CC BY
59
УДК 57.083.13; 574.632, 639.2.09, 663.18
DOI: 10.24412/1728-323X-2022-1-16-23
ИЗУЧЕНИЕ РОЛИ ПРОБИОТИКОВ В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ РОДА AEROMONAS И PSEUDOMONAS В АКВАКУЛЬТУРЕ КАРПА
IN VITRO
Ж. Б. Текебаева, магистр технических наук, научный сотрудник, Республиканская коллекция микроорганизмов (РКМ), j.tekebaeva@mail.ru, Нур-Султан, Казахстан; аспирант Нижневартовского государственного университета (НГУ), Нижневартовск, Россия, А. А. Кулагин, доктор биологических наук, профессор, Нижневартовский государственный университет (НГУ), kulagin-aa@mail.ru, Нижневартовск, Россия, Г. Н. Бисенова, кандидат сельскохозяйственных наук, Республиканская коллекция микроорганизмов (РКМ), Bissenova84@mail.ru, Нур-Султан, Республика Казахстан,
Р. Р. Бейсенова, доктор биологических наук, профессор, Евразийский национальный университет (ЕНУ), raihan_b_r@mail.ru, Нур-Султан, Республика Казахстан, З. С. Сармурзина, кандидат биологических наук, Республиканская коллекция микроорганизмов (РКМ), sarmurzina@list.ru, Нур-Султан, Республика Казахстан
Аннотация. Потребности в экологически чистой аквакультуре, ингибировании патогенных бактерий, в повышении иммунного ответа, в снижении кормозатрат и потерь при выращивании, создают преимущество для применения пробиотиков. Про-биотики представляют собой отдельные или смешанные культуры живых микроорганизмов, способствующие развитию полезной кишечной микрофлоры организмов-хозяев, вызывающие выздоровление. Известно также, что молочнокислые бактерии обладают выраженной антагонистической активностью к патогенной микрофлоре.
Важную роль в сокращении гибели ценных видов рыб от бактериальных заболеваний играет разработка эффективных мер лечения и профилактики. Известно, что заболевания бактериальной природы могут вызвать гибель от 50 до 100 % рыбы, выжившая после болезни рыба теряет в весе, а затем долгое время отстает в росте. Это приводит к необходимости разработки препаратов, представляющих альтернативу антибиотикам и являющихся более физиологичными и безопасными средствами для профилактики и лечения бактериозов.
В статье представлены результаты по исследованию антагонистической активности и чувствительности к антибиотикам консорциума на основе молочнокислых бактерий, выделенных из кишечника карпа (Cyprinus carpió) с целью их дальнейшего перспективного использования в борьбе против аэромонозов и бактериозов в аквакультуре карпа.
Absract. The need for environmentally friendly aquaculture, inhibition of pathogenic bacteria, increased immune response, reduced feed costs and rearing losses, creates an advantage for the use of probiotics. Probiotics
Введение. В настоящее время аквакультура стала важным видом хозяйственной деятельности во многих странах. На объектах производства очень часто возникают проблемы, которые связаны с болезнями водных животных, ухудшением условий окружающей среды, что ведет в свою очередь к экономическим потерям [1].
Эффективность рыбоводства существенно снижается из-за гибели рыб вследствие инфекционных заболеваний, возбудителями которых являются патогенные бактерии различных таксономических групп [2].
Такие химиотерапевтические агенты, как антибиотики и химикаты, являются классическими лекарствами от инфекционных заболеваний в аквакультуре. Бесконтрольное и широкое использование этих препаратов приводит к их накоплению в водной среде, вызывая такие вредные последствия, как появление устойчивых к антибиотикам бактерий, накопление остатков антибиотиков в тканях и иммуносупрессия [3], гибель полезных для желудочно-кишечного тракта микробов, а также изменения микробиоты водной окружающей среды [4]. Существует также вероятность риска, связанного с передачей резистентных бактерий из среды в аквакультуру и человеку и риски, связанные с внедрением в среду обитания человека бактерий, содержащих антимикробные гены резистентности и последующий перенос таких генов в микробиом человека [5].
Уже сегодня использование антибиотиков в борьбе с бактериальными инфекциями и с целью предотвращения смертности рыб в аквакультуре становится не всегда возможной, так как на сегодняшний день патогенные и условно-патоген-
are single or mixed cultures of live microorganisms that promote the development of beneficial intestinal microflora of the host organisms, causing recovery. It is also known that lactic acid bacteria have a pronounced antagonistic activity against pathogenic microflora.
