CC BY
31
УДК 619:615.9:576.535:619:618.14-002 DOI: 10.30914/2411 -9687-2020-6-2-206-213
Изучение цитотоксического действия препарата
на основе ионизированного серебра Е. Ю. Тарасова, Л. Е. Матросова, С. А. Танасева, Р. М. Потехина
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, г. Казань, Россия
В связи с тем что наночастицы и ионы серебра обладают широким спектром антимикробной активности по отношению к некоторым устойчивым к антибиотикам микроорганизмам, препараты на их основе приобретают все большую популярность. Несмотря на широкое распространение послеродовых эндометритов коров, немалое количество работ, посвященных этой проблеме, вопросы терапии остаются недостаточно изученными. В данной статье проведено изучение цитотоксического действия препарата на основе ионизированного серебра с целью дальнейшего его внедрения в практику, как эффективного средства лечения и профилактики послеродовых эндометритов у коров различной этиологии. Цитоток-сическое действие препарата на основе ионизированного серебра изучали на эпителиоподобных клетках перевиваемой линии ЛЭК (легкое эмбриона коровы). Для определения влияния изучаемого препарата на адгезивную способность клеток добавляли его в соотношении к ростовой среде в концентрациях 25 и 50 % соответственно. Клетки культивировали в 3 повторностях. В качестве контроля использовали те же концентрации физиологического раствора в ростовой среде и полную ростовую среду без разведения. В полученные растворы добавляли суспензию клеток ЛЭК и разливали по 200 мкл в конечной концентрации 1000 клеток на лунку с чипами CIM-Plate. По изменению клеточного импеданса, выражающегося в значении клеточного индекса определяли скорость роста клеточной популяции в различных условиях. Для определения влияния препарата на основе ионизированного серебра на пролиферацию клеток, клеточную суспензию ЛЭК на полной ростовой среде рассевали на лунку с чипами CIM-Plate по 200 мкл в конечной концентрации 1000 клеток на лунку. Через 24 часа после полной адгезии клеток ЛЭК из лунок убирали ростовую среду, добавляли 25 или 50 % физиологического раствора или препарата к ростовой среде (n = 3). В качестве контроля использовали те же концентрации физиологического раствора в ростовой среде и ростовую среду без разведения (n = 3). По изменению клеточного импеданса, выражающегося в значении ИП, определяли скорость роста клеточной популяции в различных условиях. Затем проводили окрашивание этой же культуры клеток ЛЭК на выявление апоптотических клеток. Количество клеток в апоптозе определяли в процентах от общего числа клеток при помощи набора Annexin V Apoptosis Detection Kit. Показано, что препарат на основе ионизированного серебра, учитывая фактор разбавления и, в связи с этим, малого количества питательных веществ, как в лунках с испытываемым веществом, так и в лунках с физиологическим раствором, не влияет на адгезивную способность и не оказывает отрицательного влияния на процессы жизнедеятельности культуры клеток ЛЭК.
Ключевые слова: ионизированное серебро, цитотоксическое действие, индекс пролиферации, адгезия, эндометрит, культура клеток.
