Научная статья на тему 'ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ CIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL'

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ CIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
61
16
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
CIRSIUM HETEROPHYLLUM HILL / ВОДНОЕ ИЗВЛЕЧЕНИЕ ЛИСТЬЕВ / ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ / ЦИНАРОЗИД / ПЛЕТИЗМОМЕТР

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Касьянов З. В., Якушина К. Е., Утушкина Т. А., Апушкин Д. Ю., Андреев А. И.

Интересным представляется изучение биологической активности экстрактов листьев Cirsium heterophyllum. Опыт применения в народной медицине и предварительные исследования указывают на потенциальное наличие противовоспалительной активности у данного вида сырья. Целью работы было изучение противовоспалительной активности водного извлечения листьев Cirsium heterophyllum. Материалами для исследования служили водные экстракты листьев Cirsium heterophyllum, заготовленных в д.Васильевка в окрестностях г. Перми Пермского края России. Экстракты стандартизировались по содержанию флавоноидов в пересчете на цинарозид. Для изучения противовоспалительной активности использовался метод модельного каррагенинового отека на аутбредных мышах стока линии ICR (CD-1) и аутбредных крысах стока линии Wistar. В качестве препарата сравнения использовался диклофенак. Исследуемые вещества растворяли в 2% крахмальном растворе и вводили животным внутрибрюшинно. Замер лап животных выполнялся гидрометрически и фотометрически. Проведенные исследования показывают, что водные извлечения проявляют мягкое действие по сравнению с диклофенаком. На мышах процент торможения отёка на 4-ом часе равен 19% (p-значение = 0,0310) и 20% (p-значение = 0,0130) для фотометрии и гидрометрии соответственно. На крысах процент торможения отёка на 1-ом часе равен 47% (p-значение = 0,0300) и на 3 часе 28,7% (p-значение = 0,0170) для гидрометрии, фотометрия данные результаты не подтвердила. В ходе эксперимента выяснено, что водное извлечения Cirsium heterophyllum обладает мягкой активностью по сравнению с диклофенаком, что может быть связано с взаимным действием веществ экстракта при применении внутрибрюшинно, а также большим присутствием полисахаридов в водном экстракте. Дальнейшие исследования могут изучить, что противовоспалительная активность водного извлечения, возможно, лучше проявится в сочетании с ранозаживляющим действием при наружном применении.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Касьянов З. В., Якушина К. Е., Утушкина Т. А., Апушкин Д. Ю., Андреев А. И.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

A STUDY OF ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY OF AN AQUEOUS EXTRACT OF СIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL. LEAVES

The biological activity of extracts from Cirsium heterophyllum leaves is of interest. Traditional medicine and preliminary studies indicate that this raw material may have the potential for anti-inflammatory activity. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory activity of an aqueous extract of Cirsium heterophyllum leaves. We studied the anti-inflammatory activity of aqueous extracts of Cirsium heterophyllum leaves harvested in Vasilyevka village, Perm district, Perm territory (kray), Russia. The extracts were standardized for the content of flavonoids in terms of cynaroside. To study the anti-inflammatory activity, we used carrageenan-induced paw edema model in outbred ICR (CD-1) mice and outbred Wistar rats. Diclofenac was used as a reference drug. The test substances were dissolved in a 2% starch solution and injected intraperitoneally to the animals. The paw volume was measured hydrometrically and photometrically. The study has shown that the aqueous extracts of Cirsium heterophyllum have a mild effect compared to diclofenac. In mice, the percentage of inhibition of edema at the 4th hour was 19% (p-value = 0.0310) and 20% (p-value = 0.0130) for photometry and hydrometry, respectively. In rats, the percentage of edema inhibition was 47% (p-value = 0.0300) at the 1st hour and 28.7% (p-value = 0.0170) at 3 hours for hydrometry; photometry did not confirm these results. The results suggest that the aqueous extract of Cirsium heterophyllum has a mild activity in comparison with diclofenac, which may be due to the mutual action of the extract substances when applied intraperitoneally, as well as the presence of polysaccharides in the aqueous extract. Further research is required to determine whether the anti-inflammatory activity of its aqueous extract might be better combined with wound healing effects when applied topically.

Текст научной работы на тему «ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ CIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL»

2022. Vol. 24. № 10

medical & pharmaceutical

JOURNAL "PULSE"

https://clinical-journal ru E-ISSN 2686-6838

ф

RESEARCH ARTICLE

3. Medical sciences

УДК 615.322; 615.012; 615.074; 615.076.9

Corresponding Author: Kasyanov Zakhar, Ph.D., Associate Professor of Pharmacology and Pharmacy Department, Perm State National Research University, Perm, Russia E-mail: [email protected]

© Kasyanov Z.V., Yakushina K.E., Utushkina T.A., Apushkin D.Y., Andreev A.I., Nepogodina E.A., Akhremenko E.A., Kovalenko I.I. - 2022

*** I Accepted: 20.10.2022

http://dx.doi.org/Z10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10-37-44

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ CIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL

Касьянов1 З.В., Якушина1 К.Е., Утушкина1 Т.А., Апушкин1'2 Д.Ю., Андреев1'2А.И., Непогодина2 Е.А., Ахременко1 Е.А., Коваленко1 И.И.