An important role in reducing the death of valuable fish species from bacterial diseases is played by the development of effective treatment and prevention measures. It is known that diseases of a bacterial nature can cause the death of 50 to 100 % of the fish, the fish that survives after the disease loses weight, and then lags behind in growth for a long time. This leads to the need to develop drugs that are an alternative to antibiotics and are more physiological and safe means for the prevention and treatment of bacteriosis.
The article presents the results of the study of antagonistic activity and sensitivity to antibiotics of a consortium based on lactic acid bacteria isolated from the intestines of carp (Cyprinus carpio) for the purpose of their further promising use in the fight against aeromonosis and bacteriosis in carp aquaculture.
Ключевые слова: аквакультура, пробиотики, молочнокислые бактерии, патогенные бактерии, карп, антагонизм, антибиотикорезистентность.
Keywords: aquaculture, probiotics, lactic acid bacteria, pathogenic bacteria, carp, antagonism, antibiotic resistance.
ные микроорганизмы не восприимчивы ко многим препаратам [6].
Бесконтрольное применение антибиотиков, а также неправильный выбор антибиотика, режима его дозирования или длительности лечения являются причиной формирования и распространения антибиотикорезистентных штаммов, что сегодня является глобальной проблемой для всех стран мира [7, 8]. Поэтому в последние годы использование некоторых антибиотиков было запрещено в ряде стран по причине серьезной экологической опасности, а также некоторого канцерогенного эффекта [6].
В связи с этим в настоящее время в качестве профилактического средства, а также для поддержания и восстановления нормального физиологического состояния в аквакультуре широко используются различные пробиотические препараты [9]. Пробиотические препараты стимулируют рост привели-гированных микроорганизмов и укрепляют естественные защитные механизмы организма [10]. Механизм действия про-биотиков, в отличие от такового антибиотиков, направлен не на уничтожение части популяции кишечных микроорганизмов, а на заселение кишечника конкурентоспособными штаммами бактерий-пробионтов, которые осуществляют неспецифический контроль над численностью условно-патогенной микрофлоры путем ее вытеснения из состава кишечного микробиоценоза [9].
Наиболее часто применяемые в пробиотических препаратах микроорганизмы — это различные штаммы лактобакте-рий и бифидобактерий: Lactobacillus, Bifidobacterium [11]. Про-биотические добавки из живых бактерий стали альтернативой антибиотикам [12, 13].
Следует отметить, что данная проблема существует не только в Республике Казахстан, но и во многих других странах, занимающихся аквакультурой, поэтому защита рыб от бактериальных заболеваний является актуальным вопросом ихтио-патологической науки. В новой госпрограмме развития АПК республики к 2030 году запланировано увеличение объема производства и улова рыбы на 45 %. Важное значение при подборе культур микроорганизмов для включения в пробио-тики придается их устойчивости к антибиотикам. По этим причинам важно идентифицировать устойчивые к антибиотикам пробиотические бактерии и использовать их в аквакуль-туре [14].
В связи с этим целью исследования являлось изучение влияния автохтонных штаммов пробиотических бактерий по отношению к возбудителям бактериозов у карпа в аквакуль-туре в условиях in vitro.
Модели и методы
Для проведения исследований были использованы четыре культуры пробиотических бактерий Lactobacillus fermentum 24с B-RKM 0817, Pediococcus pentosaceus 10/9к B-RKM 0816, Lactobacillus paracasei 9с B-RKM 0815, Lactobacillus paracasei 12/2с B-RKM 0896, ранее выделенных из кишечника карпа (Cyprinus carpio), как монокультурах, так и в составе консорциума. Культивирование МКБ проводили с использованием
MRS-агара (Man Ragosa and Sharpe) при 37 °C в течение 24—48 часов [15].
Также для выполнения работы из коллекции Биобанка промышленных микроорганизмов РГП «Республиканская коллекция микроорганизмов» были взяты для использования тест-штаммы Pseudomonas taiwanensis CB 2R-1 B-RKM 0726, Pseudomonas aeruginosa G13 B-RKM 0427, Aeromonas punctata G30 B-RKM 0287, известные как основные возбудители бактериозов у карповых рыб. Культивирование условно-патогенных бактерий проводили с использованием МПА (мясо-пептонного агара) при 37 °C в течение 24—48 часов [15].
