CC BY
70
Естественные и точные науки ••• 1
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
УДК 594(481.67)
ИЗУЧЕНИЕ ЖИЗНЕННОГО ЦИКЛА PLAGIORCHIS NOTABILIS
© 2013 Алиев Ш.К., Муталимова Р.З., Гаписова У.А.
Дагестанский государственный педагогический университет
В течение 2012 года поставлен ряд экспериментов по искусственному выращиванию стерильной молоди некоторых видов пресноводных моллюсков, с целью их дальнейшего использования при изучении жизненного цикла Plagiorchis notabilis. Проведены эксперименты по искусственному заражению моллюсков Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea glabra, Lymnaea stagnalis, мирацидиями Plagiorchis notabilis.
During 2012 the artificial raising experiments of sterile and young forms of some freshwater mollusks for using life cycle of Plagiorchis notabilis were performed. The artificial infection experiments of mollusks such as Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea glabra, Lymnaea stagnalis, miracidiumes Plagiorchis notabilis were held.
Ключевые слова: трематоды, пресноводные моллюски, Plagiorchis notabilis.
Keyworlds: Trematoda, freshwater mollusks, Plagiorchis notabilis.
Трематоды семейства PlagюrcЫdae являются широко распространенными гель-минтозами птиц в Дагестане. Plagiorchidae с их уникальным жизненным циклом уже на протяжении полутора веков остаются одним из наиболее часто изучаемых зоологических объектов. Постепенно возрастающий интерес к партеногенетическим поколениям - спороцистам и редиям привел к появлению множества работ, посвященных изучению жизненного цикла трематод. Однако до настоящего времени жизненные циклы многих представителей данного семейства остаются не до конца выясненными или не изученными вовсе. За последние годы появилось множество работ, посвященных морфологии и биологии мирацидиев различных видов трематод, а также партеногенетическим поколениям спороцистам и редиям. Тем не менее, сведения о жизненных циклах ряда трематод носят фрагментарный и во многом противоречивый характер, следова-
тельно, данные аспекты требуют более детального изучения. Система «партени-ты-моллюск» служит удобным объектом для решения ряда паразитологических проблем, касающихся изучения жизненных циклов различных гельминтов.
Основной целью данной работы явилось проведение ряда экспериментов для изучения жизненного цикла Plagiorchis notabilis. Достижение поставленной цели предполагало решение следующих задач:
1. Вырастить молодь моллюсков в стерильных условиях;
2. Провести ряд опытов по искусственному заражению выращенных моллюсков мирацидиями Plagiorchis notabilis;
3. Выявить промежуточного хозяина для Plagiorchis notabilis
Материалом исследований послужили пресноводные моллюски рода Lymnaeidae: Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea glabra, Lymnaea stagnalis, а также мираци-дии Plagiorchis notabilis.