1ФГАУ ВО «Пермский государственный национальный исследовательский университет», г. Пермь, Российская Федерация

2ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России, г. Пермь, Российская Федерация

Аннотация. Интересным представляется изучение биологической активности экстрактов листьев Cirsium heterophyllum. Опыт применения в народной медицине и предварительные исследования указывают на потенциальное наличие противовоспалительной активности у данного вида сырья. Целью работы было изучение противовоспалительной активности водного извлечения листьев Cirsium heterophyllum. Материалами для исследования служили водные экстракты листьев Cirsium heterophyllum, заготовленных в д.Васильевка в окрестностях г. Перми Пермского края России. Экстракты стандартизировались по содержанию флавоноидов в пересчете на цинарозид. Для изучения противовоспалительной активности использовался метод модельного каррагенинового отека на аутбредных мышах стока линии ICR (CD-1) и аутбредных крысах стока линии Wistar. В качестве препарата сравнения использовался диклофенак. Исследуемые вещества растворяли в 2% крахмальном растворе и вводили животным внутрибрюшинно. Замер лап животных выполнялся гидрометрически и фотометрически. Проведенные исследования показывают, что водные извлечения проявляют мягкое действие по сравнению с диклофенаком. На мышах процент торможения отёка на 4-ом часе равен 19% (p-значение = 0,0310) и 20% (p-значение = 0,0130) для фотометрии и гидрометрии соответственно. На крысах процент торможения отёка на 1-ом часе равен 47% (p-значение = 0,0300) и на 3 часе 28,7% (p-значение = 0,0170) для гидрометрии, фотометрия данные результаты не подтвердила. В ходе эксперимента выяснено, что водное извлечения Cirsium heterophyllum обладает мягкой активностью по сравнению с диклофенаком, что может быть связано с взаимным действием веществ экстракта при применении внутрибрюшинно, а также большим присутствием полисахаридов в водном экстракте. Дальнейшие исследования могут изучить, что противовоспалительная активность водного извлечения, возможно, лучше проявится в сочетании с ранозаживляющим действием при наружном применении.

Ключевые слова: Cirsium heterophyllum Hill., водное извлечение листьев, противовоспалительная активность, цинарозид, плетизмометр.

A STUDY OF ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY OF AN AQUEOUS EXTRACT OF ORSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL. LEAVES

Kasyanov1 Z. V., Yakushina1 K.E., Utushkina1 T.A., Apushkin1'2D. Y., Andreev1'2A.I., Nepogodina2 E.A., Akhremenko1 E.A., Kovalenko1 I.I.

1Perm State National Research University, Perm, Russian Federation 2Perm State Pharmaceutical Academy, Perm, Russian Federation

Abstract. The biological activity of extracts from Cirsium heterophyllum leaves is of interest. Traditional medicine and preliminary studies indicate that this raw material may have the potential for anti-inflammatory activity. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory activity of an aqueous extract of Cirsium heterophyllum leaves. We studied the anti-inflammatory activity of aqueous extracts of Cirsium heterophyllum leaves harvested in Vasilyevka village, Perm district, Perm territory (kray), Russia. The extracts were standardized for the content of

>3

3

а

;<

3

a

^

s;

^

с

¡Í

с

о

о

а

^

3

>3

3

су

с

^

с

a

н

^

S

a

a

с

3

^

а

^

О

a

3

з"

§

о

^

О

1

о

^

а

a

с

с

>3

с

1

о

>3

с

a

£

а

е

a

а

^

S ^

сК*

^

а

<N

со

а

<N

а

S

с

1-п

к

к

к

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

lo

в

§

CT)

ci

i

о

£

s

3

8

о.

с

а:

m

https://ctinical-joumaL ru

E-ISSN 2686-6838

flavonoids in terms of cynaroside. To study the anti-inflammatory activity, we used carrageenan-inducedpaw edema model in outbred ICR (CD-1) mice and outbred Wistar rats. Diclofenac was used as a reference drug. The test substances were dissolved in a 2% starch solution and injected intraperitoneally to the animals. The paw volume was measured hydrometrically and photometrically. The study has shown that the aqueous extracts of Cirsium heterophyllum have a mild effect compared to diclofenac. In mice, the percentage of inhibition of edema at the 4th hour was 19% (p-value = 0.0310) and 20% (p-value = 0.0130) for photometry and hydrometry, respectively. In rats, the percentage of edema inhibition was 47% (p-value = 0.0300) at the 1st hour and 28.7% (p-value = 0.0170) at 3 hours for hydrometry; photometry did not confirm these results. The results suggest that the aqueous extract of Cirsium heterophyllum has a mild activity in comparison with diclofenac, which may be due to the mutual action of the extract substances when applied intraperitoneally, as well as the presence of polysaccharides in the aqueous extract. Further research is required to determine whether the anti-inflammatory activity of its aqueous extract might be better combined with wound healing effects when applied topically.

Key words: Cirsium heterophyllum, aqueous extract of leaves, anti-inflammatory activity, cynaroside, pletismometer

Введение: помимо синтетических лекарственных препаратов, по-прежнему, на повестке дня стоит вопрос поиска эффективных средств растительного происхождения с отсутствием побочных эффектов.

Род Cirsium L. (Asteraceae) представлен более 400 видами [1], которые являются многолетними и двулетними травянистыми растениями. На территории Средней Полосы России и Урала встречается около 20 видов [2, 3], относящихся к луговой и сорной флоре.

Современные мировые фармакологические исследования показали, что извлечения и компоненты растений Cirsium обладают широким спектром биоактивностей [4], таких как кровоостанавливающаяе (C. setosum) [5], гепатопротекторная (C. arisanense) [6], противовоспалительная и противомикробная (C. japonicum [4], C. eriophorum [7]), противодиабетическая (C. setosum) [8] и другими, что позволяет предположить, что растения Cirsium имеют важное лечебное значение.

