CC BY
46
doi: 10.24411/0235-2451-2021-10511 УДК 619:616/006.446.639.112.1
Катионные белки лизосом и миелопероксидаза в нейтрофилах молодняка крупного рогатого скота разного возраста при лейкозной инфекции
В. С. ВЛАСЕНКО, Е. А. ВИШНЕВСКИЙ, Т. С. ДУДОЛАДОВА
Омский аграрный научный центр, ул. Королева, 26, Омск, 644027, Российская Федерация
Резюме. Исследования проводили с целью изучения динамики цитохимической активности миелопероксидазы (МПО) и содержания лизосомальных катионных белков (ЛКБ) в нейтрофильных гранулоцитах у животных разных периодов постнатального развития при лейкозной инфекции. Работу выполняли в хозяйстве с высоким распространением инфицированности вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) в стаде на 80-и особях разного возраста: до 2-х месяцев (n=20), 4...6 месяцев (n=20), 9...12 месяцев (n=20) и 15.17 месяцев (n=20). По результатам диагностических исследований с использованием метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) животных всех возрастных категорий разделили на 2 группы: интактные (контроль) и положительно реагирующие в пЦр (инфицированные ВЛКРС). Установлены существенные различия в изменении активности антимикробных систем нейтрофилов у носителей ВЛКРС, по сравнению с интактными животными, во все наблюдаемые возрастные периоды. У инфицированного молодняка крупного рогатого скота до 9.12-месячного возраста выявлена однонаправленная трансформация, характеризующаяся статистически значимым снижением числа неактивных клеток на 28,5.45,0 %, увеличением количества нейтрофилов с высокой степенью активности антимикробных пептидов на 16,4.41,5 %, а также их общей величины, выраженной в виде среднего цитохимического коэффициента (СЦК), - на 14,3.36,8 %. С 15.17-месячного возраста наблюдается противоположная траектория изменений, свидетельствующая о недостаточности ферментных и неферментных механизмов антимикробной защиты и проявляющаяся, в конечном итоге, снижением СЦК ЛКБ и МПО на 29,8 и 18,1 % соответственно. Результаты исследований позволяют предположить возможность использования цитохимических показателей нейтрофилов крови для оценки предрасположенности животных к инфицированию ВЛКРС в условиях неблагополучной фермы.
Ключевые слова: молодняк крупного рогатого скота, вирус лейкоза, ПЦР, нейтрофильные гранулоциты, бактерицидные системы, миелопероксидаза, катионные белки.
Сведения об авторах: В. С. Власенко, доктор биологических наук, главный научный сотрудник (e-mail: vvs-76@list.ru); Е. А. Вишневский, аспирант; Т. С. Дудоладова, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник
Для цитирования: Власенко В. С., Вишневский Е. А., Дудоладова Т. С. Катионные белки лизосом и миелопероксидаза в нейтрофилах молодняка крупного рогатого скота разного возраста при лейкозной инфекции // Достижения науки и техники АПК. 2021. Т. 35. №5. С. 65-69. doi: 10.24411/0235-2451-2021-10511
Cationic proteins of lysosomes and myeloperoxidase in neutrophils of young cattle of different ages infected with leukemia
V. S. Vlasenko, E. A. Vishnevskii, T. S. Dudoladova
Omsk Agrarian Scientific Center, ul. Koroleva, 26, Omsk, 644027, Russian Federation
Abstract. The purpose of the research was to study the dynamics of the cytochemical activity of myeloperoxidase (MPO) and the content of lysosomal cationic proteins (LCP) in neutrophilic granulocytes of animals infected with leukemia at different periods of postnatal development. The work was performed at a farm with a high prevalence of bovine leukemia virus (BLV) in a herd of 80 animals of different ages: up to 2 months (n = 20), 4-6 months (n = 20), 9-12 months (n = 20), and 15-17 months (n = 20). According to the results of diagnostic studies using the polymerase chain reaction (PCR) method, animals of all age categories were divided into 2 groups: intact (control) and positively responding to PCR (infected with BLV). We found significant changes in the activity of antimicrobial systems of neutrophils in BLV carriers, compared with intact animals, in all observed age periods. In infected young cattle aged from 9 to 12 months, we revealed a unidirectional transformation, characterized by a statistically significant decrease in the number of inactive cells by 28.5-45.0%, an increase in the number of neutrophils with a high degree of activity of antimicrobial peptides by 16.4-41.5%, as well as an increase in their total value, expressed as an average cytochemical coefficient (ACC) by 14.3-36.8%. Young cattle aged from 15 months to 17 months were observed an opposite trajectory of changes, indicating the insufficiency of the enzymatic and non-enzymatic mechanisms of antimicrobial protection and manifested, ultimately, by a decrease in the ACC of LCP and MPO by 29.8% and 18.1%, respectively. The research results suggest the possibility of using cytochemical parameters of blood neutrophils to assess the predisposition of animals to infection with BLV at a dysfunctional farm.
Keywords: young cattle; leukemia virus; PCR; neutrophilic granulocytes; bactericidal systems; myeloperoxidase; cationic proteins. Author Details: V. S. Vlasenko, D. Sc. (Biol.), chief research fellow (e-mail: vvs-76@list.ru); E. A. Vishnevskii, post graduate student; T. S. Dudoladova, Cand. Sc. (Biol.), senior research fellow
For citation: Vlasenko VS, Vishnevskii EA, Dudoladova TS. [Cationic proteins of lysosomes and myeloperoxidase in neutrophils of young cattle of different ages infected with leukemia] Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2021;35(5):65-9. Russian. doi: 10.24411/02352451-2021-10511.
Инфицирование вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) широко распространено в молочном скотоводстве во многих стран мира, особенно там, где производители не пытаются контролировать или снижать заболеваемость в своих стадах. Однако в таких случаях это заболевание может привести к значительным финансовым потерям, связанным, прежде всего, со снижением продуктивности и содержания жира в молоке. К существенному экономическому ущербу ВЛКРС приводит и по таким причинам, как потеря племенной ценности молодня-
ка и ограничение его реализации, высокий уровень инфекционных осложнений, несостоятельность репродуктивной функции и др. [1, 2, 3].
На сегодняшний день не вызывает сомнений, что определяющее значение для развития лейкоза имеет состояние естественной (неспецифической) резистентности, важным звеном которой служат нейтрофильные гранулоциты, ответственные за фагоцитоз и синтез различных биологически активных факторов, накапливающихся в азурофильных (первичных) и специфических (вторичных) лизосомальных гранулах [4, 5].
Известно, что после активизации нейтрофильных гранулоцитов происходит перемещение гранул к наружной клеточной мембране и последующее слияние с ней, что сопровождается выделением содержимого гранул в межклеточную жидкость. Среди компонентов нейтрофильных гранулоцитов важнейшими составными частями антимикробной защиты служат метаболиты кислорода (супероксиданион, перекись водорода, гидроксильный радикал и гипохлорный анион), высвобождающиеся в результате респираторного взрыва, фермент миелопероксидаза, содержащийся в азурофильных гранулах, проявляющий свою бактерицидную активность в присутствии кислорода, а также неферментные катионные белки, локализующиеся в специфических гранулах и действующие в анаэробных условиях. Недостаточность этих систем в гранулоцитах вызывает резкое снижение резистентности организма [6, 7].
Изучение способности нейтрофильных гранулоцитов к продукции активных форм кислорода при лейкозной инфекции крупного рогатого скота, дополнившее сложившееся представление о роли этих клеток в прогрессировании упомянутой болезни, нашло свое отражение в научной литературе [8].
Исследования особенностей кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма нейтрофи-лов, происходящего с участием миелопероксидазы и катионных белков, довольно широко отражены в медицинской практике при изучении патогенетических механизмов многих инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии. Однако в ветеринарии они не нашли должного распространения, поэтому сведения о состоянии указанных бактерицидных систем при лейкозной инфекции крупного рогатого скота крайне ограничены и носят фрагментарный характер.
В результате наших более ранних исследований были установлены дефекты кислородзависимых и кислороднезависимых механизмов у коров, инфицированных ВЛКРС, усиливающиеся при переходе заболевания в гематологическую стадию [9]. В этой связи отдельный интерес представляет изучение особенностей функционирования неферментных и ферментных бактерицидных систем при лейкозной инфекции у молодняка крупного рогатого скота различных периодов постнатального развития.
Цель исследований - изучить динамику изменений показателей антимикробных систем нейтрофильных гранулоцитов у молодняка крупного рогатого скота при лейкозной инфекции.
Условия, материалы и методы. Работа выполнена в лаборатории эпизоотологии и мер борьбы с туберкулезом отдела ветеринарии ФГБНУ «Омского АНЦ».
Объект исследования - крупный рогатый скот черно-пестрой и симментальской породы из сельскохозяйственного предприятия Омской области с широким распространением вирусной инфекции (более 65 % носителей ВЛКРС в стаде), периферическая кровь 80 голов разного возраста (до 2-х месяцев, 4...6, 9...12 и 15...17 месяцев). Отбор проб крови проводили в сроки, предусмотренные планом диагностических исследований на лейкоз, проводимых в хозяйстве.
Изучение ферментных и неферментных систем нейтрофилов осуществляли на молодняке крупного рогатого скота указанных периодов постнатального
развития по 20 голов каждого возраста. По результатам молекулярно-генетических исследований с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) животных всех возрастных категорий разделили на 2 группы: интактные (ПЦР-, контроль) и инфицированные ВЛКРС (ПЦР+).
В цитоплазме нейтрофильных гранулоцитов определяли содержание лизосомально-катионных белков (ЛКБ) по методу М.Г. Шубича с бромфеноло-вым синим (Шубич М.Г. Выявление катионного белка в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфенолового синего//Цитология. 1974. Т. 16. № 10. С. 1321-1322) и активность миелопероксидазы (МПО) по методу Грэхем-Кнолля с использованием бензидина (Hrycek A. Functional characterization of peripheral blood neutrophils in patients with primary hypothyroidism // Folia Biologica (Praha). 1993. Vol. 39 No 6. S. 304-310). В мазках с использованием иммерсионной микроскопии учитывали долю положительно прореагировавших клеток (в процентах) и в соответствии со стандартными методиками рассчитывали средний цитохимический коэффициент (СЦК). С этой целью исследуемые клетки делили по активности гранул на 4 группы:
неактивные (0 степень) - не имеющие гранул; малоактивные (1 степень) - с единичными гранулами;
среднеактивные (2 степень) - клетки, у которых менее 50 % площади цитоплазмы занята гранулами;
высокоактивные (3 степень) - фагоциты с гранулами, занимающими от 50 до 100 % площади цитоплазмы.
Итоговый результат активности фагоцитов оценивали по формуле:
СЦК = (1 х Н1 + 2 х Н2 + 3 х Н3)/100, где Н1, Н2, Н3 - количество нейтрофилов с активностью 1, 2 и 3 балла соответственно.
Выделение провируса лейкоза из крови молодняка крупного рогатого скота, а также постановку полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводили в соответствии с инструкцией производителя по применению коммерческих наборов. В работе использовали комплект реагентов для выделения ДНК из клинического материала «ДНК-сорб-В», а также тест-систему «ЛЕЙКОЗ» для выявления вируса крупного рогатого скота (КРС) методом ПЦР вариант FRT-50 F (изготовитель ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора). Амплификацию осуществляли на анализаторе-термоциклере для детекции нуклеиновых кислот методом ПЦР в реальном времени ICycler iQ5 (BioRad, США).
Результаты реакции интерпретировали на основания наличия (или отсутствия) пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией в виде графика зависимости интенсивности флуоресценции от количества циклов. Это соответствовало наличию (или отсутствию) значения порогового цикла «Ct» в таблице результатов инструкции к набору.
