СТРАНИЧКА МОЛОДОГО УЧЕНОГО
С.К. Кононов
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ИОННЫХ ФАКТОРОВ НА ПРОТЕКАНИЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ И ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ИММУНОДИАГНОСТИКУМОВ НА ОСНОВЕ ГИДРОЗОЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ
Кировская государственная медицинская академия
Гидрозольные препараты представляют со бой коллоидные и полуколлоидные растворы оксидов и гидроксидов «переходных металлов»: прежде всего меди и железа, на поверхности ко торых адсорбированы биоспецифические ком поненты, в частности антигены, либо компли ментарные им антитела к различным нозологи- ям. Это новый класс диагностических препара тов. которые на сегодняшний день созданы и ус пешно апробированы в ряде методик.
Один из компонентов гидрозольного диагно-стикума является раствор электролита, в кото ром и происходит реакция. При этом нами уста новлено, что иммунохимическая активность гид розоля напрямую зависит от применяемого элек тролита. Эти данные были получены в ходе экс периментальных работ по созданию новых серо-диагностикумов на туберкулез и методики эксп рессного выявления вируса осповакцины на ос нове гидрозольных препаратов гексацианофер-рата железа (III).
Целью работы было установить влияние изу чаемых ионов на эффективность диагностику-мов. Задачей являлось провести постановку ре акции с применением раствора NaCl в сравне нии с растворами BaCl,, MgS04, а также провес ти сравнительную оценку результатов.
Гидрозольные препараты синтезировали по известной методике. На поверхности твердой фазы сорбировали биолиганд туберкулезный ан тиген в одном случае и антитела к антигенам вируса осповакцины в другом.
Результаты и их обсуждение
Были получены следующие результаты: при постановке реакции с участием биолигандов ви руса осповакцины наилучшие результаты были получены с применением 0,45°/) раствора MgS04 (антигены выявлялись в разведениях 1/20 - 1/320). В реакции с применением 0,9% NaCl в разведениях 1/20 - 1/40; в случае 1,2% раствора ВаС12 наблюдалась агглютинация и в плюс реак ции, и в контроле, но интенсивность в после днем в разведениях 1/20 -1/80 была выше. Во всех трех случаях ионная сила растворов I =0.15 моль/кг.
При постановке реакции по серодиагностике туберкулеза распределение результатов было
следующим: с 0,2% антитела выявлялись в
1/20 - 1/40, с 0,4% ШС1 - также 1/20 - 1/40, но в
первом случае результат фиксировался более длительное время. При применении 0.6% ВаС1, происходила неспецифическая агглютинация. В этой методике I = 0,07 моль/кг.
Таким образом, очевидно значительное вли яние различных ионов на протекание серодиаг-ностических реакций.
Данный факт можно попытаться объяснить следующим образом.
Частицы гидрозольного препарата, как кол лоидного раствора, структурированы в мицел лах - гетерогенных микросистемах из микрокри сталлов дисперсной фазы, окруженной сольвати- рованными ионами, которые усиливают срод ство коллоидных частиц к дисперсионной среде и препятствуют и агрегации.
При этом нейтрализация самих ионов либо связывание гпдратной оболочки способно уменьшить коллоидную устойчивость.
Рассмат риваемые нами ионы действуют подобным об разом, они способствуют уменьшению агрега-тивной устойчивости раствора (в регулируемых пределах), повышают взаимодействие частиц между собой. При этом в случае взаимодействия исследуемых биолигандов с лигандами на повер хности частиц происходит стабилизация гидро зольных комплексов, и это сопровождается от сутствием видимой агглютинации в плюс реак ции. В контроле этого взаимодействия не проис ходит и пониженная агрегативная устойчивость способствует быстрой видимой глазом агглюти нации.
Анализируя полученные результаты,
предпо ложительно можно констатировать в соответ ствии с законом Шульце - Гарди: коагуляция коллоидного раствора вызывается ионом, заряд которого противоположен знаку гранулы ми целлы и тем сильнее, чем выше заряд этого иона. Десольватация будет вызываться сильнее теми ионами, чей радиус меньше, т.е. в соответствии слиотропным рядом: СШ > I > В г > С1 > Г >804" Н+ >Ге,+ > Ва2+ > Са2+ > Mg:+ > МЫ/ > К+ > Ыа+
При этом важно учитывать и тот факт, что ионы с большим радиусом способны приво дить к гипергидратации частиц, и очевидно это тоже способствует потере агрегатпвной ус тойчивости.
Из этого видно, что нон Ыа+, хотя имеет наи меньший радиус, является одновалентным, по этому эффективность его наименьшая; ион Ва2+ является двухвалентным и имеет достаточно большой радиус, с чем, возможно, и связано так же низкая его эффективность; ион Mg2+ -двух валентен, имеет промежуточное положение по радиусу, применялся в сочетании с 8042" ионом, который обладает наибольшей десольватирую- щей активностью. Возможно, этот баланс харак
теристик MgS04 и определил его наибольшую активность.
Таким образом, результаты исследования по казывают сильное влияние различных ионов на протекание гидрозольных реакций, а примене ние различных ионных характеристик в регули руемых пределах позволяет повысить эффектив ность иммунохимической диагностической ме тодики.
Литература
1.«Вятский медицинский вестник» № 1, 1999 г. д.т.н. А.Г. Мешандин, асс. О.Ю. Орлова, асп. А.В. Цепелева «Гидрозоли: принципиально новый класс диагностических препаратов для выявления и мони торинга инфекционных и соматических заболева ний», стр. 37-42.
2.Журнал «Неврология и психиатрия» № 5, 2000.Ю.В Кислицин, А.Г. Мешандин «Определение противомозговых антител в крови больных с опухо лями мозга методом иммуноагглютинации»
3.«Клиническая лабораторная диаг ностика» № 1, 2001 Ю.В. Золотарев, А.Г. Мешандин, Л.В. Золотаре ва «Серологическая диагностика сальмонеллёзов».
4.пат. РФ № 2169924
5 Заказ 848
5.пат. РФ № 2130613
Summary
THE ROLE OF THE IONIC FACTORS IN SEROLOGICAL TESTS AND IN SENSITIVENESS OF THE HYDROSOL IMMUNODI AGNOSTIC METHOD
S.K. Kononov Kirov Slate Medical Academy The article describes the results of comparative investigations of NaCl, MgS04 and BaCl2 solutions in the hydrosol immunodiagnostic method. The immune sensitivenesses of the tuberculosis, small pox vaccine hydrosol diagnostic tests were studied. Our experiments show that some features of MgS04, BaCl, solutions can improve efficacy of this method.