Чтобы лучше понять материальную основу применения в медицине, было проведено множество фитохимических исследований видов Cirsium, которые показали, что флавоноиды [4, 9], тритерпеноиды [4, 8] и фенилпропаноиды [4, 6] являются основными активными фармакологически активными составляющими растений Cirsium.

Бодяк разнолистный (Cirsium heterophyllum Hill., Asteraceae) - многолетнее травянистое растение, широко распространенное в Европейской части России [2, 3]. В народной медицине применяют настои травы и листьев Cirsium heterophyllum при лечении астмы и туберкулеза [10]. В медицине коми-пермяков кашицу из свежих листьев (или листья целиком) накладывают на ссадины, ранки, фурункулы. Высушенные листья растирают в порошок и посыпают им гноящиеся раны [10]. Также отмечается, что настой листьев обладает противовоспалительным и тонизирующим действием, улучшает работу желудочно-кишечного тракта и печени [11].

Ранее были проведены некоторые исследования биологической активности извлечений сырья

Сп^шт heterophyllum. Водное извлечение листьев С. heterophyllum проявляет гемостатическую активность в опыте на цитратной крови кроликов, сопоставимую с препаратом сравнения этамзилатом [Касьянов, Непогодина]. Есть обрывочные данные, что сухой спиртовой экстракт С. heterophyllum листьев способен снижать острый воспалительный отек, вызванный субплантарным введением в заднюю лапу крысы водного раствора каррагенина [12]. Есть короткие сведения о полном снижении отека суммой флавоноидов травы С. heterophyllum в серотониновом тесте [13]. Также имеются сведения о биологической активности полисахаридного комплекса листьев, в частности, фракция гемицеллюлозы А оказывает

противовоспалительный эффект, сопоставимый с диклофенаком [14]. Кроме этого, есть данные о высокой ранозаживляющей активности

полисахаридных фракций листьев бодяка. Растворы пектиновых веществ и водорастворимого полисахаридного комплекса при поверхностном применении на модели асептической линейной раны кожи крысы оказывают ранозаживляющий эффект превосходит подобный у мази с настойкой календулы и сопоставим с действием крема Бепантен [15].

По литературным данным известно, что главным флавоноидным соединением Сггешт heterophyllum, собранном в Уральском регионе является лютеолин-7-О-Р-В-глюкопиранозид

(лютеолин-7-гликозид или цинарозид) [16].

Лютеолин-7-гликозид (цинарозид) -флавоноидное соединение, использующееся в качестве стандарта во многих методиках анализа, проявляет противовоспалительную активность в ряде экспериментов [17, 18].

Воспаление, как общебиологическая реакция на различные патогенные раздражители, лежит в основе многочисленной группы заболеваний и нередко приводит к длительной потере трудоспособности людей разного возраста. Несмотря на создание большого арсенала современных противовоспалительных препаратов и широкое их использование в клинической практике,

оэ п

E-ISSN 2686-6838

проблема изыскания новых эффективных и малотоксичных лекарственных средств, в том числе растительного происхождения, способных регулировать течение воспалительного процесса, в настоящее время остается весьма острой [19, 20].

Исходя из всего вышесказанного, авторы настоящей работы считают, что исследование противовоспалительных эффектов извлечений из листьев C. heterophyllum является актуальной задачей.

Целью настоящей работы является изучение противовоспалительной активности водного и извлечения листьев Cirsium heterophyllum (L.) Hill.

Основная часть

Материалы. Объектами исследования являлись водные извлечения листьев Cirsium heterophyllum. Сэмплинг листьев был произведен в июле 2020 г. (Пермский край, Пермский р-н, д. Васильевка). Иллюстрированный определитель растений Пермского края [3] был использован для подтверждения вида изучаемого растения.

Методика получения водных извлечений. Листья Cirsium heterophyllum измельчили до прохождения сквозь сито 1 мм. 5 г измельченного сырья поместили в колбу объемом 250 мл, залили горячей водой 100 мл, нагрели на водяной бане с обратным холодильником до кипения. Затем это извлечение охладили, профильтровали через вату, избегая попадания сырья на фильтр. Сырье залили 100 мл горячей воды и снова повторили нагревания на водяной бане и фильтрование через вату. Вторую операцию повторили еще раз. Сырье перенесли на ватный фильтр и отжали. Объединенные извлечения профильтровали через бумажный фильтр. Экстрагент сначала отгоняли до смолообразного состояния, затем аккуратно на выпарительных чашках в сушильном шкафу досуха.

При анализе водных извлечений C. heterophyllum и водных растворов стандартного образца (СО) цинарозида использовался прибор «СФ 2000» (Россия). Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид по следующей методике.

Определение суммы флавоноидов в водном экстракте. Около 0,5 г водного экстракта (точная навеска) растворяли в воде в мерной колбе 50 мл (раствор А). 1 мл раствора А перенесли в мерную колбу 25 мл прибавили 5 мл 2% водного раствора алюминия хлорида и 0,1 мл 3% уксусной кислоты, затем довели водой содержимое колбы до 25 мл. Оставляли колбу на 45 минут для образования комплекса флавоноидов с алюминия хлоридом (раствор Б). Затем измеряли оптическую плотность при длине волны 396 нм относительно раствора сравнения (1 мл раствора А, растворенный в воде в мерной колбе на 25 мл).

