CC BY
54
УДК 619:616.98:578.828.11
К вопросу о генотипировании изолятов вируса лейкоза крупного рогатого скота, распространенных на территории Ставропольского края
С.С. Абакин, к.б.н, Т.Л. Красовская, к.б.н.
ГНУ СНИИЖК Россельхозакадемии Д.А. Ковалев
ФКУЗ Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора
abakins@yandex.ru
Одной из важнейших задач животноводства является производство высококачественных продуктов массового потребления, в частности молока и мяса. При этом наиболее остро стоит задача обеспечения населения безопасной в экологическом отношении продукцией. В связи с этим проблемы диагностики, профилактики и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота, как одной из наиболее распространенных инфекционных болезней, выходят на первый план.
Согласно данным за 2012 год, на территории Российской Федерации зарегистрирован 2201 неблагополучный по лейкозу пункт (в Ставропольском крае - 19), причем с прогрессирующей динамикой количества заболевших животных. Лейкоз представляет угрозу для генофонда молочного скота. Сложно переоценить экономический ущерб сельхозпредприятий вследствие недополучения молока и приплода из-за преждевременной выбраковки коров, убоя быков-производителей, утилизации туш больных животных и дополнительных расходов на проведение ветеринарно-санитарных мероприятий. Также большой интерес представляют проблемы потенциальной опасности для человека продуктов питания, влияния вредных метаболитов, накапливающихся в организме больных коров, на организм человека.
Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая лимфопролиферативная болезнь, вызываемая вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), относящегося к семейству RETROVIRIDAE роду Deltaretrovirus. Установлена высокая степень сходства вируса лейкоза крупного рогатого скота с вирусом Т -клеточного лейкоза человека (HTLV-1, Human T-cell leukemia virus), который имеет с ним близкое морфологическое и эволюционное родство. Отличительной чертой всех ретровирусов является наличие в их составе фермента РНК-зависимой ДНК-полимеразы, осуществляющей важный этап жизненного цикла - синтез ДНК на матрице РНК. Затем ДНК-копия вирусного генома встраивается в геном клетки хозяина и остаётся в нём пожизненно [1, 2].
Использование молекулярно-генетических подходов для характеристики возбудителей инфекционных болезней раскрывает широкие возможности сравнительной характеристики штаммов, циркулирующих на определенных территориях, что важно при
расследовании вспышек инфекционных болезней, изучении филогенетического родства микроорганизмов. В связи с этим в последние годы наблюдается повышенный интерес ученых всего мира к исследованию генетического разнообразия ВЛКРС.
На основании метода анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ, Restriction fragment length polymorphism, RFLP) и секвенирования отдельных локусов ДНК вируса лейкоза крупного рогатого скота классифицированы три подгруппы вируса - Бельгийская, Австралийская и Японская. Исследования генетической изменчивости гена env ДНК ВЛКРС, кодирующего белки внешней оболочки, показали, что расхождение в нуклеотидных последовательностях изолятов из различных географических регионов мира составляет менее 6%. Несмотря на то, что причины такого консерватизма неизвестны, стабильность генома может быть результатом высокой точности прохождения процесса обратной транскрипции или строгого ограничения условий репликации. На основе анализа полученных данных была предложена классификация штаммов ВЛКРС на семь различных генотипов [3]. Зарубежными учеными также исследуется влияние того или иного генотипа ВЛКРС на проявление иммунного ответа организма хозяина.
Ученые России также уделяют внимание этой проблеме, поскольку определение первичной структуры вируса лейкоза из разных регионов страны позволит оценить не только генетическое разнообразие циркулирующих вирусов, установить их филогенетическое родство и проследить эволюцию, но и разработать более точную диагностику. Кроме того, выявление того или иного генотипа ВЛКРС может играть определенно важную роль в исследовании этапов лейкомогенеза. В спорных случаях, связанных с импортом племенного скота, это может помочь в выяснении источника инфицирования животных. Уже удалось типировать вирусы, распространенные в Московской, Рязанской, Ростовской, Калужской, Челябинской областях, Республике Калмыкия.
Таким образом, генотипирование изолятов ВЛКРС позволяет систематизировать штаммы вируса в соответствии с существующим таксономическим положением видов и биоваров и является эффективным инструментом для решения важных задач молекулярной эпидемиологии возбудителя лейкоза крупного рогатого скота: установление источника инфекции при вспышке болезни; изучение путей передачи и резервуаров распространения конкретных изолятов и др.
Результат генетического типирования ВЛКРС на территории Ставропольского края в контексте их эпизоотической значимости даст возможность создать пополняемую компьютерную базу данных генотипов штаммов ВЛКРС, что позволит качественно улучшить систему мониторинга за этой инфекцией, а также разработать научно
обоснованные схемы эффективного оздоровления неблагополучных по лейкозу хозяйств.