Цифровые данные обрабатывали с использованием стандартных методов вариационной статистики, включающих расчет средней арифметической (M) и ошибки средней арифметической (m). Статистическую значимость различий средних оценивали по t-критерию Стьюдента. Различия считали достоверными при вероятности ошибки р<0,05. Наличие статистически значимой связи между показателями
кислородзависимого и кислороднезависимого антимикробных механизмов нейтрофильных гранулоцитов определяли по коэффициенту корреляции Пирсона.
Результаты и обсуждение. По результатам анализа периферической крови молодняка крупного рогатого скота в возрасте до 2-х месяцев и 15...17 месяцев установлено по 10 носителей ВЛКРС, в возрасте 4.6 и 9.12 месяцев - по 5 носителей. В качестве контроля использовали животных этих же возрастных периодов, отрицательно реагирующих в ПЦР, - соответственно по 10 и по 15 голов.
Достоверные изменения средних значений определяемых параметров функционально-метаболической активности нейтрофилов у особей, инфицированных ВЛКРС, относительно интактных животных, отмечали во все наблюдаемые периоды постнатального развития. Так, у ПЦР-позитивного молодняка крупного рогатого скота до 2-х месячного возраста количество нейтрофилов с высоким содержанием ЛКБ увеличивалось (см. табл.), по сравнению с ПЦР-отрицательными особями, на 10,20 % (р<0,01), МПО - на 15,3 % (р<0,01). Об усилении функциональной активности фагоцитарных клеток также свидетельствовало возрастание средних цитохимических коэффициентов СЦК ЛКБ и МПО соответственно в 1,16 (р<0,01) и 1,22 раза (р<0,001), а также снижение числа ЛКБ-, МПО-неактивных клеток (с отсутствием неферментных и ферментных активных веществ в гранулах) в 1,47 (р<0,01) и 1,99 (р<0,001) раза, по отношению к контролю.
Практически идентичная картина изменений отмечена у инфицированных телят 4.6-месячного возраста. Как и у молодняка младшего возраста, у них зафиксировано снижение количества клеток с нулевой степенью ЛКБ в 1,97 (р<0,001) раза, МПО -в 1,39 (р<0,05) раза при одновременном увеличении уровня активных веществ в гранулах с третьей степенью соответственно в 1,31 и 1,16 раза, но с той разницей, что повышение МПО было статистически
Таблица. Активность миелопероксидазы и содержание катионных белков лизосом у телят, инфицированных ВЛКРС, M±m
Цитохимические показатели Активность МПО ЛКБ
ПЦР- ПЦР+ ПЦР- 1 ПЦР+
телята в возрасте до 2-х месяцев
0 степень, % 29,30±2,23 14,70±1,58*** 31,70±2,90 21,50±1,86**
1 степень, % 2,80±0,53 2,60±0,56 4,60±0,58 5,20±0,81
2 степень, % 7,00±1,58 6,50±1,17 7,70±1,83 7,10±1,00
3 степень, % 60,90±2,86 76,2±2,60** 56,00±3,13 66,20±2,23**
СЦК 1,99±0,07 2,44±0,06*** 1,88±0,08 2,18±0,06**
телята в возрасте 4...6 месяцев
0 степень, % 29,66±3,18 21,20±2,54* 31,60±1,17 16,00±2,12***
1 степень, % 12,53±2,97 11,80±1,93 7,00±0,76 4,40±1,21
2 степень, % 17,60±1,67 20,20±4,10 8,33±0,88 9,80±1,28
3 степень, % 40,20±4,38 46,80±6,63 53,06±1,56 69,80±2,82***
СЦК 1,68±0,10 1,92±0,11 1,83±0,03 2,33±0,07***
телята в возрасте 9.12 месяцев
0 степень, % 41,86±3,71 23,00±2,48** 41,20±3,13 24,00±4,53**
1 степень, % 3,20±0,51 1,50±0,96 4,40±0,82 2,50±0,86
2 степень, % 7,93±1,34 9,00±0,71 9,66±0,56 10,75±1,38
3 степень, % 47,00±3,70 66,50±2,10*** 44,73±3,42 62,75±3,70**
СЦК 1,60±0,11 2,19±0,06*** 1,58±0,09 2,12±0,12**
телята в возрасте 15.17 месяцев
0 степень, % 41,60±3,00 47,70±2,02 40,70±2,16 55,60±2,40***
1 степень, % 13,80±1,19 18,70±2,16 12,30±2,90 13,00±1,66
2 степень, % 19,10±2,20 15,20±1,15 19,60±1,56 12,80±1,09**
3 степень, % 25,50±1,66 18,40±1,71** 27,40±0,99 18,60±2,01**
СЦК 1,27±0,07 1,04±0,04* 1,34±0,03 0,94±0,06***
*р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001. Достижения науки и техники АПК. 2021. Т. 35. № 5
не значимым. Выявленная трансформация метаболической активности способствовала увеличению средних цитохимических коэффициентов, особенно это касалось СЦК ЛКБ, который возрастал с высокой достоверностью (р<0,001) на 27 %.
