CC BY
116
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ И ОБЩАЯ БИОЛОГИЯ / PHYSICO-CHIMICAL AND GENERAL BIOLOGY
Оригинальная статья / Original article
УДК 577.15.08+606.61
DOI: 10.21285/2227-2925-2017-7-1 -62-71
ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ХИТОЗАНА И НЕКОТОРЫХ ГИДРОЛАЗ
© Э.Э. Досадина*, М.А. Бикинеева*, А.Ю. Евдокименко*, Е.Е. Савельева*, Е.О. Медушева**, А.А. Белов*
*Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1 **ОАО «НИИ текстильных материалов» Российская Федерация, 105118, г. Москва, ул. Кирпичная, д. 6
Изучены свойства биополимеров на основе хитозана, а также гидролитических ферментов и некоторых органических соединений. Исследованы различные свойства (ферментативные активности) полученных препаратов и их структуры с применением различных методов (адсорбционная спектроскопия, динамическое светорассеивание, электронная микроскопия). Предложена структурная схема полученных композиций и механизмы взаимодействий компонентов системы для возможности научного обоснованного создания новых медицинских препаратов на основе изученных терапевтических агентов с заданными свойствами в будущем.
Ключевые слова: хитозан, протеиназы, глицерин, ферментативная активность, инактивация, иммобилизация.
Формат цитирования: Досадина Э.Э., Бикинеева М.А., Евдокименко А.Ю., Савельева Е.Е., Медушева Е.О., Белов А.А. Изучение взаимодействия хитозана и некоторых гидролаз // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2017. Т. 7, N 1. С. 62-71. DOI: 10.21285/2227-2925-2017-7-1-62-71
STUDY OF INTERACTION BETWEEN CHITOSAN AND SOME HYDROLASES
© E.E. Dosadina*, M.A. Bikineeva*, A.Y. Evdokimenko*, E.E. Savelyeva*, E.O. Medusheva**, A.A. Belov*
*Mendeleev University of Chemical Technology of Russia 20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480, Russian Federation **Scientific Research Institute of Textile Materials 6, Kirpichnaya St., Moscow, 105118, Russian Federation
The properties of biopolymers based on chitosan, hydrolytic enzymes and some organic compounds have been studied. Enzymatic activities of obtained materials and their structure were estimated using absorption spectroscopy, dynamic light scattering, and electron microscopy. Also we proposed in this paper the structural scheme of designed materials and interaction mechanisms of system's components to create the medical materials based on studied therapeutic agents with adjusted properties in future. Keywords: chitosan, proteinases, glycerin, enzymatic activity, inactivation, immobilization
Format citation: Dosadina E.E., Bikineeva M.A., Evdokimenko A.Y., Savelyeva E.E., Medusheva E.O., Belov A.A. Study of interaction between chitosan and some hydrolases. Izvestiya Vuzov. Prikladnaya Khimiya i Biotekhnologiya [Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology]. 2017, vol. 7, no 1, pp. 6271. DOI: 10.21285/2227-2925-2017-7-1-62-71 (in Russian)
ВВЕДЕНИЕ
К настоящему времени описано большое количество полимерных соединений различного химического строения, проявляющих биологическую активность как за счет макромолеку-лярной природы (полимеры с собственной биологической активностью), так и за счет спе-
циально вводимого компонента, который может постепенно выделяться из полимера и поступать в биологический объект (системы с контролируемым выделением активного вещества). В последнем случае определяющее значение имеет не только тип выделяющегося активного вещества и характер связи его с по-
лимерным носителем, определяющей скорость выделения, но и строение самого полимерного носителя, который должен обладать высоким уровнем безвредности (особенно для систем, вводимых инъекционно). Поэтому во многих случаях в качестве основы для создания полимерных носителей лекарственных веществ используются полимеры, хорошо изученные как компоненты ранозаживления, взаимодействие которых с организмом исследовано достаточно глубоко, в том числе хитозан (Хт), входящий в состав различных медицинских препаратов. Важнейшим элементом создания лекарственных полимеров с контролируемым выделением активного вещества является выбор иммобилизуемого объекта, определяющего характер и уровень биологической активности, что отражено в громадном числе публикаций. В то же время такие важные группы биологически активных полимеров как ферменты, в первую очередь, гидролазы, в сочетании с полисахаридами в качестве матрицы и биоцидами, которые могут явиться основой целого ряда терапевтических систем, исследованы явно недостаточно [1]1.