Для цитирования: Тарасова Е.Ю., Матросова Л.Е., Танасева С.А., Потехина Р.М. Изучение цитотоксического действия препарата на основе ионизированного серебра // Вестник Марийского государственного университета. Серия «Сельскохозяйственные науки. Экономические науки». 2020. Т. 6. № 2. С. 206-213. DOI: 10.30914/2411-9687-2020-6-2-206-213
Study of the cytotoxic action of ionized silver based drug E. Y. Tarasova, L. E. Matrosova, S. A. Tanaseva, R. M. Potekhina
Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia
Due to the fact that silver nanoparticles and ions have a wide spectrum of antimicrobial activity in relation to certain antibiotic-resistant microorganisms, preparations based on them are becoming increasingly popular. Despite the widespread occurrence of postpartum endometritis of cows, and a considerable number of works devoted to this problem, therapy issues remain insufficiently studied. In this article, the authors studied the cytotoxic effect of the drug based on ionized silver with the aim of further introducing it into practice as an effective means of treating and preventing postpartum endometritis of various etiologies in cows. The cytotoxic effect of the drug based on ionized silver was studied on epithelial-like continuous line cells of LCE (lung of a cow embryo). To determine the effect of the studied drug on the adhesive ability of cells, it was added in relation to the growth medium at
concentrations of 25 and 50 %, respectively. Cells were cultured in 3 replicates. As control, the same concentrations of saline in the growth medium and the complete growth medium without dilution were used. A suspension of LCE cells was added to the resulting solutions and 200 ^l was dispensed at a final con centration of 1000 cells per well with CIM-Plate chips. The change in cell impedance expressed in the value of the cell index was used to determine the growth rate of the cell population under various conditions. To determine the effect of ionized silver-based preparation on cell proliferation, a cell suspension of LCE in a complete growth medium was dispersed at 200 ^l per well with CIM-Plate chips at a final concentration of 1000 cells per well. 24 hours after complete adhesion of LCE cells, the growth medium was removed from the wells, 25 or 50 % saline or preparation was added to the growth medium (n = 3). As control, the same concentrations of saline in the growth medium and growth medium without dilution were used (n = 3). The change in cell impedance, expressed in the value of IP, determined the growth rate of the cell population under various conditions. Then the same culture of LCE cells was stained for the detection of apoptotic cells. The number of cells in apoptosis was determined as a percentage of the total number of cells using the Annexin V Apoptosis Detection Kit. It is shown that a preparation based on ionized silver, taking into account the dilution factor and, therefore, a small amount of nutrients, both in wells with a test substance and in wells with physiological saline, does not affect the adhesive ability and does not adversely affect life processes of LCE cell culture.
Keywords: ionized silver, cytotoxic effect, proliferation index, adhesion, endometritis, cell culture.
For citation: Tarasova E.Yu., Matrosova L.E., Tanaseva S.A., Potekhina R.M. Study of the cytotoxic action of ionized silver based drug. Vestnik of the Mari State University. Chapter "Agriculture. Economics". 2020, vol. 6, no. 2, pp. 206-213. DOI: 10.30914/2411-9687-2020-6-2-206-213 (In Russ.).
В последние годы резко возрос интерес к использованию препаратов на основе ионов или нано-частиц серебра в качестве универсальных антибактериальных и фунгицидных средств [2; 8; 11]. Однако в фармакодинамике таких форм серебра не все так однозначно. Наночастицы серебра могут проникать через гематоэнцефалический, альвеолярно-капиллярный, гемато-тестикуляр-ный барьеры, а также кровеносные сосуды кожи [12; 14; 15]. Размер частиц является основным фактором, влияющим на взаимодействие с форменными элементами крови [10]. Показано, что модифицированные полиэлектролитом наноча-стицы серебра в определенной концентрации оказывают цитотоксическое действие на перевиваемые линии клеток [5].
Ионизированная серебром вода используется в хирургии, офтальмологии, педиатрии, стоматологии, гинекологии и так далее [4].
Отмечено стимулирующее действие препаратов серебра на морфологические показатели крови: возрастает содержание эритроцитов, гемоглобина, лимфоцитов и моноцитов, снижается скорость оседания эритроцитов.
Поступление наночастиц серебра в организм животных в составе питьевой воды инициировало сдвиги в их физиологическом состоянии, что отражалось на массе тела и внутренних органов и зависело от дозы вводимого препарата, так же
установлено, что добавление в рацион кормления птиц серебряного нанокомпозита положительно влияло на прирост массы тела утят и цыплят [6].
С одной стороны, серебро рассматривается как микроэлемент, необходимый для нормального функционирования внутренних органов и систем, с другой стороны, как средство, повышающее иммунитет, активно воздействующее на патогенные микроорганизмы.
Серебро в ионном виде обладает выраженным бактерицидным, бактериостатическим, противовирусным, противогрибковым и антисептическим действием. По антимикробному действию ионное серебро превосходит антибактериальные препараты и ингибирует рост резистентных бактерий. Ионы серебра способны ингибировать in vitro адено- и энтеровирусы, вирусы оспы и гриппа, оказывать терапевтический эффект при лечении вирусного энтерита, ингибировать на начальной стадии развития вирус иммунодефицита [1; 13].
