CC BY
14
bentonite showed that it has a moderate inhibitory effect on mutagenesis caused by mitomycin C, 2,4-dinitrophenylhydrazine and ethylmethansulfonate, and no effect was found on the genotoxic potential of hydrogen peroxide. The obtained results demonstrate the absence of genotoxicity of nanoscale bentonite, which can be used to develop safe materials of a new generation based on nanotechnology methods.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-240-4-75-80 УДК 619:616.9
КИШЕЧНЫЕ ГЕЛЬМИНТОЗЫ И ПРОТОЗООЗЫ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ
Долбин Д. А. - к.б.н., *Лутфуллин М.Х. - д.в.н., профессор, Тюрин Ю.А. - к.м.н.
ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет» *ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: Кишечные гельминтозы, протозоозы, антиретровирусная терапия,
ВИЧ
Keywords: Intestinal helminthiases, protozoa, antiretroviral therapy, HIV
Необходимо отметить, что инфекционные процессы желудочно-кишечного тракта представляют одну из существенных проблем при лечении ВИЧ-инфицированных пациентов. Как правило, ВИЧ-инфекция часто бывает ассоциирована с несколькими оппортунистическими кишечными паразитарными инвазиями, которые могут приводить к хронической диареи.
Как правило (но далеко не всегда), для диагностики паразитарной инвазии бывает достаточно проведение гельминто-овоскопических лабораторных исследований фекалий.
Необходимо отметить, что данных о инвазированности кишечными гельминтами ВИЧ-инфицированных пациентов, получающих АРВТ, недостаточны. Есть предположения, что инвазия кишечными паразитами снижается у пациентов с назначенной АРВТ. Основные механизмы этого эффекта не вполне ясны. Есть предположение исследователей, что эффект от АРВТ, так и профилактический курс назначения котримоксазола может снижать риск инвазированности кишечными гельминтозами и протозоозами у этой категории пациентов [1, 2, 3]. К сожалению, эти исследования не были хорошо разработаны для решения конкретного эффекта АРВТ на процессы инвазии кишечными гельминтами. Возможно этот эффект мо-
жет быть обусловлен общим побочным действие большинства антиретровирусных препаратов - митохондриальной токсичностью. Эти препараты, также как антигель-минтные препараты, воздействуют на митохондрии гельминтов [4]. Отмечено, что наибольшей митохондриальной токсичностью из антиретровирусных препаратов обладает ставудин [5]. Возможно, токсический эффект нуклеотидных аналогов, применяемых в качестве антиретровирусных препаратов опосредуется через множественные митохондриальные пути, инги-бирование гамма-ДНК-полимеразы [6].
Цель настоящего исследования состояла в выборочной оценке распространённости кишечных гельминтозов и про-тозоозов, характерных для ВИЧ-инфицированных пациентов и проверке предварительной гипотезы влияния АРВТ на распространённость кишечных гельминтов.
В качестве основной гипотезы, предположили, что АРВТ может быть ассоциирована с меньшим риском заражения кишечными гельминтами, в качестве альтернативной гипотезы, назначение АРВТ не влияет на распространённость кишечных гельминтозов и протозоозов у этих пациентов.
Материал и методы исследований. За период с 2012-2015 гг. годы совместно с ГАУЗ «Республиканский Центр
по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Министерства здравоохранения Республики Татарстан» проведено клинико-лабораторное исследование ВИЧ-инфицированных пациентов в рамках договора №3/5 от 2.05.2012 о творческом сотрудничестве. При планировании исследования были предварительно сформированы две группы пациентов: первая группа 71 человек ,из них 50 мужчин и 21 женщин,получающие АРВТ, вторая группа 51 человек, из них 35 мужчин и 16 женщин, не получающие АРВТ. Всего в исследование было включено 122 ВИЧ-инфицированных пациента. Пациенты наблюдались каждые 3 месяца с последующим визитом через 2 недели, если пациент получал АРВТ. Паразитоло-гические исследование образцов фекалий проводилось на базе ФБУН КНИИЭМ Ро-спотребнадзора согласно МУ 4.2.3145 -13 [7]. Сбор фекалий пациенты осуществляли в полистироловые контейнеры с вмонтированной ложечкой, содержащие 10 мл фиксирующего раствора Турдыева. Обследование проводили трехкратно с интервалом в 1 - 3 дня. Все положительные образцы были подтверждены врачом клинической лабораторной диагностики и старшим лаборантом. Исследование фекалий проводили прямыми гельминтоовоскопи-ческими методами: влажного мазка из консерванта; модифицированного метода Като (из консерванта); комбинированного гель-минтоовоскопического метода (авторской разработки), с использованием насыщенного водного раствора хлористого цинка (трехкомпонентная флотационная система, в состав которой входили насыщенные водные растворы хлорида цинка (2пС12, р - 1,82), хлорида натрия (№С1, р - 1,19) и глицерина в соотношении 2 : 1 : 1, а также флотационная система для выявления яиц трематод,состоящая из насыщенного водного раствора хлористого цинка (р - 1, 82).