Одно из направлений современной медицинской химии - концепция «многофункциональных лекарств». В рамках этой парадигмы понятию лекарственного средства как «магической пули» с максимальной селективностью, действующего на одну, строго определенную мишень, противопоставлена широта фармакологического действия и способность лекарственного вещества взаимодействовать одновременно с несколькими мишенями. Многофункциональные лекарства содержат в своей структуре несколько фармакофоров, действие которых дополняет друг друга. Такие препараты имеют более предсказуемый фар-макокинетический профиль, у них существенно снижен риск несовместимости с другими препаратами за счет уменьшения количества про-
2
писываемых пациенту лекарств .
Полимерные композиции в качестве средств для заживления ран, полученные на основе Хт, применяют в виде сшитых гелей, микросфер, губок, пленок. В хитозан могут
быть импрегнированны различные классы веществ, такие как клетки, биологически активные вещества (в том числе ферменты, ингибиторы, гормоны, антибластомогенные вещества) и многие другие без значительной потери их биологических свойств [1, 2-4].
Хитозан является прекрасным носителем для иммобилизации ферментов (наиболее лабильными биологически активными веществами), так как обладает высокой химической и биологической стойкостью, высокой механической прочностью, достаточной проницаемостью для самого фермента и субстратов, характеризуются высокой гидрофильностью и малой растворимостью, легко активируются для ковалентного связывания с БАВ [4].
Хитозан в виде растворов, гелей или пленок используют для лечения ран, ожогов и других травматических повреждений кожи. Искусственная кожа - пленка, изготовленная на основе хитозана, не вызывает реакции отторжения, нанесенная на ожоговые поверхности, она легко срастается с тканями, нет необходимости удалять ее, так как она (и продукты ее деградации) является питательной средой для роста собственных клеток кожи. Установлено, что препараты на основе хитозана активизируют заживление ожоговой и раневой поверхности без образования рубцов, так как стимулируют рост коллагеновых волокон кожи, обеспечивающих эластичность кожных покровов [2, 5].
Таким образом, весьма актуальной является разработка медицинских перевязочных материалов, содержащих различные терапевтические агенты (в том числе и такие лабильные соединения как ферменты), а в качестве макромолекулярных носителей используются полимеры с высоким уровнем биологической безвредности для человеческого организма.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
В работе использовали: хитозан (Хт) производства НПО «Биопрогресс» (г. Щелково, МО, РФ): влажность препарата - 10%, ТУ 9289-067-00472124-03, степень деацилиро-вания - 80,0%; кинематическая вязкость - не
1Ташмухамедов Р.И. Биологически активные аминокислотные производные поли-^винилпирролидона и их металлокомплексы: автореф. дисс. ... д-ра хим. наук. М., 2007. С. 37
Tashmukhamedov R.I. Biologicheski aktivnye aminokislotnye proizvodnye poli-N-vinilpirrolidona i ikh metallokom-pleksy, Avtoref. diss. dokt. khim. nauk [Biologically active amino acids derivaties of poly-N-vynylpyrrolidone. Author's abstract of doct. thesis]. Moscow, 2007. 37 p.
2Серков И.В. Синтез и свойства биологически активных соединений, содержащих NO-донорный фрагмент: автореф. дисс. ... д-ра хим. наук. Черноголовка, 2010. С. 50.