Водные растворы серебра - эффективное бактерицидное средство при гнойных ранах [7].
Из-за микроскопических размеров наночасти-цы серебра более активны, а их большая удельная поверхность усиливает область контакта с микроорганизмами, что значительно увеличивает бактерицидные свойства [3; 13].
Некоторые исследователи, объясняя механизм бактерицидного воздействия серебра на клетку,
особое значение придают биохимическим процессам, катализируемым ионами серебра, в том числе окислению цитоплазмы бактерий и ее разрушение кислородом в присутствие ионов серебра.
Другие авторы объясняют антимикробное действие серебра нарушением структурно-функциональных свойств ферментов, содержащих SH- и СООН-группы, а также нарушением осмотического давления клетки в результате взаимодействия ионов серебра с цитоплазмой [9].
Послеродовые эндометриты у коров являются огромной проблемой для животноводства, приводящей к снижению продуктивности и, как следствие, значительным экономическим потерям [16], поэтому разработка методов и способов лечения, а также внедрение в практику новых высокоэффективных препаратов является очень актуальным.
Учитывая вышеизложенное, препарат на основе ионизированного серебра может стать перспективным терапевтическим и профилактическим средством при данном заболевании.
При внедрении новых фармакологических препаратов в производство основное внимание разработчиков должно быть уделено контролю их качества, в том числе вопросам токсикологической безвредности.
Цель исследования
Целью первого этапа исследований являлось изучение цитотоксического действия препарата на основе ионизированного серебра.
Материалы и методы
Цитотоксическое действие препарата на основе ионизированного серебра изучали на эпите-лиоподобных клетках перевиваемой линии ЛЭК (легкое эмбриона коровы). ЛЭК культивировался на полной ростовой среде (DMEM с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки до 10 %, L-2 мМглутамина и гентамицина). Смену среды осуществляли 2 раза в 7 суток. При достижении монослоем 80 % конфлюэнтности клетки переводили в суспензию с использованием раствора 0,25 % трипсина с версеном (1:1) и рассевали в соотношении 1 : 3. Флаконы помещали в CO2-инку-батор и инкубировали при стандартных условиях при 37°С, 5 % СО2 и увлажненной среде.
Все работы с культурой клеток проводили в стерильном ламинарном боксе II класса биологической безопасности с соблюдением общепринятых правил работы с эукариотическими клетками.
Для проведения экспериментов с использованием изучаемого препарата готовили 0,9 %-ный раствор натрия хлорида. Стерилизацию проводили пропусканием полученного раствора через фильтр с размерами пор 0,22 мкм.
Для определения влияния изучаемого препарата на адгезивную способность клеток добавляли его в соотношении к ростовой среде в концентрациях 25 и 50 % соответственно. Клетки культивировали в 3 повторностях. В качестве контроля использовали те же концентрации физиологического раствора в ростовой среде и полную ростовую среду без разведения. В полученные растворы добавляли суспензию клеток ЛЭК и разливали по 200 мкл в конечной концентрации 1000 клеток на лунку с чипами CIM-Plate.
Измерения проводили на приборе xCELLigence (Roche Applied Science, Швейцария) с чипами CIM-Plate (cellular invasion/migration). По изменению клеточного импеданса, выражающегося в значении клеточного индекса (ИП) определяли скорость роста клеточной популяции в различных условиях. Эксперимент проводили на протяжении 72 часов, измерения клеточного импеданса проводили каждый час.