Метод влажного мазка из консерванта. Из пробы с консервантом, отбирали патологические примеси или немного фекалий (с булавочную головку), помещали в каплю с физиологическим раствором и в каплю с раствором Люголя, растирали до
получения равномерной негустой эмульсии и микроскопировали.
Модифицированный метод Като. Из пробы с консервантом, отбирали придонный осадок фекалий или патологические примеси в количестве 0,5 мл на предметное стекло, распределяли по стеклу. Фекалии накрывали полоской целофана, обработанной в растворе Като. Целлофан притирали специальным валиком, ширина которого соответствует или немного больше ширины предметного стекла, до получения тонкого, равномерного, прозрачного слоя. Препарат выдерживали при комнатной температуре в течение 1 часа и микроскопировали.
Комбинированный гельминтоово-скопический метод. К пробе фекалий вносили 40 - 60 мл воды и тщательно размешивали. После 5 минутного отстаивания над осадочную жидкость удаляли, оставляя на дне не более 5 мл смеси, которую помещали в полипропиленовую пробирку для центрифугирования. Центрифугировали 5 минут при 3000 об. /мин. После центрифугирования к полученному осадку добавляли флотационный раствор. Снимали поверхностную пленку флотационного раствора при помощи стандартной металлической петли и переносили на предметное стекло (8 капель), мик-роскопировали.
Статистический анализ. Влияние АРВТ на инвазированность кишечными паразитозами у пациентов с диагностированной инвазией, получающих антиретро-вирусные препараты, сравнивали с неинва-зированными пациентами, используя х2 критерий и двухстороний критерий Фишера. Также были вычислены экспоненты коэффициентов логистической регрессии с учётом 95% доверительного интервала, выраженные как отношение шансов (ОЯ) в качестве оценки вероятности развития инвазии.
Результаты исследований .Всего в
исследование было включено 122 пациента. Основными критериями отборы были наличие одного или двух ведущих симптомов у пациентов в течение 6 месяцев наблюдения (таблица 1).
Таблица 1 - Основные симптомы при отборе на паразитологическое исследование
ВИЧ-инфицированных
Ведущий симптом Встречаемость, (%, п)
Дефицит массы тела (потеря веса) 81,9% (100)
Диарея 24,6% (30)
Боли в животе 38,5% (47)
Анемия 14,8% (18)
Кашель 28,6% (35)
Сочетание симптомов (1+3; 1+4; 5+3; 3+2; 12,3% (15)
1+2)
Одним из ведущих симптомов у подавляющего большинства ВИЧ-инфицированных пациентов, отобранных на проведение паразитологического исследования, было снижение массы тела (потеря веса) в 81,9% случаев, далее второй по встречаемости болевой абдоминальный симптом, характеризующийся развитием периодических болей в животе в области мезогастрия и эпигастрия.был выявлен в 38,5% случаев. В 24,6% и в 28,6% случаев в отобранной выборке регистрировались симптом диареи и кашель. Анемический симптом (снижение уровня гемоглобина менее 120 г/л) регистрировался редко не более чем у 14,8%. Сочетание двух ведущих симптомов в отобранной выборке регистрировалось в 12,3% случаев. В процессе проведения исследования образцы
фекалий были предоставлены только 102 пациентами. Из них у 75 (73,5%) человек было проведено полное трехкратное исследование фекалий с интервалом 1 -3 дня. Остальные 20 пациентов в последующем были исключены из данного исследования как не представившие материал для исследования.
