CC BY
235
статья i стоматология
Изучение роли Prevotella intermedia в развитии хронического пародонтита методом полимеразной цепной реакции в реальном времени
А. В. Шибаева1'2, Н. К. Аймадинова3, Е. В. Трубникова4, Т. В. Кузнецова2, О. А. Зорина3'5, Ю. К. Кудыкина6, А. Б. Шевелев2'6^
1 Институт биохимической физики имени Н. М. Эмануэля РАН, Москва
2 Институт общей генетики имени Н. И. Вавилова РАН, Москва
3 Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова, Москва
4 Курский государственный университет, Курск
5 Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии, Москва
6 Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов имени М. П. Чумакова РАМН, Москва
Методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием набора «Дентофлор» установлено, что па-родонтопатоген Prevotella intermedia встречается у 55 % пациентов с хроническим пародонтитом. Это существенно ниже аналогичного показателя для Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythensis и Treponema denticola. При этом гиперколонизация P intermedia обнаружена только у 7,7 % пациентов контрольной группы. Это говорит о том, что гиперколонизация P intermedia является значимым прогностическим признаком тяжести поражения пародонта. Патологический рост обсеме-ненности P intermedia редко протекает в форме моноинфекции: для этого вида больше, чем для других патогенов «красного комплекса», характерно сочетание с P gingivalis, T. forsythensis и T. denticola, приводящее к наиболее тяжелым формам хронического пародонтита. Для P intermedia, в отличие от других патогенов «красного комплекса», не выявлено различий у мужчин и женщин по встречаемости и степени поражения пародонта при равной обсемененности.
Ключевые слова: микробиом, хронический пародонтит, полимеразная цепная реакция, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythensis, Treponema denticola
ЕЗ Для корреспонденции: Алексей Борисович Шевелев
142782, Москва, пос. Института полиомиелита, 27 км Киевского шоссе; shevel_a@hotmail.com Статья поступила: 13.09.2015 Статья принята к печати: 02.10.2015
A study of the role of Prevotella intermedia in the development of chronic periodontitis using real-time polymerase chain reaction
Shibaeva AV1,2, Aymadinova NK3, Trubnikova EV4, Kuznetsova TV2, Zorina OA3,5, Kudykina YK6, Shevelev AB2,6^
1 N. M. Emanuel Institute of Biochemical Physics, Russian Academy of Sciences, Moscow
2 Vavilov Institute of General Genetics, Russian Academy of Sciences, Moscow
3 The First Sechenov Moscow State Medical University, Moscow
4 Kursk State University, Kursk
5 Central Research Institute of Dental and Maxillofacial Surgery, Moscow
6 Chumakov Institute of Poliomyelitis and Viral Encephalitides, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow
In a real-time polymerase chain reaction-based assay with a Dentoflor kit Prevotella intermedia, a periodontal pathogen, was found to be present in 55 % of patients with chronic periodontitis. This percantage is significantly lower than the corresponding statistic for Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsuthensis and Treponema denticola. In addition, hypercolonization of periodontium by P intermedia was detected in 7.7 % of patients in the control group. This suggests that P intermedia hypercolonization is an important prognostic factor indicating the severity of periodontal disease. The abnormal increase in P intermedia is rarely a result of a monoinfection. Compared to other “red complex” pathogens, this species is more likely to co-occur with P gingivalis, T. forsythensis and T. denticola, which leads to the most severe forms of chronic periodontitis. Unlike other “red complex” pathogens, P intermedia showed no significant difference in occurrence and the degree of periodontal damage in male and female individuals with equal colonization levels.
Keywords: microbiome, chronic periodontitis, polymerase chain reaction, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythensis, Treponema denticola
ITT Correspondence should be addressed: Aleksey Shevelev
27 km Kievskoe highway, Institute of Poliomielit village, Moscow, 142782; shevel_a@hotmail.com Received: 13.09.2015 Accepted: 02.10.2015
10
вестник РГМУ I 4, 2015 | VESTNIKRGMU.rU
article i stomatology
В качестве основных причин развития пародонтита традиционно рассматриваются генетическая предрасположенность, влияние факторов среды (таких как уровень гигиены полости рта, диета, курение, наличие ортодонтических конструкций и др.), а также бактериальная инфекция. И если в патогенезе агрессивных форм пародонтита, как принято считать, ведущую роль играет генетическая составляющая [1], то основной причиной возникновения хронического пародонтита, по мнению большинства авторов, является именно инфицирование поверхности пародонта патогенными бактериями [2, 3]. В полости рта выявлено около 700 видов микроорганизмов, однако в качестве основных пародонтопатогенов называют, как правило, виды Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porph-yromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythensis, Treponema denticola [4-9].