Состояние ферментных и неферментных систем гранулоцитов у ПЦР-позитивного молодняка 9.12-месячного возраста, по сравнению с интактными животными, характеризовалось схожими изменениями, с установленными у телят младших возрастных групп (см. табл.). В частности, отмечено статистически значимое увеличение числа нейтрофилов с высоким содержанием ЛКБ и МПО в 1,4 раза, СЦК ЛКБ и МПО -в 1,34 и 1,37 раза-соответственно, а также снижение клеток с нулевой степенью - в 1,58 и 1,55 раз. Помимо этого, наблюдали уменьшение числа фагоцитов с единичными гранулами миелопероксидазы и катионных белков на 1,70 и 1,90 % соответственно, однако оно не достигло статистически значимой разницы.
У инфицированного молодняка 15.17-месячного возраста изменения, относительно контрольной группы, носили противоположную закономерность, не характерную для телят в возрасте до 9.12 месяцев, они сопровождались угнетением изучаемых бактерицидных систем нейтрофилов (см. табл.). О недостаточности ферментных и неферментных механизмов антимикробной защиты свидетельствовал ряд отклонений, которые прежде всего, были связаны с ростом доли неактивных и низкоактивных иммунокомпетентных клеток. Особенно можно выделить увеличение числа фагоцитов с отсутствием в гранулах катионных белков на 14,9 % (р<0,001), по сравнению с контролем.
Некоторое повышение числа гранулоцитов с низкой активностью (1 степень) изучаемых внутриклеточных компонентов у инфицированного молодняка крупного рогатого скота не достигало статистически значимых различий.
Кроме того, происходило снижение количества нейтрофилов со средней и высокой плотностью
гранул с МПО и ЛКБ в цитоплазме. В частности, статистически значимо, относительно контроля, уменьшалась концентрация нейтрофилов со 2-й и 3-й степенью активности гранул с ЛКБ на 6,80 и 8,80 % соответственно, а также клеток с МПО с 3-й степенью активности на 7,10 %. Вследствие этих изменений произошло снижение СЦК МПО на 0,23 (р<0,05) и СЦК ЛКБ - на 0,4 (р<0,001).
На следующем этапе исследований был выполнен сравнительный анализ изменений показателей ЛКБ и МПО в динамике. Следует отметить, что в более ранних исследованиях на коровах была установлена прямая корреляционная зависимость между суммарны-
■е ■е
я
о *
X
о
I-
X
ч
ф
а. О
0
до 2-х месяцев
4-6 месяцев
9-12 месяцев
15-17 месяцев
Рис. 1. Динамика изменений СЦК МПО и ЛКБ у ПЦР-отрицательного молодняка крупного рогатого скота разного возраста: - МПО; - ЛКБ.
Рис. 2. Динамика изменений числа неактивных клеток (0 степень) у ПЦР-позитивного молодняка крупного рогатого скота разного возраста: - МПО; > - - ЛКБ.
Рис. 3. Динамика изменений СЦК МПО и ЛКБ у ПЦР-позитивного молодняка крупного рогатого скота разного возраста: - МПО; - ЛКБ.
