CC BY
36
THE RELEVANCE OF VARIOUS FRACTIONS OF ALLOGENIC BONE MARROW CELLS TO THE TYPE II DIABETES CORRECTION
O.I. Stepanova, N.A. Onischenko, N.N. Karkischenko, O.V. Baranova, T.V. Galahova
The Research Centre for Biomedical Technologies of RAMS, Moscow Research Institute of Transplantology and Artificial Organs, Moscow
The aim of the study was to restore the immune disturbance in mice with diabetes. The clinical and histological signs of diabetes type II were decreased by application of bone marrow cells. The mice life duration was prolonged. The expressed therapeutic effect was achieved.
Key words: stromal cells, regeneration, recipient; transplantation.
■
Изучение влияния агонистов и антагонистов дофаминергических рецепторов на толерантность опиатной анальгезии
Н. Пирцхелани, Е. Абзианидзе, В. Беришвили, Т. Ткемаладзе, Б. Парцхаладзе,
Г. Капанадзе
Тбилисский государственный медицинский университет, Республика Грузия Институт физиологии им. И. С. Бериташвили АН Грузии, Республика Грузия Научный центр биомедицинских технологий РАМН, Москва
На крысах исследуется эффект малых доз парлодела - агониста дофамина - на вызванной морфином анальгезии, толерантности и зависимости. Парлодел в дозе 0,05 и 0,1 мг/кг не вызывает изменения латентного периода рефлекса поднятия хвоста у крыс, но дозозависимо усиливает морфиновую анальгезию. Предварительное введение 5 мг/кг алкоприда -антагониста дофаминергических рецепторов - блокирует эффект 0,1 мг/кг парлодела и уменьшает морфиновую анальгезию. Ежедневное введение 10 мг/кг морфина ускоряет толерантность к болеутоляющему эффекту у животных контрольной группы. Ежедневное совместное введение парлодела и морфина подавляет развитие толерантности к морфину. Однако ежедневное введение парлодела (0,1 мг/кг) и алкоприда (5 мг/кг) не вызывает значительных изменений развития толерантности к морфиновой анальгезии у крыс.
Ключевые слова: анальгезия, толерантность, морфин, парлодел, алкоприд.
В определенных областях мозга установлены дофаминергические и энкефали-нергические нейроны [6]. Согласно [1, 6, 12], опиаты могут влиять на синтез [14], кругооборот и высвобождение [15] дофамина. Кроме того, имеются данные, указывающие, что повышение уровня дофамина вызывает антиноцицептивное действие [3, 7]. Однако данные относительно эффекта дофаминергических агонистов на опиат-
ную анальгезию, толерантность и зависимость весьма малочисленны [5, 10]. Поэтому целью настоящей работы является определение влияния парлодела на ноцицеп-тивную чувствительность и морфиновую анальгезию. В работе также исследуется влияние низких доз парлодела на изменение степени толерантности и зависимости, вызванной морфиновой анальгезией.
Материал и методы
Эксперименты проводились на половозрелых белых крысах весом 200-250 г. Животного с целью иммобилизации помещали в специальную клетку из органического стекла, в которой крыса привыкала к условиям опыта. Для болевого раздражения использовался фокусированный луч, который наносился на верхнею треть хвоста крысы, заранее отмеченную тушью [9]. Поднятие хвоста, как правило, происходило при действии фокусированного луча при температуре 42—47°С, вызывавшем болевое ощущение. Фокусированный луч автоматически выключался сразу же после поднятия хвоста. Скрытый период рефлекса регистрировался на энцефалографе с помощью специального устройства.
Для нейрофармакологического анализа использовались наркотический анальгетик морфин (1—10 мг/кг), агонист дофами-нергических рецепторов парлодел (0,05—
0,1 мг/кг) и антагонист этих же рецепторов алкоприд (5 мг/гк) — интраперитонеально; в контрольной группе животным вводился физиологический раствор.
Антиноцицептивный эффект морфина изучался на животных, которым предварительно вводился парлодел и алкоприд или физиологический раствор. Изучалось также влияние парлодела на латентный период рефлекса поднятия хвоста. Болеутоля-ющиий эффект морфина (10 мг/кг) определялся в течение восьми дней, затем производилось сравнивание с эффектом, полученным в первый день опыта. Развитие толерантности действия морфина определялось в четырех группах крыс. Животным первой и второй группы ежедневно предварительно вводился парлодел, животным третьей группы — парлодел и алкоприд, а животным контрольной группы вводился физиологический раствор.