В исследовании L. Ximenez-Fyvie и соавт. [10] виды P gingivalis, T. forsythensis и T. denticola предложено выделить в «красный комплекс» микроорганизмов, обладающих устойчивостью in vivo и in vitro. Кроме того, в глубоких пародон-тальных карманах отмечена повышенная обсемененность Fusobacterium nucleatum, представителями рода Prevotella, Eikenella corrodens, Peptostreptococcus micros и Campylobacter rectus, вероятно, участвующими в развитии бактериальной инфекции.
Виды рода Prevotella рассматриваются в качестве опасных пародонтопатогенов и в исследовании N. Suzuki и соавт.
[9] наряду с P. gingivalis, Bacteroides forsythus, Fusobacterium, Campylobacter и Treponema. В ряде исследований [11,12] приводятся факты выявления на пародонте здоровых людей опасных пародонтопатогенов, хотя степень обсемененности ими у здоровых лиц в среднем оказывалась существенно ниже, чем у пациентов с пародонтитом.
В связи с этим существует необходимость анализировать не столько качественные, сколько количественные соотношения бактерий в консорциумах пародонта. В исследовании K. Torrungruang и соавт. [13] впервые представлены статистически достоверные количественные данные о наличии паро-донтопатогенов на пародонте здоровых лиц и пациентов с хроническим пародонтитом, полученные с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени.
При этом в отношении P intermedia делается вывод о склонности этого патогена к коинфекции с T. denticola. В то же время сам вид P. intermedia представляется авторам менее значимым с точки зрения риска развития хронического пародонтита, чем P gingivalis, T. forsythensis и T. denticola.
С учетом вышесказанного целью настоящего исследования было уточнение роли P. intermedia в качестве этиологического фактора хронического пародонтита на основании данных измерения количественной представленности этого микроорганизма у пациентов с хроническим пародонтитом и лиц контрольной группы.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Клинический материал был собран на базе Центрального научно-исследовательского института стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Министерства здравоохранения РФ.
Все пациенты дали информированное согласие, в котором были подробно описаны условия участия в исследовании. Обследованы 153 пациента в возрасте от 16 до 70 лет без тяжелой соматической патологии. Основную группу составили 78 человек — пациенты с гингивитом (n = 2), хроническим пародонтитом легкой степени (n = 12), средней (n = 37) и тяжелой (n = 27), средний возраст — 42,6 ± 11,3 года. В контрольную группу вошли 75 человек (лица без признаков пародонтита), средний возраст — 27,7 ± 10,8 года.
В представленной выборке женщины составили 92 человека (41 пациентка с хроническим пародонтитом и 51 — контрольной группы), мужчины — 61 (основная группа — 34 пациента, контрольная — 27). Главным критерием для постановки диагноза «хронический генерализованный пародонтит» считали разрушение зубодесневого прикрепления. Степень тяжести устанавливали на основании оценки глубины пародонтальных карманов и выраженности деструкции костной ткани.
Содержимое пародонтальных карманов получали с помощью стерильных бумажных эндодонтических штифтов (размером № 25), которые помещали в пробирку с реактивом «Проба-Рапид» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) объемом 0,5 мл. Клинический материал от каждого пациента собирали дважды.
Суммарную бактериальную ДНК пародонтального смыва пациентов выделяли с помощью набора реагентов «Проба-ГС» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) в соответствии с инструкцией. Препарат ДНК, соответствующий 1/10 объема одного смыва (50 мкл), растворяли в 50 мкл элюирующего раствора. В качестве матрицы для проведения одной ПЦР использовали 5 мкл полученного препарата.
В целях нормирования сигнала (учета разброса в количестве взятого биоматериала и эффективности экстракции ДНК) для каждого образца определяли величину «относительного Ct». Для этого из величины «абсолютного Ct» для специфического набора праймеров и зонда, усредненной по двум образцам одной серии, вычитали усредненную величину Ct общей бактериальной массы для тех же двух образцов серии. Статистической обработке подвергали данные, выраженные в форме «относительного Ct».