Serkov I.V. Sintez i svoistva biologicheski aktivnykh soedinenii, soderzhashchikh NO-donornyi fragment. Avtoref. diss. dokt. khim. nauk. [Synthesis and properties of biologically active compounds, that contain NO-donor fragment. Author's abstract of doct. thesis]. Chernogolovka, 2010, 50 p.
менее 383,7 сСт; молекулярная масса - около 500 кДа; протеолитический комплекс из гепа-топанкреаса краба (ПК) (г. Щелково, МО, Россия): ТУ 9281-004-11734126-00, протеолитиче-ская активность по казеину - 0,9 ПЕ/мг; активность по BApNa - 43 нМоль/мг*мин, активность по азоколлу - 28 ЕД/мг, НПО «Биопрогресс»; трипсин (Тр) из поджелудочной железы крупного рогатого скота («Самсон Мед», Россия): протеолитическая активность по казеину - 7,0 ± 0,5 ПЕ/мг; активность по BApNa - 800 ± 38 нМоль/мг*мин; активность по азоколлу - 3200 ± 80 ЕД/мг. Все остальные реактивы, если не оговорено особо, отечественного производства квалификации не ниже "ХЧ".
Ферментативные активности определяли аналогично [1, 6], используя в качестве субстрата либо казеин, либо азоколл, либо BApNa в 1/15 М фосфатном буфере рН - 8,0.
Для получения пленок Хт-фермент полученный гель (после полного растворения фермента) наносили (обычно 100^l раствора) на полиэтиленовую подложку. Для определения ферментативной активности вырезали подложку с высохшим гелем и помещали в пробирки с субстратом. В специально проведенных опытах было установлено, что подложка является инертной и не оказывает влияния на ферментативную активность исследуемых препаратов.
УФ-Вид измерения выполнялись с помощью регистрирующего спектрофотометра фирмы Shimadzu UV-2600 (Япония).
ИК-спектры ИК-Фурье получали с помощью спектрометра Nicolet 380 с приставкой НПВО (Thermo Scientific, США).
Дзета потенциал и средний размер частиц были измерены на приборе Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments, Великобритания).
Для изучения характеристик поверхности был использован атомно-силовой микроскоп Ntegra Prima (NT-MDT, г. Зеленоград, Россия), который был оснащен сканером и кремниевым кантелевером HA_NC Etalon (длина консоли -124 мкм, силовая константа - 3,5 Н/м, резонансная частота - 140 кГц). Радиус закругления иглы менее 10 нм в соответствии с производственной спецификацией.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Иммобилизация ферментов путем образования новых химических связей является в настоящее время доминирующим способом получения перевязочных медицинских препаратов пролонгированного действия [1 ]. Важ-
нейшим условием получения высокоактивных препаратов иммобилизованных ферментов является участие в образовании химических связей с носителем тех функциональных групп белка, которые не являются ответственными за его биологические свойства (в случае иммобилизованных ферментов - каталитические свойства), иными словами, не входят в состав активного центра фермента и не располагаются в непосредственной близости от него [1].
Нами было исследовано взаимодействие структурных единиц хитина и хитозана ^-ацетиглюкозамина и глюкозамина соответственно) с изучаемыми ферментными препаратами и показано [8], что ^ацетилглюкозамин не влияет на ферментативную активность исследованных ферментов, в то время как глю-козамин способен снижать активность при концентрациях более 5 мМоль.
Было изучено взаимодействие хитозана с различными ферментами и ферментными комплексами: трипсин (Тр), панкреатин, ПК и бромелаин (Брм). Полученные данные представлены на рис. 1. При изучении связывания белков с хитозансодержащими носителями, было установлено, что Хт незначительно влияет на протеолитическую активность препаратов Тр и Брм. Отличный вид зависимости ПК от других систем может быть объяснен низкой изоэлектрической точкой ферментов комплекса (ниже - 3,5) [8, 9], - наличие большого количества кислотных концевых групп. Для других изученных ферментов изоэлектрические точки белков лежат в интервале 8-10.