Определение чувствительности пробиотических штаммов и условно-патогенных бактерий проводили стандартным диско-диффузионным методом [16], с использованием имеющихся дисков с антибиотиками: пенициллин (P 10), тетрациклин (ТЕ 30), рокситромицин (RO 30), канамицин (K 30), ампициллин (AMP 25), амок-сициллин/клавулановая кислота (АМС 30), клин-дамицин (CD 10), цефазолин (CZ 30), гентами-цин (GEN), ванкомицин (VA 5), карбенициллин (CB 25), фузидин (FUZ 10), олеандомицин (OL 15), рифампицин (RIF 5), неомицин (N 30), оксациллин (OX 10), ципрофлоксацин (С1Р 5), эритромицин (E 15), левомицитин (LEV 30). Для этого бактериальную взвесь, соответствующей 0,5 стандарту мутности по МакФарланду, равномерно распределяли на поверхности среды стерильным шпателем и накладывали диски с антибиотиками. Чашки инкубировали в течение 24 часов при 37 °С. Диаметр зоны отсутствия роста измеряли линейкой и учитывали результаты в мм [16].
Антагонистическую активность пробиотичес-ких бактерий L. fermentum 24с, P. pentosaceus 10/9к, L. paracasei 9с, L. paracasei 12/2с в отношении тест-штаммов Ps. taiwanensis CB 2R-1, Ps. aeruginosa G13, A. punctata G30 определяли методом диффузии в агар, которую выражали в мм диаметра зоны ингибирования роста условно-патогенных бактерий. Условно-патогенные культуры в виде суспензии клеток в количестве 1 млрд/мл (по бактериальному стандарту мутности) наносили на поверхность среды МПА, после чего вырезали лунки диаметром 10 мм и заполняли их ис-сле дуемыми культурами (по 0,1 мл). Результаты учитывали через 48 часов, с учетом диаметра зоны лунки [15].
Результаты и обсуждение
Факторами, сдерживающими успешное развитие пресноводного рыбоводства, являются за-
болевания различной этиологии, наносящие существенный ущерб отрасли.
Например, представители родов Aeromonas и Pseudomonas представляют собой один из компонентов бактериальной флоры воды и обнаруживаются во всех водоемах, особенно загрязненных. При определенных условиях эти бактерии могут вызвать тяжелейшие бактериальные инфекции — аэромонозы и псевдомонозы, при которых гибель разводимых объектов может достигать 100 % [17].
Из кишечника взрослых особей карпа и сазана (Cyprinus carpio) из хозяйств аквакультуры Карагандинской и Акмолинской областей в 2019 году было выделено 24 изолята МКБ. В результате скрининга по показателям жизнеспособности, способности к адгезии, толерантности к солям желчи, а также биосовместимости были отобраны наиболее активные штаммы: L. fermentum 24с, P. pentosaceus 10/9к, L. paracasei 24с, L. paracasei 12/2с.
Проведена оценка чувствительности к различным антибиотикам молочнокислых бактерий как монокультуре, так и в составе консорциума (таблица 1). Далее проведены исследования по изучению резистентности к антибиотикам условно-патогенных штаммов Ps. taiwanensis, Ps. aeruginosa, A. punctata, вызывающих псевдомоноз и аэромо-ноз у карповых рыб (таблица 1). На рисунке 1 представлены результаты чувствительности МКБ и тест-штаммов к различным антибиотикам.
По результатам таблицы видно, что штаммы МКБ обладают наибольшей чувствительностью к следующим антибиотикам (в порядке уменьшения): Пенициллин > Амоксиклав > Рокситромицин > Далацин > Левомицитин > Эритромицин > Тетрациклин > Ампициллин > Карбенициллин > Рифампицин. Зона задержки роста составила от 40,5 ± 1,5 мм до 11,5 ± 0,5 мм у разных штаммов. У всех штаммов выявлена резистентность к Канамицину, Ванкомицину, Неоми-цину, Оксациллину, Ципрофлоксацину. Отмечена очень слабая чувствительность у штамма P. pentosaceus 10/9к к Цефазолину (7 ± 1,0 мм) и Гента-мицину (7 ± 0 мм). Аналогичные результаты по антибиотикорезистентности исследуемых штаммов МКБ подтверждаются в составе консорциума.
В результате проведенных исследований выявлено, что все тест-штаммы обладают разной степенью чувствительностью к следующим антибиотикам (в порядке уменьшения): Амоксиклав > Канамицин > Гентамицин > Ципрофлоксацин > Неомицин > Тетрациклин > Левомицитин. Зона отсутствия роста у разных штаммов составила от 32,5 ± 0,5 мм до 11,5 ± 0,5 мм. Все тест-штаммы обладают устойчивостью к Карбе-нициллину, Фузидину, Олеандомицину, Рифам-
Рис. 1. Чувствительность штаммов МКБ, консорциума и тест-штаммов к антибиотикам диско-диффузионным методом
пицину, Оксациллину. Отмечена также чувствительность разных штаммов к отдельным антибиотикам.