Для анализа данных применяли параметр «пороговой обсе-мененности» пародонта патогенами A. actinomycetemcomitans, P gingivalis, P intermedia, T. forsythensis и T. denticola, что позволяло отличить патологическую обсемененность (ACt <15), способную служить причиной возникновения пародонтита, от нормальной (ACt >15), встречающейся у лиц без выраженного поражения пародонта или склонности к нему. Данный подход к анализу результатов был рассмотрен в заявке на патент РФ № 2015120411 (Шибаева, Кудыкина, Трубникова и др. Способ оценки обсемененности пародонта патогенными бактериями с применением полимеразной цепной реакции в реальном времени).
Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета Statistica 8.0 для Windows по стандартным методикам вариационной статистики для непараметрических данных, сравнение полученных величин осуществляли путем анализа параметров Манна-Уитни.
При анализе взаимосвязей внутри пары количественных или порядковых качественных признаков использовали корреляционный анализ по методу Спирмена.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Результаты сравнения полученных данных, нормированных на содержание общей 16S рДНК в образце, в виде параметра Ct были проанализированы с помощью критерия Манна-Уитни (в составе программы Statistica). Данный подход позволил выявить вклад каждого из патогенов в развитие патологии пародонта, а также исследовать склонность пародонтопатогенов к коинфекции. Была проверена гипотеза о наличии статистически значимых различий между основной и контрольной группами по представленности в консорциуме паро-донта каждого из исследуемых видов патогенов. Анализ осуществляли во всей выборке (без разделения по полу), а также отдельно в выборке мужчин и в выборке женщин (табл. 1).
Сравнительный анализ обеих групп показал наличие силь-
ВЕСТНИК РГМУ I 4, 2015 | VESTNIKRGMU.rU
11
статья i стоматология
Таблица 1. Сравнительный анализ основной и контрольной групп по встречаемости пародонтопатогенов с применением критерия Манна-Уитни
Микроорганизм Суммарное значение ACt U Z Р Количество человек
контрольная группа основная группа контрольная группа основная группа
Вся выборка
A. actinomycetemcomitans 6030 5751 2901 0,09 >0,05 78 75
P. gingivalis 7667 4115 1265 6,2 <0,001 78 75
P. intermedia 7345 4437 1587 5,6 <0,001 78 75
T. forsythensis 8251 3531 681 8,3 <0,001 78 75
T. denticola 7868 3914 1064 7,2 <0,001 78 75
Мужчины
A. actinomycetemcomitans 880 1011 416 0,64 >0,05 27 34
P gingivalis 1075 816 221 3,5 <0,001 27 34
P intermedia 1063 828 233 3,6 <0,001 27 34
T. forsythensis 1206 685 90 5,4 <0,001 27 34
T. denticola 1142 750 155 4,7 <0,001 27 34
Женщины
A. actinomycetemcomitans 2373 1905 1044 0,012 >0,05 51 41
P gingivalis 3041 1238 377 5,3 <0,001 51 41
P intermedia 2817 1462 601 4,2 <0,001 51 41
T. forsythensis 3141 1138 277 6,1 <0,001 51 41
T. denticola 3017 1261 400 5,4 <0,001 51 41
Сравнительный анализ обеих групп показал наличие сильной связи между обсемененностью пародонта патогенами P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythensis, T. denticola и патологическим состоянием пародонта: значение параметра Z составляло 6,2; 5,6; 8,3; 7,2 соответственно. Только для такого опасного пародонтопатогена, как A. actinomycetemcomitans, не было выявлено разницы в значениях ACt в контрольной и основной группах. При сравнительном анализе полученных данных отдельно у мужчин и женщин отличий от результатов для всей выборки выявлено не было, однако ввиду дробления выборки на меньшие по размеру группы произошло снижение значений Z и р. Полученные результаты свидетельствуют, что P. intermedia нельзя назвать наиболее распространенным па-родонтопатогеном. В контрольной группе патологическая об-семененность этим микроорганизмом зафиксирована только в 7,7 % случаев, а в основной группе пациентов — в 55 %. Для сравнения: пародонтопатогены «красного комплекса» обнаружены в существенно большем количестве случаев:
• P gingivalis: норма — 33 %, патология — 76 %;
• T. forsythensis: норма — 40 %, патология — 95 %;
• T. denticola: норма — 19 %, патология — 76 %.