Как нами было показано в работах [4, 8, 9], взаимодействие белков с хитозаном может проходить по схеме, показанной на рис. 2.
Путь, по которому протекает взаимодействие, может определяться концентрацией находящегося в среде хитозана: при малых концентрациях хитозана происходит образование полиэлектролитного комплекса (ион-ионное взаимодействие), при ее увеличении -инкапсулирование белков в хитозановый гель, и при больших концентрациях хитозана наблюдается его агрегирование, в результате чего молекулы белков адсорбируются на поверхности сформировавшихся хитозановых агрегатов. Анализ дзета потенциала и геометрических параметров исследуемых систем (таблица) также подтверждает предложенные варианты взаимодействия ферментов и хито-зана.
Таким образом, отсутствие сильного взаимодействия (образование ионных или иных
Э.Э. Досадина, М.А. Бикинеева, А.Ю. Евдокименко, Е.Е. Савельева, Е.О. Медушева, А.А. Белов
1,6
1,2
0,8
А/Ао
0,4
ПК Тр О— Брм
10 20 30 40 50
мг Хт на 1 мг фермента
60
70
Рис. 1. Влияние хитозана на ферментативную активность некоторых протеиназ (Ао - ферментативная активность препарата в отсутствии хитозана)
Рис. 2. Возможные типы взаимодействий белка (фермента) с хитозаном
сильных связей) между Хт и исследованными белками (кроме ПК) и отсутствие инкапсулирования молекул фермента в Хт по-видимому и приводит к отсутствию потери ферментативной активности при растворении фермента в Хт. Это также может быть подтверждено с по-
мощью анализа ИК-спектров исследуемых образцов (рис. 3 и 4), где отсутствие различий между характеристическими спектрами отдельных соединений и их смесей может свидетельствовать об образовании небольшого количества слабых не химических связей.
2
0
0
Средние гидродинамические диаметры (б) и дзета потенциал (ф исследуемых образцов
Образец Параметры
d, нм С мВ
ПК в 0,1М №С1 789,0 (84,1%) 33,1 (10,5%) 5,2 (5,4%) -12,0
Хитозан 5237 (2,7%) 1449 (97,3%) +48,9
ПК-Хитозан (50:1) 138,8 (57,4%) 330,0 (42,6%) -24,0
ПК-Хитозан (1:5) 1635 (100%) +60,2
ПК-Хитозан (1:50) 4386 (100%) +63,5
Бромелаин в 0,1М №С1 342,82 (94,18%) 2,51 (5,82%) -5,7
Бромелаин-Хитозан 879,3 (75,2%) 240,8 (24,8%) +34,2
Рис. 3. ИК-спектры Хт и ферментов ПК ! ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ И ОБЩАЯ БИОЛОГИЯ
Рис. 4. ИК-спектры Хт и бромелаина
Для получения более эластичных материалов при получении производных Хт перед высушиванием часто добавляют в раствор глицерин (Гл) [12]. Хт по данными литературы имеет диаметр (гидродинамический радиус, умноженный на 2) от 0,515 нм (структурная единица - глюкозамин) до 90 нм (ММ около 500 кДа) для единичных молекул и более 250 нм, так как в растворе особенно концентрированном могут образовываться различные ас-социаты молекул Хт [11]. При наличии Гл в Хт происходит упорядочивание структуры, наблюдается отсутствие формирования кон-
гломератов, что показано в [11] на основании снимков атомно-силовой микроскопии высохших пленок Хт, содержащие и не содержащие Гл (рис. 5). Было показано, что увеличение концентрации Гл в хитозане не ведет к падению ферментативной активности ферментов (ПК) при разработанном оптимальном методе иммобилизации, при этом в отсутствии хитоза-на глицерин практически полностью снижает ферментативную активность исследуемых ферментов (ПК) (рис. 6). Полученные данные могут быть объяснены образованием аддуктов Хт-Гл [11].
