CC BY
85
УДК 547.466.3:616.895.4
© Н.Р. Кулешевская, М.А. Самотруева, И.Н. Тюренков,
Д.Л. Теплый, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, 2011
Н.Р. Кулешевская1, М.А. Самотруева1, И.Н. Тюренков2, Д.Л. Теплый3 В.М. Берестовицкая4, О.С. Васильева4
ИЗУЧЕНИЕ ПСИХОИММУНОКОРРИГИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ФЕНИБУТА
И ЕГО НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ДЕПРЕССИИ
РАЗНОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ
:ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России 2ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития
России
3ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет»
4ФГБОУ ВПО «Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена»,
г. Санкт-Петербург
Показано, что при экспериментальной депрессии, формирующейся в результате социальных конфронтаций, фенибут (25 мг/кг) и его производные под лабораторными шифрами РГПУ-29 (25 мг/кг), РГПУ-147 (50 мг/кг) и РГПУ-189 (50 мг/кг) восстанавливают гуморальное звено иммунитета и устраняют нарушения поведенческих реакций, что свидетельствует о наличии у изучаемых веществ выраженных психоиммунокорриги-рующих свойств. Субстанции изучаемых химических соединений (под шифрами РГПУ) были получены на кафедре органической химии Российского государственного педагогического университета им. А.Н. Герцена.
Ключевые слова: фенибут и его новые производные, психоиммуномодуляция, экспериментальная депрессия, метод конфликтных ситуаций.
N.R. Kuleshevskaya, M.A. Samotrueva, I.N. Tyurenkov, D.L. Teply,
V.M. Berestovitskaya, O.S. Vasilyeva
THE INVESTIGATION OF PSYCHOIMMUNOCORRECTING ACTIVITY OF PHENIBUT AND ITS DERIVATIVES IN EXPERIMENTAL DEPRESSION OF VARIOUS SEVERITY DEGREE
The article deals with the data about experimental depression formed in the result of social conflicts and usage of phenibut and its derivatives under laboratory codes RGPU-29 (25 mg/kg), RGPU-147(50mg/kg) and RGPU-189(50mg/kg) to restore humoral unit of immunity and liquidate damages of behavioral reaction, this fact shows the presence of special substances with psychoimmunocorrecting properties in observed persons. The substances of investigated chemical combinations (under code RGPU) were received at the department of organic chemistry of The Russian State Pedagogical University named after A.N. Gertsen.
Key words: phenibut, its new derivatives, psychoimmunomodulation, experimental depression, method of conflicting situations.
Развитие многих психопатологий и психосоматических заболеваний в значительной мере определяется нарушением механизмов психонейроиммуномодуляции, что, прежде всего, связано с изменением нейрохимической картины мозга и функционированием центральных нейромедиаторных систем (в том числе, ГАМК-ергической системы) [2, 4, 12]. Существуют убедительные данные, полученные в результате фармакологических, нейрофизиологических и нейрогенетических исследований, свидетельствующие в пользу того, что дисфункция ГАМК-ергической системы мозга является ведущим интегральным патогенетическим механизмом тревоги и депрессии [3, 10]. Поэтому поиск новых ГАМК-ергических средств, селективно подавляющих депрессию и одновременно обладающих иммуномодулирующими свойствами, является перспективным. Ранее в наших исследованиях мы выявили выраженную иммуномодулирующую активность фенибута и его новых производных на моделях экспериментальной иммунопатологии (иммунодепрессия и иммунный стресс), что объясняет наш интерес именно к этой группе веществ [5, 6, 7, 8].
Цель: изучение психоиммунокорригирующей активности фенибута и его новых производных под лабораторными шифрами РГПУ-29, РГПУ-147 и РГПУ-189 в условиях экспериментальной депрессии разной степени тяжести.