В сформированной группе из 102 пациентов, получающих АРВТ, был 61 пациент, у 35 из них диагностирована ВИЧ инфекция 3 стадии, а у 6 человек ВИЧ-инфекция 4 стадии. Около 70% пациентов получали АРВТ не менее года. Почти половина из них получала терапию котри-моксазолом. Не получающих АРВТ пациентов было 41 человек, из них у 35 человек диагностирована ВИЧ-инфекция 3 стадия, у 6 человек - ВИЧ-инфекция 4 стадия.
Таблица 2- Сравнительная оценка частоты встречаемости инвазии гельминтами и простейшими в двух группах ВИЧ-инфицированных._
Тип инвазии Группа 1 АРВТ получают не менее 12 мес %, 95%С1 (п=61) Группа 2 АРВТ не получают %, 95%С1 (п=41) р а
Круглыми гельминтами 5.8±0.02% (2,4-12,87) 6.8±0.03% (3,04-14,1) 0.28 а 0.36ь
Плоскими кишечными гельминтами 2.9±0.02% (0,76-8,9) 4.9±0.02% (1,8-11,6) 0.18 а >0.05 ь
Описторхозом 0.98±0.01% (0,05-6,12) 0.98±0.01% (0,05-6,12) 0.76 а >0.05 ь
Лямблиями 3.9±0.02% (1,26-10,3) 13.7±0.03% (7,9-22,3) <0,001 " <0.05 ь
Всего инвазированных 13.7±0.03% (7,9-22,3) 26.5±0.04% (18,4-36,3) <0,001 <0.05
Примечание: различия между группами в 5 категориях по критерию Хи-квадрат (X ) а с поправкой Йейтса и Фишера (Г) ь
В результате исследования образцов фекалий в общей группе ВИЧ-инфицированных пациентов (102 человека) были выявлены яйца гельминтов (яйца круглых гельминтов, описторхисов, ленточных кишечных гельминтов) у 23 (22,5% И 15,132,1) человек, а у 18 (17,6% а 11,1-26,7) человек цисты простейших (рис. 1). В 59,8% случаев инвазия гельминтами и простейшими не была установлена.
Влияние АРВТ на встречаемость инвазии кишечными гельминтами и простейшими (лямблиями), выявленных при использовании прямых гельминтоовско-пических методов, была оценена в двух группах с помощью статистических критериев Хи-квадрат (X2) и точного двустороннего критерия Фишера (Г) (таблица 2). В общей группе ВИЧ-инфицированных пациентов достоверную значимость в качестве факторов риска (табл.3) развития инвазии гельминтами, выявляемой прямыми гельминтовоскопическими методами, показали такие факторы как снижение уровня гемоглобина в ОАК менее 120 г/л (ОR=2,5, p=0.02) т.е. развитие анемии, наличие сопутствующей патологии ЖКТ и гепатобилиарной системы (ОR=2,1, p=0.01) и снижение CD4 лимфоцитов менее 250 кл/мкл. Риск инвазирования кишечными лямблиями в группе ВИЧ-инфицированных пациентов показал из значимых факторов только наличие сопутствующей патологии ЖКТ и гепатобилиарной системы ^=1,875, p=0.02).
В группе пациентов, не получающих АРВ терапию достоверную значимость в качестве факторов риска (табл.3) развития инвазии гельминтами, показали (OR>1), такие факторы как показатели концентрации гемоглобина в ОАК (т.е. наличие анемии), уровень CD4 клеток и сопутствующая патология ЖКТ (табл.3). К факторам риска (табл.3) развития инвазии кишечными лямблиями в этой группе пациентов были отнесены такие значимые факторы как развитие анемии (лабораторный показатель концентрации гемоглобина менее 120 г/л) и сопутствующая патология ЖКТ и гепатобилиарной системы.