Рис. 5. ACM полученных пленок образцов Хт (а) и Хт-Гл (б) = ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ И ОБЩАЯ БИОЛОГИЯ
масс.% Гл
Рис. 6. График зависимости ферментативной активности исследованных систем от концентрации глицерина (Ао - ферментативная активность ПК в отсутствии глицерина и хитозана)
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, в ходе исследования различными методами было изучено взаимодействие хитозана с ферментами. Было показано, что в ходе взаимодействия Хт не влияет на субстрат и фермент-субстратный комплекс, а оказывает воздействие только на сам фермент. Анализ результатов изучения взаимодействия ферментов с мономерами хитозана и хитина (глюкозамина и ^ацетилглюкозамина соответственно) показывает, что глюкозамин значительно снижает активность фермента, что по-видимому объясняется ион-ионным взаимодействием между соединениями. С помощью различных методов (дисперсионный анализ, ИК-спектроскопия, исследование изменения ферментативной активности) было показано, что взаимодействие хитозана с изу-
1. Belov A.A. Textile materials containing immobilized hydrolases for medical and cosmetic purposes. Production. Properties. Application. Germany: LAP LAMBERT Acad. Pub., GmbH &Co. KG, 2012. 242 p.
2. Скрябин К.Г., Вихоревая Г.А., Варламов В.П. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. М.: Наука, 2002. 368 с.
3. Miranda Castro S.P., Lizarraga Paulin E.G. Is Chitosan a New Panacea? Areas of Application // The Complex World of Polysaccharides. Edited by Desiree Nedra Karunaratne. Chapter 1. In Tech, 2012. P. 3-46. DOI: 10.5772/51200
4. Гришин А.А., Зорина Н.В., Луцкий В.И. Хитин и хитозан: химия, биологическая активность, применение // Известия вузов. Приклад-
ченными ферментами протекает по адсорбционной модели, что в свою очередь и служит объяснением отсутствия падения ферментативной активности созданных терапевтических систем.
Полученные результаты являются основой для дальнейшей разработки лечебных материалов на основе хитозана, ферментов и других биологически активных соединения для применения в медицине для лечения ран различной природы. Изучение взаимодействия компонентов, входящих в созданные системы, дает возможность вводить в материалы новые соединения с новыми свойствами при сохранении оптимального значения активности препарата для разработки универсальных раневых покрытий с комплексным действием.
КИЙ СПИСОК
ная химия и биотехнология. 2014. N 1 (6). С. 29-34.
5. Sato M., Onishi H., Takahara J. Machida Y., Nagai T. In vivo drug release and antitimor characteristics of water-soluble conjugates of mi-tomycin C with glycol-chitosan and N-succinil-chitosan // Biological and Pharmaceutical Bulletin. 1996. V. 19, N. 9. P. 1170-1177.
6. Dosadina E.E., Kulmetyeva M.A., Belov A.A. The changing of enzymatic activity of hydrolases immobilized on natural polysaccharide matrix for purulent and burn wounds treatment during storing and exploitation. Biointerface Research in Applied Chemistry. V. 6, N 3. 2016. pp.12911298.
7. Досадина Э.Э., Кульметьева М.А., Ду-
бовикова О.Э., Евдокименко А.Ю., Савельева Е.Е., Белов А.А. Синтез и исследование свойств комплекса протеиназ, иммобилизованных на полисахаридных носителях для медицинского использования // Бутлеровские сообщения. 2016. Т .46, N. 6. C. 1-10.
8. Руденская Г.Н. Брахиурины - серино-вые коллагенолитические ферменты крабов // Биоорганическая химия. 2003. T. 29, N. 2. C.117-128.
9. Rudenskaya G.N., Isaev V.A., Shmoylov A.M., Karabasova M.A., Shvets S.V., Miroshnikov A.I., Brusov A.B. Preparation of proteolytic enzymes from Kamchatka crab Paralithodes cam-chatica hepatopancreas and their application // App. Biochem. Biotech. 2000. V. 88, N 1-3. P.175-183.
