CC BY
149
ЭКОЛОГИЯ
582.284.5 В.А. Власенко,
Т.В. Теплякова,
Н.А. Мазуркова, Т.А. Косогова,
А.В. Бердашева, Н.В. Псурцева
ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ГРИБОВ РОДА PHELLINUS S.L. В ЗАПАДНОЙ СИБИРИ
Ключевые слова: грибы, феллинус, трутовики, лекарственные грибы, биоактивные компоненты, противовирусная активность, лесостепь, Западная Сибирь.
Введение
Род феллинус (Phellinus s.l.) относится к базидиальным грибам семейства Hymeno-chaetaceae, по данным авторов и литературным данным в Западной Сибири он насчитывает 25 видов. В широком понимании он включает в себя виды, относящиеся в настоящее время также к родам
Phellinidium, Phellopilus, Porodaedalea, Phylloporia, выделенных из рода феллинус, и характеризуется преимущественно многолетними сидячими, распростерто-отогну-
тыми или распростертыми базидиомами с трубчатым гименофором, твердой, деревянистой консистенцией, тканью бурого цвета.
Грибы рода феллинус развиваются на живых деревьях и мертвой древесине хвойных и лиственных деревьев, вызывают белую гниль. Среди феллинусов наиболее известны и широко распространены в Западной Сибири такие виды, как Phellinus
chrysoloma (Fr.) Donk., Ph. hartigii (Allesch. et Schnabl) Pat., Porodaedalea pini (Brot.) Murrill, развивающиеся на хвойных деревьях, реже встречаются Ph. viticola (Schwein.) Donk., Ph. weirii (Murrill) Gilb., Phellinidium ferrugineofuscum (P. Karst.) Fiasson et Nieme^, Phellopilus nigrolimitatus (Romell)
Nieme^, T. Wagner et M. Fisch. На лиственных деревьях часто встречаются Ph. igniarius (L.) Qufil., Ph. punctatus (Fr.) PilSt, Ph. tremulae (Bondartsev) Bondartsev et P.N. Borisov, Phellinus laevigatus (Fr.) Bourdot et Galzin. Редкими для региона или ограниченно распространенными являются Ph. baumii
Pilet, Ph. cinereus (Nieme^) M. Fischer, Ph. conchatus (Pers.) Qu^., Ph. contiguus (Pers.) Pat., Ph. hippophaлicola H. Jahn., Ph. laricis (Jacz. ex Pil6t) Pil6+, Ph. lonicerinus (Bondartsev) Bondartsev et Singer, Ph. lundellii Nieme^, Ph. robustus (P. Karst.) Bourdot et Galzin, Ph. sulphurascens Pi^t, Phellinidium pouzarii (Kotl.) Fiasson et Nieme^, Phylloporia ribis (Schumach.) Ryvarden, Porodaedalea niemelaei M. Fisch.
Лекарственные свойства некоторых видов грибов из рода Phellinus давно известны. Ложный трутовик — Ph. igniarius (L.) Qu^. (Ph. alni (Bondartsev) Parmasto; Ph. nigricans (Fr.) P. Karst.) в народной медицине используют в качестве антидота при отравлениях как успокаивающее, стимулятор пищеварения как диуретик, в качестве противоопухолевого средства [1]. Известны антипроли-феративные и антиметастатические эффекты этанольных экстрактов этого вида [2]. Водорастворимые экзополимеры, выделенные из погруженного мицелия другого вида, сосновой губки — Phellinus pini (Brot.) Bondartsev et Singer (Porodaedalea pini (Brot.) Murrill), показали иммуномодулирующую активность [3].
Феллинус льняной — Ph. linteus (Berk. et M.A. Curtis) Teng (жимолостный трутовик, Ph. lonicerinus (Bondartsev) Bondartsev et Singer), использовался в народной медицине при болезнях сердца, почек, печени и селезенки [1]. В странах Юго-Восточной Азии данный гриб применяли для лечения желудочно-кишечной дисфункции, диареи, кровотечений и рака. Выяснено, что полисахариды и экстракты из плодовых тел и мицелия гриба не только стимулируют гуморальный и клеточный иммунитет, снимают воспалительные реакции, но и подавляют
рост опухоли, метастазирование, индуцируют апоптоз опухолевых клеток, не вызывая токсического эффекта. Исследования, сосредоточенные на противоопухолевом эффекте этого гриба, показали, что PH. ііп-teus может быть перспективным кандидатом в качестве альтернативы противоопухолевым препаратам или синергистом существующих [4-6]. Мицелиальный экстракт PH. liпteus увеличивает противоопухолевую деятельность макрофагов и может быть потенциальным терапевтическим агентом для контроля карциномы легкого человека
[7].