ми показателями содержания катионных белков и миелопероксидазы как у РИД-отрицательных, так и РИД-позитивных животных. Нарушение последовательности воздействия бактерицидных си-
стем, сопровождавшееся исчезновением этой взаимосвязи, наблюдали только при переходе лейкоза в гематологическую стадию [9].
Аналогичная закономерность установлена при изучении этой зависимости у телят разных периодов постнатального развития. К 15...17-месячному возрасту происходит равномерное последовательное снижение СЦК МПО и ЛКБ. О тесном взаимодействии кислородзависимой и кис-лороднезависимой бактерицидных систем у интакт-ного молодняка крупного рогатого скота во все возрастные периоды также свидетельствовала прямая корреляционная зависимость (г>0,70) между величинами этих показателей (рис. 1).
У инфицированного ВЛКРС молодняка крупного рогатого скота разного возраста наиболее наглядно тесное взаимодействие принципиально различных бактерицидных систем нейтрофилов отражали такие цитохимические показатели, как процент неактивных клеток (0 степень) и процент высокоактивных клеток (3 степень) и СЦК.
Минимальное в опыте количество клеток, не имеющих гранул с ЛКБ и МПО, определено у телят самого младшего возраста. В дальнейшем к 15.17 месяцам число неактивных нейтрофилов резко возрастало (рис. 2). Коэффициент корреляции между параметрами неферментных и ферментных бактерицидных систем характеризовал тесную прямую связь.
Самый высокий средний цитохимический коэффициент МПО и ЛКБ (рис. 3), напротив, наблюдали у животных в возрасте до 2-х месяцев, а к 15.17-месячному возрасту он значительно снижался (г>0,70).
Таким образом, кислородзависимые и кисло-роднезависимые антибактериальные механизмы как у интактного, так и у инфицированного вирусом лейкоза молодняка крупного рогатого скота разных
3
2
периодов постнатального развития, тесно взаимодействуют между собой, о чем свидетельствует однонаправленная тенденция изменений параметров бактерицидных систем.
Выводы. Полученные данные о динамике цитохимической активности ферментных и неферментных систем нейтрофильных гранулоцитов (МПО, ЛКБ) отражают существенные различия в изменении их параметров между интактным и инфицированным
ВЛКРС молодняком крупного рогатого скота во все наблюдаемые возрастные периоды.
Установленная закономерность функционирования бактерицидных систем лейкоцитов у молодняка крупного рогатого скота разных периодов постнатального развития дает возможность использовать цитохимические показатели нейтрофилов для выявления животных с повышенной чувствительностью к лейкозной инфекции в условиях неблагополучной фермы.
Литература
1. Options for the control of bovine leukemia virus in dairy cattle / P. C. Bartlett, L. M. Sordillo, T. M. Byrem et al. // Journal of the American Veterinary Medical Association. 2014. Vol. 244. No. 8. P. 914-922. doi: 10.2460/javma.244.8.914.
2. Frie M. C., Coussens P. M. Bovine leukemia virus: A major silent threat to proper immune responses in cattle // Veterinary Immunology and Immunopathology. 2015. Vol. 163. No. 3-4. P. 103-114. doi: 10.1016/j.vetimm.2014.11.014.
3. Sevik M., Avci O., Ince O. An 8-year longitudinal seroepidemiological study of bovine leukaemia virus (BLV) infection in dairy cattle in Turkey and analysis of risk factors associated with BLV seropositivity // Tropical Animal Health and Production. 2015. Vol. 47. No. 4. P. 715-720. doi: 10.1007/s11250-015-0783-x.
4. Effects of bovine leukemia virus infection on milk neutrophil function and milk lymphocyte profile /A. Della Libera, F. Souza, C. Batista, et al. //Veterinary Research. 2015. Vol. 46. Article 2. URL: https://veterinaryresearch.biomedcentral.com/articles/10.1186/ s13567-014-0125-4 (дата обращения: 03.03.2021). doi: 10.1186/s13567-014-0125-4.