Заключение. Общие данные по изучаемой выборке ВИЧ-инфицированных
пациентов показали, что распространённость инвазий, вызванных кишечными гельминтами (Ascaris lumbricoides, Enterobius sp., Opisthorchis felineus, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Taenia solium) составляет не более 22,5% (95%CI 15,1-32,1). Инвазия кишечными простейшими (лямблиями) составила не более 17,6% CI 11,1-26,7. Установлена избирательная распространенность таких кишечных гельминтозов как аскаридоз и энтеробиоз среди ВИЧ-инфицированных пациентов, среди которых преобладали лица мужского пола, что в целом характеризует преобладание среди ВИЧ-инфицированных мужчин в возрасте от 25 до 44 лет со стадией ВИЧ 3 - 4 стадия, что характерно и для некоторых особо эндемичных регионов (8). При данном объеме выборки достоверное влияние гендерного фактора как фактора риска в распространённости инвазии гельминтами или простейшими в этой группе пациентов не установлено. При исследовании гипотезы о возможном влиянии АРВТ на распространённость инвазий гельминтами (круглыми и плоскими кишечными) у ВИЧ-инфицированных пациентов при статистическом анализе представленных групп не было получено достоверных подтверждений, влияния АРВТ на встречаемость инвазий гельминтами.
Необходимо, отметить, что полученные данные, показывающие значимость таких факторов как показатели концентрации гемоглобина в ОАК (т.е. наличие анемии), уровень CD4 клеток на распространённость инвазии у пациентов не получающих АРВТ, могут служить лабораторными критериями при выявлении которых необходимо проводить дополнительно паразитологическое исследование фекалий прямыми методами.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов: методические указания. М.: ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребна-дзора,2014 . 154 с.
2. Bachur, T.P. Enteric parasitic infections in HIV/AIDS patients before and after the highly active antiretroviral therapy / T.P.
Bachur, J.M. Vale, I.C. Coelho, T.R. Queiroz, C.S. Chaves // Braz J Infect Dis. - 2008. -12(2): - 115-22.
3. Abate, E. The impact of asymptomatic helminth co-infection in patients with newly diagnosed tuberculosis in north-west Ethiopia / E. Abate, M. Belayneh, A. Gelaw, J. Idh, A. Getachew, S. Alemu, et al. // PLoS One. -2012. - 7(8). - P.42901.
4. Taye, B. The magnitude and risk factors of intestinal parasitic infection in relation to Human Immunodeficiency Virus infection and immune status, at ALERT Hospital, Addis Ababa, Ethiopia / B. Taye, K. Desta, S. Ejigu, G.U. Dori // Parasitol Int. -2014. - 63(3). - P. 550-556.
5. Chan, K. Drug-induced mitochondrial toxicity / K. Chan, D. Truong, N. Shangari,
P.J. O'Brien // Expert Opin Drug Metab Toxicol. - 2005. - 1(4). - P. 655-669.
6. Valk, M. Prevalence of lipoatrophy and mitochondrial DNA content of blood and subcutaneous fat in HIV-1-infected patients randomly allocated to zidovudine-or stavudine-based therapy / M. Valk, M. Casula, G.J. Weverlingz, et al. // Antivir Ther. - 2004. - 9(3). - P. 385-393.
7. Cote, H.C. Possible ways nucleoside analogues can affect mitochondrial DNA content and gene expression during HIV therapy / H.C. Cote // Antivir Ther. - 2005. - 10 Suppl 2. - P. 3-11.
8. Tanzania Commission for AIDS National Bureau of Statistics and ORC Macro. Tanzania HIV/AIDS Indicator Survey 2003-04.
КИШЕЧНЫЕ ГЕЛЬМИНТОЗЫ И ПРОТОЗООЗЫ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ
ПАЦИЕНТОВ
Долбин Д.А., Лутфуллин М.Х., Тюрин Ю.А.
Резюме
Общие данные по изучаемой выборке ВИЧ-инфицированных пациентов показали, что распространённость инвазий, вызванных кишечными гельминтами (Ascaris lumbricoides, Enterobius sp., Opisthorchis felineus, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Taenia solium) составляет не более 22,5%. Инвазия кишечными простейшими (лямблиями) составила не более 17,6%. Результаты этого исследования показали избирательную распространенность таких кишечных гельминтозов как аскаридоз и энтеробиоз среди ВИЧ-инфицированных пациентов. При данном объеме выборки достоверное влияние гендерного фактора как фактора риска в распространённости инвазии гельминтами или простейшими в этой группе пациентов не установлено. При исследовании гипотезы о возможном влиянии АРВТ на распространённость инвазий гельминтами (круглыми и плоскими кишечными) у ВИЧ-инфицированных пациентов при статистическом анализе представленных групп не было получено достоверных подтверждений, влияния АРВТ на встречаемость инвазий гельминтами.