Для определения влияния препарата на основе ионизированного серебра на пролиферацию клеток, клеточную суспензию ЛЭК на полной ростовой среде рассевали на лунку с чипами CIM-Plate по 200 мкл в конечной концентрации 1000 клеток на лунку. Через 24 ч после полной адгезии клеток ЛЭК из лунок убирали ростовую среду, добавляли 25 и 50 %-ную смесь физиологического раствора с препаратом и ростовой средой (n = 3). В качестве контроля использовали те же концентрации физиологического раствора в ростовой среде и ростовую среду без разведения (n = 3). Измерения также проводили на приборе xCELLigence. По изменению клеточного импеданса, выражающегося в значении ИП, определяли скорость роста клеточной популяции в различных условиях. Эксперимент проводили на протяжении 48 ч, измерения клеточного импеданса проводили каждый час. Затем проводили окрашивание этой же культуры клеток ЛЭК на выявление апоптоти-ческих клеток. После 24 ч роста в полной ростовой среде и 48 ч сокультивирования в экспериментальных средах количество клеток в апоптозе определяли в процентах от общего числа клеток при помощи набора Annexin V ApoptosisDetectionKit (SantaCrus, sc-4252 AK, США). Окрашивание
клеток проводили согласно инструкции фирмы-производителя. Определение жизнеспособности проводили на проточномцитофлуориметре FACS Aria III (BD Biosciences, США).
Статистическую обработку результатов осуществляли с использованием стандартного пакета программ MicrosoftExcel. Результаты представлены, как средние арифметические со стандартным
отклонением. Статистическую значимость различий определяли по критерию Стьюдента.
Результаты
Результаты исследования влияния изучаемого препарата на основе ионов серебра на адгезию и индекс пролиферации клеток ЛЭК представлены в таблице 1.
Таблица 1 / Table 1
Срок исследовании, ч / Research period, h Среда культивирования / Cultivation medium
полная ростовая среда/ complete growth medium ростовая среда + препарат (50:50 %) / growth medium + drug (50:50 %) ростовая среда + препарат (75:25 %) / growth medium + drug (75:25 %) ростовая среда + физр-р (50:50 %) / growth medium + saline (50:50 %) ростовая среда + физр-р (75:25 %) / growth medium + saline (75:25 %)
24 5,1±0,15 1±0,03 1,1±0,03 0 1,4±0,04
48 7,3±0,22 0 2,1±0,06 0 2,1±0,06
72 9,2±0,28 0 4,2±0,13* 0 4,4±0,13*
* Р < 0,05 по сравнению с контролем, 72 ч.
Одномоментное добавление в среду культивирования 50 % физиологического раствора, содержащего препарат на основе ионов серебра, и последующее культивирование на протяжении 3 сут показало отрицательное влияние на адгезию клеток данного раствора. В контроле с добавлением 50 % физиологического раствора так же не произошло прикрепления клеток к культураль-ной посуде. В ростовых средах, содержащих по 25 % физиологического раствора и содержащего изучаемый препарат соответственно, произошло частичное прикрепление клеток к культуральной посуде и их пролиферация. В полной ростовой
среде клетки адгезировались и пролиферировали. Отсутствие или низкая адгезия клеток к культу-ральному пластику, вероятно, связана с критическим уровнем сыворотки крови крупного рогатого скота, так как именно белки, входящие в ее состав, обеспечивают данный процесс. Таким образом, полученные нами результаты, показывают отсутствие отрицательного влияния препарата на основе ионизированного серебра на клеточную адгезию.
Результаты исследования влияния изучаемого препарата на рост клеточной культуры ЛЭК представлены в таблице 2.
Таблица 2 / Table 2
Индекс пролиферации культуры клеток ЛЭК при добавлении препарата на основе ионизированного серебра после адгезии клеток (n = 3) / The proliferation index of LCE cell culture by adding the drug based on ionized silver after cell adhesion (n = 3)
Срок исследовании, ч / Research period, h Среда культивирования / Cultivation medium
полная ростовая среда / complete growth medium ростовая среда + препарат (50:50 %) / growth medium + drug (50:50 %) ростовая среда + препарат (75:25 %) / growth medium + drug (75:25 %) ростовая среда + физр-р (50:50 %) / growth medium + saline (50:50 %) ростовая среда + физр-р (75:25 %) / growth medium + saline (75:25 %)
24 5,1±0,15 5,3±0,16 5,1±0,15 5,0±0,15 5,4±0,16
48 6,1±0,18 6,3±0,19 6,1±0,18 6,0±0,18 6,4±0,19
72 8,2±0,25 3,4±0,10* 5,3±0,16* 4,3±0,13* 7,0±0,21*
*Р<0,05 по сравнению с контролем, 72 ч.