Таблица 1
Результаты выращивания стерильной молоди некоторых видов моллюсков__________
Дата заселения моллюсков Вид Моллюска Количество Место содержания (диаметр, см) температура рН воды о- т га о - § г о : а 1- о с ы В Корм Дата продуцирования кладок Количество кладок Промеры кладок мм Количество яиц На какой день произошло вылупление молоди из кладок
длина ширина
14.02.12 Lymnaea peregra 65 Аквариум,57 3-14 7,8 7 Рогос, листья шелковицы 27.02.12 55 5-13 2-5 7-11 23
03.03.12 - 128 Бассейн в оранжерее 14-17 7,8 5 Рогос, листья карагача 15.03.12 34 11-21 6-7 20-34 17
22.03.12 - 48 Стеклянный сосуд, 45 13-15 7,8 5 Элодея, валлисне-рия, водяной мак, листья карагача 06.03. 12 16 4-7 2-3 8-20 23
08.04.12 - 64 Бассейн в оранжерее 15-18 7,6 22 Листья капусты, нитчатка 22.04.12 41 8-11 4-5 11-18 27
09.05.12 - 80 Бассейн на воздухе 17-20 7,6 22 Валлиснерия, листья шелковицы 22.05.12 53 8-15 4-5 10-13 19
03.06.12 Lymnaea ovata 68 Стеклянный сосуд,45 22-26 7,6 22 Листья карагача и шелковицы 11.06.12 30 5-7 3 6-10 13
11.06.12 - 124 Бассейн в оранжерее 21-26 7,6 5 Листья карагача и шелковицы 23.06.12 68 6-11 3-5 5-11 13
22.06.12 - 35 Стеклянный сосуд в лаборатории, 45 25-28 7,8 5 Рогос 03.07.12 - - - - -
02.07.12 - 113 Стеклянный сосуд в лаборатории, 45 25-28 7,8 5 Элодея курчавая, валлиснерия 14.07.12 5 6-9 4 5-9 12
11.07.12 112 Аквариум на воздухе, 45 21-25 7,8 7 Листья карагача, мох, нитчатка 23.07.12 43 3-7 3-4 6-23 14
20.09.12 Lymnaea glabra 43 Аквариум с глинистым грунтом на воздухе 57 18-24 7,2 7 Дно аквариума устлано листьями шелковицы 05.10.12 65 3-6 2-3 2-3 18
30.09.12 - 268 Бассейн в оранжерее 20-21 7,5 22 Трава, мел листья карагача, капусты шелковицы 13.10.12 5 2-5 2-3 6-8 19
12.10.12 - 62 Аквариум с глинистым грунтом, 57 18-20 7,5 6-7 Нитчатка, элодея курчавая - - - - - -
01.11.12 - 38 Аквариум с глинистым грунтом, 57 17-19 7,5 6-7 Трава, капусты шелковицы, элодея курчавая, валлиснерия - - - - - -
12.11.12 Lymnaea stagnalis 37 Стеклянный сосуд в лаборатории, 45 11-14 7,5 5 Листья капусты, нитчатка 21.11.12 23 1-2 1-2 2-3 26
22.11.12 - 68 Стеклянный сосуд с грунтом, 34 10-14 7,5 5 Листья капусты, нитчатка, мел 03.12.12 45 1-2 1-2 2-4 23
30.11.12 - 23 Стеклянный сосуд с проточной водой, 34 14-16 7,6 5 Листья капусты, нитчатка 13.12.12 19 1-2 1-2 2-3 27
10.12.12 - 80 Бассейн в оранжерее с проточной водой и с грунтом, 34 10-15 7,6 5 Листья капусты, нитчатка, валлисне-рия 20.12.12 50 1-2 1-2 3-4 25
С начала 2012 года нами проведен ряд экспериментов по изучению жизненного цикла Plagiorchis notabilis. Была выявлена естественная зараженность пресноводных моллюсков партеногенетическими стадиями этих трематод, также проводились опыты по искусственному заражению некоторых видов моллюсков мирацидиями.
Мы подвергли искусственному заражению ряд видов пресноводных моллюсков, таких как Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea glabra, Lymnaea stagnalis мирацидиями Plagiorchis notabilis. Эксперимент проводили по Н. А. Богомоловой
[4].
Стерильная молодь моллюсков была выращена в аквариумах, в стеклянных сосудах и в бассейне с проточной водой. С птицефабрики «Эльдама» в физиологическом растворе были доставлены половозрелые особи Plagiorchis notabilis. Доставленный в лабораторию материал помещался в термостат при температуре 36-38°С на 12-15 часов. Таким образом, гельминты сами выделяли яйца. Затем мертвых гельминтов по одному экземпляру переносили в чашку Петри с водопроводной водой, раздирали препаровальными иглами матку и выдавливали из нее яйца.