Результаты и обсуждение
Латентный период рефлекса поднятия хвоста равнялся 4—6 секундам. Введение
0,05 мг/кг парлодела не изменяет латентный период рефлекса поднятия хвоста, тогда как 0,1 мг/кг парлодела вызывает незначительное увеличение латентного периода.
При введении морфина (2—4 мг/кг) латентный период зависимо от дозы увеличивается. Предварительное введение пар-лодела (0,05 мг/кг) не влияет на продолжительность латентного периода рефлекса поднятия хвоста, однако отмечается статистически недостоверное увеличение латентного периода при введении парлодела (1 мг/кг) (рис. 1).
■ парлодел (0,1 мг/кг) с аклопридом (5 мг/кг) на фоне морфиновой анальгезии
Рис. 1. Изменения латентного периода рефлекса поднятия хвоста под влиянием парлодела (0.05 - 1мг/кг), парлодела (1 мг/кг) и алкоприда (5 мг/кг) на морфиновую анальгезию (мг/кг)
Таким образом, парлодел в низких дозах (0,05 мг/кг) существенно не влияет на аналь-гезирующий эффект морфина, но увеличение дозы парлодела (1 мг/кг) потенцирует антиноцицептивное действие морфина. Одновременное введение алкоприда и пар-лодела на фоне морфиновой анальгезии блокирует эффект парлодела на морфино-вую анальгезию, более того, значительно уменьшает антиноцицептивное действие морфина (рис. 1).
Ежедневное введение морфина (10 мг/кг) в течение восьми дней вызывает развитие толерантности к болеуталяющему действию морфина. При одновременном введении парлодела и морфина зависимо от дозы по-давлается толерантность морфиновой анальгезии. Ежедневное введение морфина и пар-лодела (0,05—0,08 мг/кг) вызывает уменьшение болеутоляющего эффекта морфина только на 4-й день, на 20—10% соответственно, по сравнению с первым днем; однако для животных, которым одновременно вводился морфин и физиологический раствор, болеутоляющий эффект морфина на 5-й день уменьшается на 50% (рис. 2). Ежедневное применение парлодела и алкоприда на фоне введения морфина у животных вызывает толерантность к болеутоляющему эффекту. Повторное введение парлодела и алкопри-да вызывает уменьшение эффекта морфи-новой анальгезии (10 мг/кг) на 40% по сравнению с контрольными животными.
Установлено, что дофаминергическая система включена в модуляции болевой аф-ферентации [1, 2, 6, 8, 14]. Также показано, что нигростриальная дофаминергическая
1 2 3 4 5 6 7 8
Дни
—■— морфин
парлодел на фоне морфина —□— парлодел и алкоприд на фоне морфина
Рис. 2. Влияние парлодела с алкопридом на толерантность к морфину (10 мг/кг).
Крысам ежедневно предварительно вводился парлодел (0,5-1 мг/кг)
Введение парлодела (1 мг/кг) с алкопридом (5 мг/кг)
система отвечает на разнообразный болевой стимул [11]. Полученные нами данные показывают, что введение парлодела существенно не влияет на латентный период рефлекса поднятия хвоста, тогда как парлодел зависимо от дозы увеличивает анальгетичес-кий эффект морфина, что выражается в увеличении латентного периода рефлекса. Согласно [13, 4] введение низких доз апомор-фина вызывает существенное увеличение латентного периода рефлекса поднятия хвоста, однако в наших опытах применение низких доз парлодела не вызывает антино-цицептивного действия. Это можно объяснить применением разных видов животных, различных доз веществ, аффинностью рецепторов и селективностью дофаминерги-ческих агонистов.
Показано, что при блокировании D-2 рецепторов алкопридом парлодел уменьшает антиноцицептивное действие морфина. Следовательно, когда D-2 рецепторы блокированы алкопридом, парлодел, стимулируя D-1 рецепторы, уменьшает антиноци-цептивное действие морфина. Кроме того, одновременное введение агониста дофами-нергических рецепторов и морфина не вызывает толерантность к морфину.
Литература
1. Лабахуа Т.Ш., Бутхузи С.М., Бекая Г.Л. и др. Модуляция постсинаптических реакций нейронов коры больших полушарий при стимуляции черной субстанции // Изв. АН Грузии, Биол. сер. А, т. 30, № 4, с. 517-525, 2004.