Известно, что МКБ обладают высокой антагонистической активностью против широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.
Антагонистическую активность молочнокислых бактерий, входящих как в состав консор-
циума, так и в монокультурах исследовали по отношению к возбудителям бактериозов у рыб Ps. taiwanensis, Ps. aeruginosa, A. punctata, а также возбудителей кишечных и других инфекций Staphylococcus aureus B-RKM 0470, Escherichia coli B-RKM 0447, Salmonella enteridis B-RKM 0680 (табл. 2, рис. 2).
Штаммы пробиотического консорциума проявили высокую антагонистическую активность
Таблица 1
Определение чувствительности к антибиотикам штаммов МКБ, консорциума и тест-штаммов
Наименование антибиотика Штаммы МКБ Консорциум МКБ Тест-штаммы
L. ferm. 24с P. pent. 10/9к L. par. 9с L. par. 12/2с Ps. taiw. Ps. aerug. A.punct.
P 10 S (27,5) I (21,0) S (30,0) S (40,5) S (31,5) S (29,5) R R
ТЕ 30 I (20,5) I (16,5) I (19,5) S (23,5) I (20) S (32,5) I (13,5) R (11,5)
RO 30 S (29,0) S (23,5) S (31,5) S (35,0) S (32) I (27) R R
K 30 R R R R R I (26,5) I (22,5) I (23,0)
AMP 25 I (11,5) I (15,5) I (12,0) S (31,5) S (25,5) I (22) R R
АМС 30 S (33,5) S (26,5) S (33,0) S (26,0) S (27,5) S (32,5) I (27,0) I (23,5)
CD 10 S (30,5) S (22,0) S (33,0) S (25,0) S (31,5) I (16,5) R R
CZ 30 R R (7,0) R I (13,5) R R (12,0) R R
VA 5 R R R R R I (19,0) R R
GEN 10 R R (7,0) R R (11,0) R (9,5) I (22,5) I (20,0) I (21,5)
CB 25 I (19,5) I (14,0) I (17,5) I (20,0) I (20,5) R R R
FUZ 10 R I (15,0) R I (12,5) R R R R
OL 15 R I (13,5) R I (17,5) R (12,5) R R R
RIF 5 I (13,0) I (19,5) S (26,0) S (27,0) S (24,0) R R R
N 30 R R R R R I (19,5) I (19,5) I (20,0)
OX 10 R R R R R R R R
С1Р 5 R R R R R I (21,0) I (19,0) I (22,0)
E 15 I (19,0) I (17,5) S (21,5) S (34,5) S (25) R R I (23,5)
LEV 30 S (21,5) I (18,5) S (24) I (20,5) I (19,5) I (17,0) I (14,0) I (20,0)
Примечание: S — чувствительный; I — промежуточно-чувствительный; R — устойчивый (резистентный).
Рис. 2. Антагонистическая активность консорциума МКБ по отношению к тест-штаммам
ко всем условно-патогенным микроорганизмам. Зоны ингибирования роста у A. punctata по отношению к монокультурам и в составе консорциума от 12,5 ± 0,29 до 17,0 ± 1,0 мм; у Ps. taiwanensis — от 12,3 ± 0,25 до 16,5 ± 0,5 мм; у Ps. aeruginosa — от 13,5 ± 0,5 до 15,5 ± 0,5 мм, у St. aureus — от 12,5 ± 1,0 до 14,8 ± 0,48 мм, у E. coli — от 11,0 ± 0 до 17,3 ± 0,25 мм, у S. cnteridis — от 11,0 ± 0,82 до 15,5 ± 0,29 мм.
По результатам исследования установлено, что пробиотические штаммы МКБ, отобранные для консорциума как по отдельности, так и вместе проявили высокую антагонистическую активность ко всем условно-патогенным микроорганизмам (100 %).
В современном товарном выращивании объектов аквакультуры применяются антибиотики
в терапевтических целях, для профилактики заболеваний и в качестве стимуляторов роста. Устойчивость бактерий к различным классам антибиотиков снижает эффективность лечения инфекций у людей и животных, способствует росту заболеваемости, смертности и приводит к значительным экономическим потерям [18].
Применяемые для лечения бактериозов препараты — антибиотики, антисептики, проявляя антибактериальное действие, отрицательно воздействуют на организм рыб и часто на экологическое состояние водоемов.
Несмотря на то что в структуре возбудителей бактериозов рыб аэромонады занимают доминирующее положение, большинство бактериальных болезней прудовых рыб вызвано именно ассоциацией условно-патогенных микроорганиз-
Таблица 2
Антагонистическая активность штаммов МКБ по отдельности и в составе консорциума
Наименование Условно-патогенные штаммы, мм
А. punct. Ps. taiwan. Ps. aerug. St. aureus E. coli S. ent.