Результаты исследований, отраженные в таблице 1 , показывают, что наилучшим методом содержания и выращивания стерильной молоди моллюсков является создание условий, близких к естественным, которым является бассейн с проточной водой, на дне которого помещен грунт, взятый непосредственно со дна водоемов с моллюсками. Помещенные в такие условия моллюски при обильном кормлении хорошо отмоченными листьями карагача, шелковицы, листьями капусты и мелом стали откладывать яйца на пятый день. При температуре 27-28°С происходило вылупление мальков, содержащихся в таком бассейне. Остальные виды моллюсков были выращены в аквариумах и в сосудах с различными условиями содержания.
На протяжении всего опыта моллюски выращивались при различных температурных значениях. Для определения наиболее оптимального температурного режима моллюски содержались в различных условиях и в различные времена года (табл. 1). По нашим результатам, наиболее
оптимальной среднесуточной температурой при выращивании стерильной молоди для Lymnaea peregra является 17°С, Lymnaea ovata - 25°С, Lymnaea glabra -19°С и для Lymnaea stagnalis - 13°С.
Заражение пресноводных моллюсков мирацидиями Plagiorchis notabilis производилось в стеклянных чашках диаметром 12 см, путем слива воды с мирацидиями из чашки Петри к этим моллюскам. Слой воды в чашках с моллюсками во время опытов не превышал 1,5 см. Количество мирацидиев на каждый экземпляр не превышал десяти. При наблюдении под бинокулярной лупой нами был прослежен процесс внедрения мирацидиев Plagiorchis notabilis, в моллюски Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea stagnalis. В чашках с Lymnaea glabra проникновение моллюсков в них не наблюдалось.
30 25 20 15 10 5 0
Рис. 1. Среднесуточная температура выращивания стерильной молоди моллюсков
В течение всего опыта моллюски находились в тех же чашках, где и проводилось заражение их мирацидиями Plagior-chis notabilis. Как видно из таблицы 2, при вскрытии моллюсков на 6-15 день были обнаружены спороцисты, на 13-21 день -материнские редии. При изучении воды в чашке Петри с подопытными моллюсками рода Lymnaea на 45-51 день наблюдались церкарии и их инцистирование. Одновременно с подопытными моллюсками рода Lymnaea вскрытию подвергались и контрольные моллюски, являющиеся стерильными.
При вскрытии трех экземпляров Lymnaea peregra на 6-й день после заражения у одного моллюска было обнаружено 5-6 спороцист. При вскрытии 14 экземпляров Lymnaea peregra на 13-й день после заражения у 10 моллюсков были обнаружены редии, у отдельных моллюсков ко-
Lymnaea Lymnaea Lymnaea Lymnaea peregra ovata glabra stagnalis
личество доходило от 10 до 13 экземпляров. На 25-й день после заражения у двух моллюсков обнаружены редии, содержащие церкарии. На 31-й день с начала опыта вскрытию были подвергнуты 17 экземпляров Lymnaea peregra, у 10 из которых были обнаружены только редии. По нашему предположению, в этом случае произошло продуцирование дочерних ре-дий. На 45-й день вскрыто 24 экземпляра моллюсков, из которых 13 содержали ре-дии с церкариями, продуцирование которых произошло на 47-й день. Количество редий составило 3-5 экземпляров.
Из 65 экземпляров Lymnaea ovata 15 погибли. На 12-й день после заражения из
25 вскрытых моллюсков у 15-ти экземпляров Lymnaea ovata были обнаружены спороцисты. При вскрытии 20-ти экземпляров Lymnaea ovata на 19-й день после заражения у 14 моллюсков были обнаружены редии, у некоторых моллюсков количество редий доходило от 13 до 17 экземпляров. На 51-й день с начала опыта вскрыты 20 экземпляров Lymnaea peregra, у 15 из них обнаружили редии с церкари-ями.
Опыт, поставленный по заражению моллюска Lymnaea glabra мирацидиями Plagiorchis notabilis, оказался безрезультатным.