NTESTINAL HELMINTHES AND PROTOSES IN HIV-INFECTED PATIENTS
Dolbin D.A., Lutfullin M.H., Tyurin Yu. A.
Summary
General data on the studied sample of HIV-infected patients showed that the prevalence of intestinal helminth invasions (Ascaris lumbricoides, Enterobius sp., Opisthorchis felineus, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Taenia solium) is not more than 22.5%. Invasion of intestinal protozoa (Giardia) was not more than 17.6%. The results of this study showed the selective prevalence of such intestinal helminth infections as ascariasis and enterobiasis among HIV-infected patients. With this sample size, the significant influence of gender as a risk factor in the prevalence of invasion by helminths or protozoa in this group of patients has not been established. When studying the hypothesis about the possible effect of ART on the incidence of
invasions by helminths (round and flat intestinal) in HIV-infected patients, a statistical analysis of the groups presented did not provide reliable evidence of the effect of ART on the incidence of invasions by helminths.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-240-4-80-83 УДК 619:614.449:638.1
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ВЕТЕРИНАРНОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ ПЧЕЛОВОДЧЕСКИХ ХОЗЯЙСТВ
Домолазов С.М - к.в.н.
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана»
Ключевые слова: Пчеловодство, анализ, заболевания пчел Keywords: Bee-keeping, analysis, diseases of bees
Пчеловодство является неотъемлемой частью животноводства, и, несмотря на все сложности, возникающие в условиях коренного преобразования сельского хозяйства, наращивает темпы производства ценнейших продуктов: меда, воска, прополиса, перги, маточного молочка, пчелиного яда. Важным фактором поддержания эпизоотического благополучия отрасли пчеловодства, является выполнение комплекса лечебно-профилактических мероприятий, так как эпизоотическая ситуация по инфекционным и инвазионным болезням пчел в ряде регионов России остается сложной (Н.И. Кривцов, В.И. Лебедев, 2001) [1].
На этом фоне: в отдельных регионах ослаблен контроль со стороны государственной ветеринарной службы за ве-теринарно-санитарным состоянием пасек и воско-перерабатывающих заводов; несвоевременно проводится диагностика основных заболеваний; имеет место производство и использование пчеловодами некачественных и малоэффективных средств, а также недостаточно четкое и профессиональное проведение профилактических, диагностических мероприятий и мер лечения заболеваний на неблагополучных пасеках.
Цель работы: Провести анализ действующего законодательства по ветери-нарно-санитарным правилам содержания пчел; совершенствование норм труда специалистов ветеринарных лабораторий при исследовании проб патологического мате-
риала с пасек на инфекционные и инвазионные болезни пчел.
Материал и методы исследований. Анализ законодательства по ветери-нарно-санитарным правилам содержания пчел проведен с использованием общих методов исследования применяемых в юриспруденции (Обобщение; Сравнение; Описание). При изучении трудовых процессов и затрат рабочего времени ветеринарных специалистов при лабораторной диагностике инфекционных и инвазионных болезней пчел применяли несколько методов исследованя: фотография, самофотография рабочего дня, хронометраж и фотохронометраж трудовых процессов, а так же методические указания по изучению и нормированию труда ветеринарных специалистов (П.А. Чулков, М.С. Ромашин, И.Н. Никитин, Л.И. Иванов, П.И. Гончаров, 1984, 1988) [3].
Результаты исследований. С целью регламентации ветеринарного обслуживания пчеловодства в мае 2016 г. приказом Министерства сельского хозяйства Российской Федерации №194 были утверждены «Ветеринарные правила содержания медоносных пчел в целях их воспроизводства, выращивания, реализации и использования для опыления энто-мофильных растений и получения продукции пчеловодства», а также в феврале 2018 году Решением Коллегии Евразийской экономической комиссии № 27 - «Единые ветеринарные (ветеринарно-санитарные)
