CC BY
51
© Смирнов В.М., Сычев И.А., 2003 УДК 615.322:582.892.2].017:615.276
ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ ДОННИКА ЖЕЛТОГО
В.М. Смирнов, И.А. Сычев
Российский государственный медицинский университет, Москва, Рязанский областной институт развития образования
Изучали влияние полисахаридов растений донника желтого: водорастворимый полисахаридный комплекс - ВРПС, Пектин, Гемицеллюлоза А, Гемицеллюлоза Б - на течение воспалительного процесса в организме подопытных животных. Полисахариды оказывают сильное противовоспалительное действие, снижают лейкоцитоз, нормализуют СОЭ, уменьшают отек тканей воспа-
ленной конечности.
Создание препаратов на основе природного сырья, обладающих свойствами стимулировать защитные функции организма является актуальной задачей. Эти вещества дают возможность регулировать состояние иммунной системы, что необходимо при профилактике и лечении целого ряда патологий, сопровождающихся, в том числе, воспалительной реакцией. Особую важность эта проблема приобретает при лечении инфекционных заболеваний и разного рода воспалений.
Существуют данные о противовоспалительном, иммунокорригирующем, ранозаживляющем действии полисахаридов растительного происхождения [1,
2, 3, 6]. Известно, что полисахариды растений стимулируют процесс фагоцитоза, усиливают регенерационные и ан-тианемические процессы в организме
[3, 6].
В этой связи представляется важным исследование противовоспалительной активности полисахаридов растений Донника желтого.
Материалы и методы
Полисахариды различных групп получают из растений Донника желтого последовательной экстракцией. Водо-
растворимый полисахаридный комплекс (ВРПС), представляющий собой смесь поверхностных, инкрустирующих полисахаридов, гликопептидов и водорастворимого пектина, экстрагировали горячей водой 90°С, пектин - 1% раствором лимоннокислого аммония, Геми-циллюлозы А и Б - 5% и 25% растворами КОН соответственно. Полученные вещества осаждали этанолом 96%, очищали электродиализом и пере-осаждением. Полученные полисахариды представляют собой порошки от светло-серого до белого цвета, растворимые в горячей воде.
Все полисахариды различаются величиной молекулярной массы и моно-сахаридным составом. ВРПС и Пектин, а также Гемицеллюлоза А и Гемицеллюлоза Б близки между собой по составу и величинам молекулярных масс и по некоторым физико-химическим свойствам.
Из полисахаридов приготавливали 5% раствор для введения в организм подопытных животных.
Противовоспалительное действие полисахаридов изучали на 48 белых крысах У181аг обоего пола, массой 140170 грамм. Моделью воспаления служил отек, вызванный введением 0,1 мл
2,5% раствора формалина под апоневроз стопы одной из конечностей крысы [1, 4]. Для изучения динамики воспалительной реакции величину отека измеряли онкометрическим методом [5]. Критерием интенсивности отека являлось увеличение объема воспаленной конечности по сравнению с исходным. Объем конечности измеряли через 1, 2, 3, 4, 6, 24 часа после введения флого-генного агента, а затем раз в сутки. Кровь для анализа брали из хвостовой вены через четыре часа после введения формалина, а также на 3, 5, 7 и 9 сутки эксперимента. Определяли скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и количество лейкоцитов. Полисахариды вводили животным в дозе 0,5 г/кг за 2 часа до и через 2 часа после инъекции формалина, в последующие 9 суток - однократно. Противовоспалительную активность изучали в сравнении с бутадио-ном, который вводили животным в кровь (0,025 г/кг). Контрольные живот-
ные получали физиологический раствор в режиме введения препаратов.
Результаты и их обсуждение
Лечение подопытных животных различными полисахаридами Донника желтого сильно угнетало развитие воспалительного процесса и ускоряло нормализацию величины СОЭ, количество лейкоцитов в крови крыс и объема воспаленной конечности.
Препарат ВРПС уменьшал максимальную величину отека конечности, (максимальная величина отека развивается через четыре часа после введения формалина) по сравнению с контролем на 43,5±0,5%. Объем воспаленной конечности в случае введения ВРПС достигал нормы на пятые сутки эксперимента, у контрольных животных - на восьмые сутки (рис. 1). Количество лейкоцитов и величина СОЭ нормализовалась также на пятые сутки (табл. 1, 2).
200 J 180 -160 --140= =
120 Ф 100 1 ч.
2 ч.
4 ч.
3 сут. 5 сут. 8 сут.
Контроль И ВРПС
Рис. 1. Лечение воспаления препаратом ВРПС.