2. Akil H., Liebeskind J.C. Brain Res. 94:279 // C.F.Gonzalez et al. Br. J. Pharmac. 86:709P, 1985.
3. Barasi S., Ben-Sreti M.M., Duggal K.N., Gonzalez J.P., SewellR.D.E. Antinociceptive activity on intravenous and intrathecal dopamine agonists in naive and supersensitive rats // Br. J. Pharmac. 84:166 P, 1985.
4. Barasi B., Ben-Sreti M.M., Clatworthy A.L. et al. Dopamine receptor-mediated spinal antinociception in the normal and haloperidol
pretreatment rat: effects of sulpiride and SCH 23390 // Br. J. Pharmac. 90:15,1987.
5. Choe C.H. and Smith F.L. Sedative tolerance accompanies tolerance to the analgesic effects of fentanyl in infant rats // J. Pediatric Research, 47:727-735, 2000.
6. Chudler E.H., Dong W.K. The role of the basal ganglia in nociception and pain // Pain, 60, pp. 3-38; 1995.
7. Delfs J.M., Zhu Y., Druhan J.P., Aston-Jones G. Noradrenergic actions in ventral forebrain are critical for opiate withdrawal // Nature (Lond.), 403: 430-434, 2000.
8. Druhan J.P., Walters C.L., Aston-Jones G. Behavioral Activation Induced by D2-Like Receptor Stimulation during Opiate Withdrawal // J. Pharmacology and experimental therapeutics, vol. 294, 2, pp. 531-538, 2000.
9. Hardy J.D., Jacobs I. and Meixner M.D. Thresholds of pain and reflex contraction as related to noxious stimulation // J. Appl. Physiol., 5:725739, 1953.
10. Khanna J.M., Morato G.S., Ferreira V.M.M. NMDA Antagonists and Tolerance to Drugs Affecting the Central nervous System // CNS Drug Reviews, vol. 5, 2, pp. 165-176.
11. Pay S., Barasi S. A study of the connections of nociceptive substantia nigra neurons // Pain 12:75,1982.
12. Spampinato U., Inveernizzi R., Nowakowska E. Reduction of morphine’s effect on striatal dopamine metabolism in rats treated with a low dose of apomorphine of agents increasing serotonin transmission // Biochem. Pharmacol. 33:163,1984.
13. Stoof J. C., Kebabian J.W. Opposing roles for D-1 and D-2 dopamine receptors in efflux of cyclic AMP from rat neostriatum // Nature 294:366,1981.
14. Wilcox C.L. Pharmacology ofpain and analgesia // IASP Refresher Courses on Pain Management held in conjunction with the 9th World Congress on Pain. August 22-27, Vienna Austria, pp. 573591,1999.
15. Wood P.L., Scotland M., Richard J.W., Rachham A. Actions of mu, Kappa, Sigma, delta and agonist/antagonist opiates on striatal dopaminergic junction // J. Pharmacol. Exp. Ther 215:697,1980.
STUDY OF AGONISTS AND ANTAGONISTS OF DOFAMINERGIC RECEPTORS INFLUENCE ON TOLERANCE TO OPIATE ANALGESIA
N. Pirtskhelani, E. Abzianidze, V. Berishvili, T. Tkemaladze, B. Partskhaladze, G.Kapanadze
Tbilisi State Medical University, Republic of Georgia
I. Beritashvili Institute of Physiology of Georgian Academy of Sciences, Republic of Georgia The Research Centre for Biomedical Technologies of RAMS, Moscow
The effect of small doses of parlodel, a dopamine agonist, on morphine-induced analgesia, tolerance and dependence was investigated in rats. Parlodel of 0.05 and 0.1 mg/kg dose did not affect the base line of tail flick latency of mice but potentiated the morphine analgesia depending on dose. Pretreatment of rats with 5 mg/kg of alkoprid, a D-2 antagonist, not only blocked the effect of 0.1 mg/kg of parlodel but also antagonized the morphine analgesia. Daily injections of 10 mg/kg of morphine rapidly developed tolerance to the analgesic effect in control animals. Daily treatment with parlodel plus morphine suppressed the development of tolerance to morphine. However, daily treatment with parlodel (0.1 mg/kg) plus alkoprid (5 mg/kg) did not produce significant changes in development of tolerance to the morphine analgesia in rats.
Key words: Analgesia, tolerance, morphine, parlodel, alkopride.