Приготовление раствора стандартного образца цинарозида и определение его оптической плотности. Около 0,01 г (точная навеска) цинарозида помещали в мерную колбу 50 мл, растворяли в 30 мл воды при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры, его объем доводили соответствующим растворителем до метки (раствор А цинарозида). 1 мл раствора А цинарозида помещали в мерную колбу на 25 мл, прибавляли 5 мл 2% водного раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки водой (испытуемый раствор Б цинарозида). Измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 396 нм относительно раствора сравнения (1 мл раствора А цинарозида, растворенный в соответствующем растворителе в мерной колбе на 25 мл). Расчет содержания суммы флавоноидов. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид в процентах (X) вычисляли по формуле (1):

0хтох1хрх50х25х100 йхтохР

X, % = ............. = ^ ..... (1)

Dox50x25xlxmxl00

Doxm

где D - оптическая плотность испытуемого раствора; D0 - оптическая плотность раствора СО цинарозида; m - масса экстракта, г; m0 - масса СО цинарозида, г; P - содержание основного вещества в СО цинарозида, %

Экспериментальные животные. В эксперименте использовались белые лабораторные аутбредные крысы стока линии Wistar массой 150-200 г (Опыт №1) и белые лабораторные аутбредные мыши стока линии ICR (CD-1) массой 20-30 г (Опыт №2). Подготовка животных включала отбор по полу, возрасту и состоянию здоровья. В рамках выделенной субпопуляции был выполнен рандомизированный отбор с использованием генератора случайных чисел в экспериментальные группы по 6 животных для крыс и по 10 для мышей (Опыт №1 - 2 экспериментальные группы, 1 контрольная, 1 группа препарата сравнения; Опыт №2 - 1 экспериментальная группа, 1 контрольная, 1 группа препарата сравнения) [21]. Животные в группах маркировались методом нанесения сквозных индивидуальных меток. Проверка качества рандомизации выполнялась на основе тестирования значимости сдвигов масс и гомогенности дисперсий - до эксперимента. Протокол исследования соответствовал этическим принципам и нормам проведения биомедицинских исследований с участием животных.

Оценка противовоспалительной активности:

Стандартизированную исследуемую

субстанцию растворяли в 2% крахмальном растворе, и вводили животным внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг (внутренний стандарт) за 40 минут до введения 1% раствора каррагенина. В качестве

Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10 —--—

https://clinical-journal. ru

E-ISSN 2686-6838

препарата сравнения использовали таблетки диклофенака 0,05 г, покрытые кишечнорастворимой оболочкой производства ООО «Озон» г. Жигулёвск. В качестве эквивалентного стрессового воздействия животным в контрольной группе вводился 2% крахмальный раствор, объём которого рассчитывался аналогичным с веществами методом. Индуктором отёка являлся 1% раствор гамма-каррагенина.

Модель экссудативного воспаления -каррагенинового отёка лапы, моделировалась согласно руководящим документам в данной области доклинических исследований [22]. Замер лапы выполнялся онкометрическим методом двумя способами: гидро- и фотометрия.

Гидрометрия. Установка представляет собой штатив для титрования, на котором закреплена микробюретка объёмом 5 мл для крыс и 2 мл для мышей. Носик микробюретки находится непосредственно над сосудом ^=14.5 мм (крысы), d=8.5 мм (мыши)) с водой дистиллированной, из которого вода будет выливаться в объёме, вытесненном при погружении лапы животного.

Фотометрия. Установка представляет собой цифровой безводный плетизмометр. В плетизмометре применяется оптическая трехмерная измерительная система, которая вычисляет объём лапы на основании изображений с нескольких цифровых камер [23].

Схема проведенного эксперимента может быть представлена в 4-х стадиях. Во-первых, было проведено онкометрическое определение фоновых (до введения исследуемых веществ и индуктора отёка) значений объёма лапы у животных с помощью гидрометрического и фотометрического способа. Затем было осуществлено внутрибрюшинное введение веществ в запланированных дозах, основанных на

индивидуальной массе каждого животного. После этого произведено субплантарное введение индуктора отёка каждому животному в размере 0,1 мл (крысы) или 0,01 мл (мыши). И в конце определены онкометрические значения объёма лапы у животных с помощью гидрометрического и фотометрического способа через 1, 3 и 5 часа (или через 1 час и 4 часа) после индукции отёка.

Противовоспалительный эффект, оценивался по уменьшению объёма отека в экспериментальных группах по сравнению с контрольной. Для оценки противовоспалительной активности веществ использовали следующие показатели: значение процента прироста, значение процента торможения отёка.

Статистическая обработка результатов. Для

обработки данных экспериментов использовались непараметрические статистические методы во всех случаях, когда не выполнялись требования параметричности данных. Основными методами обработки данных являлись различные реализации одномерного и многомерного дисперсионного анализа, в том числе устойчивые к выбросам. В данном случае использовался непараметрический метод Вилкоксона (p-Wilcoxon signed-rank test), поправки на множественные сравнения не выполнялись. Исключение выбросов выполнялось по правилу «1.5 IQR» [24, 25].

Результаты и обсуждение. В таблицах 1 и 2 представлены данные о степени

противовоспалительной активности и способности водного экстракта Cirsium heterophyllum тормозить развитие отёка в остром эксперименте. Отрицательные значения следует считать нулевым приростом. Значения выделенные жирным -значения p <0,05.