Индекс пролиферации культуры клеток ЛЭК при добавлении изучаемого препарата и одновременном внесении клеточной суспензии (n = 3) / The proliferation index of LCE cell culture when adding the studied drug and the simultaneous introduction of cell suspension (n = 3)
Окрашивание клеточной культуры на наличие же средах с добавлением 25 % физиологического апоптотических клеток показало их незначи- раствора (53±1,5 %) и 25 % изучаемого препара-тельное количество в контроле (12±3,2 %), а так та (52±1,1 %) соответственно (рис. 1-3).
Plot Р04, gated on P01.R1
10" 10" 10J 10ч Green Fluorescence (GRN-HLog)
Рис. 1. Наличие апоптических клеток в контроле / Fig. 1. The presence of apoptotic cells in the control
Plot P04, gated on P01.R1
Green Fluorescence (GRN-HLog)
Рис. 2. Наличие апоптических клеток в варианте «ростовая среда + физ р-р (75 : 25 %)» / Fig. 2. The presence of apoptotic cells in the variant of growth medium + saline (75 : 25 %)
о Plot P04, gated on P01.R1
10" 10^ 10J 104 Green Fluorescence (GRN-HLog)
Рис. 3. Наличие апоптических клеток в варианте «ростовая среда+препарат на основе ионизированного серебра (75 : 25 %)» / Fig. 3. The presence of apoptotic cells in the variant of growth medium + drug based on ionized silver (75 : 25 %)
Культивирование клеточной суспензии ЛЭК на протяжении 24 ч на полной ростовой среде показало, что в этот период происходит прикрепление клеток ко дну культуральной посуды и начинается их интенсивное деление. Индекс пролиферации клеток ЛЭК после замены полной ростовой среды на экспериментальные растворы через 24 ч культивирования практически не отличается от индекса пролиферации клеток, выросших на полной среде.
Через 48 ч роста на экспериментальных средах наблюдается снижение индекса пролиферации по сравнению с клетками, росшими на полной ростовой среде. Окраска на наличие апоптозных клеток через 48 ч культивирования при росте клеток в присутствии 25 % физиологического раствора и 25 % препарата на основе ионизированного серебра показало их присутствие в практически одинаковом диапазоне в обоих случаях. Это связано с большим разведением питательных веществ в ростовых средах.
Заключение
Установлено, что в течение первых суток культивирования с разбавленной изучаемым препаратом или физиологическим раствором ростовой
средой питательных веществ было достаточно для активной пролиферации клеток. Более длительное культивирование приводило к снижению питательных веществ в ростовой среде, что отрицательно сказывалось на пролиферации клеток. Количество апоптических клеток в средах, содержащих 25 % физиологического раствора и препарата на основе ионизированного серебра, находилось на уровне 52-53 % соответственно, что также связано с малым количеством питательных веществ в среде.
Таким образом, препарат на основе ионизированного серебра, учитывая фактор разбавления и в связи с этим малого количества питательных веществ, как в лунках с испытываемым веществом, так и в лунках с физиологическим раствором, не влияет на адгезивную способность и не оказывает отрицательного влияния на процессы жизнедеятельности перевиваемых клеток ЛЭК, что видно впервые 24 часа культивирования. Однако для решения вопроса о внедрении препарата на основе ионизированного серебра в практику необходимо провести его полную фармако-токсикологическую оценку, что будет являться вторым этапом наших исследований.
Литература
1. Габидулина З.Г., Габидулин Ю.З., Ахтариева А.А. Характеристика свойств определяющих персистенцию моно- и ассоциированных культур условно патогенных энтеробактерий // Микробиология, эпидемиология и иммунология. 2006. № 4. С. 62-64. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=9226778 (дата обращения: 27.01.2020).
2. Матросова Л.Е., Чередниченко Ю.В., Тарасова Е.Ю. [и др.]. Влияние препарата на основе ионизированного серебра на образование биопленок микроорганизмами // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2017. № 1. С. 52-57. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=37025096 (дата обращения: 27.01.2020).