L. ferm. 24с P. pent. 10/9к L. parac. 9с L. parac. 12/2 Консорциум 16,5 ± 0,5 14,5 ± 0,5 17,0 ± 1,0 12,5 ± 0,29 13,3 ± 0,25 15,5 ± 0,5 13,5 ± 0,5 16,5 ± 0,5 13,0 ± 1,08 12,3 ± 0,25 13,5 ± 0,5 15,5 ± 0,5 14,5 ± 0,5 14,0 ± 0 14,3 ± 1,03 13,8 ± 0,25 14,8 ± 0,41 14,8 ± 0,48 12,8 ± 0,25 12,5 ± 0,29 15,5 ± 0,29 14,0 ± 0,41 17,3 ± 0,25 11,0 ± 0,41 12,5 ± 0,29 11,0 ± 0,82 12,0 ± 0,82 15,5 ± 0,29 12,5 ± 0,29 13,0 ± 0,41
Примечание: Антагонистическая активность исследованных культур считается нулевой при ширине зоны ингибирования роста до 5,0 мм, низкой — при 5,1—9,9 мм, средней — при 10,0—19,9 мм, высокой при 20,0 мм и более.
мов. Вследствие чего применение традиционных в отечественном рыбоводстве таких препаратов, как тетрациклин, фуразолидон, левомицитин, можно считать нецелесообразным [3].
В связи с вышеизложенным, мониторинг ан-тибиотикорезистентности основных групп бактерий, вызывающих болезни рыб, способствует решению важных задач. Прежде всего, по его результатам можно рекомендовать препараты для эмпирической химиотерапии бактериозов, что особенно ценно для тех многих рыбоводных предприятий, которые не проводят микробиологические исследования. Кроме того, мониторинг способствует своевременной ротации антибактериальных лекарственных препаратов, вследствие чего данная информация может быть востребована их производителями [19].
В этом контексте микробное вмешательство может сыграть жизненно важную роль в производстве продукции аквакультуры, а эффективное лечение пробиотиками может обеспечить широкий спектр и большую защиту от неспецифических заболеваний [20].
Пробиотики должны быть адаптированы к различным видам и средам. Важно понимать механизм действия пробиотиков, чтобы правильно определить критерии их отбора [21].
С целью повышения эффективности лечения аэромоноза и псевдомоноза в аквакультуре карпа in vitro были проведены тесты на антибиотико-чувствительность и изучена антимикробная активность в отношении бактерий родов Pseudomonas и Aeromonas. Консорциум из штаммов проби-отических молочнокислых бактерий Lactobacillus fermentum 24с, Pediococcuspentosaceus 10/9к, Lactobacillus paracasei 24с и Lactobacillus paracasei 12/2с может рекомендоваться для использования в целях профилактики и лечения бактериозов, а также для улучшения желудочно-кишечного тракта у карповых рыб.
Заключение. Пробиотики укрепляют иммунный статус рыб, тем самым сохраняя их здоровье и повышая производственные показатели. Но самое главное, их следует рассматривать как один из факторов, обеспечивающих безопасность ры-
боводческой продукции для конечного потребителя — человека.
Применение пробиотических препаратов при выращивании гидробионтов является перспективным направлением аквакультуры [22].
Таким образом, установлено, что выраженным бактерицидным действием в отношение Aeromonas punctatü и Pseudomonas aeruginosa у карпа обладают препараты анибиотиков из группы ами-ногликозидов широкого спектра действия — Ка-намицин, Неомицин и Гентамицин, а также препарат из группы фторхинолов II поколения — Ципрофлоксацин. Нами для эффективной борьбы против возбудителя аэромоноза и псевдомо-ноза, а также желудочно-кишечных заболеваний в аквакультуре карпа рекомендуются штаммы пробиотических МКБ как в монокультуре, так и в составе консорциума, которые активно подавляют рост условно-патогенных бактерий, что представляется возможным для использования в качестве средств для профилактики и лечения бактериозов. Хотелось бы подчеркнуть важность мониторинга антибиотикорезистентности возбудителей бактериальных болезней рыб и поиска новых, эффективных и безопасных биопрепаратов в борьбе с ними.
Стоит отметить, что для рыбоводных хозяйств представляется перспективным использование бактериальных препаратов, сочетающих свойства продуцентов пробиотиков и антагонистов патогенов. Конкурентное преимущество таковых препаратов заключается в разработке отечественной «зеленой» технологии лечебно-профилактических биопрепаратов на основе активных пробио-тических бактерий без использования антибиотиков или в сочетании с минимальной дозировки, а также сокращающих гибель товарных и ценных видов рыб в Казахстане.