Таблица 1.

Результаты эксперимента. Крысы стока-линии Wistar. Опыт №1.

Группа Медианный процент прироста, %

1 час 3 час 5 час

Прирост, % p-значение Прирост, % p-значение Прирост, % p-значение

Фотометрия

Контроль 34,4 0,0087 102,9 0,0043 70,0 0,0022

Диклофенак 11,0 0,2400 39,4 0,0410 31,3 0,0650

Уменьшение отёка, % 68,0 61,8 55,3

Водный экстракт 12,6 0,1800 70,5 0,3100 62,2 0,8100

Уменьшение отёка экстрактом, % 63,5 31,5 11,1

Гидрометрия

Контроль 45,1 0,0022 101,7 0,0050 83,2 0,0022

Диклофенак 7,1 0,0080 31,0 0,0080 47,9 0,0080

Уменьшение отёка, % 84,3 69,5 42,4

Водный экстракт 23,9 0,0300 72,5 0,0170 61,0 0,1260

Уменьшение отёка экстрактом, % 47,0 28,7 26,7

о

Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10 —--—

https: clinical-journal. ru

E-ISSN 2686-6838

Table 1.

Experimental results. Wistar line rats. Experiment №1.

Group Median percentage of increase %

1 hour 3 hour 5 hour

Increase, % p-value Increase, % p-value Increase, % p-value

Photometry

Control 34,4 0,0087 102,9 0,0043 70,0 0,0022

Diclofenac 11,0 0,2400 39,4 0,0410 31,3 0,0650

Inhibition of paw edema, % 68.0 61.8 55.3

Aqueous exctract 12,6 0,1800 70,5 0,3100 62,2 0,8100

Inhibition of paw edema by extract, % 63,5 31,5 11,1

Hydrometry

Control 45,1 0,0022 101,7 0,0050 83,2 0,0022

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Diclofenac 7,1 0,0080 31,0 0,0080 47,9 0,0080

Inhibition of paw edema, % 84,3 69,5 42,4

Aqueous exctract 23,9 0,0300 72,5 0,0170 61,0 0,1260

Inhibition of paw edema by extract, % 47,0 28,7 26,7

Таблица 2.

Результаты эксперимента. Мыши стока линии CD-1. Итоги. Опыт №2

Группа Медианный процент прироста, %

1 час 3 час 1 час 3 час

Прирост % p- значение Прирост % p- значение Прирост % p- значение Прирост, % p- значение

Фотометрия Гидрометрия

Контроль 18,4 0,0002 38,1 0,0002 37,5 0,1518 56,2 0,1516

Диклофенак 19,6 0,9160 27,5 0,0120 11,5 0,0040 8,4 0,0010

Уменьшение отёка, % -6,5 28,0 69,5 85,1

Водный экстракт 18,3 1,000 30,9 0,0310 28,8 0,2020 45,0 0,0130

Уменьшение отёка экстрактом, % 0,8 19,0 23,3 19,9

Table 2.

Experimental results. Mice line CD-1. Experiment №2

Group Median percentage of increase %

1 hour 3 hour 1 hour 3 hour

Increase, % p-value Increase % p-value Increase % p-value Increase % p-value

Photometry Hydrometry.

Control 18,4 0,0002 38,1 0,0002 37,5 0,1518 56,2 0,1516

Diclofenac 19,6 0,9160 27,5 0,0120 11,5 0,0040 8,4 0,0010

Inhibition of paw edema, % -6,5 28,0 69,5 85,1

Aqueous exctract 18,3 1,000 30,9 0,0310 28,8 0,2020 45,0 0,0130

Inhibition of paw edema by extract, % 0,8 19,0 23,3 19,9

E-ISSN 2686-6838

Результаты проведенного исследования

показывают, что изученные экстракты бодяка разнолистного обладают мягкой

противовоспалительной активностью:

Опыт №1. Процент торможения отёка на 1-ом часе равен 47% (р^аЬе = 0,0300) и на 3 часе 28,7% (р^а1ие = 0,0170) для гидрометрии, фотометрия данные результаты не подтвердила.

Опыт №2. Процент торможения отёка на 4-ом часе равен 19% (р^аЬе = 0,0310) для фотометрии и 20% (р^аЬе = 0,0130) для гидрометрии.

Следует отметить выраженный прирост объёма лапы в контрольных группах всех проведённых экспериментов, а также наличие профильной биологической активности у препарата сравнения диклофенака, что может косвенно

свидетельствовать о верно выбранном дизайне эксперимента и отсутствии критических ошибок на этапе его выполнения.

Также стоит заметить, что результаты, полученные с помощью гидрометрического способа

измерения объёма лапы у мышей в таком его исполнении, не могут считаться вполне корректными по причине недостаточной разрешающей способности, связанной, прежде всего, с гидростатическими особенностями самой конструкции мышиной установки.

Заключение: в ходе эксперимента выяснено, что водное извлечения Cirsium heterophyllum обладает мягкой активностью по сравнению с диклофенаком, что может быть связано с взаимным действием веществ экстракта при применении внутрибрюшинно, а также большим присутствием полисахаридов в водном экстракте. Литературные данные указывают на то, что у C. heterophyllum есть большой потенциал в плане биологической активности. Дальнейшие исследования, возможно, могут показать, что противовоспалительная активность водного извлечения лучше проявится в сочетании с ранозаживляющим действием при наружном применении.