3. Медведева Н.В., ИпатоваО.М., Иванов Ю.В. [и др.] Нанобиотехнология и наномедицина // Биомедицинская химия. 2006. Т. 52 (6). С. 529-546. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=12873439 (дата обращения: 27.01.2020).
4. Мосин О.В. Бактерицидные свойства наночастиц коллоидного серебра // Бионанотехнологии. 2013. № 6 (25). С. 54-59. URL: https://cyberleninka.rU/article/n/kolloidnoe-serebro-v-bionanotehnologii (дата обращения: 27.01.2020).
5. Тарасова Е.Ю., Науменко Е.А., Рожина Э.В. [и др.]. Прямая модификация клеток с использованием поликатион-стабилизированных серебряных наночастиц // Гены и клетки. 2015. № 10 (4). С. 94-98. URL: https://cyberleninka.ru/ article/n/pryamaya-modifikatsiya-kletok-s-ispolzovaniem-polikation-stabilizirovannyh-serebryanyh-nanochastits (дата обращения: 27.01.2020).
6. Шамсутдинова И.Р., Дерхо М.А. Особенности биологического действия наночастиц серебра в организме животных // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2016. № 1 (57). C. 202-205. URL: https://cyberleninka.ru/ article/n/osobennosti-biologicheskogo-deystviya-nanochastits-serebra-v-organizme-zhivotnyh (дата обращения: 27.01.2020).
7. Chen L.Q., Fang L., Ling J. [et al.]. Nanotoxicity of silver nanoparticles to red blood cells: Size-dependent adsorption, uptake and hemolytic activity // Chem. Res. Toxicol.2015. № 28 (3). P. 501-509. DOI: 10.1021/tx500479m
8. Dunn K., Edwards-Jones V. The role of Acticoat with nanocrystalline silver in the management of bums // Bums. 2004. № 30. P. 1-9. DOI: 10.1016/s03054179(04)90000-9
9. Gogoi S.K., Gopinath P., Paul A. [et al.]. Green Fluorescent Protein-Expressing Escherichia coli as a Model System for Investigating the Antimicrobial Activities of Silver Nanoparticles // Langmuir. 2006. № 22. P. 9322-9328. DOI: 10.1021/la060661v
10. Hernandez-Sierra J.F., Ruiz F., Pena D.C. [et al.]. The antimicrobial sensitivity of Streptococcus mutans to nanoparticles of silver, zinc oxide, and gold // Nanomed.-Nanotechnol. Biol. Med. 2008. № 4 (3). P. 237-240. DOI: 10.1016/j.nano.2008.04.005
11. Lok C.N., Ho C.M., Chen R. [et al.]. Proteomic Analysis of the Mode of Antibacterial Action of Silver Nanoparticles // Pro-teome Res. 2006. № 5. P. 916-924. DOI: 10.1021/pr0504079
12. Samberg M.E., Oldenburg S.J., Monteiro-Riviere N.A. Evaluation of silver nanoparticle toxicity in skin in vivo and keratino-cytes in vitro// Environmental health perspectives. 2010. № 118. Р. 407. DOI: 10.1289/ehp.0901398
13. Shahverdy A., Fakhimi A., Minaian S. Synthesis and effect of silver nanophractes on the antibacterial activity of different antibiotics against Staphylococcus and Escherichia coli // Nanomedicine-Nanotechnology biolog and medicine. 2007. № 3 (2). P. 168-171. DOI: 10.1016/j.nano.2007.02.001
14. Sharma V.K., Yngard R.A., Lin Y. Silver nanoparticles: green synthesis and their antimicrobial activities // Advances in colloid and interface science. 2009. № 145. P. 83. DOI: 10.3109/21691401.2015.1011805
15. Takenaka S., Karg E., Roth C. [et al.]. Pulmonary and systemic distribution of inhaled ultrafine silver particles in rats // Environmental health perspectives. 2001. № 109. Р 547. DOI: 10.1289/ehp.01109s4547
16. Yumangulova G.M., Semenov E.I., Potekhina R.M. [et al.] Effect of abiotic stressors on T-2-producing environmental isolates of Fusarium sporotrichioides // Journal of Pharmacy Research. 2017. V. 11. P. 1226-1229. URL: http://jprsolutions.info/article_detail.php?article_id=1854 (дата обращения: 27.01.2020).