10. Досадина Э.Э., Белов А.А. Возможные
механизмы взаимодействия хитозана, целлюлозных носителей и белков протеолитического комплекса из гепатопанкреаса краба // Успехи в химии и химической технологии. 2015. N. 8 (167). C. 82-84.
11. Кульметьева М.А., Белов А.А., Досадина Э.Э., Субчева Е.Н. Влияние хитозана на ферменативную активность протеолитическио-го комплекса из гепатопанкреаса краба. // Тр. 15 ежегодной междунар. молодежной конф. «ИБХФ РАН - вузы». М., 2015. C. 83-86.
12. Quijada-Garrido I., Iglesias-Gonzaflez V., Mazo^n-Arechederra J.M., Barrales-Rienda J.M. The role played by the interactions of small molecules with chitosan and their transition temperatures. Glass-forming liquids: 1,2,3-Propantriol (glycerol) // Carbohydrate Polymers. 2007. V. 68. P.173-186.
1. Belov A.A. Textile materials containing immobilized hydrolases for medical and cosmetic purposes. Production. Properties. Application. LAP LAMBERT Acad. Pub., GmbH &Co. KG, Germany, 2012, 242 p.
2. Skryabin K.G., Vikhorevaya G.A., Var-lamov V.P. Khitin i khitozan. Poluchenie, svoistva i primenenie [Chitin and chitosan. Obtaining, properties and application]. Moscow, Nauka Publ., 2002, 368 p.
3. Miranda Castro S.P., Lizarraga Paulin E.G. Is Chitosan a New Panacea? Areas of Application. Desiree Nedra Karunaratne «The Complex World of Polysaccharides» (Chapter 1). In Tech. 2012, pp. 3-46.
4. Grishin A.A., Zorina N.V., Lutskii V.I. Chitin and chitosan: chemistry, biological activity, application. Izvestiya VUZov. Prikladnaya khimiya i biotekhnologiya [Proceedings of Universities. Applied chemistry and biotechnology. 2014, vol. 1, no. 6, pp. 29-34. (in Russian)
5. Sato M., Onishi H., Takahara J. [et al.] In vivo drug release and antitimor characteristics of water-soluble conjugates of mitomycin C with gly-col-chitosan and N-succinil-chitosan. Biol. Pharm. Bull. 1996, vol. 19, no. 9, pp. 1170-1177. (in Russian)
6. Dosadina E.E., Kulmetyeva M.A., Belov A.A. The changing of enzymatic activity of hydrolases immobilized on natural polysaccharide matrix for purulent and burn wounds treatment during storing and exploitation. Biointerface Research in Applied Chemistry. 2016, vol. 6, no. 3, pp. 12911298. (in Russian)
7. Dosadina E.E., Kulmetyeva M.A., Belov A.A. [et al.] Synthesis and study of properties of proteinases complex, immobilized on polysaccha-
ride carriers for medical purposes. Butlerovskie soobscheniya [Butlerov communication]. 2016, vol. 46, no. 6, pp. 1-10. (in Russian)
8. Rudenskaya G.N. Brachyury-serine colla-genolytic enzymes of crabs. Bioorganicheskaya khimiya [Bioorganic chemistry]. 2003, vol. 29, no. 2, pp. 117-128. (in Russian)
9. Rudenskaya G.N., Isaev V.A., Shmoylov A.M. [et al.] Preparation of proteolytic enzymes from Kamchatka crab Paralithodes camchatica hepatopancreas and their application. App. Biochem. Biotech. 2000, no. 88, pp. 175-183.