Материалы и методы. Исследование выполнено на 120 крысах-самцах линии Wistar 5-6месячного возраста. Для выработки альтернативных типов поведения применяли модель одновременного формирования агрессивного и подчиненного (субмиссивного) поведения самцов в условиях парного дистантного сенсорного контакта [1]. Перед экспериментом животных помещали в одиночные клетки для снятия групповых влияний на 2-3 дня. Затем их попарно рассаживали в экспериментальные металлические клетки размером 28 X 14 X 10 см, разделенные на два отсека прозрачной перегородкой с отверстиями, которая исключала физический контакт животных, но позволяла особям видеть и воспринимать запахи друг друга. После двухдневного сенсорного контакта в одно и то же время суток начиналось ежедневное тестирование конфронтаций самцов. Тестирование проходило следующим образом: животные адаптировались 5 мин к новому освещению после смены крышки клетки на прозрачное оргстекло. Затем перегородка, разделявшая мышей, убиралась на 10 мин, что обычно приводило к агонистическому взаимодействию самцов [1]. Параметрами подчиненного поведения служили проявления поз вертикальной и боковой защиты, бегство от нападающего противника, наличие поз пассивной защиты (позы «замирание» и «на спине»). У агрессивных крыс учитывали число атак во время теста, латентное время первой атаки и продолжительность каждой атаки. Закрепление агрессивного и субмиссивного типа поведения осуществляли в течение 10 (N10) и 20 (N20) дней. Группа животных с патологией составляла контроль 2. Контролем 1 служили животные, рассаженные на 5 дней в индивидуальные клетки по одному для снятия групповых влияний. Опытные группы животных (опыт №1-4) с оппозитными формами поведения (каждая группа была разделена на агрессоров и жертв) получали внутрибрюшинно в течение 10 дней (1 раз в сутки) фенибут (25 мг/кг), РГПУ-29 (25 мг/кг), РГПУ-147 (50 мг/кг) и РГПУ-189 (50 мг/кг), соответственно.
Изучение влияния фенибута и его органических солей на формирование гуморального звена иммунного ответа проводили на основе реакции прямой гемагглютинации (РГА) [9]. Уровень тревожности животных определяли с использованием общепринятого теста «Приподнятый крестообразный лабиринт» [9].
Все манипуляции с животными проводили, соблюдая принципы Good Laboratory Practice [11]. Полученные результаты подвергали статистической обработке: достоверность различий оценивали с помощью критерия Стьюдента (t) с поправкой Бонферрони для множественных сравнений.
Результаты исследования и их обсуждение. Результаты нашего исследования показали, что межсамцовые конфронтации в течение 20 дней способствовали снижению образования антиэрит-роцитарных антител в прямой РГА более чем на 20 % по сравнению с интактными животными (p1 < 0 ,05). Установлено, что у животных с экспериментальной депрессией легкой степени (N10) изменения иммунореактивности имеют разнонаправленный характер: у агрессоров отмечено снижение титра антител на 17 % (pj < 0,05), тогда как у жертв выявлено увеличение данного показателя более чем на 15 % (pj < 0,05).
Фенибут и его новые производные, применяемые в опытных группах после 20 конфронтаций, проявили себя как иммунокорректоры: титр антител достигал фоновых значений в контроле 1. Введение же изучаемых веществ у крыс опытных групп после 10 конфронтаций сопровождалось активацией гуморального звена иммуногенеза: титр антител превышал соответствующие значения в контроле 2 (p2 < 0,05).
Агрессия и субмиссия, сформированная в течение 10 дней, в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт» проявлялась снижением времени нахождения в открытых рукавах и количества поведенческих актов (стойки, исследовательские «свешивания» и «выглядывания», переходы) по сравнению с контролем 1 (pi < 0,05). По мере увеличения стрессирующего воздействия до 20 агонистических взаимодействий у депрессированных животных (и агрессоров, и жертв) снижение исследовательского поведения и повышение общего уровня тревожности (р1 < 0,05) было выражено в большей степени.
и
И
ь
ч
е
н
8
Н
=
р
н
8
Н
2.5 2
1.5 1
0,5
0
1
2
3
4
5
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
2,5
1 1,5
Ег 0,5
0
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
3
2
1
1
2
3
4
5
6
6
Рис. 1. Влияние фенибута и его производных на формирование прямой РГА у крыс после 10 и 20 межсамцовых конфронтаций
Примечание: А — р < 0,05 по сравнению с контролем 1; х — р < 0,05 по сравнению с контролем 2.