С учетом этого наблюдения вся исследуемая выборка вне зависимости от диагноза была разделена по признаку патологической обсемененности P intermedia, т. е. в основную группу были отнесены пациенты со значением ACt <15 (патологический уровень обсемененности), в контрольную — с ACt >15 (допустимый уровень обсемененности). С помощью критерия Манна-Уитни была проверена гипотеза о наличии статистически значимых различий между группами по представленности каждого из исследуемых патогенов (табл. 2). Согласно полученным результатам патологическая обсемененность
пародонта P intermedia имеет сильную связь с наличххием в первую очередь T. forsythensis (Z = 6,5, р <0,001). Значимые корреляции отмечены также для T. denticola (Z = 6,0, р <0,001) и P gingivalis (Z = 5,1, р <0,001). Патологическая обсеменен-ность P. intermedia, как показало проведенное исследование, не коррелирует с A. actinomycetemcomitans.
Для установления парных корреляций между гиперколонизацией пародонта P. intermedia и другими патогенами определяли коэффициент корреляции Спирмена. Исследование проводили для всей выборки (табл. 3), а также отдельно для контрольной группы (табл. 4) и группы пациентов с хроническим пародонтитом (табл. 5). Полученные результаты полностью подтвердили существенную роль P. intermedia в составе комплекса с P. gingivalis, T. forsythensis и T. denticola в развитии пародонтита. Анализ всей выборки показал, что самая сильная связь наблюдается в отношении колонизации пародонта парой T. forsythensis / T. denticola.
Несколько меньшая, но высокая взаимосвязь выявлена в парах P gingivalis / T. forsythensis, P intermedia / T. forsythensis, P intermedia / T. denticola и P gingivalis / T. denticola. Связь средней силы получена для пары P gingivalis / P intermedia. Сходные корреляции наблюдались и при анализе пациентов основной группы с той лишь разницей, что значение коэффициента корреляции для пары P. gingivalis / T. forsythensis несколько больше, а для пары P. gingivalis / P. intermedia — меньше. При использовании корреляционного теста A. actinomycetemcomitans не проявил склонности к коинфекции с пародонтопатогенами «красного комплекса». Напротив, при анализе данных контрольной группы прослеживалась слабая тенденция к конкуренции между ним и другими патогенами: P. gingivalis и T. denticola.
Таблица 2. Сравнительный анализ групп пациентов с патологической обсемененностью пародонта P. intermedia (ACt <15) и без нее (ACt >15) по встречаемости других пародонтопатогенов с применением критерия Манна-Уитни
Микроорганизм Суммарное значение ACt U Z Р Количество человек
ACt P. intermedia <15 ACt P. intermedia >15 ACt P. intermedia <15 ACt P. intermedia >15
A. actinomycetemcomitans 3913 7868 2408 0,56 >0,05 49 104
P. gingivalis 2486 9295 1261 -5,1 <0,001 49 104
T. forsythensis 2133 9648 908 -6,5 <0,001 49 104
T. denticola 2335 9447 1110 -6,0 <0,001 49 104
12
вестник РГМУ I 4, 2015 | VESTNIKRGMU.rU
article i stomatology
Таблица 3. Взаимосвязь между гиперколонизацией пародонта P. intermedia и другими патогенами при анализе общей выборки пациентов
Микроорганизм A. actinomycetemcomitans P. gingivalis P intermedia T. forsythensis T. denticola Значение p
A. actinomycetemcomitans >0,05 >0,05 >0,05 >0,05
P. gingivalis 0,14 <0,001 <0,001 <0,001
P intermedia -0,061 0,36 <0,001 <0,001
T. forsythensis -0,054 0,51 0,48 <0,001
T. denticola -0,0077 0,46 0,46 0,6
Коэффициент Спирмена
Таблица 4. Взаимосвязь между гиперколонизацией пародонта P. intermedia и другими патогенами при анализе контрольной группы
Микроорганизм A. actinomycetemcomitans P. gingivalis P. intermedia T. forsythensis T. denticola Значение p
A. actinomycetemcomitans <0,01 >0,05 >0,1 <0,01
P. gingivalis 0,36 >0,05 >0,05 >0,05
P. intermedia -0,065 -0,03 >0,05 >0,05
T. forsythensis 0,037 0,017 0,16 <0,05
T. denticola 0,3 0,12 0,054 0,24
Коэффициент Спирмена
