki Y Gene therapy for myocardial angiogenesis: with direct intramuscular gene transfer of naked deoxyribonucleic acid encoding vascular endothelial growth factor and cell transplantation of vascular endothelial growth factor transfected H9c2 myoblast // Jpn. J. Thorac. Cardiovasc. Surg.—2003.—Vol. 51.—P. 192-197.
41. Suzuki K., Murtuza B., Smolenski R.T. et al. Cell transplantation for the treatment of acute myocardial infarction using vascular endothelial growth factor-expressing skeletal myoblasts // Circulation.-2001.-Vol. 104, Suppl I.-P. 207-212.
42. Thompson C.A., Nasseri B.A., Makower J. et al. Percutaneous transvenous cellular cardiomyoplasty. A novel nonsurgical approach for myocardial cell transplantation // J. Am. Coll Cardiol.-2003.-Vol. 41.-P. 1964-1971.
43. Tomita S., Mickle D.A., Weisel R.D. et al. Improved heart function with myogenesis and angiogenesis after autologous porcine bone marrow stromal cell transplantation // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.-2002.-Vol. 123.-P. 1132-1140.
44. Wollert K.C., Meyer G.P., Lotz J. et al. Intracoronary autologous bone-marrow cell transfer after myocardial infarction: the BOOST randomised controlled clinical trial // Lancet.-2004.-Vol. 364.-P. 141-148.
45. Yau T.M., Li G., Zhang Y et al. Vascular endothelial growth factor receptor upregulation in response to cell-based angiogenic gene therapy // Ann. Thorac. Surg.-2005.-Vol. 79.-P. 2056-2064.
Поступила в редакцию 27.06.2006 г.