1 — контроль 1 (физ. раствор); 2 — контроль 2 (модель депрессии); 3 — РГПУ-29 (25 мг/кг) + модель депрессии; 4 — РГПУ-147 (50мг/кг) + модель депрессии; 5 — РГПУ-189 (50мг/кг) + модель депрессии;
6 — Фенибут (25 мг/кг) + модель депрессии.
Установлено, что фенибут и его производные обладают выраженным антидепрессивным действием, что проявляется в увеличении времени пребывания в светлом отсеке лабиринта у опытных животных N10 и N20 в 3 и 4 раза, соответственно, по сравнению с контролем 2 (Р2 > 0 ,05). Изучаемые вещества в используемых дозах после 20 конфронтаций существенно не повлияли на вертикальную активность: количество стоек не достигло значений контроля 1 (Р2 > 0 ,05). Ориентировочно-исследовательская активность животных после 10 конфронтаций на фоне введения изучаемых веществ претерпела существенные изменения: количество вертикальных стоек увеличилось у агрессоров и у жертв более чем на 40 % по сравнению с контролем 2 (Р2 < 0 ,05). Кроме того, у крыс опытных групп после введения фенибута и его производных выявлено увеличение количества переходов между закрытыми рукавами лабиринта и исследовательских «свешиваний» с открытых рукавов (р2 < 0,05). Важно отметить, что наиболее выраженные корригирующие свойства в отношении нарушений психоэмоционального статуса проявляло соединение под лабораторным шифром РГПУ-189, что делает его перспективным для дальнейшего углубленного изучения.
Таким образом, фенибут и новые органические производные под лабораторными шифрами РГПУ-29, РГПУ-147 и РГПУ-189 проявили себя как эффективные психоиммунокорректоры, восстанавливая процесс антителообразования и оказывая положительное влияние на психоэмоциональный статус животных с экспериментальной депрессией, смоделированной в результате межсамцовых конфронтаций.
Агрессоры
Жертвы
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
8
О
Ч
н
о
и
и
и
-
7
о
а
03
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
5
*
Я
О
н
и
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
5
*
Я
О
т
и
10
8
6
4
2
0
1 2 3 4 5 6
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
-а £
5 2
Н _
в 2 о в
ч: в '■ л й В Е о
м
5
О
її
2,5-
1,5
0,5
д
31
і І І І I
12 3 4
5 6
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
л
н
3
а
н
о
н _ «
в 2 о в
ч: в
о сз
Ч в у в
у 9
а в
Й
2,5-|
1,5
0,5
X
----ПЬ
а
2 3
5 6
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
Рис. 2. Влияние фенибута и его производных на поведение животных в «Приподнятом крестообразном лабиринте» после 10 и 20 межсамцовых конфронтаций
Примечание: А — р < 0,05 по сравнению с контролем № 1; х — р < 0,05 по сравнению с контролем 2. 1 — контроль 1 (физ. раствор); 2 — контроль 2 (модель депрессии); 3 — РГПУ-29 (25 мг/кг) + модель депрессии; 4 — РГПУ-147 (50 мг/кг) + модель депрессии; 5 — РГПУ-189 (50 мг/кг) + модель депрессии; 6 — Фенибут (25 мг/кг) + модель депрессии.
1
2
3
4
5
6
3
2
2
1
1
0
0
1
4
и
о
и
я
а
а И
М 3
2 £
4 &
5 «
*
и
о
и
я
а
^ я
& а
м я 5 *
м ^
£ а
<5 «
И
3
2.5 2
1.5
1 + 0,5 0
ЗЕВ
Ш
-
ь
1 2 3 4 5 6
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
а в * Ъ
В -в
В Я
49 Й 2 ^
£ Ё ч -в
а I
м 3
еч а я
сз
м
А -о
£ а
X
* ч -в
^ 5 £
м й ~
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
□ 10 конфронтаций □ 20 конфронтаций
Рис. 2. Влияние фенибута и его производных на поведение животных в «Приподнятом крестообразном лабиринте» после 10 и 20 межсамцовых конфронтаций (продолжение)
Список литературы
1. Августинович, Д. Ф. Экспериментальная тревожная депрессия и серотонинергическая система мозга : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / Д. Ф. Августинович. - Новосибирск, 2008. - 35 с.