Таблица 2
Опыты по заражению различных видов пресноводных моллюсков
Дата заражения Вид моллюска рН воды t° воды во время заражения Количество од-опытных моллюсков Количество он-трольных моллюсков Возраст моллюсков, недели Принадлежность мирацидиев Количество зараженных моллюсков % заражения Сроки появления в моллюсках партеногенетиче-ских стадий, день
спороцисты редии церкарии
01.03.12 Lymnaea peregra 7,8 20 60 30 4-5 Plagiorchis notabilis 37 61,6 6 13 45
12.06.12 Lymnaea ovata 7,6 20 65 30 6 Plagiorchis notabilis 34 52,3 12 19 51
07.10.12 Lymnaea glabra 7,5 20 50 25 6 Plagiorchis notabilis - - - - -
24.12.12 Lymnaea stagnalis 7,5 20 50 25 6 Plagiorchis notabilis 13 26 15 21 38
Данный вид моллюсков подвергался нами заражению мирацидиями PlagюrcЫs notabilis в разных условиях, таких как различные значения температур, количество экземпляров мирацидий на каждый экземпляр моллюска, толщина слоя воды при заражении и т. д.
На 15-й день после заражения моллюсков Lymnaea stagnalis мирацидиями Plagi-orchis notabilis из 15-ти вскрытых моллюсков у 6-ти экземпляров были обнаружены спороцисты. На 21-й день у 9 из 20 были обнаружены редии с формирующимися в них дочерними редиями. На 21 -й день у 6 из 15 вскрытых моллюсков нпайдены ре-дии с церкариями.
Проникновение мирацидиев Plagiorchis notabilis в Lymnaea stagnalis составило 26%, что является значительно меньшим результатом, чем при случаях с Lymnaea
peregra и Lymnaea ovata, процент заражения которых составил 61,6 и 52,3% соответственно. Опыт, поставленный по заражению моллюска Lymnaea glabra мираци-диями Plagiorchis notabilis, оказался безуспешным.
Рис. 2. Процент заражения моллюсков мирацидиями Plagiorchis notabilis
Выводы
При постановке опытов по искусствен ному выращиванию пресноводных мол
люсков нами выявлено, что оптимальной температурой для их развития является интервал от 13°С до 25°С.
В опытах по искусственному заражению моллюсков Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea glabra, Lymnaea stagnalis мирацидии Plagiorchis notabilis положительный результат отмечен у моллюсков Lymnaea peregra, Lymnaea ovata и Lymnaea stagnalis.
Опыты, поставленные по заражению моллюска Lymnaea glabra мирацидиями Plagiorchis notabilis, дали отрицательный результат. Сроки развития личиночных стадий Plagiorchis notabilis с момента заражения моллюсков Lymnaea peregra, Lymnaea ovata, Lymnaea stagnalis, при среднесуточной температуре 22-25°С до получения инцистированных церкариев равны 38-51 дню.
Примечания
1. Алиев Ш.К., Муталимова Р.З. Некоторые вопросы динамики гельминтозов врановых птиц в условиях Дагестана // Мат-лы докладов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2005. Вып. 6. С. 24-25. 2. Алиев Ш. К., Муталимова Р. З. К вопросу изучения гельминтофауны воробьиных птиц Дагестана // Ветеринария Кубани. 2006. №6. С. 7-9. S. Алиев Ш. К., Муталимова Р. З. Встречаемость некоторых видов гельминтов воробьиных птиц в Дагестане // Мат-лы IX Международной конференции «Биологическое разнообразие Кавказа», посвященной 65-летию Г. М. Абдурахманова. Махачкала, 2007. С. 154-155. 4. Башкирова Е. Я. Семейство Echinostomatidae Dietz, 1909 // Трематоды животных и жизнь человека. Т. IV. 1947 С. 329-423. 5. Быховская-Павловская И. Е. Сосальщики птиц СССР // Восьмое совещание по паразитологическим проблемам. Тезисы докладов. Л., 1959. С. 28-29.
Статья поступила в редакцию 11.05.2013 г.