REFERENCES

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК

[1]. Worldfloraonline.org [Internet]. An Online Flora of All Known Plants; c2022 [cited 2022 Aug 10]. Available from: http://www. worldfloraonline .org/

[2]. Maevsky PF. Flora of the middle zone of the European part of Russia. 11th ed. M.: Partnership of scientific publications KMK, 2014; 200. (in Russ.)

[3]. Ovesnov S.A. et al. Illustrated guide to plants of the Perm region. Perm: Book. mir, 2007; 743. (in Russ.)

[4]. Wei Luo, Bei Wu, Liangjie Tang, Guoyou Li, Hulan Chen, Xuemei Yin. Recent research progress of Cirsium medicinal plants in China. Journal of Ethnopharmacology. Volume 280. 2021. 114475. ISSN 0378-8741. doi: 10.1016/j.jep.2021.114475

[5]. Chang N, Li Y, Zhou M, Gao J, Hou Y, Jiang M, Bai G. The hemostatic effect study of Cirsium setosum on regulating a1-ARs via mediating norepinephrine synthesis by enzyme catalysis. Biomed Pharmacother. 2017 Mar;87:698-704. doi: 10.1016/j.biopha.2017.01.022. Epub 2017 Jan 12. PMID: 28088737.

[6]. Zhao ZW, Chang JC, Lin LW, Tsai FH, Chang HC, Wu CR. Comparison of the Hepatoprotective Effects of Four Endemic Cirsium Species Extracts from Taiwan on CCL-Induced Acute Liver Damage in C57BL/6 Mice. Int J Mol Sci. 2018 Apr 30;19(5): 1329. doi: 10.3390/ijms19051329. PMID: 29710853; PMCID: PMC5983772.

[7]. Laneri, S, Dini, I, Tito, A, et al. Plant cell culture extract of Cirsium eriophorum with skin pore refiner activity by modulating sebum production and inflammatory response. Phytotherapy Research. 2021; 35: 530- 540. https://doi.org/10.1002/ptr.6832

[8]. Li X, Zhong X, Wang X, Li J, Liu J, Wang K, Yue J, Yang X, Shang X, Lin S. Bioassay-Guided Isolation of Triterpenoids as a-Glucosidase Inhibitors from Cirsium setosum. Molecules. 2019 May 14;24(10):1844. doi: 10.3390/molecules24101844. PMID: 31091665; PMCID: PMC6571863.

[9]. Wang HC, Bao YR, Wang S, Li TJ, Meng XS. Simultaneous determination of eight bioactive components of Cirsium setosum flavonoids in rat plasma using triple quadrupole LC/MS and its application to a pharmacokinetic study. Biomed Chromatogr. 2019

[1]. Worldfloraonline [Электронный ресурс]. An Online Flora of All Known Plants. Режим доступа: http://www.worldfloraonline.org/ (дата обращения: 10.08.2022).

[2]. Маевский П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. 11-е изд. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2014. 635 с.

[3]. Овеснов С.А. и др. Иллюстрированный определитель растений Пермского края. Пермь.: Кн. мир, 2007. 743 с.

[4]. Wei Luo, Bei Wu, Liangjie Tang, Guoyou Li, Hulan Chen, Xuemei Yin. Recent research progress of Cirsium medicinal plants in China // Journal of Ethnopharmacology. 2021. Vol. 280. 114475. ISSN 03788741. doi: 10.1016/j.jep.2021.114475

[5]. Chang N, Li Y, Zhou M, Gao J, Hou Y, Jiang M, Bai G. The hemostatic effect study of Cirsium setosum on regulating a1-ARs via mediating norepinephrine synthesis by enzyme catalysis // Biomed Pharmacother. 2017 Mar;87. P.698-704. doi: 10.1016/j.biopha.2017.01.022.

[6]. Zhao ZW, Chang JC, Lin LW, Tsai FH, Chang HC, Wu CR. Comparison of the Hepatoprotective Effects of Four Endemic Cirsium Species Extracts from Taiwan on CCL-Induced Acute Liver Damage in C57BL/6 Mice // Int J Mol Sci. 2018 Apr 30;19(5):1329. doi: 10.3390/ijms19051329.

[7]. Laneri S, Dini I, Tito A, et al. Plant cell culture extract of Cirsium eriophorum with skin pore refiner activity by modulating sebum production and inflammatory response // Phytotherapy Research. 2021; 35: P. 530- 540. https://doi.org/10.1002/ptr.6832

[8]. Li X, Zhong X, Wang X, Li J, Liu J, Wang K, Yue J, Yang X, Shang X, Lin S. Bioassay-Guided Isolation of Triterpenoids as a-Glucosidase Inhibitors from Cirsium setosum // Molecules. 2019 May 14;24(10):1844. doi: 10.3390/molecules24101844.

[9]. Wang HC, Bao YR, Wang S, Li TJ, Meng XS. Simultaneous determination of eight bioactive components of Cirsium setosum flavonoids in rat plasma using triple quadrupole LC/MS and its application to a pharmacokinetic study // Biomed Chromatogr. 2019 Nov;33(11):e4632. doi: 10.1002/bmc.4632.

N

E-ISSN 2686-6838

Nov;33(11):e4632. doi: 10.1002/bmc.4632. Epub 2019 Aug 19. PMID: 31264241.

[10]. Makhlayuk V.P. Medicinal plants in folk medicine. 2nd edition. Saratov, Volga Book Publishing House. 1967. 560. (in Russ.)