2. Аведисова, А. С. Нейропластичность и патогенез депрессии : новые данные / А. С. Аве-дисова // Психиатрия и психофармакотерапия. - 2004. - № 6. - С. 312-314.
3. Калуев, А. В. Роль ГАМК в патогенезе тревоги и депрессии - нейрогенетика, нейрохимия и нейрофизиология / А.В. Калуев // Нейронауки. - 2006. - № 2. - С. 29-48.
4. Крыжановский, Г. Н. Нейроиммунопатологические механизмы в типовых патологических процессах в центральной нервной системе / Г. Н. Крыжановский, С. В. Магаева // Нейроиммунология : сб. тр. X Конференции. - 2001. - Т. 2. - С. 51-53.
5. Самотруева, М. А. Оценка иммунокорригирующей активности фенибута / М. А. Само-труева, А. Н. Овчарова, И. Н. Тюренков // Вестник новых медицинских технологий. - 2008. -№ 3.- С. 168-169.
6. Самотруева, М. А. Иммунорегуляторное действие фенибута в условиях липополисаха-рид-индуцированного иммунного стресса / М. А. Самотруева, И. Н. Тюренков, Д. Л. Теплый и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2010. - № 5. - С. 30-32.
7. Тюренков, И. Н. Сравнительное изучение иммунокорригирующей активности фенибута и его органических солей при экспериментальном иммунодефиците / И. Н. Тюренков, М. А. Самотруева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - № 5. - С. 536-539.
8. Тюренков, И. Н. Экспериментальное обоснование применения фенибута как модулятора иммунного ответа / И. Н. Тюренков, М. А. Самотруева, Н. Р. Кулешевская, Т. К. Сережникова // Фармация. - 2010. - № 4. - С. 42-44.
9. Хаитов, Р. М. Руководство по экспериментальному доклиническому изучению новых фармакологических веществ / Р. М. Хаитов, И. С. Гущин, Б. В. Пинегин и др.; под ред. Р. У. Хаб-риева. - М. : Медицина, 2005. - 840 с.
10. Anisman, H. Cascading effects of stressors and inflammatory immune system activation : implications for major depressive disorder / H. Anisman // J. Psychiatry Neurosci. - 2009. - № 34 (1). -P. 4-20.
11. GLP: Principles of Good Laboratory Practice as specified by national. German Chemicals Law, Annex 1, 20 June 2002) and international (OECD, Paris, 1998; EC Directive 2004/10/ EC, 11. February 2004.
12. Moynihana, J. A. Brain Behavior and Immunity : twenty years of T cells / J. A. Moynihana, F. M. Santiago // Brain Behav Immun. - 2007. - Vol. 21 (7). - P. 872-880.
Кулешевская Надия Растямовна, соискатель кафедры ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразви-тия России, заместитель главного врача по медицинской части МБУЗ «Приволжская ЦРБ», Россия, 414000,
г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел. (8512) 52-41-43, e-mail: kuly80@mail.ru.
Самотруева Марина Александровна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел. (8512) 5241-43, e-mail: ms1506@mail.ru.
Тюренков Иван Николаевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, д. 1, (8442) 97-81-80, e-mail: fibfuv@mail.ru.
Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и морфологии человека и животных ГОУ ВПО «Астраханский государственный университет» Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1.
Берестовицкая Валентина Михайловна, Заслуженный деятель науки РФ, профессор, доктор химических наук, заведующая кафедрой органической химии ФГБОУ ВПО «Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена», Россия, 191186, г. Санкт-Петербург, Набережная реки Мойки,
д. 48.
Васильева Ольга Сергеевна, кандидат химических наук, старший научный сотрудник ФГБОУ ВПО «Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена», Россия, 191186, г. Санкт-Петербург, Набережная реки Мойки, д. 48.
