CC BY
37
УДК 579.222:504.72
DOI 10.21685/2307-9150-2020-1-10
Е. В. Плешакова, С. Д. Колесник
ИЗУЧЕНИЕ СПОСОБНОСТИ ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ БУРОВЫХ ШЛАМОВ МИКРООРГАНИЗМОВ К СИНТЕЗУ БИОЛОГИЧЕСКИХ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ В УСЛОВИЯХ ПОВЫШЕННОЙ СОЛЕНОСТИ СРЕДЫ
Аннотация.
Актуальность и цели. Микроорганизмы могут продуцировать биологические поверхностно-активные вещества (биоПАВ), которые имеют существенные преимущества перед синтетическими ПАВ: низкую токсичность, высокую биодеградабельность, устойчивую активность в условиях окружающей среды, улучшенные функциональные характеристики, возможность получения на возобновляемых источниках сырья. Микроорганизмы, изолированные из экстремальных экологических ниш и способные к синтезу биоПАВ в этих условиях, имеют большое значение для использования в биоремедиационных технологиях, особенно для утилизации отходов бурения, содержащих комплекс токсичных органических и неорганических соединений. В связи с этим мы оценили способность выделенных из буровых шламов микроорганизмов к синтезу биоПАВ в условиях повышенной солености среды.
Материалы и методы. Объектами исследований являлись шесть микробных штаммов, выделенных из буровых шламов: Halomonas sp. ОБР 1, Bacillus circulans НШ, B. firmus ОБР 1.1, B. firmus ОБР 3.1, Solibacillus silvestris ОБР 3.2; B. circulans ОБР 3.3 и контрольный нефтеокисляющий микроорганизм Dietzia maris АМ3. О способности микроорганизмов к синтезу биоПАВ при культивировании их в среде с различной концентрацией NaCl судили по показателю снижения поверхностного натяжения (Ас) культуральной среды и суперна-тантов.
Результаты. Установлено, что пять из шести исследованных микробных штаммов способны к продукции эндо- и экзоПАВ при культивировании их в среде с повышенной соленостью (3,5 и 6,5 % NaCl). Исключение составил микробный штамм Halomonas sp. ОБР 1. Максимальные значения Ас культу-ральной среды и супернатантов при культивировании микроорганизмов в среде с 3,5 %-й концентрацией NaCl определены у микроорганизмов B. firmus ОБР 3.1 и B. circulans ОБР 3.3; с 6,5 %-й концентрацией NaCl - у B. circulans НШ и B. firmus ОБР 1.1.
Выводы. Обнаруженные авторами свойства выделенных из буровых шламов микроорганизмов, способных продуцировать биоПАВ в условиях повышенной солености среды, открывают перспективу практического использования данных микроорганизмов в биотехнологиях детоксикации буровых отходов.
Ключевые слова: биоПАВ, микробные штаммы, поверхностное натяжение, культуральная среда, супернатант.
© Плешакова Е. В., Колесник С. Д., 2020. Данная статья доступна по условиям всемирной лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), которая дает разрешение на неограниченное использование, копирование на любые носители при условии указания авторства, источника и ссылки на лицензию Creative Commons, а также изменений, если таковые имеют место.
E. V. Pleshakova, S. D. Kolesnik
THE STUDY OF THE ABILITY OF MICRO-ORGANISMS ISOLATED FROM DRILLING SLUDGE FOR THE SYNTHESIS OF BIOLOGICAL SURFACE-ACTIVE SUBSTANCES UNDER THE CONDITIONS OF INCREASED SALINITY MEDIUM
Abstract.
Background. Microorganisms are capable of producing biosurfactants which have significant advantages over synthetic surfactants such as: low toxicity, high biodegradability, stable activity in the environment, improved functional characteristics, and the possibility of obtaining raw materials from renewable sources. Microorganisms isolated from extreme ecological niches and capable of synthesizing bio-surfactants under these conditions are of great importance for use in bioremediation technologies, especially for disposal of drilling waste containing a complex of toxic organic and inorganic compounds. In this regard, we evaluated the ability of microorganisms isolated from drill sludges to synthesize biosurfactants in conditions of high salinity.
Materials and methods. The objects of this research were 6 microbial strains isolated from drill sludges: Halomonas sp. sample 1, Bacillus circulans NSh, B. firmus OBR 1.1, B. firmus OBR 3.1, Solibacillus silvestris OBR 3.2; B. circulans OBR 3.3 and the control oil-oxidizing microorganism Dietzia maris AM3. The ability of microorganisms to synthesize biosurfactants when cultured in a medium with different concentrations of NaCl was determined based on the index of surface tension reduction (До) of the culture medium and supernatants.
Results. It was found that five of the six studied microbial strains were capable of producing endo- and exo-surfactants when cultured in an environment with high salinity (3,5 and 6,5 % NaCl). The exception was the microbial strain Halomonas sp. OBR 1. Maximum values of До of the culture medium and supernatants were observed when cultivating B. firmus OBR 3.1 in an environment with a 3,5 % concentration of NaCl and B. circulans OBR 3.3; with a 6,5 % concentration of NaCl -B. circulans NSh and B. firmus OBR 1.1.
Conclusions. The properties of microorganisms isolated from drilling sludges capable of producing biosurfactants in conditions of high salinity of the environment, discovered by us, open the prospect of the practical use of these microorganisms in biotechnologies for detoxification of drilling waste.
Keywords: biosurfactants, microbial strains, the surface tension, of the culture medium, the supernatant.
Введение
Многие микроорганизмы способны синтезировать биосурфактанты и биоэмульгаторы - амфифильные соединения, различающиеся по структуре и химическим свойствам и способные выполнять много разных функций, такие как снижение поверхностного и межфазного натяжения, солюбилизация гидрофобных субстратов, разрушение эмульсии и др. [1, 2]. Благодаря природному происхождению, низкой токсичности, биоразлагаемости и относительной простоте получения, по сравнению с синтетическими сурфактанта-ми, поверхностно-активные вещества, продуцируемые микроорганизмами, находят все большее применение в различных отраслях промышленности, медицины и сельского хозяйства [3]. Использование биоПАВ исключает необходимость их удаления из сточных вод из-за малой токсичности [4].
Синтетические ПАВ, широко использующиеся в настоящее время для очистки загрязненных нефтепродуктами почв, почвогрунтов, нефтешламов, других природных и техногенных субстратов, обладают потенциальным риском вторичного загрязнения объектов окружающей среды [5, 6]. В связи с ужесточением требований к внедрению экологически безопасных технологий и стремлением к минимизации загрязнений в технологиях утилизации отходов нефтяной индустрии предпочтительным является применение биоПАВ [7-9].
Ранее было показано, что микроорганизмы способны продуцировать биоПАВ с различной интенсивностью в зависимости от используемых субстратов и условий культивирования [10-12]. Изучение закономерностей роста микроорганизмов - потенциальных продуцентов биоПАВ - и подбор оптимальных условий культивирования для максимального синтеза биоПАВ являются актуальными научно-практическими задачами.
Цель настоящей работы состояла в оценке способности микроорганизмов - потенциальных продуцентов биоПАВ, выращенных в среде с различным содержанием NaCl, к снижению поверхностного натяжения культураль-ной среды и супернатантов.
Материалы и методы
Объектами исследований являлись шесть микробных штаммов: Halomonas sp. ОБР 1, Bacillus circulans НШ (В-12646), B. firmus ОБР 1.1 (В-12647), B. firmus ОБР 3.1 (В-12645), Solibacillus silvestris ОБР 3.2 (В-12644), B. circulans ОБР 3.3, выделенных А. Ю. Беляковым [13] из буровых шламов, отобранных из нефтяных скважин Восточной Сибири. Четыре штамма депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ФГБУ «ГосНИИгенетика» Минобрнауки России (ВКПМ, г. Москва).
Буровые шламы отличались специфическими свойствами: высокой щелочностью (рН 9) и высокой степенью минерализации (15 %). Поэтому микроорганизмы, выделенные из этих буровых шламов, характеризуются уникальным сочетанием эколого-функциональных свойств, в том числе широким субстратным спектром в отношении нефтяных углеводородов разной степени токсичности, алкало- и галотолерантностью, полирезистентностью к тяжелым металлам [14]. Для сравнения в настоящих экспериментах использовали нефтеокисляющий микроорганизм Dietzia maris АМ3, полученный из коллекции непатогенных микроорганизмов ИБФРМ РАН (г. Саратов).
Микроорганизмы культивировали в жидкой минеральной среде М9 [15] с различными концентрациями NaCl (0,05, 3,5 и 6,5 % по объему) при комнатной температуре в настольном шейкере-инкубаторе PSU-10Í в течение суток. В качестве единственного источника углерода и энергии использовали глицерин (2 % по весу). Абиотическим контролем служила минеральная среда разной степени минерализации с глицерином без микроорганизмов. В качестве посевного материала использовали смыв суточной культуры микроорганизмов (в случае D. maris АМ3 - трехсуточной) с мясо-пептонного агара (МПА) стерильным физиологическим раствором. Оптическая плотность посевной дозы составляла 0,2-0,5 ед. при длине волны 540 нм. Каждый вариант изучали в трех повторностях, измеряя поверхностное натяжение при
температуре окружающей среды 25-27 °С методом отрыва кольца [16] в куль-туральной среде и в супернатантах, полученных центрифугированием при 12 000 об/мин в течение 5 мин на центрифуге Eppendorf 22331 MiniSpin. По полученным результатам рассчитывали показатель снижения поверхностного натяжения (Да) как разницу между значениями поверхностного натяжения стерильной среды (контроль) и пробы исследуемой культуральной среды или супернатанта. Для всех полученных данных вычисляли средние значения, для сравнения которых использовали показатели стандартного отклонения и наименьшей существенной разницы. Статистическую обработку результатов проводили при p < 0,05 с помощью программного обеспечения Microsoft Excel 2010.
Результаты и обсуждение
Для микроорганизмов, выделенных из буровых шламов и являющихся объектами наших исследований, была присуща галотолерантность - одно из оригинальных эколого-функциональных свойств, имеющих важное прикладное значение. Как было показано ранее [14], в нашем эксперименте все шесть микробных штаммов отличались заметным ростом при 3,5 и 6,5 %-й концентрации NaCl в полноценной питательной среде. Поэтому необходимо было оценить возможную продукцию биоПАВ данными микроорганизмами при их культивировании в минеральной среде с углеводородным субстратом в условиях повышенной солености. Результаты определения снижения поверхностного натяжения культуральной среды и супернатантов при культивировании микроорганизмов в среде в диапазоне NaCl представлены на рис. 1,а и б.
Как показали эксперименты, в абиотическом контроле (исходная среда без микроорганизмов) при всех исследованных концентрациях NaCl показатель снижения поверхностного натяжения культуральной среды равнялся нулю. При культивировании исследуемых микроорганизмов в среде с 0,05 %-м содержанием NaCl данный показатель варьировал от 11,16 до 19,80 мН/м. Минимальные значения зафиксированы для микробного штамма B. firmus ОБР 3.1, максимальные - для B. firmus ОБР 1.1 и Halomonas sp. ОБР 1 (см. рис. 1,а). Согласно литературным данным, микроорганизмы, снижающие поверхностное натяжение более чем на 10 мН/м, могут являться перспективными продуцентами ПАВ [17, 18]. Поэтому все исследованные авторами микроорганизмы можно охарактеризовать как способные к синтезу биоПАВ. У контрольного нефтеокислящего штамма D. maris АМ3 при росте в данных условиях показатель Да культуральной среды составил 14,06 мН/м, что было сопоставимо с Да у других исследованных микроорганизмов или чуть ниже.
Для определения типа биоПАВ регистрировали поверхностное натяжение не только в культуральной среде с микробными клетками, но и в супернатантах исследованных микроорганизмов. У всех изученных микроорганизмов, выросших в среде с 0,05 %-м содержанием NaCl, включая контрольный нефтеокислящий штамм D. maris АМ3, значения Да супернатантов были выше 10 мН/м, находясь в пределах от 10,98 до 16,64 мН/м, и незначительно ниже значений Ао культуральной среды (см. рис. 1,б). Полученные данные свидетельствовали о синтезе экзоПАВ изученными микроорганизмами.
40
35
30
25
>i
i
s 20
l->
15
10
5
0
rii
ri~l
1
ri~l
1
rf
л
rb
л л
л
Ъ
-Ь
3 4 5
варианты
□ 0,05 %□ 3,50 %П6,50 % а)
40
35
30
25
X
s 20
1-1
15
10
5
0
rfi
В
Гк
J\
А
ft
варианты
□ 0,05 % □ 3,50 % □ 6,50 % б)
Рис. 1. Снижение поверхностного натяжения: а - культуральной среды; б - супернатантов при выращивании микроорганизмов: 1 - Halomonas sp. ОБР 1;
2 - B. firmus ОБР 1.1; 3 - B. firmus ОБР 3.1; 4 - Solibacillus silvestris ОБР 3.2; 5 - B. circulans ОБР 3.3; 6 - B. circulans НШ; 7 - D. maris АМ3 в среде с различным содержанием NaCl
В ходе экспериментов было установлено, что при культивировании исследуемых микроорганизмов в среде с 3,5 %-м содержанием NaCl значения Да культуральной среды находились в диапазоне от 5,23 до 12,86 мН/м (см. рис. 1,а). Минимальное значение наблюдалось у микробного штамма Halomonas sp. ОБР 1 (5,23 мН/м), при выращивании которого в среде с невысокой соленостью обнаружено, напротив, максимальное значение Да по сравнению с другими исследованными микроорганизмами, что указывало на
7
неспособность данного штамма продуцировать биоПАВ в условиях повышенной солености среды. За исключением Halomonas sp. ОБР 1, у остальных изученных микроорганизмов, включая контрольный нефтеокислящий штамм D. maris АМ3, значения Да культуральной среды были сходными, они превышали 10 мН/м, свидетельствуя о продукции биоПАВ.
Значения показателя снижения поверхностного натяжения супернатан-тов у всех исследованных микроорганизмов, культивируемых при 3,5 % NaCl, были выше, чем значения показателя снижения поверхностного натяжения культуральной среды (см. рис. 1,б). Максимальное значение Да суперна-танта зафиксировано у микробного штамма B. circulans ОБР 3.3 (17,58 мН/м), который также отличался и высоким значением Ао культуральной среды, а также у микробного штамма B. circulans НШ (15,78 мН/м). У микробного штамма B. firmus ОБР 3.1 определены высокие значения показателя снижения поверхностного натяжения культуральной среды и супернатанта (12,86 и 14,25 мН/м соответственно). Таким образом, все изученные микроорганизмы, включая контрольный нефтеокислящий штамм D. maris АМ3, снижали поверхностное натяжение культуральной среды и супернатантов более, чем на 10 мН/м (за исключением Halomonas sp. ОБР 1 в культуральной среде), что позволяет их считать перспективными продуцентами эндо- и экзоПАВ в условиях повышенной солености среды (3,5 % NaCl).
В результате экспериментов было выявлено, что при культивировании исследуемых микроорганизмов в среде с 6,5 %-м содержанием NaCl значения Да культуральной среды варьировали от 8,47 до 25,59 мН/м (см. рис. 1,а), значения Да супернатантов - от 8,99 до 30,94 мН/м (см. рис. 1,б). У микробного штамма Halomonas sp. ОБР 1 значения Да были невысокими (8,47 и 8,99 мН/м культуральной среды и супернатанта соответственно), аналогично данным, полученным при росте штамма в среде с 3,5 %-й концентрацией NaCl. Невысокие значения Да наблюдались и у контрольного нефтеокисля-щего штамма D. maris АМ3, выросшего в условиях высокой солености (8,43 и 8,56 мН/м культуральной среды и супернатанта соответственно). У остальных изученных микроорганизмов значения Да были выше 10 мН/м. Максимальные значения Да культуральной среды и супернатанта наблюдались у микроорганизмов: B. circulans НШ (22,65 и 30,94 мН/м соответственно) и B. firmus ОБР 1.1 (25,59 и 21,05 мН/м соответственно). У ряда исследованных микроорганизмов: B. firmus ОБР 3.1, B. circulans ОБР 3.3 и B. circu-lans НШ - значения показателя снижения поверхностного натяжения супер-натантов были выше, чем значения Да культуральной среды.
Известно, что молекулярные механизмы осмоадаптации основаны на аккумуляции хлорид-ионов и катионов калия, которые, в свою очередь, индуцируют биосинтез осмолитиков. Ранее было показано, что у микробного штамма Azospirillum halopraeferens, проявляющего устойчивость к присутствию 3 % NaCl, основной стратегией осмоадаптации является внутриклеточное накопление органических растворенных веществ, таких как бетаин и пролин [19]. У нефтеокисляющего галотолерантного штамма Dietzia sp., выделенного из пластовых вод Ромашкинского нефтяного месторождения (Республика Татарстан), было идентифицировано другое осмопротекторное со-
единение - глицинбетаин [20]. Так как производные бетаина могут выступать в роли ПАВ, то можно предположить, что наличие подобных механизмов ос-моадаптации у изученных авторами микроорганизмов, выделенных из буровых шламов, обусловливает повышенную продукцию ПАВ при культивировании данных бактерий в условиях соленой среды. Доказательством этого является увеличение способности бактерий снижать поверхностное натяжение. Также можно предположить, что микробный штамм Halomonas sp. ОБР 1 реализует иной механизм солеустойчивости, не связанный с синтезом соединений, обладающих свойствами ПАВ. Возможно, этот механизм сходен с обнаруженным свойством бактерий Halomonas boliviensis и H. longate, которые защищаются от высокой концентрации соли, синтезируя эктоин [21], который окружает себя и соседние белки слоем воды, стабилизируя клеточные мембраны и липиды, улучшая их подвижность.
Заключение
В ходе данных исследований при повышенной солености среды получены убедительные доказательства продукции эндо- и экзоПАВ микроорганизмами, выделенными из буровых шламов (за исключением микробного штамма Halomonas sp. ОБР 1). Использование микроорганизмов, способных продуцировать биоПАВ в присутствии соли, может заменить дорогостоящие технологии, направленные на снижение солености или удаление соли путем обратного осмоса, ионного обмена или электродиализа перед практическим применением биологической очистки. Поэтому изученные микробные штаммы как перспективные продуценты ПАВ в экстремальных экологических условиях могут быть применены в биотехнологиях ремедиации почв и вод, загрязненных органическими поллютантами и тяжелыми металлами, и для утилизации отходов нефтяной индустрии.
Библиографический список
1. Конон, А. Д. Микробные поверхностно-активные вещества как антимикробные и антиадгезивные агенты / А. Д. Конон, А. Б. Скочко, Т. П. Пирог // Наука и современность. - 2011. - Т. 8, № 1. - С. 25-30.
2. Methods for investigating biosurfactants and bioemulsifiers: a review / S. K. Satpute, A. G. Banpurkar, P. K. Dhakephalkar, I. M. Banat, B. A. Chopade // Critical Reviews Biotechnology. - 2010. - Vol. 30, № 2. - P. 1-18.
3. Singh, A. Recent advances in petroleum microbiology / A. Singh, J. D. Van Hamme, O. P. Ward // Microbiology and molecular biology reviews. - 2003. - Vol. 67, № 4. -P. 503-549.
4. Urum, K. Surfactants treatment of crude oil contaminated soils / K. Urum, T. Pekde-mir, M. 3opur // Journal of Colloid and Interface Science. - 2004. - Vol. 276, № 2. -P. 456-464.
5. Oil recovery from fuel oil storage tank sludge using biosurfactants / T. M. S. Lima, A. F. Fonseca, B. A. Leao, A. H. Mounteer, M. R. Totola, A. C. Borges // Journal Bio-remediation & Biodegradation. - 2011. - № 2. - P. 125-130.
6. Effect of biosurfactant addition in a pilot scale dissolved air flotation system / F. C. P. Rocha e Silva, N. M. P. Rocha e Silva, A. E. Moura, R. A. Galdino, J. M. Luna, R. D. Rufino, V. A. Santos, L. A. Sarubbo // Separation Science and Technology. - 2015. -Vol. 50. - P. 618-625.
7. Куликова, О. А. Использование реагентов на основе поверхностно-активных веществ для очистки почв от нефтяного загрязнения / О. А. Куликова, Е. А. Маз-лова, Д. И. Брадик, Е. П. Кудрова // Химия и технология топлив и масел. - 2018. -№ 6. - С. 47-52.
8. Bachmann, R. T. Biotechnology in the petroleum industry : an overview / R. T. Bachmann, A. C. Johnson, R. G. J. Edyvean // International Biodeterioration & Biodegradation. - 2014. - Vol. 86. - P. 225-237.
9. Biosurfactants: promising molecules for petroleum biotechnology advances / D. G. De Almeida, R. C. F. Soares Da Silva, J. M. Luna, R. D. Rufino, V. A. Santos, I. M. Banat, L. A. Sarubbo // Frontiers in Microbiology. - 2016. - № 7. - P. 1718-1732.
10. Выделение биосурфактантов из супернатанта штаммов микроорганизмов Bacillus thuringiensis А1, Dietzia maris U.2.5 / А. Я. Ягафарова, Н. Б. Молдагулова, К. Т. Муканова, Д. Б. Канаев, А. Б. Курманбаева, Э. Ж. Хасенова // Биотехнология. Теория и практика. - 2012. - № 4. - С. 30-33.
11. Makkar, R. S. An update on the USA of unconventional substance for biosurfactant proction and their new application / R. S. Makkar, S. S. Cameotra // Applied Microbiology and Biotechnology. - 2002. - Vol. 58. - P. 428-434.
12. Пирог, Т. П. Синтез поверхностно-активных веществ нефтеокисляющими бактериями Rhodococcus erythropolis ЭК-1 / Т. П. Пирог, И. Н. Волошина, С. В. Игна-тенко // Прикладная биохимия и микробиология. - 2011. - Т. 47, № 4. -С. 189-190.
13. Беляков, А. Ю. Скрининг микроорганизмов-деструкторов компонентов буровых растворов / А. Ю. Беляков, Е. В. Плешакова // Известия Саратовского университета. Новая серия. Сер.: Химия. Биология. Экология. - 2013. - Т. 13, № 4. -С. 37-42.
14. Беляков, А. Ю. Эколого-функциональные особенности бактерий, выделенных из буровых шламов / А. Ю. Беляков, Е. В. Плешакова, В. А. Амангалиева // Известия Самарского научного центра РАН. - 2014. - № 1. - С. 294-298.
15. Панченко, Л. В. Введение в практические занятия по экологической биотехнологии с основами микробиологии / Л. В. Панченко, А. Ю. Муратова, О. В. Тур-ковская. - Саратов : Научная книга, 2005. - 56 с.
16. Миронова, И. К. Методическое пособие к малому практикуму по биофизике / И. К. Миронова, М. В. Каневский. - 6-е изд. - Саратов : Изд-во Саратовского ун-та, 2016. - 44 с.
17. Francy, D. S. Emulsification of hydrocarbons by subsurface bacteria / D. S. Francy, J. M. Thomas, R. L. Raymond, C. H. Ward // Indian Journal of Microbiology. - 1991. -№ 8. - P. 237-246.
18. Образование нефтевытесняющих соединений микроорганизмами из нефтяного месторождения Дацин (КНР) / Т. Н. Назина, Д. Ш. Соколова, А. А. Григорьян, Я. Ю. Сюэ, С. С. Беляев, М. В. Иванов // Микробиология. - 2003. - Т. 72, № 2. -С. 206-211.
19. Bashan, Y. Azospirillum-plant relationships: agricultural, physiological, molecular and environmental advances / Y. Bashan, G. Holguin, L. E. De-Bashan // Canadian Journal of Microbiology. - 2004. - Vol. 50. - P. 521-577.
20. Плакунов, В. К. Устойчивость нефтеокисляющего микроорганизма Dietzia sp. к гиперосмотическому шоку в реконструированных биопленках / В. К. Плакунов, М. В. Журина, С. С. Беляев // Микробиология. - 2008. - Т. 77, № 5. -С. 581-589.
21. Complete genome sequence of Halomonas sp. R5-57 / A. Williamson, C. De Santi, B. Altermark, C. Karlsen, E. Hjerde // Standards in Genomic Sciences. - 2016. -Vol. 11. - P. 62-71.
References
1. Konon A. D., Skochko A. B., Pirog T. P. Nauka i sovremennost' [Science and modernity]. 2011, vol. 8, no. 1, pp. 25-30. [In Russian]
2. Satpute S. K., Banpurkar A. G., Dhakephalkar P. K., Banat I. M., Chopade B. A. Critical Reviews Biotechnology. 2010, vol. 30, no. 2, pp. 1-18.
3. Singh A., Van Hamme J. D., Ward O. P. Microbiology and molecular biology reviews. 2003, vol. 67, no. 4, pp. 503-549.
4. Urum K., Pekdemir T., Zopur M. Journal of Colloid and Interface Science. 2004, vol. 276, no. 2, pp. 456-464.
5. Lima T. M. S., Fonseca A. F., Leao B. A., Mounteer A. H., Totola M. R., Borges A. C. Journal Bioremediation & Biodegradation. 2011, no. 2, pp. 125-130.
6. Rocha e Silva F. C. P., Rocha e Silva N. M. P., Moura A. E., Galdino R. A., Luna J. M., Rufino R. D., Santos V. A., Sarubbo L. A. Separation Science and Technology. 2015, vol. 50, pp. 618-625.