References
1. Gabidulina Z.G., Gabidulin Yu.Z., Akhtarieva A.A. Kharakteristika svoistv opredelyayushchikh persistentsiyu mono-i assotsiirovannykh kul'tur uslovnopatogennykh enterobakterii [Characteristics of properties determining the persistence of mono-and associated cultures of conditionally pathogenic enterobacterial Mikrobiologiya, epidemiologiya I immunologiya = Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunology, 2006, no. 4, pp. 62-64. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=9226778 (accessed 27.01.2020). (In Russ.).
2. Matrosova L.E., Cherednichenko Yu.V., Tarasova E.Yu. [et al.]. Vliyanie preparata na osnove ionizirovannogo serebra na obrazovanie bioplenok mikroorganizmami [The effect of a drug based on ionized silver on the formation of biofilms by microorganisms]. Problemy veterinarnoi sanitarii, gigieny I ekologii = Problems of Veterinary Sanitation, Hygiene and Ecology, 2017, no. 1, pp. 52-57. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=37025096 (accessed 27.01.2020). (In Russ.).
3. Medvedeva N.V., Ipatova O.M., Ivanov Yu.V. [et al.]. Nanobiotekhnologiya I nanomeditsina [Nanobiotechnology and Nanomedicine]. Biomeditsinskaya khimiya = Biomedical Chemistry, 2006, vol. 52 (6), pp. 529-546. Available at: https://elibrary.ru/ item.asp?id=12873439_(accessed 27.01.2020). (In Russ.).
4. Mosin O.V. Bakteritsidnye svoistva nanochastits kolloidnogo serebra [Bactericidal properties of colloidal silver nanoparti-cles]. Bionanotekhnologii = Bionanotechnology, 2013, no. 6 (25), pp. 54-59. Available at: https://cyberleninka.ru/article/n7 kolloidnoe-serebro-v-bionanotehnologii (accessed 27.01.2020). (In Russ.).
5. Tarasova E.Y., Naumenko E.A., Rozhina E.V. [et al.]. Pryamaya modifikatsiya kletok s ispol'zovaniem polikation-stabilizirovannykh serebryanykh nanochastits [Direct cell modification using polycation-stabilized silver nanoparticles]. Geny i kletki = Genes and Cells, 2015, no. 10 (4), pp. 94-98. Available at: https://cyberleninka.ru/article/n/pryamaya-modifikatsiya-kletok-s-ispolzovaniem-polikation-stabilizirovannyh-serebryanyh-nanochastits_(accessed 27.01.2020). (In Russ.).
6. Shamsutdinova I.R., Derkho M.A. Osobennosti biologicheskogo deistviya nanochastits serebra v organizme zhivotnykh [Peculiarities of biological impact of silver nanoparticles in the animals' body]. Izvestia Orenburgskogo gosudarstvennogo agrar-nogo universiteta = Izvestia Orenburg State Agrarian University, 2016, no. 1 (57), pp. 202-205. Available at: https://cyberleninka.ru/ article/n/osobennosti-biologicheskogo-deystviya-nanochastits-serebra-v-organizme-zhivotnyh_(accessed 27.01.2020). (In Russ.).
7. Chen L.Q., Fang L., Ling J. [et al.]. Nanotoxicity of silver nanoparticles to red blood cells: Size-dependent adsorption, uptake and hemolytic activity. Chem. Res. Toxicol, 2015, no. 28 (3), pp. 501-509. DOI: 10.1021/tx500479m (In Eng.).
8. Dunn K., Edwards-Jones V. The role of Acticoat with nanocrystalline silver in the management of burns. Burns, 2004, no. 30, pp. 1-9. DOI: 10.1016/s0305 4179(04)90000-9 (In Eng.).
9. Gogoi S.K., Gopinath P., Paul A. [et al.]. Green Fluorescent Protein-Expressing Escherichia coli as a Model System for Investigating the Antimicrobial Activities of Silver Nanoparticles. Langmuir, 2006, no. 22, pp. 9322-9328. DOI: 10.1021/la060661v (In Eng.).