5. Blagitz M., Souza F., Batista C. Immunological implications of bovine leukemia virus infection // Research in Veterinary Science. 2017. Vol. 114 P. 109-116. doi: 10.1016/j.rvsc.2017.03.012.
6. Маянский А. Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофилах и макрофагах. Новосибирск: Наука, 1989. 342 с.
7. Fingerhut L., Dolz G., de Buhr N. What is the evolutionary fingerprint in neutrophil granulocytes? // International journal of molecular sciences. 2020. Vol. 21. No 12. P. 4523. URL: https://www.mdpi.com/1422-0067/21/12/4523 (дата обращения: 08.03.2021). doi: 10.3390/ijms21124523.
8. Иванов А. И., Власенко В. С. Применение теста с нитросиним тетразолием для выявления животных с повышенной чувствительностью к лейкозной инфекции //Достижения науки и техники АПК. 2015. Т. 29. № 4. С. 61-62.
9. Власенко В. С., Вишневский Е. А. Сравнительная характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой бактерицидных систем нейтрофилов при лейкозной инфекции // Вестник КрасГАУ. 2020. № 11. С. 170-174.
References
1. Bartlett PС, Sordillo LM, Byrem TM, et al. Options for the control of bovine leukemia virus in dairy cattle. J Am Vet Med Assoc. 2014;244(8): 914-22. doi: 10.2460/javma.244.8.914.
2. Frie MС, Coussens PM. Bovine leukemia virus: A major silent threat to proper immune responses in cattle. Vet Immunol Immunopathol. 2015;163(3-4): 103-14. doi: 10.1016/j.vetimm.2014.11.014.
3. Sevik M, Avci O, Ince OB. An 8-year longitudinal seroepidemiological study of bovine leukaemia virus (BLV) infection in dairy cattle in Turkey and analysis of risk factors associated with BLV seropositivity. Trop Anim Health Prod. 2015;47(4): 715-20. doi: 10.1007/s11250-015-0783-x.
4. Della Libera A, Souza F, Batista C, et al. Effects of bovine leukemia virus infection on milk neutrophil function and milk lymphocyte profile. Vet. Res [Interent]. 2015 [cited 2021 Mar 3];46: Article 2. Available from: https://veterinaryresearch.biomedcentral. com/articles/10.1186/s13567-014-0125-4. doi: 10.1186/s13567-014-0125-4.
5. Blagitz M, Souza F, Batista C. Immunological implications of bovine leukemia virus infection. Res Vet Sci. 2017;114:109-16. doi: 10.1016/j.rvsc.2017.03.012.
6. Mayansky AN, Mayansky DN. Ocherki o neytrofilah i makrofagah [Essays on neutrophils and macrophages]. Novosibirsk (Russia): Nauka; 1989. 342 p. Russian.
7. Fingerhut L, Dolz G, de Buhr N. What is the evolutionary fingerprint in neutrophil granulocytes? Int J Mol Sci [Internet]. 2020 [cited 2021 Mar 8];21(12):4523. Available from: https://www.mdpi.com/1422-0067/21/12/4523. doi: 10.3390/ijms21124523.
8. Ivanov AI, Vlasenko VS. [Test with nitroblue tetrazolium administration for detection of animals with hypersusceptibility to the leucosis infection] Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2015;29(4):61-2. Russian.
9. Vlasenko VS, Vishnevsky ЕА. [Comparative analysis of oxygen-dependent and oxygen-independent bactericidal systems of neutrophiles in leukemic infectious disease] Vestnik KrasGAU. 2020;(11):170-4. Russian.
К
ВНИМАНИЮ СОИСКАТЕЛЕЙ УЧЕНЫХ СТЕПЕНЕЙ И ДРУГИХ ЗАИНТЕРЕСОВАННЫХ ЛИЦ!
Редакция журнала «Достижения науки и техники АПК» издает монографии и другую книжную продукцию с редактированием и всеми выходными данными.
Цены договорные. Заявки отправлять по адресу: 101000, г. Москва, Моспочтамт, а/я 166. Тел.: (963) 758-48-44. E-mail: agroapk@mail.ru