Работа выполнена в рамках программы целевого финансирования на 2021—2022 гг. OR11465530 «Создание и пополнение коллекции промышленно-ценных микроорганизмов, изучение и сохранение их биологического разнообразия для нужд биотехнологии, медицины и сельского хозяйства».
Библиографический список
1. Balcâzar J. L. The role of probiotics in aquaculture / J. L. Balcâzar, I. De Bias, I. Ruiz-Zarzuela, D. Cunningham, D. Daniel Vendrell // Veterinary microbiology. — 2006. Vol. 114. № 3. — Р. 173—186.
2. Радько М. М. Борьба с болезнями рыб — актуальная задача рыбоводства Беларуси / М. М. Радько, Э. К. Скурат, С. М. Дегтярик, М. В. Якубовский, А. И. Чигир, В. Г. Лысый // Белорусское сельское хозяйство. — 2008. № 2 (78). — C. 90—91.
3. Аламдари Х. Использование пробиотических препаратов при кормлении осетровых рыб: результаты испытания при температуре воды ниже оптимальной / Х. Аламдари, С. В. Пономарев // Вестник АГТУ. Сер.: Рыбное хозяйство. — 2013. № 3. — С. 133—140.
4. Mai D. Ibrahem Evolution of probiotics in aquatic world: Potential effects, the current status in Egypt and recent prospectives // Journal of Advanced Research. — 2015. № 6. — Р. 765—791.
5. Report of the regional donor consultation on the role of aquaculture and living aquatic resources: priorities for support and networking: FAO Regional Office Asia and the Pacific. Bangkok Thailand: RAP Publication. — 2003. № 4. — 222 р.
6. Serrano Е. P. Responsible Use of Antibiotics in Aquaculture. FAO Fisheries Technical Paper, Rome. — 2005. № 469. — 98 р.
7. Laxminarayan, R. et al. Antibiotic resistance the need for global solutions // Lancet Infect. Dis. — 2013. Vol. 13. № 12. — P. 1057—1098.
8. Sumpradit N. et al. Antibiotics Smart Use: a workable model for promoting the rational use of medicines in Thailand // Bull. World Health Organ. — 2012. Vol. 90. № 12. — P. 905—913.
9. Артюхова С. И. Использование пробиотиков в кормлении птицы / С. И. Артюхова, А. Лашин // Сб. материалов Междунар. конф. «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы». 2004, Москва. — С. 130—131.
10. El-Ezabi M. M. The viability of probiotics as a factor influencing the immune response in the Nile tilapia, Oreochromis nilo-ticus / M. M. El-Ezabi, S. S. El-Serafy, M. A. Essa, S. Lall, S. M. Daboor, N. A. Esmael // Egypt J. Aquat. Biol. & Fish. — 2011. Vol. 15. № 1. — P. 105—124.
11. Карапетян К. Дж. Сравнительная оценка ряда свойств новых штаммов молочнокислых бактерий // Биолог. журн. Армении. — 2009. — № 4 (61). — С. 36—42.
12. Горковенко Л. Г. Наставления по применению пробиотических препаратов «Бацелл», «Моноспорин» и «Пролам» в прудовом рыбоводстве. — 2011, Краснодар. — 15 с.
13. Максим Е. А. Применение комплекса пробиотиков в рыбоводстве / Сб. науч. тр. СКНИИЖ. — 2014. Т. 2. Вып. 3. — С. 197—201.
14. Ozcan D. Antibiotic Resistance of Some Probiotic Strains in Aquaculture / D. Ozcan, §. Onalan // Eastern Anatolian Journal of Scienve. — 2017. — Vol. 3. — Issue 1. — Р. 22—26.
15. Нетрусов А. И. Практикум по микробиологии. Учебное пособие / А. И. Нетрусов, М. А. Егорова, Л. М. Захарчук и др. — М.: Издательский центр «Академия», 2005. — 608 с.
16. МУ 2.3.2.2789—10 «Методические указания по санитарноэпидемиологической оценке безопасности и функционального потенциала пробиотических микроорганизмов, используемых для производства пищевых продуктов», 2010. — 105 с.
17. Лаженцева Л. Ю., Шульгина Л. В., Ким Э. Н. Микроорганизмы сырья прибрежного лова и их влияние на безопасность продукции: моногр. / Л. Ю. Лаженцева, Л. В. Шульгина, Э. Н. Ким — Владивосток: Дальрыбвтуз, 2013. — 243 с.