10. Hernandez-Sierra J.F., Ruiz F., Pena D.C. [et al.]. The antimicrobial sensitivity of Streptococcus mutans to nanoparticles of silver, zinc oxide, and gold. Nanomed.-Nanotechnol. Biol. Med, 2008, no. 4 (3), pp. 237-240. DOI: 10.1016/j.nano.2008.04.005 (In Eng.).
11. Lok C.N., Ho C.M., Chen R. [et al.]. Proteomic Analysis of the Mode of Antibacterial Action of Silver Nanoparticles. Prote-ome Res, 2006, no. 5, pp. 916-924. DOI: 10.1021/pr0504079 (In Eng.).
12. Samberg M.E., Oldenburg S.J., Monteiro-Riviere N.A. Evaluation of silver nanoparticle toxicity in skin in vivo and keratino-cytes in vitro. Environmental health perspectives, 2010, no. 118, Р. 407. DOI: 10.1289/ehp.0901398 (In Eng.).
13. Shahverdy A., Fakhimi A., Minaian S. Synthesis and effect of silver nanophractes on the antibacterial activity of different antibiotics against Staphylococcus and Escherichia coli. Nanomedicine-Nanotechnology biolog and medicine, 2007, no. 3 (2), pp. 168-171. DOI: 10.1016/j.nano.2007.02.001 (In Eng.).
14. Sharma V.K., Yngard R.A., Lin Y. Silver nanoparticles: green synthesis and their antimicrobial activities. Advances in colloid and interface science, 2009, no. 145, p. 83. DOI: 10.3109/21691401.2015.1011805 (In Eng.).
15. Takenaka S., Karg E., Roth C. [et al.]. Pulmonary and systemic distribution of inhaled ultrafme silver particles in rats. Environmental health perspectives, 2001, no. 109, p. 547. DOI: 10.1289/ehp.01109s4547 (In Eng.).
16. Yumangulova G.M., Semenov E.I., Potekhina R.M. [et al.] Effect of abiotic stressors on T-2-producing environmental isolates of Fusarium sporotrichioides. Journal of Pharmacy Research, 2017, vol. 11, pp. 1226-1229. Available at: http://jprsolutions.info/article_detail.php?article_id=1854_(accessed 27.01.2020). (In Eng.).
Статья поступила в редакцию 23.04.2020 г.; принята к публикации 19.06.2020 г.
Submitted 23.04.2020; revised 19.06.2020.
Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.
All authors have read and approved the final manuscript.
Об авторах
Тарасова Евгения Юрьевна
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории микотоксинов, ФЦТРБ-ВНИВИ, г. Казань, Россия, ORCID ГО: 00000002-9056-5798, [email protected]
Матросова Лилия Евгеньевна
доктор биологических наук, зав. лабораторией, ФЦТРБ-ВНИВИ, г. Казань, Россия, ORCID ГО: 0000-0001-7428-7882, [email protected]
Танасева Светлана Анатольевна
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории микотоксинов, ФЦТРБ-ВНИВИ, г. Казань, Россия, ORCID ГО: 00000003-1295-6184, vip. tanaseva2015@mail т
About the authors Evgeniya Yu. Tarasova
Ph. D. (Biology), Senior Researcher, Mycotoxin Laboratory, Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia, ORCID ID: 0000-0002-9056-5798, Evgenech-ka1885@gmail. com
Lilia E. Matrosova
Dr. Sci. (Biology), Head of Laboratory, Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia, ORCID ID: 0000-0001-74287882, [email protected]
Svetlana A. Tanaseva
Ph. D. (Biology), Senior Researcher, Mycotoxin Laboratory, Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia, ORCID ID: 0000-0003-1295-6184, [email protected]
Потехина Рамзия Мухаметовна
кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории микотоксинов, ФЦТРБ-ВНИВИ, г. Казань, Россия, ORCID ГО: 00000002-9395-8327, [email protected]
Ramziya M. Potekhina
Ph. D. (Biology), Leading Researcher, Mycotoxin Laboratory, Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia, ORCID ID: 0000-0002-9395-8327, [email protected]