Лечение воспаления препаратом Пектин показало, что максимальная величина отека лапки была на 40,7±0,4% ниже, чем в контроле (рис. 2). Первоначальный объем конечности восстанавливался также на пятые сутки, у контрольных животных
- на восьмые сутки. Количество лейкоцитов и величина СОЭ достигали нормы на шестые сутки введения препПраиарактЕемицеллюлоза А умень-
шает максимальное развитие отека лапки подопытных крыс на 43,4±0,3% по сравнению с отеком конечности у контрольных животных, а нормальной величины объем конечности животного достигал на шестые сутки эксперимента (рис. 3). Количество лейкоцитов и СОЭ крови нормализуется на шестые сутки эксперимента у подопытных животных и на седьмые-восьмые сутки у животных контрольной группы.
Гемицеллюлоза Б несколько слабее уменьшает максимальный отек (на 41,6±0,1%), а нормы объем конечности достигает на шестые сутки (рис. 3). Количество лейкоцитов и величина СОЭ крови нормализуется на шестые сутки
введения препарата.
Таким образом, противовоспалительная активность наиболее высока у ВРПС и Пектина и несколько ниже у Гемицеллюлоз А и Б и не намного превосходит препарат бутадион (рис. 4).
Рис. 2. Лечение воспаления препаратом пектин.
Рис. 3. Лечение воспаления препаратом Г. А. и Г.Б.
Контроль
Бутадион
Рис. 4. Лечение воспаления препаратом бутадион.
Таблица 1
Количество лейкоцитов
Препарат Время после введения формалина
4 ч. 3 сут. 5 сут. 7 сут. До воздействия
Контроль 33528±192 19878±624 19391±328 11485±259 10820±395
Бутадион 28345±352 25837±724 15124±254 11425±230
ВРПС 31878±257 25937±602 19586±124 10255±211 10564±285
Пектин 32627±312 19428±215 16510±205 10854±205 11078±360
ГА 33165±324 24145±187 13927±253 10448±218 11325±255
ГБ 32828±656 24848±346 12825±254 11338±185 10754±328
P<0,05.
Таблица 2
Величина СОЭ
Препарат Время после введения формалина
4 ч. 3 сут. 5 сут. 6 сут. 8 сут. До воздействия
Контроль 2,7±0,3 3,4±0,3 2,6±0,3 1,3±0,2 1,4 ±0,2
Бутадион 2,4±0,1 2,3±0,2 1,8±0,2 1,4±02 1,5 ±0,3
ВРПС 2,9±0,3 2,3±0,2 1,9±0,2 1,6±0,2 1,3 ±0,1
Пектин 3,0±0,2 2,4±0,1 2,1±0,3 1,7±0,2 1,6 ±0,2
ГА 2,0±0,3 1,8±0,2 1,3±0,2 1,3±0,1 1,4 ±0,2
ГБ 2,1±0,3 1,7±0,2 1,4±0,2 1,3±0,2 1,5 ±0,1
Р<0,05.
По мнению некоторых авторов, механизм противовоспалительного действия полисахаридов и их комплексов может быть связан с их способностью ингибировать гиалорунидазу и кинино-вую систему за счет наличия больших неразветвленных гетерополярных цепей, а также связывать биологически активные вещества (гистамин, серотонин), оказывать влияние на проницаемость сосудистой стенки, имеющее первостепенное значение в патогенезе воспалительной реакции [7].
Кроме того, известно, что полисахариды растений, в том числе, полисахариды донника, стимулируют активность иммунной системы. Полисахариды донника стимулируют фагоцитоз, а также количество антителобразующих
клеток. Возможно, полисахариды стимулируют выработку интерлейкинов, интерферона [6, 7]. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности дальнейших исследований влияния полисахаридов Донника на иммунную систему, состояние ферментных систем, уровня пролиферативной активности клеток различных тканей.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аркадьева Г.Е., Алехова Т.М., Супиев Т.К. // Стоматология. - 1986. - Т.65, №2.
- С. 5-7.
2. Енгалычева Е.И., Рожкова В.Н., Ладыгина Е.Я. // Фармация. - 1982. - №2. - С. 37-39.
3. Застрожнова Н.Н., Ляшенко В.А., Дро-женников В.А. // Иммунология. - 1985. -№2. - С. 73-74.
4. Каманова Э.Г., Давидова В.А., Лазарева Д.Н. // Фармакология и токсикология. -1979. - Т.42, №3. - С. 261-265.
5. Крылова Н.В., Беседнова Н.Н., Соловьева Т.Ф. и др. // Антибиотики и химиотерапия. - 1990. - Т.35, №4. - С. 41-42.
6. Подколзин А.А., Донцов В.И., Сычев И. А. и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1996. - Т.65, №6. - С. 661663.
7. Ройт С. Основы иммунологии / С. Ройт.
- М.: Мир, 1987.
THE STUDY OF ANTIINFLAMMATORY ACTIVITY OF POLYSACCHARIDES ISOLATED
FROM MELILOTUS OFF
V.M. Smimov, I.A. Sychov
It was shown the process of adding of Melilotus off. Polysaccharides to animal organisms due to which we observe the strong antiinflammatory activity, the normalisation of leucocytes number and erythrocyte sedimentation rate, the decreasing of drops.