Таблица 5. Взаимосвязь между гиперколонизацией пародонта P intermedia и другими патогенами при анализе группы пациентов с хроническим пародонтитом
Микроорганизм A. actinomycetemcomitans P. gingivalis P. intermedia T. forsythensis T. denticola Значение p
A. actinomycetemcomitans >0,1 >0,1 <0,05 <0,05
P. gingivalis 0,0059 <0,01 <0,001 <0,001
P. intermedia -0,11 0,3 <0,05 <0,001
T. forsythensis -0,19 0,48 0,26 <0,001
T. denticola -0,22 0,31 0,33 0,39
Коэффициент Спирмена
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Применение критерия Манна-Уитни позволило подтвердить существенное влияние пародонтопатогенов «красного комплекса» — P gingivalis, P intermedia,T. forsythensis, T. denticola — на развитие хронического пародонтита. Однако достоверность различий между основной и контрольной группами, полученных для P intermedia, оказалась ниже, чем для остальных пародонтопатогенов. Это, вероятно, связано с относительной редкостью P intermedia у пациентов (7,7 % — в случае нормы, 55 % — в случае патологии). Более того, не было зафиксировано ни одного случая заболевания пародонтитом, при котором наблюдалась бы патологическая обсемененность P intermedia без одновременной патологической колонизации пародонта каким-либо патогеном «красного комплекса».
Таким образом, применительно к P intermedia невозможно говорить о ее поведении при моноинфекции, в отличие, например, от P gingivalis. Подтверждение этого факта было получено при разделении выборки по признаку наличия/отсутствия патологической обсемененности пародонта P intermedia.
При этом была выявлена выраженная тенденция к формированию комплекса этого патогена с T. forsythensis, а также с T denticola и P gingivalis. Эти результаты полностью
Литература
1. Michalowicz BS. Genetic and heritable risk factors in periodontal disease. J Periodontol. 1994; 65: 479-488.
2. Page RC. Critical issues in periodontal research. J Dent Res. 1995; 74: 1118-1128.
3. Tanner ACR, Kent R Jr., Dyke Van Т, Sonis ST, Murray LA. Clinical and other risk indicators for early periodontitis in adults. J Periodontol. 2005; 76 (4): 573-581.
4. Atieh MA. Accuracy of real-time polymerase chain reaction versus anaerobiccultureindetectionofAggregatibacteractinomycetemcomitans
подтвердились и при исследовании корреляций по методу Спирмена: патологическая обсемененность P intermedia показывает связь высокой силы с наличием на пародонте комплекса T. forsythensis / T. denticola, в то время как корреляция с гиперколонизацией пародонта P gingivalis заметно слабее.
ВЫВОДЫ
Можно утверждать, что P. intermedia является достаточно опасным пародонтопатогеном. Обнаружение этого микроорганизма на пародонте с высокой долей вероятности позволяет прогнозировать тяжелое течение хронического пародонтита. Это заключение дает основание рассматривать уровень колонизации пародонта P. intermedia как важный диагностический критерий. При этом P intermedia не выступает в роли инициатора патологических процессов, но вносит значительный вклад в развитие сочетанной инфекции пародонта, участвуя в коинфекции с комплексом T. forsythensis / T. denticola.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (гос. задание № 19.1724.2014/К в сфере научной деятельности).
and Porphyromonas gingivalis: a meta-analysis. J Periodontol. 2008; 79 (9): 1620-9.
5. Cortelli JR, Cortelli SC, Jordan S, Haraszthy VI, Zambon JJ. Prevalence of periodontal pathogens in Brazilians with aggressive or chronic periodontitis. J Clin Periodontol. 2005; 32 (8): 860-6.
6. Finoti LS, Anovazzi G, Pigossi SC, Corbi SC, Teixeira SR, Braido GV et al. Periodontopathogens levels and clinical response to periodontal therapy in individuals with the interleukin-4 haplotype associated with susceptibility to chronic periodontitis. Eur J Clin Microbiol Infect Dis.
вестник РГМУ I 4, 2015 | VESTNIKRGMU.rU
13
статья i стоматология
2013; 32 (12): 1501-9.