[11]. Znaniemed.ru [Internet]. Medical knowledge library; c2022 [cited 2022 Aug 10]. Available from: https://znamemed.ru/pacTeHHe/6ogflK-pa3HonHCTHLiH

[12]. Kasyanov Z.V., Nepogodina E.A., Starkova A.V., Bukanova E.V. Phytochemical analysis and biological activity of extracts of the leaves of Cirsium heterophyllum. Journal of scientific articles "Health and education in the XXI century." 2018. Volume 20. №9. 100-103. doi: 10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-9-100-103. (in Russ.)

[13]. Ogurtsova L.N. Goleneva A.F., Syuzeva Z.F. Study of flavonoids of Cirsum heterophyllum, C. esculentum, C. oleraceum, C. palustre. Materials of the 2nd All-Union Congress of Pharmacists. Riga, 1974. 222-223. (in Russ.)

[14]. Kasyanov Z.V., Gankova K.L., Shustov M.V., Goldstein A.G. Analysis of the chemical composition and anti-inflammatory activity of the polysaccharide complex of Cirsium heterophyllum leaves. Journal of scientific articles "Health and education in the XXI century." 2018. Volume 20, №8. 94-98. doi:10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-8-94-98. (in Russ.)

[15]. Ivashkina E.I., Zakirova E.R., Chashchina S.V., Kasyanov Z.V. Study of the wound healing activity of water-soluble extracts from Cirsium heterophyllum leaves and Anthemis tinctoria herba. Bulletin of the Perm State Pharmaceutical Academy. 2020. 25. 114-116. (in Russ.)

[16]. Ogurtsova L.N., Syuzeva Z.F. Flavonoids of Cirsium heterophyllum. Chem Nat Compd 10, 90 (1974). https://doi.org/10.1007/BF00568241

[17]. Szekalska M, Sosnowska K, Tomczykowa M, Winnicka K, Kasacka I, Tomczyk M. In vivo anti-inflammatory and anti-allergic activities of cynaroside evaluated by using hydrogel formulations. Biomed Pharmacother. 2020 Jan; 121:109681. doi: 10.1016/j.biopha.2019.109681. Epub 2019 Nov 25. PMID: 31810125.

[18]. Zou Y, Zhang M, Zhang T, et al. Antioxidant and Anti-inflammatory Activities of Cynaroside from Elsholtiza bodinieri. Natural Product Communications. November 2018. doi:10.1177/1934578X1801301122

[19]. Furman, D., Campisi, J., Verdin, E. et al. Chronic inflammation in the etiology of disease across the life span. Nat Med 25, 1822-1832 (2019). https://doi.org/10.1038/s41591-019-0675-0

[20]. Deme P, Aluganti Narasimhulu C, Parthasarathy S. Evaluation of Anti-Inflammatory Properties of Herbal Aqueous Extracts and Their Chemical Characterization. J Med Food. 2019 Aug;22(8):861-873. doi: 10.1089/jmf.2019.0009. Epub 2019 Jun 26. PMID: 31241395; PMCID: PMC6686693.

[21]. Anglemyer A, Horvath HT, Bero L. Healthcare outcomes assessed with observational study designs compared with those assessed in randomized trials. Cochrane Database Syst Rev. 2014 Apr 29;2014(4):MR000034. doi: 10.1002/14651858 .MR000034.pub2.

[22]. Mironov A.N. Guidelines for conducting preclinical studies of drugs. Part one. M .: Grif i K, 2012. 944. (in Russ.)

[23]. Openscience.ru [Internet]. Digital anhydrous pletismometer; c2022 [cited 2021 Nov 27]. Available from:

http://www.openscience.ru/index.php?page=physio&item =001

[24]. Hollander M., Wolfe D. A., Chicken E. Nonparametric statistical methods. John Wiley & Sons, 2013. 848.

[10]. Махлаюк В.П. Лекарственные растения в народной медицине. Изд-е 2-е. Саратов, Приволж.кн, изд., 1967. 560 с.

[11]. Библиотека медицинских знаний [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://znaniemed.ru/растение/бодяк-разнолистный (дата обращения: 10.08.2022).

[12]. Касьянов З.В., Непогодина Е.А., Старкова А.В., Буканова Е.В. Фитохимический анализ и биологическая активность извлечений листьев бодяка разнолистного. Журнал научных статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2018. Т.20, №9. С. 100-103. doi: 10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-9-100-103

[13]. Огурцова Л.Н., Голенева А.Ф., Сюзева З.Ф. Изучение флавоноидов бодяка (разнолистного, съедобного, овощного, болотного) / // Мат-лы 2-го Всесоюз. съезда фармацевтов. Рига, 1974. С. 222-223.

[14]. Касьянов З.В., Ганькова К.Л., Шустов М.В., Гольдштейн А.Г. Анализ химического состава и противовоспалительная активность полисахаридного комплекса листьев бодяка разнолистного. Журнал научных статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2018. Т.20, №8. С. 94-98. doi:10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-8-94-98

[15]. Ивашкина Е.И., Закирова Э.Р., Чащина С.В., Касьянов З.В. Исследование ранозаживляющей активности водорастворимых извлечений из листьев бодяка разнолистного и травы пупавки красильной. Вестник ПГФА. 2020. N25. С. 114-116.