18. Борьба с устойчивостью к антибиотикам с позиций безопасности пищевых продуктов в Европе // Всемирная организация здравоохранения, Европейское региональное бюро, 2011. — 84 с.
19. Гаврилин К. В. Результаты мониторинга антибиотикорезистентности основных групп ихтиопатогенных бактерий за 2014 год / К. В. Гаврилин // Российский ветеринарный журнал. — 2014. — № 3. — С. 14—15.
20. Paningrahi A. Microbial intervention for better fish health in aquaculture: the Indian scenario / A. Paningrahi, I. S. Azad // Fish Physiol Biochem. — 2007. — Vol. 33. — P. 429—440.
21. Venkateswarlu V. Use of Beneficial Microbes (Probiotics) in Aquaculture / V. Venkateswarlu, S. Shehataj //International Journal for Research in Applied Science & Engineering Technology (IJRASET). — 2019. — Vol. 7. Issue 9. — P. 392—400.
22. Ларионов С. В. Внутренние незаразные болезни животных — одна из основных дисциплин в подготовке ветеринарного врача / С. В. Ларионов //Аграрный научный журнал. — 2018. — № 6. — С. 99.
STUDY OF THE ROLE OF PROBIOTICS AGAINST PATHOGENIC BACTERIA
OF THE GENUS AEROMONAS AND PSEUDOMONAS IN CARP AQUACULTURE IN VITRO
Zh. B. Tekebayeva, Master of Engineering Sciences (Giemical Technology of organic substances), Republican Collection of Microorganisms (RCM), j.tekebaeva@mail.ru, Nur-Sultan, Kazakhstan; Postgraduate (Ecology), Nizhnevartovsk State University (NSU), Nizhnevartovsk, Russia,
А. А. ^lagin, Ph. D. (Ecology), Dr. Habil., Professor, Nizhnevartovsk State University (NSU), kulagin-aa@mail.ru, Nizhnevartovsk, Russia,
G. N. Bissenova, Ph. D. (Agriculture), Republican Collection of Microorganisms (RCM), Bissenova84@mail.ru, Nur-Sultan, Kazakhstan,
R. R. Beisenova, Ph. D. (Biology), Dr. Habil., Professor, Eurasian National University (ENU), raihan_b_r@mail.ru, Nur-Sultan, Kazakhstan,
Z. S. Sarmurzina, Ph. D. (Biology), Republican Collection of Microorganisms (RCM), sarmurzina@list.ru, Nur-Sultan, Kazakhstan References
1. Balcazar J. L. The role of probiotics in aquaculture / J. L. Balcazar, I. De Blas, I. Ruiz-Zarzuela, D. Cunningham, D. Daniel Vendrell. Veterinary microbiology. 2006. Vol. 114. No. 3. Р. 173—186.
2. Radko M. M., Skurat E. K., Degtyarik S. M., Yakubovskij M. V., Chigir A. I., Lysyj V. G. Borba s boleznyami ryb — ak-tualnaya zadacha rybovodstva Belarusi [The fight against fish forests is an urgent task of fish farming in Belarus]. Belorusskoe selskoe hozyajstvo. 2008. No. 2 (78). P. 90—91 [in Russian].
3. Alamdari H., Ponomaryov S. V. Ispolzovanie probioticheskih preparatov pri kormlenii osetrovyh ryb: rezultaty ispytaniya pri temperature vody nizhe optimalnoj [The use of probiotic preparations in sturgeon feeding: test results at suboptimal water temperatures]. Vestnik AGTU. Ser.: Rybnoe hozyajstvo. 2013. No. 3. P. 133—140 [in Russian].
4. Mai D. Ibrahem Evolution of probiotics in aquatic world: Potential effects, the current status in Egypt and recent prospective. Journal of Advanced Research. 2015. No. 6. Р. 765—791.
5. Report of the regional donor consultation on the role of aquaculture and living aquatic resources: priorities for support and networking: FAO Regional Office Asia and the Pacific. Bangkok Thailand: RAP Publication, 2003. No. 4. 222 р.
6. Serrano Е. P. Responsible Use of Antibiotics in Aquaculture. FAO Fisheries Technical Paper, Rome. 2005. No. 469. 98 р.
7. Laxminarayan R. Antibiotic resistance the need for global solutions / R. Laxminarayan et al. Lancet Infect. Dis. 2013. Vol.13. No. 12. P. 1057-1098.
8. Sumpradit N. Antibiotics Smart Use: a workable model for promoting the rational use of medicines in Thailand / Sumpradit N. et al. Bull. World Health Organ. 2012. Vol. 90. No. 12. P. 905-913.