10. Dosadina E.E., Belov A.A. Possible mechanisms of interaction between chitosan, cellulose carriers and proteins of proteolytic complex from hepatopancreas of crab. Uspekhi v khimii i khimicheskoi tekhnologii [The progress of chemistry and chemical technology]. 2015, no. 8, pp. 8284. (in Russian)
11. Kulmetyeva M.A., Belov A.A., Dosadina E.E., Subcheva E.N. Vliyanie khitozana na fer-menativnuyu aktivnost' proteoliticheskiogo kom-pleksa iz gepatopankreasa kraba [The effect of chitosan on enzymatic activity of proteolytic complex from hepatopancreas of crab]. Trudy XV Ezhegodnoi Mezhdunarodnoi Molodezhnoi Kon-ferentsii IBKhF RAN-VUZy [Proc. XV Ann. Intern. Young Sci. Conf. IBC-RAN-VUZy]. Moscow, 2015, pp. 83-86.
12. Quijada-Garrido I., Iglesias-Gonzarïez V., Mazo^n-Arechederra J.M., Barrales-Rienda J.M. The role played by the interactions of small molecules with chitosan and their transition temperatures. Glass-forming liquids: 1,2,3-Propantriol (glycerol). Carbohydrate Polymers, 2007, vol. 68, pp. 173-186.
Критерии авторства
Досадина Э.Э., Бикинеева М.А., Евдокименко А.Ю., Савельева Е.Е., Медушева Е.О., Белов А.А. выполнили экспериментальную работу, на основании полученных результатов провели обобщение и написали рукопись. Досадина Э.Э., Бикинеева М.А., Евдокименко А.Ю., Савельева Е.Е., Медушева Е.О., Белов А.А. имеют на статью равные авторские права и несут равную ответственность за плагиат.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ Принадлежность к организации
Элина Э. Досадина
Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1 Магистрант
Маргарита А. Бикинеева
Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1 Студент
Анастасия Ю. Евдокименко
Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1 Студент
Елизавета Е. Савельева
Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1 Студент
Contribution
Dosadina E.E., Bikineeva M.A., Evdokimenko A.Y., Savelyeva E.E., Medusheva E.O., Belov A.A. carried out the experimental work, on the basis of the results summarized the material and wrote the manuscript. Dosadina E.E., Bikineeva M.A., Evdokimenko A.Y., Savelyeva E.E., Medusheva E.O., Belov A.A. have equal author's rights and bear equal responsibility for plagiarism.
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interests regarding the publication of this article.
AUTHORS' INDEX Affiliations
Elina E. Dosadina
D. Mendeleev University of Chemical Technology
20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480, Russian Federation Master Student [email protected]
Margarita A. Bikineeva
D. Mendeleev University of Chemical Technology
20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480, Russian Federation Master Student [email protected]
Anastasiya Y. Evdokimenko
D. Mendeleev University of Chemical Technology
20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480,
Russian Federation
Student
Elizaveta E. Savelyeva
D. Mendeleev University of Chemical Technology
20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480,
Russian Federation
Student
Елена О. Медушева
ОАО НИИ текстильных материалов Российская Федерация, 105118, г. Москва, ул. Кирпичная, д.6 зам. директора Д.м.н.,
Elena O. Medusheva
Scientific Research Institute of Textile Materials
6, Kirpichnaya St., Moscow, 105118, Russian Federation
Deputy Director, Doctor of Medical Sciences, И ОБЩАЯ БИОЛОГИЯ
[email protected] Алексей А. Белов
Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева Российская Федерация, 125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20 , корп. 1; ОАО НИИ текстильных материалов Российская Федерация, 105118, г. Москва, ул. Кирпичная, д. 6 Д.т.н., доцент [email protected]
Поступила 04.10.2016
[email protected] Aleksei A. Belov
D. Mendeleev University of Chemical Technology
20, Geroev Panfilovtsev St., Moscow, 125480, Russian Federation
Scientific Research Institute of Textile Materials
6, Kirpichnaya St., Moscow, 105118, Russian Federation
Doctor of Engineering, Associate Professor [email protected]
Received 04.10.2016