[16]. Ogurtsova L.N., Syuzeva Z.F. Flavonoids of Cirsium heterophyllum // Chem Nat Compd 1974. Vol. 10, P. 90. doi.org/10.1007/BF00568241

[17]. Szekalska M, Sosnowska K, Tomczykowa M, Winnicka K, Kasacka I, Tomczyk M. In vivo anti-inflammatory and anti-allergic activities of cynaroside evaluated by using hydrogel formulations // Biomed Pharmacother. 2020 Jan;121:109681. doi: 10.1016/j.biopha.2019.109681

[18]. Zou Y, Zhang M, Zhang T, et al. Antioxidant and Antiinflammatory Activities of Cynaroside from Elsholtiza bodinieri // Natural Product Communications. November 2018. doi:10.1177/1934578X1801301122

[19]. Furman D., Campisi J., Verdin E. et al. Chronic inflammation in the etiology of disease across the life span // Nat Med. 2019. Vol. 25. P. 1822-1832. doi.org/10.1038/s41591 -019-0675-0

[20]. Deme P, Aluganti Narasimhulu C, Parthasarathy S. Evaluation of Anti-Inflammatory Properties of Herbal Aqueous Extracts and Their Chemical Characterization // J Med Food. 2019 Aug;22(8):861-873. doi: 10.1089/jmf.2019.0009

[21]. Anglemyer A, Horvath H.T., Bero L. Healthcare outcomes assessed with observational study designs compared with those assessed in randomized trials // Cochrane Database Syst Rev. 2014 Apr 29;2014(4):MR000034. doi: 10.1002/14651858.MR000034.pub2.

[22]. Миронов А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.

[23]. Цифровой безводный плетизмометр / Современное оборудование для работы с животными [Электронный ресурс] Режим доступа: http://www.openscience.ru/index.php?page=physio&item =001 (дата обращения: 10.08.2022).

[24]. Hollander M., Wolfe D. A., Chicken E. Nonparametric statistical methods. John Wiley & Sons, 2013. 848 p.

[25]. Exploratory Data Analysis. In: The Concise Encyclopedia of Statistics. Springer, New York, NY, 2008. https://doi.org/10.1007/978-0-387-32833-1_136

https://clinical-journaL ru

2022. Vol. 24. № 10 Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10 E-ISSN 2686-6838

[25]. Exploratory Data Analysis. (2008) In: The Concise Encyclopedia of Statistics. Springer, New York, NY. https://doi.org/10.1007/978-0-387-32833-1_136

Contribution of authors. Kasyanov Z. V. - material collection, phytochemical analysis, literature review, text writing, Yakushina K.E. - statistical data processing, Utushkina T.A. - statistical data processing, Apushkin D. Yu. - concept and design of the study, data collection, Andreev A.I. - data collection, Nepogodina E.A. - phytochemical analysis, Akhremenko E.A. - data collection, Kovalenko I.I. - data collection

Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest. Kasyanov Z.V. - SPIN ID: 3227-8183; ORCID ID: 0000-0002-9758-3649 Yakushina K.E. - ORCID ID: 0000-0002-3050-0220 Utushkina T.A. - ORCID ID: 0000-0002-6314-1850 Apushkin D.Yu. - SPIN ID: 5268-6519; ORCID ID: 0000-0003-4459-5264 Andreev A.I. - SPIN ID: 2892-7750; ORCID ID: 0000-0002-3718-4830 Nepogodina E.A. - SPIN ID: 4132-6721; ORCID ID: 0000-0002-0572-8215 Akhremenko E.A. - SPIN ID: 8315-9400; ORCID ID: 0000-0003-0757-064X Kovalenko I.I. - SPIN ID: 5738-0770; ORCID ID: 0000-0003-4450-1184

For citation: Kasyanov Z.V., Yakushina K.E., Utushkina T.A., Apushkin D.Y., Andreev A.I., Nepogodina E.A., Akhremenko E.A., Kovalenko I.I. A STUDY OF ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY OF AN AQUEOUS EXTRACT OF QRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL. LEAVES. Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2022;24(10): 37-44. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10-37-44.

Вклад авторов. Касьянов З.В. - сбор материала, фитохимический анализ, обзор литературы, написание текста, Якушина К.Е. - статистическая обработка данных, Утушкина Т.А. - статистическая обработка данных, Апушкин Д.Ю. - концепция и дизайн исследования, сбор данных, Андреев А.И. - сбор данных, Непогодина Е.А. - фитохимический анализ, Ахременко Е.А. - сбор данных, Коваленко И.И. - сбор данных

Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Касьянов З.В. - SPIN ID: 3227-8183; ORCID ID: 0000-0002-9758-3649

Якушина К.Е. - ORCID ID: 0000-0002-3050-0220

Утушкина Т.А. - ORCID ID: 0000-0002-6314-1850

Апушкин Д.Ю. - SPIN ID: 5268-6519; ORCID ID: 0000-0003-4459-5264

Андреев А.И. - SPIN ID: 2892-7750; ORCID ID: 0000-0002-3718-4830

Непогодина Е.А. - SPIN ID: 4132-6721; ORCID ID: 0000-0002-0572-8215

Ахременко Е.А. - SPIN ID: 8315-9400; ORCID ID: 0000-0003-0757-064X

Коваленко И.И. - SPIN ID: 5738-0770; ORCID ID: 0000-0003-4450-1184

Для цитирования: Касьянов З.В., Якушина К.Е., Утушкина Т.А., Апушкин Д.Ю., Андреев А.И., Непогодина Е.А., Ахременко Е.А., Коваленко И.И. ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ CIRSIUM HETEROPHYLLUM (L.) HILL // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2022;24(10): 37-44. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-10-37-44.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.