9. Artyukhova S. I., Lashin A. V. Ispolzovanie probiotikov v kormlenii pticy [The use of probiotics in poultry nutrition]. Sb. materialov Mezhdunar. konf "Probiotiki, prebiotiki, sinbiotiki i funkcionalnye produkty pitaniya. Sovremennoe sostoyanie i per-spektivy". 2004. Moscow. P. 130—131 [in Russian].
10. El-Ezabi M. M. The viability of probiotics as a factor influencing the immune response in the Nile tilapia, Oreochromis nilo-ticus / M. M. El-Ezabi, S. S. El-Serafy, M. A. Essa, S. Lall, S. M. Daboor, N. A. Esmael. Egypt J. Aquat. Biol. & Fish. 2011. Vol. 15. No. 1. P. 105—124.
11. Karapetyan K. Dzh. Sravnitelnaya ocenka ryada svojstv novyh shtammov molochnokislyh bakterij [Comparative evaluation of a number of properties of new strains of lactic acid bacteria]. Biolog. zhurn. Armenii. 2009. No. 4 (61). P. 36—42 [in Russian].
12. Gorkovenko L. G. Nastavleniya po primeneniyu probioticheskih preparatov "Bacell", "Monosporin" i "Prolam" v prudovom rybovodstve [Guidelines for the use of probiotic preparations "Bacell", "Monosporin" and "Prolam" in pond fish farming]. Krasnodar. 2011. 15 p. [in Russian].
13. Maksim E. A. Primenenie kompleksa probiotikov v rybovodstve [The use of a complex of probiotics in fish farming]. Sb. nauch. tr. SKNIIZh. 2014. Vol. 2. Issue 3. P. 197—201 [in Russian].
14. Ozcan, D. Antibiotic Resistance of Some Probiotic Strains in Aquaculture / D. Ozcan, §. Onalan Eastern Anatolian Journal of Scienve. 2017. Vol. 3. Issue 1. Р. 22—26.
15. Netrusov A. I., Egorova M. A., Zaharchuk L. M. i dr. Praktikum po mikrobiologii. Uchebnoe posobie [Workshop on microbiology. Tutorial]. 2005. Moscow, Izdatelskij centr Akademiya. 608 p. [in Russian].
16. MUK 2.3.2.2789—10. Metodicheskie ukazaniya po sanitarnoepidemiologicheskoj ocenke bezopasnosti i funkcional'nogo potenciala probioticheskih mikroorganizmov, ispol'zuemyh dlya proizvodstva pishchevyh produktov. [Guidelines for the sanitary and epidemiological assessment of the safety and functional potential of probiotic microorganisms used for food production]. 2010. 105 p. [in Russian].
17. Lazhentseva L. Yu., Shulgina L. V., Kim E. N. Mikroorganizmy syrya pribrezhnogo lova i ih vliyanie na bezopasnost produk-cii: monogr. [Microorganisms of coastal fishing raw materials and their impact on product safety: monograph.]. 2013. Vladivostok, Dalrybvtuz. 243 p. [in Russian].
18. Borba s ustojchivostyu k antibiotikam s pozicij bezopasnosti pishevyh produktov v Evrope // Vsemirnaya organizaciya zdra-voohraneniya [Fighting antibiotic resistance from a food safety perspective in Europe]. Evropejskoe regionalnoe byuro. 2011. 84 p. [in Russian].
19. Gavrilin K. V. Rezultaty monitoringa antibiotikorezistentnosti osnovnyh grupp ihtiopatogennyh bakterij za 2014 god [The results of monitoring the antibiotic resistance of the main groups of ichthyopathogenic bacteria in 2014]. Rossijskij veterinarnyj zhurnal. 2014. No. 3. P. 14—15 [in Russian].
20. Paningrahi A. Microbial intervention for better fish health in aquaculture: the Indian scenario / A. Paningrahi, I. S. Azad. Fish Physiol Biochem. 2007. Vol. 33. P. 429—440.
21. Venkateswarlu V., Shehataj S. Use of Beneficial Microbes (Probiotics) in Aquaculture / V. Venkateswarlu, S. Shehataj. International Journal for Research in Applied Science & Engineering Technology (IJRASET). 2019. Vol. 7. Issue 9. Р. 392—400.
22. Larionov S. V. Vnutrennie nezaraznye bolezni zhivotnyh — odna iz osnovnyh disciplin v podgotovke veterinarnogo vracha [Internal non-communicable diseases of animals — one of the main disciplines in the training of a veterinarian]. Agrarnyj nauchnyj zhurnal. 2018. No. 6. P. 99. [in Russian].
