К вопросу о повреждающем действии кеторолака трометамина Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

К ВОПРОСУ О ПОВРЕЖДАЮЩЕМ ДЕЙСТВИИ КЕТОРОЛАКА ТРОМЕТАМИНА Холодов Д.Б., Николаевский В.А.

Воронежский государственный университет, кафедра фармакологии, г. Воронеж.

Аннотация. В данном тезисе представлены результаты исследования влияния кеторолака трометамина (кеторолак*) на белковые молекулы с использованием модели лекарственный препарат - гемоглобин. Авторами установлено, что кеторолака трометамин не вызывает необратимой денатурации белка. Однако зарегистрированное увеличение буферной ёмкости гемоглобина свидетельствует о некоторых конформационных изменениях в структуре белка.

Ключевые слова: кеторолака трометамин, белок денатурация эритроцит.

Ранее нами было установлено, что диклофенак натрия, в концентрациях соответствующих ED25,ED50,EDl00 анальгетической активности, вызывает дозозависимое повреждающее действие на белок за счёт денатурации белковых глобул. В связи с этим представляло интерес выявление закономерностей возможного взаимодействия с белковыми структурами эритроцитов кеторолака трометамина (кт), обладающего сходным фармакологическим действием с диклофенаком натрия.

В качестве модели белковой молекулы мы использовали оксигемоглобин, полученный из крови белых беспородных крыс в количестве 30 и массой 200-250г. Для изучения возможных механизмов химической модификации белка использовали метод кислотно - основного титрования и изучения оптических свойств биополимеров [1,2].

В ходе эксперимента нами установлено, что кт в концентрациях 4,98*10-7 моль/л, 9,96*10-7 моль/л, 19,92*10-7 моль/л, соответствующих анальгетической активности ED25,ED50,ED100 по тесту «уксусные корчи», вызывает снижение светопоглощения модифицированного оксигемоглобина по отношению к интактному на 12,76%; 10,67%; 4,95 соответственно (р<0.05). Это показало, что в условиях тепловой инкубации кт связывается с молекулами оксигемоглобина, при этом с увеличением концентрации кт по сравнению с контролем светопоглощение возрастает (Д^ контроль=13,125%; С 4,98*10-7 моль/л=11,45%; С 9,96*10-7 моль/л=11,75; Д^С 19,92*10-7 моль/л=12,475%). То есть наряду со связыванием, сопровождающимся уплотнением молекулы оксигемоглобина на пути от низшей к высшей концентрации кт, происходит нарастание деструктивного действия в следствие образования большего количества связей.

Анализ буферных свойств оксигемоглобина, модифицированного кт в концентрациях 4,98;9,96;19,92*10-7 моль/л, выявил увеличение объёма титранта, пошедшего на титрование растворов оксигемоглобина, относительно контроля на 5,1%; 7%; 8,2% соответственно (р<0.05). Анализируя кривую титрования оксигемоглобина, модифицированного кт, на основе закономерностей, которые предложил Т. Кеппап, нами установлено, что кт связывается с карбоксильными группами и увеличивает количество доступных для титрования функциональных групп гистидина, лизина и тирозина.

Таким образом по сравнению с диклофенаком натрия кт не вызывает необратимой денатурации белка, вмести с этим при модификации водных растворов гемоглобина кт буферная ёмкость белковых растворов увеличивается, что свидетельствует о конформационных изменениях в структуре белка, сопровождающееся увеличением числа ионогенных групп, способных к диссоциации. Нами установлено, что кт связывается с карбоксильными группами, а также вызывает диссоциацию МН+- групп имидазолонового кольца гистидина, сульфгидрильных групп цистеина, фенольных групп тирозина и е - аминогрупп лизина. Причём данные изменения пропорциональны концентрации кт.

ЛИТЕРАТУРА

1. 1 Артюхов В.Г., Шмелёв В.П., Ковалёва Т.А. Биофизика. - Воронеж. Издательство ВГУ.1994. - 327 с.

2. 2.Резван С.Г., Вашанов Г.А., Лавриненко И.А. и др. Молекулярные механизмы взаимодействия гемоглобина с серотонином.// Рос. физиол. журн. им Сеченова. - 2004. - Т.90.№8. - С. 46 - 47.

3. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2011г.

4. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2010г.

5. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2009г.

6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2008г.

7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2007г.

8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2006г.

9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2005г.

10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2004г.

11. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2003г.

12. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2002г.

13. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2001г.

14. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2000г.

15. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2011г.

16. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2010г.

17. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2009г.

Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва

18. Электронный сборник научных трудов

19. Электронный сборник научных трудов

20. Электронный сборник научных трудов

21. Электронный сборник научных трудов

22. Электронный сборник научных трудов

23. Электронный сборник научных трудов

24. Электронный сборник научных трудов

25. Электронный сборник научных трудов

«Здоровье и образование в XXI веке». 2008г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2007г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2006г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2005г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2004г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2003г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2002г. «Здоровье и образование в XXI веке». 2001г.

To the question about ketorolak trometamine’s damaging action D.B. Holodov, V.A. Nikolaevsky

Voronezh State University, department of pharmacology, Voronezh

In this article shown the results of studies using the model drug-hemoglobin, that consider ketorolak trometamine's action on the proteins molecules. The authors establish, that ketorolak trometamine do not cause the irreversible protein’s denaturation. However it was determine the hemoglobine’s buffer capacity increase, that can be evidence of some conformational modification in the protein’s structure.

Keywords: ketorolak trometamine, protein, denaturation, erythrocyte.

Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва