Вестник ОрелГАУ, 6(57), Декабрь 2015, http://dx.doi.org/10.15217/issn1990-3618.2015.6.120 W / UDK 635.656:631.52:631.524.86
ИЗУЧЕНИЕ СЕЛЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА ГОРОХА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ПАТОГЕНАМ И ФИТОФАГАМ И ВЫДЕЛЕНИЕ ИСТОЧНИКОВ УСТОЙЧИВОСТИ ДЛЯ
ПРАКТИЧЕСКОЙ СЕЛЕКЦИИ
STUDY OF BREEDING MATERIAL OF PEAS FOR RESISTANCE TO PATHOGENS AND PHYTOPHAGES AND ALLOCATION OF SOURCES OF RESISTANCE FOR PRACTICAL
BREEDING
Бударина Г.А., кандидат сельскохозяйственных наук, зав. лаб. агротехнологий и
защиты растений
Budarina G. A., Candidate of Agricultural Sciences, Head. Lab. Agricultural Technologies
and Crop Protection Зеленов А.Н., доктор сельскохозяйственных наук, гл. науч. Сотрудник Zelenov A. N., Doctor of Agricultural Sciences, Chief Researcher Уваров В.Н., кандидат сельскохозяйственных наук, вед. науч. сотрудник Uvarov V.N., Candidate of Agricultural Sciences, Leading Researcher Задорин А.М., кандидат сельскохозяйственных наук, зав. лаб. селекции зернобобовых
культур
Zadorin A. M., Candidate of Agricultural Sciences, Head. Lab. Selection of Grain Legumes Соболева Г.Н., кандидат сельскохозяйственных наук, вед. науч. сотрудник
ФГБНУ ВНИИЗБК Soboleva G.N., Candidate of Agricultural Sciences, Leading Researcher FGBNU «The All-Russia Research Institute of Legumes and Groat Crops»
АННОТАЦИЯ
Представлены результаты иммунологической оценки селекционного материала гороха на искусственном инфекционном, инвазионном и провокационном фонах к основным патогенам и фитофагам. Выделены источники устойчивости для практической селекции: к корневым гнилям гороха, аскохитозу, ржавчине, гороховой тле. С комплексной устойчивостью к болезням и гороховой тле выделено 2 сортообразца гороха. С групповой устойчивостью к корневым гнилям и листостебельным пятнистостям выделен 1 образец, с устойчивостью к аскохитозу и ржавчине 3 образца, с устойчивостью к аскохитозу, ржавчине, гороховой тле 1 образец. Исходный материал может быть рекомендован для практической селекции в качестве ценных источников устойчивости при создании сортов и гибридов, способных противостоять наиболее опасным вредителям и болезням в условиях импортозамещения в растениеводстве.
ABSTRACT
Results of immunological evaluation of breeding material of peas on artificial infectious, invasive and provocative backgrounds to major pathogens and phytophages. Sources of resistance for the practical breeding: to root rots of pea, to ascochyta, to rust, to pea aphid were allocated. 2 varieties of peas sample with complex resistance to diseases and pea aphids were allocated. With a group resistance to root rot and leafy spotty 1 sample was allocated, with resistance to ascochyta and rust - 3 samples were allocated, with resistance to ascochyta, rust, pea aphids 1 sample was allocated. The starting material can be recommended for practical breeding as a valuable source of stability for the creation of varieties and hybrids, capable of withstanding the most dangerous pests and diseases in terms of import substitution in the crop production.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА
инфекционный фон, сортообразцы, пораженность, иммунологическая оценка, источники устойчивости, патогены, фитофаги.
KEY WORDS
infectious background, variety samples, crop damage, immunological evaluation, sources of stability, pathogens, phytophages.
В решении проблемы растительного белка значительная роль отводится культуре гороха, а первостепенная роль в технологии его выращивания принадлежит сортам. Однако в настоящее время реальные урожайность и качество большинства допущенных к использованию сортов гороха существенно ниже потенциальных, вследствие поражения их патогенами и повреждения фитофагами. Экономический ущерб от болезней и вредителей в среднем составляет 2...7 ц/га, а периодически повторяющиеся эпифитотии таких болезней как корневые гнили, аскохитоз, а в последние годы ржавчина могут привести к недобору 30 -50% урожая гороха.
Общеизвестно, что идеальным и вместе с тем реальным методом сдерживания патогенов и фитофагов может быть создание и внедрение в производство устойчивых сортов гороха против экономически значимых вредных организмов [1]. При этом усилия селекционеров должны быть направлены на создание сортов с длительной неспецифической устойчивостью, которая позволит долгое время использовать сорта в качестве доноров устойчивости в селекции и в производстве. Однако ассортимент устойчивых к болезням сортов гороха ограничен по причине недостаточного внимания селекционеров к этой проблеме, очевидно из-за требований Госкомиссии создавать только высокопродуктивные сорта. А создать высокопродуктивный и одновременно устойчивый к наиболее опасным вредителям и болезням сорт классическими методами селекции очень трудно. Для этого требуются доноры и источники резистентности. Поэтому стратегия селекции сельскохозяйственных культур на устойчивость к болезням и вредителям в настоящее время должна предусматривать прежде всего, поиск эффективных генов резистентности и базироваться на наличии генетического разнообразия устойчивых хозяев и использовании их в качестве источников и доноров [2].
В связи с этим исследования по выделению источников устойчивости к наиболее опасным болезням и вредителям для практической селекции зернобобовых культур являются актуальными на сегодняшний день. Отбор такого материала и оценка его на искусственных инфекционных фонах является главной задачей современных селекционных центров нашей страны.
Цель исследований - провести иммунологическую оценку селекционного и коллекционного материала гороха на инфекционном, инвазионном и провокационном фонах к основными патогенам и фитофагами и выделить источники устойчивости для практической селекции.
Исследования выполнялись в лаборатории агротехнологий и защиты растений ФГБНУ ВНИИЗБК в лабораторных и полевых условиях с использованием естественного и искусственного инфекционных фонов, стерильного бокса, микроскопов ф. Zeizz, ламинара, бинокулярной лупы и др. Объектами исследований являлись сортообразцы селекционного и коллекционного материала гороха селекции ВНИИЗБК и мировой коллекции ВИР, отличавшиеся по морфотипу и направлению использования. В качестве инфекционного материала использовалась чистая культура грибов рода Fusarium sp; популяция возбудителей Ascochyta pisi и Ascochyta pinodes. Для выделения чистой культуры возбудителей фузариозной корневой гнили гороха в поле отбирали растения с характерными признаками поражения. Поражённые корни, стебли, семена закладывали во влажную камеру. Появившийся через 3-4 суток мицелий гриба переносили на сусловый агар, который является лучшей средой для культивирования грибов рода Fusarium sp. С наступлением спороношения (7 - 10 день) определяли виды грибов рода Fusarium, вызывающие корневую гниль гороха. Выделенный основной комплекс грибов рода Fusarium: sp. (F. solani (Mart) App. et. We;F. oxysporum (Schlecht). Skyol. et. Honsen; F. avenaceum (Fr.) F. javanicum Koort; F. culmorum (W. J. Sm) чаще всего участвующий в патологическом процессе, размножали методом пересева на питательные среды в стерильных условиях.
Выделение чистой культуры возбудителей тёмно - и бледнопятнистого аскохитоза (Ascochyta pisi и Ascochyta pinodes) проводили из местной популяции согласно созданных в лаборатории методик [3]. Наибольшее количество инфекционного материала выделено из заражённых семян. Поражённые семена закладывали во влажную камеру и через 3-4 суток развивающийся на их поверхности мицелий или пикниды переносили на овсяной агар. Полученный в чистой культуре маточный инфекционный материал возбудителей фузариозной корневой гнили и аскохитоза размножили в количестве 200- 300 чашек Петри.
Инфекционный материал впоследствии использовали для приготовления суспензии и заражения изучаемого материала гороха.
Инфекционные фоны к патогенам гороха создавали по принципу инокуляции вегетирующих растений чистой культурой возбудителей болезней. Инвазионный фон к гороховой зерновке - путём выпуска 3 особей имаго на квадратный метр посевов в период бутонизации гороха. Для создания провокационных фонов участки с посевом изучаемых сортообразцов обсевали восприимчивыми к вредителям сортами гороха с четырех сторон. Эффективность инфекционного, провокационного и инвазионного фонов подтверждалась высоким уровнем заселения фитофагами и поврежденности болезнями сортов -индикаторов.
Посев опытных делянок осуществлялся в полевых условиях касетной сеялкой СКС - А. Делянки четырёхрядковые, площадь - 1- 3 м2. Повторность 2 - х и 3 -х кратная. В качестве стандарта использовали сорта гороха: Фараон, Спартак, Батрак, Софья. Учёты, наблюдения, анализы и дифференциация сортообразцов гороха к болезням и вредителям проводилась в соответствии с методическими указаниями ВНИИЗБК (1990, 1993), и методикой по оценке устойчивости полевых культур к болезням на инфекционном и провокационном фонах (ред. Захаренко В.В., 2000).
По данным ведущих учреждений страны и результатам наших исследований [4,5], наиболее значимыми для гороха болезнями и вредителями, к которым надо проводить целенаправленную селекцию на устойчивость являются: аскохитоз (бледно - и темнопятнистый), корневые гнили гороха, мучнистая роса, ржавчина, гороховая тля, плодожорка и гороховая зерновка.
Исследования по оценке селекционного и коллекционного материала на устойчивость к отдельным видам, а также группам патогенов и фитофагов с целью выделения источников устойчивости для практической селекции, проводятся в ВНИИЗБК практически с момента образования института и имеют соответствующие результаты. Весь материал по гороху коллекции ВИР, а также селекционные образцы ВНИИЗБК, Красноярского и Башкирского НИИСХ, ВНИИССОК были последовательно изучены в отношении восприимчивости к вредоносным заболеваниям и фитофагам как в условиях естественной инфекции, так и с применением методов искусственного заражения и заселения.
В этом направлении важным этапом является создание надежных инфекционных, инвазионных и провокационных фонов к патогенам, фитофагам и достоверная оценка селекционного и коллекционного материала на устойчивость к ним. Особую роль в создании таких фонов играют метеорологические условия, которые способствуют поддержанию инфекционной нагрузки и численности вредных объектов на растениях или тормозят их развитие.
Погодные условия вегетационных периодов 2014 и 2015гг (с превышением средней многолетней температуры воздуха на 1,8 и 1,6°С) были вполне благоприятными для развития растений гороха и основных патогенов и фитофагов.
В 2014 - 2015 гг на устойчивость к основным вредителям и болезням в условиях искусственного инфекционного и провакационного фонов было оценено 85 сортообразцов гороха.
Пораженность гороха фузариозными корневыми гнилями устойчивого сорта -стандарта Dun Dale в среднем за 2 года составила 84,8% при развитии болезни 27,1%, тогда как на сортах индикаторах развитие корневых гнилей составило - 65,0 - 79,1%, что говорит об эффективности и достоверности созданного в полевых условиях инфекционного фона. Развитие аскохитоза на сорте индикаторе составило 37,0% при 100% поражении растений (табл.1).
Повреждённость изучаемых сортообразцов гороха фузариозом варьировалась от 73,8 до 100%, степень развития болезни от 30,3 до 70,2% в среднем за два года. Учеты, проведенные дважды за вегетацию, позволили дифференцировать образцы гороха по резистентности к фузариозной корневой гнили и выявить значительные различия в их реакции на заражение.
Таблица 1. Реакция стандартов устойчивости и восприимчивых к болезням индикаторов (Jnd) на инфекционных фонах, ВНИИЗБК 2014 - 2015г._
Сортообразцы Фуза риоз, % Аскохитоз, %
поражено растений степень развития болезни листья бобы
поражено степень развития болезни поражено степень развития болезни
Dun Dale (St) 84,8 27,1 - - - -
Смарагд (Jnd) 100 79,1 - - - -
Орловчанин (Jnd) 100 65,0 - - - -
Ареал (St) - - 0 0 0 0
Comet (Jnd) - - 100 37,0 25,0 2,5
Весь селекционный материал дифференцирован на среднеустойчивые, восприимчивые и высоковосприимчивые формы. Среднеустойчивые образцы составили: в 2014 году - 40%, в 2015 - 23,1%, восприимчивые - 56,4 и 60,0%, высоковосприимчивые -17,9%. К среднеустойчивым (развитие болезни не более 40,0%) отнесены: Яг - 06 - 652; Яг -06 - 83; Л - 53 - 10; Яг - 08 - 1269; Л - 8 - 13к; Л - 64 - 12 и регенерантные линии: R - 07 - 11; R - 08 - 18; R - 08 - 28; R - 08 - 29, остальные вошли в группу восприимчивых и высоковосприимчивых (табл.2). Учеты и наблюдения за развитием листостебельных пятнистостей позволили выявить первые пятна болезней на листьях гороха только в фазу полного цветения: аскохитоз в 2014году - 14 июня, в 2015 году - 12 июня, ржавчина - 16 и 18 июня соответственно. Развитие пятнистостей из-за засушливых и жарких условий на горохе нарастало медленно, что затрудняло проведение учетов. И только после прошедших во второй и третьей декаде июня дождей болезнями было поражено 100% растений с различной степенью развития в зависимости от сортообразца. К концу вегетации растения поразились ржавчиной в зависимости от года и сортообразца в среднем на 2,5 - 33,3 и 14,0
- 56,7%, аскохитозом - на 6,7 - 33,3 и 11,0 - 53,4%, что позволило достоверно оценить селекционный материал гороха на устойчивость к листостебельным пятнистостям.
Дифференциация сортообразцов гороха по устойчивости к аскохитозу в 2014 году позволила выявить высокоустойчивые (9,7%), среднеустойчивые (74,2%) и восприимчивые (16,1%) формы. Образцы (Яг - 08 - 1269; Л - 6 -13к; Рас - 1070/8; Яг - 06 - 83; R - 07 - 11; R
- 08 - 18; R - 08 - 29; R - 08 - 38) подтвердили свою устойчивость к аскохитозу и в 2015 году.
Устойчивость к ржавчине за три года исследований (2013 - 2015гг) проявил один образец (Л - 102 - 07), за 2014 год - 10 образцов, за 2015 год - 24 образца. Высокую устойчивость к ржавчине в течение 2014 и 2015 гг проявили 2 сортообразца (Л - 53 - 10 и Л
- 64 - 12). В 2014 - 2015 гг. проводились исследования по изучению устойчивости гороха к основным фитофагам. В полевых условиях были созданы жёсткие инвазионный и провокационные фоны к гороховой тле, гороховой плодожорке, гороховой зерновке. Эффективность полевых фонов и достоверность оценки сортообразцов гороха по устойчивости к гороховой тле подтверждается данными таблицы 3, где показаны значительные различия в повреждении устойчивого сорта и восприимчивых индикаторов (Jnd). При 100% степени заселения гороха тлей сорта Monigul, степень заселения сорта Родомир составила всего 30%. Подобрать устойчивый к гороховой плодожорке сорт не представлялось возможным из - за сильные поражения всего селекционного и коллекционного материала фитофагом.
В результате оценки селекционных линий гороха на инвазионном и провокационном фонах к гороховой тле выделены устойчивые, среднеустойчивые и восприимчивые формы.
Высокоустойчивые, устойчивые и среднеустойчивые формы составили большинство -по 30, 8%.
Вестник ОрелГАУ, 6(57), Декабрь 2015, http://dx.doi.org/10.15217/issn1990-3618.2015.6.120 Таблица 2. Источники устойчивости гороха к болезням и вредителям на искусственном
инфекционном и провокационном фонах (среднее за 2013 - 2014 гг.)
Сортообразец Развитие болезни, % Гороховая тля, экз./рас. Гороховая плодожорка ,% поврежденных семян
Фузариозная корневая гниль Аскохитоз Ржавчина
Софья 52,6 21,8 26,6 44,5 13,6
Спартак 51,0 18,9 17,6 54,0 14,0
Батрак 53,7 25,8 24,2 47,0 12,0
Dun - Dale (st. устойчивости к корневым гнилям) 31,4 18,2 7,6 53,0 24,0
Смарагд (Ind. восприимчивости к корневым гнилям) 68,2 - - - -
Comet (Ind. восприимчивости к аскохитозу) 45,7 27,6 25,8 54,7 11,0
Monigul (Ind. восприимчивости к гороховой тле) 47,4 13,3 28,3 61,8 6,0
Ареал (Ind. восприимчивости к плодожорке) 33,7 32,9 20,4 23,2 11,5
Флагман - 8 (Ind. восприимчивости к зерновке) 51,7 27,3 16,0 39,5 18,0
Л -102-07 65,1 15,0 15,3 41,7 7,0
Яг - 07 - 643 58,5 17,2 22,1 27,4 7,0
Фараон 54,7 20,0 14,5 6,0 11,0
Л-80 - 11 56,8 13,3 14,1 10,0 12,0
Л-53 -10 52,3 20,0 4,3 11,0 12,0
Л-65 -12 53,9 13,3 17,5 6,0 8,0
Л-80 - 12 39,8 24,0 12,8 13,0 18,0
Л-64 -12 64,8 6,7 9,2 8,0 13,0
Рас - 665/7 49,8 13,3 14,1 18,0 3,0
Рас 678/7 44,1 26,7 17,2 13,0 10,0
Рас - 828/9 42,8 20,0 15,0 6,0 11,0
К высокоустойчивым отнесены: Л -102-07, Л -65 -12, Л -64 -12, Л - 8 - 13к, Р - 743 - 09, и три регенератных линии: R - 08 - 28, R - 08 - 29, R - 08 - 38 представляющие наибольший интерес для селекции, т.к. максимальная численность гороховой тли на них не превышала за два года 8 особей на 1 растение, т.е. 12,9% от заселённости сорта-индикатора Monigul (табл. 4).
Таблица 3. Реакция стандарта устойчивости и восприимчивых к вредителям
индикаторов (Jnd) на провокационных и инвазионном фонах, 2015г.
Сортообразцы Гороховая тля Гороховая плодожорка Гороховая зерновка
Степень заселения, % численность тли,экз./рас. повреждено семян, % повреждено семян, %
Monigul (Jnd) восприимчивости к гороховой тле 100 64,9 - -
Родомир ф) устойчивости к гороховой тле 30,0 6,0 - -
Ареал (Jnd) к гороховой плодожорке - - 17,3 -
Флагман (Jnd) восприимчивости к гороховой зерновке - - - 5,0
Аз-801/5 ф) устойчивости к гороховой зерновке - - - 3,0
Повреждённость семян селекционных образцов гороховой плодожоркой варьировалась от 7,0 до 18,0% в среднем за два года, что не позволило выделить из всего материала устойчивые формы. Среднеустойчивые формы составили 38,5%, остальные отнесены к восприимчивым - 61,5%.
Гороховая зерновка - Bruchus pisorum L. - широко распространённый вредитель гороха.
Увеличению её численности благоприятствуют засушливые, жаркие весна и лето, а также сравнительно тёплая зима.
Погодные условия вегетационного периода 2015 года способствовали активному лету имаго, их плодовитости, развитию нового поколения.
Учёты численности гороховой зерновки на инвазионном фоне показали, что в период заселения, питания и откладки яиц максимальная численность фитофага составила в среднем 3 особи на 10 взмахов сачком. Анализ семян гороха на поврежденность их зерновкой в 2015 году не позволил выявить устойчивые к фитофагу образцы. Из всего материала, выращенного в естественных условиях, наибольший интерес представляли селекционные линии: Л - 102 - 07; Л - 8 - 13к; Л - 64 - 12. Поврежденность семян гороховой зерновкой у данных образцов не превышала 5%. Особый интерес с точки зрения селекции на устойчивость представляют сортообразцы, обладающие групповой и комплексной устойчивостью к патогенам и фитофагам. В числе таких источников, способных формировать наиболее ценный селекционный материал, сортообразцы гороха: с групповой устойчивостью к корневым гнилям и листостебельным пятнистостям - Л - 06 - 652, R - 08 - 28, с устойчивостью к аскохитозу и ржавчине - Л - 145 - 03, с комплексной устойчивостью к аскохитозу, ржавчине и гороховой тле - Яг - 11 - 83, с комплексной устойчивостью к аскохитозу, ржавчине, корневым гнилям и гороховой тле - Л- 53 - 10, Яг - 06 - 83, Яг - 06 -652 и Яг - 08 -1269.
В результате проведенных исследований по оценке селекционного и коллекционного материала гороха на устойчивость к основным патогенам и фитофагам в условиях жесткого инфекционного, инвазионного и провокационного фонов, выделен ценный исходный материал, который может быть рекомендован для практической селекции в качестве источников устойчивости при создании сортов и гибридов, обеспечивающих оптимизацию биоценотических взаимодействий в агроценозах, снижение загрязнения окружающей среды, энергетических и экономических затрат на выращивание растениеводческой продукции.
Таблица 4.Характеристика сортообразцов гороха по устойчивости к гороховой тле и
гороховой плодожорке (среднее за 2014 - 201 5гг), инфекционный фон, ВНИИЗБК
Гороховая Гороховая
Сортообразец тля (числен ность, экз./ Индекс устойчи плодожорка (повреждено Индекс устойчивости
рас.) вости семян, %)
1 2 3 4 5
Софьяф) 44,5 СУ 13,6 В
Фараон (st) 16,0 У 11,0 В
Dun - Dale (st. устойчивос 53,0 В 24,0 В
ти к корневым гнилям)
Comet (Ind. восприимчи 54,7 В 11,0 В
вости к аскохитозу)
Monigul (Ind. восприимчи 61,8 В 6,0 СУ
вости к тле)
Ареал (Ind. восприимчи 23,2 СУ 11,5 В
вости к плодожорке)
Флагман - 8 (Ind. воспри 39,5 СУ 18,0 В
имчивости к зерновке)
Софкр 42,2 СУ -
Л-80 - 11 12,6 У 12,0 В
Л -104 - 13 42,8 СУ -
Л -102-07 7,8 ВУ 7,0 СУ
Л -53 -10 11,0 У 12,0 В
Л-65 -12 4,6 ВУ 8,0 СУ
Л-64 -12 6,4 ВУ 13,0 В
Л - 43 -13 33,0 СУ 7,0 СУ
Л-80-12 13,0 У 18,0 В
Л - 65 - 13 26,6 СУ 6,0 СУ
Л - 96 - 13 16,6 У 9,0 СУ
Л - 8 - 13к 7,3 ВУ 5,0 СУ
Л - 6 - 13к 20,9 У 10,0 В
Л - 58 - 14 11,7 У - -
Л - 76 - 14 21,7 СУ - -
Л - 77 - 14 7,7 У -
Яг - 06 - 83 14,0 У 5,0 СУ
Р - 743 - 09 6.8 ВУ 11,0 В
Яг - 08 - 1269 29,5 СУ 5,0 СУ
Яг - 07 - 599 18,2 У 9,0 СУ
Яг - 06 - 652 24,0 СУ 5.0 СУ
Яг - 09 - 523 44,2 СУ 5,0 СУ
Яг - 11 - 83 14,7 У - -
Яг - 07 - 643 17,7 У - -
Яг - 09 - 621 15,3 У - -
Л - 135 - 03(исх.) 4,6 ВУ 8,8 СУ
R - 07 - 11 5,6 ВУ 8,3 СУ
Продолжение таблицы 4
1 2 3 4 5
R - 08 - 18 22,5 СУ 7,5 СУ
Л - 145 - 03 (исх.) 2,2 ВУ 15,8 В
R - 08 - 28 4,5 ВУ 12,7 В
R - 08 - 29 4,7 ВУ 13,7 В
R - 08 - 38 2,1 ВУ 13,9 В
Примечание: ВУ - высокоустойчивый; У - устойчивый; С - среднеустойчивый; В -
восприимчивый;
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Захаренко В.В. Итоги работы отделения защиты растений РАСХН в 2007 г./ В.В Захаренко //Защита и карантин растений, 2008 г. -№ 2.
2. Изучение генетических ресурсов зерновых культур по устойчивости к вредным организмам. Методическое пособие./ Под ред. Е.Е. Радченко. - Москва, 2008г.
3. Овчинникова. А.М. Методы ускоренной оценки селекционного материала на инфекционных и провокационных фонах./ А.М. Овчинникова, Р.М.Андрюхина, Е.Ф. Азарова//Методические рекомендации. - Москва, 1990.- 24с.
4. Борзенкова Г.А. Изучение исходного материала гороха на иммунитет к болезням для использования в практической селекции./ Г.А.Борзенкова, Е.Ф.Азарова // Сборник научных материалов. Повышение устойчивости производства сельскохозяйственных культур в современных условиях.- Орел, 2008. - с.368-372.
5. Андрианова Г.С. Вредоносность основных вредителей гороха и эффективность современных препаратов в борьбе с ними в Орловской области. // Г.С. Андрианова //Биологические основы современной агрономии. - Орёл: Изд-во Орёл ГАУ, 2004. - С. 43 - 46.