7. Kulikova O. A., Mazlova E. A., Bradik D. I., Kudrova E. P. Khimiya i tekhnologiya topliv i masel [Chemistry and technology of fuels and oils]. 2018, no. 6, pp. 47-52. [In Russian]
8. Bachmann R. T., Johnson A. C., Edyvean R. G. J. International Biodeterioration & Biodegradation. 2014, vol. 86, pp. 225-237.
9. De Almeida D. G., Soares Da Silva R. C. F., Luna J. M., Rufino R. D., Santos V. A., Banat I. M., Sarubbo L. A. Frontiers in Microbiology. 2016, no. 7, pp. 1718-1732.
10. Yagafarova A. Ya., Moldagulova N. B., Mukanova K. T., Kanaev D. B., Kurmanbae-va A. B., Khasenova E. Zh. Biotekhnologiya. Teoriya ipraktika [Biotechnology. Theory and practice]. 2012, no. 4, pp. 30-33. [In Russian]
11. Makkar R. S., Cameotra S. S. Applied Microbiology and Biotechnology. 2002, vol. 58, pp. 428-434.
12. Pirog T. P., Voloshina I. N., Ignatenko S. V. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya [Applied biochemistry and microbiology]. 2011, vol. 47, no. 4, pp. 189-190. [In Russian]
13. Belyakov A. Yu., Pleshakova E. V. Izvestiya Saratovskogo universiteta. Novaya seriya. Ser.: Khimiya. Biologiya. Ekologiya [Bulletin of Saratov University. New series. Series: Chemistry. Biology. Ecology]. 2013, vol. 13, no. 4, pp. 37-42. [In Russian]
14. Belyakov A. Yu., Pleshakova E. V., Amangalieva V. A. Izvestiya Samarskogo nauch-nogo tsentra RAN [Bulletin of the Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences]. 2014, no. 1, pp. 294-298. [In Russian]
15. Panchenko L. V., Muratova A. Yu., Turkovskaya O. V. Vvedenie vprakticheskie zanya-tiya po ekologicheskoy biotekhnologii s osnovami mikrobiologii [Introduction to practical classes in environmental biotechnology with the basics of microbiology]. Saratov: Nauchnaya kniga, 2005, 56 p. [In Russian]
16. Mironova I. K., Kanevskiy M. V. Metodicheskoe posobie k malomu praktikumu po bio-fizike [Methodical manual for a small workshop on biophysics]. 6th ed. Saratov: Izd-vo Saratovskogo un-ta, 2016, 44 p. [In Russian]
17. Francy D. S., Thomas J. M., Raymond R. L., Ward C. H. Indian Journal of Microbiology. 1991, no. 8, pp. 237-246.
18. Nazina T. N., Sokolova D. Sh., Grigor'yan A. A., Syue Ya. Yu., Belyaev S. S., Ivanov M. V. Mikrobiologiya [Microbiology]. 2003, vol. 72, no. 2, pp. 206-211. [In Russian]
19. Bashan Y., Holguin G., De-Bashan L. E. Canadian Journal of Microbiology. 2004, vol. 50, pp. 521-577.
20. Plakunov V. K., Zhurina M. V., Belyaev S. S. Mikrobiologiya [Microbiology]. 2008, vol. 77, no. 5, pp. 581-589. [In Russian]
21. Williamson A., De Santi C., Altermark B., Karlsen C., Hjerde E. Standards in Genomic Sciences. 2016, vol. 11, pp. 62-71.
Плешакова Екатерина Владимировна
доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры биохимии и биофизики, Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н. Г. Чернышевского (Россия, г. Саратов, ул. Астраханская, 83)
E-mail: plekat@yandex.ru
Pleshakova Ekaterina Vladimirovna Doctor of biological sciences, associate professor, professor of the sub-department of biochemistry and biophysics, Saratov State University (83, Astrakhanskaya street, Saratov, Russia)
Колесник Сергей Дмитриевич
магистрант, Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н. Г. Чернышевского (Россия, г. Саратов, ул. Астраханская, 83)
E-mail: Sergey42560@yandex.ru
Kolesnik Sergey Dmitrievich
Master degree student, Saratov State University (83, Astrakhanskaya street, Saratov, Russia)
Образец цитирования:
Плешакова, Е. В. Изучение способности выделенных из буровых шла-мов микроорганизмов к синтезу биологических поверхностно-активных веществ в условиях повышенной солености среды / Е. В. Плешакова, С. Д. Колесник // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Естественные науки. - 2020. - № 1 (29). - С. 100-109. - Б01 10.21685/2307-91502020-1-10.