7. Hyvarinen K, Laitinen S, Paju S, Hakala A, Suominen-Taipale L, Skurnik M, et al. Detection and quantification of five major periodontal pathogens by single copy gene-based real-time PCR. Innate Immun. 2009; 15 (4): 195-204.
8. Heasman PA, Hughes FJ. Drugs, medications, and periodontal disease. Br Dent J. 2014; 217 (8): 411-9.
9. Suzuki N, Yoneda M, Hirofuji T Mixed red-complex bacterial infection in periodontitis. Int J Dent. 2013; 2013: 587279-85.
10. Ximenez-Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS. Comparison of the microbiota of supra-and subgingival plaque in health and periodontitis. J Clin Periodontol. 2000; 27: 648-657.
11. Gmur R, Guggenheim B. Interdental supragingival plaque a natural
References
1. Michalowicz BS. Genetic and heritable risk factors in periodontal disease. J Periodontol. 1994; 65: 479-488.
2. Page RC. Critical issues in periodontal research. J Dent Res. 1995; 74: 1118-1128.
3. Tanner ACR, Kent R Jr., Dyke Van Т, Sonis ST, Murray LA. Clinical and other risk indicators for early periodontitis in adults. J Periodontol. 2005; 76 (4): 573-581.
4. Atieh MA. Accuracy of real-time polymerase chain reaction versus anaerobiccultureindetectionofAggregatibacteractinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis: a meta-analysis. J Periodontol. 2008; 79 (9): 1620-9.
5. Cortelli JR, Cortelli SC, Jordan S, Haraszthy VI, Zambon JJ. Prevalence of periodontal pathogens in Brazilians with aggressive or chronic periodontitis. J Clin Periodontol. 2005; 32 (8): 860-6.
6. Finoti LS, Anovazzi G, Pigossi SC, Corbi SC, Teixeira SR, Braido GV, et al. Periodontopathogens levels and clinical response to periodontal therapy in individuals with the interleukin-4 haplotype associated with susceptibility to chronic periodontitis. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2013; 32 (12): 1501-9.
7. Hyvarinen K, Laitinen S, Paju S, Hakala A, Suominen-Taipale L, Skurnik M, et al. Detection and quantification of five major periodontal pathogens by single copy gene-based real-time PCR. Innate Immun. 2009; 15 (4): 195-204.
habitat of Actinobacillus actinomycetemcomitans, Bacteroides forsythus, Campylobacter rectus, and Prevotella nigrescens. J Dent Res. 1994; 73 (8): 1421-8.
12. Lai H, Horita A, Chou CK, Guy AW. A review of microwave irradiation and actions of psychoactive drugs. IEEE Eng Med Biol Mag. 1987; 6 (1): 31-6.
13. Torrungruang K,Jitpakdeebordin S, Charatkulangkun O, Gleebbua Y. Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacte actinomycetemcomitans, and Treponema denticola / Prevotella intermedia co-infection areas associated with severe periodontitis in a thai population. PLoS One. 2015; 10 (8): 0136646.
8. Heasman PA, Hughes FJ. Drugs, medications, and periodontal disease. Br Dent J. 2014; 217 (8): 411-9.
9. Suzuki N, Yoneda M, Hirofuji T. Mixed red-complex bacterial infection in periodontitis. Int J Dent. 2013; 2013: 587279-85.
10. Ximenez-Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS. Comparison of the microbiota of supra- and subgingival plaque in health and periodontitis. J Clin Periodontol. 2000; 27: 648-657.
11. Gmur R, Guggenheim B. Interdental supragingival plaque a natural habitat of Actinobacillus actinomycetemcomitans, Bacteroides forsythus, Campylobacter rectus, and Prevotella nigrescens. J Dent Res. 1994; 73 (8): 1421-8.
12. Lai H, Horita A, Chou CK, Guy AW. A review of microwave irradiation and actions of psychoactive drugs. IEEE Eng Med Biol Mag. 1987; 6 (1): 31-6.
13. Torrungruang K,Jitpakdeebordin S, Charatkulangkun O, Gleebbua Y. Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, and Treponema denticola / Prevotella intermedia co-infection areas associated with severe periodontitis in a thai population. PLoS One. 2015; 10 (8): 0136646.
14
вестник РГМУ I 4, 2015 | VESTNIKRGMU.rU
