преднизолон // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2002. -№ 2. - Том 65. - С. 40-43
2. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Иностранная литература, 1954. - 165 с.
3. Пальцев М.А. Патология/М.А. Пальцев, В.С. Пауков, Э.Г. Улумбеков. М.: ГЭОТАРМЕД, 2002. - 960 с.
4. Исаков И.И. Артериальные гипертонии. Л., 1983. - 200 с.
УДК 57.044+619 ББК 28.67
ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ УПРАВЛЕНИЯ ПРОЦЕССАМИ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ В ОРГАНИЗМЕ КРЫС ПРИ ГЛЮКОКОРТИКОИД-ИНДУЦИРОВАННОМ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ
СТРЕССЕ
Луканина Светлана Николаевна.
ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный педагогический университет» доцент кафедры анатомии, физиологии и безопасности жизнедеятельности, lukanina@ngs.ru.
Сахаров Андрей Валентинович.
ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный педагогический университет», научно-образовательный центр «Экспериментальная и прикладная биология», руководитель, профессор,
asakharov 142@rambler. т.
Просенко Александр Евгеньевич.
ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный педагогический университет», заведующий кафедрой химии, профессор, chemistry@ngs.ru.
Аннотация. Исследована возможность использования антиоксидантов для управления процессами липопероксидации на модели глюкокортикоид-индуцированного окислительного стресса у крыс. Используя методы хемилюминесцентного и спектрофотометрического анализа по изменению в плазме крови активности супероксиддисмутазы, каталазы и содержания малонового диальдегида и диеновых коньюгатов, оценивали показатели развития окислительного стресса. Установлено, что полифункциональный серосодержащий антиоксидант «Тиофан» может рассматриваться в качестве перспективного средства для использования в комплексном лечении осложнений глюкокортикоидной терапии.
Ключевые слова: окислительный стресс, активированные метаболиты кислорода, супероксиддисмутаза, каталаза, антиоксиданты.
STUDY OF THE POSSIBILITY OF CONTROL PROCESSES OF LIPID PEROXIDATION IN RATS AT GLUCOCORTICOID-INDUCED
OXIDATIVE STRESS
Lukanina Svetlana N.
Novosibirsk State Pedagogical University, Anatomy, Physiology and Life Safety Department, Associate Professor, lukanina@ngs.ru.
Sakharov Andrey V.
Novosibirsk State Pedagogical University of Research and Education Center Experimental and Applied Biology, Head, Professor, asakharov 142@rambler. ru.
Prosenko Alexander E.
Novosibirsk State Pedagogical University Russian Federation, Department of Chemistry, Head, Professor, chemistry@ngs.ru.
Abstract. The possibility of using antioxidants for the control of lipid peroxidation processes on the model of glucocorticoid-induced oxidative stress in rats is discussed. Using the methods of chemiluminescence and spectrophotometric analysis of the change in blood plasma superoxide dismutase, catalase, and the content of malondialdehyde and diene conjugates, were evaluated indicators of oxidative stress. It is found that the sulfur-containing polyfunctional antioxidant "Thiophane" can be regarded as a promising agent for use in treatment of complications of glucocorticoid therapy.
Key words: oxidative stress, activated oxygen metabolites, superoxide dismutase, catalase, antioxidants.
Целью исследования явилась оценка эффективности использования антиоксидантов «Тиофан» и «а-токоферол» для управления процессами липопероксидации в организме крыс при моделировании глюкокортикоид-индуцированного окислительного стресса.
Эксперимент проводили на взрослых крысах-самцах линии Вистар, массой 250-300 г. Всех животных распределили на 5 групп - интактную, контрольную и три группы сравнения (ГС), по 10 особей в каждой. У крыс контрольной и всех ГС индуцировали развитие окислительного стресса (ОС) путем введения преднизолона (per os) в дозе 50 мг/кг в течение 14 дней [1]. Через три часа после приема преднизолона крысы первой ГС таким же способом получали 0,2 мл масляного раствора синтетического серосодержащего полифункционального антиоксиданта «Тиофан» в дозе 100 мг/кг веса, второй - водный раствор антиоксиданта «а-токоферол» в таких же объеме и дозе. Для чистоты эксперимента и стандартизации манипуляций, связанных с введением в организм веществ, крысам третьей ГС через три часа после преднизолона вводили 0,2 мл водопроводной воды. Поскольку «Тиофан» растворяли в растительном масле, животным контрольной группы после приема преднизолона вводили только 0,2 мл растительного масла.
На 15 сутки крыс всех групп выводили из эксперимента путем передозировки эфирного наркоза. В плазме крови животных всех групп определяли содержание малонового диальдегида (МДА), диеновых конъюгатов (ДК), а также активность ключевых ферментов антиоксидантной защиты - супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы (КАТ). Оценку активности СОД и КАТ осуществляли хемилюминесцентным методом [2, 5], а содержание МДА и ДК - спектрофотометрически [3, 4].
При анализе содержания продуктов свободнорадикального перекисного окисления липидов в плазме крови установлено, что у животных контрольной и всех ГС отмечается повышение уровня липопероксидации по сравнению с аналогичными показателями крыс интактной группы. При анализе содержания в плазме крови крыс ДК и МДА установлено, что использование антиоксиданта «Тиофан» приводит к достоверному снижению исследуемых показателей по сравнению с образцами крыс, получавших только глюкокортикоиды. Применение а-токоферола демонстрирует лишь тенденцию к снижению уровня маркеров ОС.
При изучении активности ключевых ферментов антиоксидантной защиты было установлено, что исследуемые показатели в плазме крови крыс контрольной и всех групп сравнения снижаются по сравнению с аналогичными значениями крыс интактной группы. Полученные результаты позволяют считать, что длительное применение глюкокортикоидов приводит к развитию глюкокортикоид-индуцированного ОС. При дифференциальной оценке специфической активности двух антиоксидантнтов, между ними установлены достоверные различия. Так, активность СОД и КАТ в плазме крови крыс, получавших антиоксидант «Тиофан» на 14,98% и 39,32%, превышает значения животных, принимавших а-токоферол.
Полученные результаты позволяют заключить, что длительное применение глюкокортикоидов приводит к развитию ОС. При дифференциальной оценке специфической активности различных антиоксидантнтов, между ними установлены достоверные различия. Сочетанное с глюкокортикоидами использование антиоксиданта «Тиофан» оптимизирует процессы СПОЛ в плазме крови и приближает показатели липопероксидации у крыс к значениям интактных животных. Применение а-токоферола не проявило выраженного антиоксидантного эффекта.
Библиографический список:
1. Валеева И.Х., Зиганшина Л.Е., Бурнашова З.А., Зиганшин А.У. Влияние димефосфона и ксидифона на показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы крыс, длительно получавших преднизолон // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2002. -№ 2. - Том 65. - С. 40-43
2. Королюк М.А. Mетод определения активности каталазы // Лаб. дело. - 1988. - №1. - С.16-19.
3. Определение резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови: метод. Рекомендации / сост. Ю.И. Рагина, М.И. Душкин -Новосибирск, 1998. - 11с.
4. Стальная И.Д. Современные методы в биохимии / И.Д. Стальная -М.: Медицина, 1977. - 391с.
5. Laihia J.K. Lucigenin and linoleate enhanced chemiluminescent assay for superoxide dismutase activity // Free Radic. Biol. Med. - 1993. - Vol. 14. - P. 457-461.