Объекты и методы
Сведения, касающиеся противовирусной активности грибов рода PHeШпus, отсутствуют, в связи с чем на базе ГНЦ ВБ Вектор были проведены исследования по определению вируснейтрализующей способности видов pH. igпianus ^.) Quйl. и pH. coпcHatus (Ре^.) Quйl. в отношении вируса гриппа птиц и вируса гриппа человека в культуре клеток MDCK (культура клеток почки собак). Для тестирования противовирусной активности препаратов, которая проводилась в лаборатории вирусологии, использовали перевиваемую культуру клеток MDCK, 2 образца водных экстрактов грибов и 1 образец суммарной полисахаридной фракции из грибов рода PHeШпus. Образец
08-41 представлял собой водный экстракт плодового тела гриба pH. igпianus С-08/6, найденного в Новосибирской области. Экстракт готовили нагреванием водной суспензии измельченного плодового тела на водяной бане. Образец 09-64 получен из Коллекции Ботанического института им. В.Л. Комарова РАН в виде чистой культуры pH. coпcHatus 2257, выделенной в результате экспедиции на Алтай. Водный экстракт из выращенного на жидкой питательной среде мицелия готовили с помощью ультразвукового дезинтегратора (МSE, Англия). Из экстракта 09-64 была приготовлена суммарная полисахаридная фракция — образец
09-64 пс. Полученные образцы разводили в
5, 10, 100, 1000, 10000, 100000, 1000000 раз для того, чтобы определить токсиче-
скую концентрацию экстрактов в отношении клеток MDCK.
Результаты и их обсуждения
Полученные экстракты и суммарные полисахариды обладали низкой токсичностью: образец 08-41 оказывал токсическое действие до разведения 1:10, для исследования противовирусной активности его разводили в 10 раз; образец 09-64 оказывал токсическое действие до разведения 1:1000, для исследования противовирусной активности его разводили в 3000 раз; образец 09-64 пс разводили в 5 раз.
В таблице представлены результаты противовирусной активности водных экстрактов Ph. ignianus С-08/6 и PH. conchatus 2257 в отношении вируса гриппа птиц А/сЫскеп/Кигдап/05/2005 субтипа Н5^ и вируса гриппа человека А/АкЫ/2/68 субтипа Н3№, а также результаты эксперимента по определению противовирусной активности суммарных полисахаридов, полученных из экстракта культивированного мицелия pH. concHatus 2257.
Из данных таблицы 1 следует, что экстракт из культивированного мицелия РН. concHatus проявил нейтрализующий эффект в отношении вирусов гриппа птиц (2,5 1д) и гриппа человека (1,0 1д), сходный с экстрактом из плодового тела PH. igniarius (2,0 и 1,1 1д соответственно), что может свидетельствовать о перспективе получения антивирусных соединений не только из плодовых тел, но и из культивированного мицелия данных видов грибов. Подавление репликации вирусов гриппа в культуре клеток составляет от 10 до 100 раз и более.
Суммарные полисахариды из экстракта культивированного мицелия PH. concHa-tus 2257 также проявляют антивирусный эффект в отношении одного из патогенных вирусов гриппа — гриппа птиц А/сЫскеп/Кигдап/05/2005 (Н5^). Нейтрализация вируса составила 1,2 1д, что свидетельствует о подавлении репликации вируса гриппа птиц в клетках культуры MDCK более чем в 10 раз.
Таблица
Результаты опытов по противовирусной активности
Тип вируса А/сЫскеп/Кигдап/05/2005 (Н5Ж) А/АісН/2/68 (№N2)
Образец ИВ ИН ИВ ИН
Контроль вируса 8,3 0 6,3 0
ЭПТ PH. igniarius 6,3 2,0 5,2 1,1
ЭКМ PH. concHatus 5,8 2,5 5,3 1,0
Контроль вируса 6,7 0 — —
ПФ PH. сoncHatus 5,5 1,2 — —
Примечание. ЭКМ — экстракт из культивированного мицелия; ЭПТ — экстракт из плодового тела; ПФ — полисахаридная фракция; ИВ — инфекционность вируса (титр вирус аллантоисной жидкости) в клетках MDCK (ИД50 в 1дТЦД50/мл) через 2 суток; ИН — индекс нейтрализации ИД50конт — ИД50опыт (1д) через 2 суток.
30
Вестник Алтайского государственного аграрного университета № 4 (90), 2012
Заключение
Грибы рода Phellinus можно использовать для получения биоактивных компонентов. Кроме противоопухолевой активности, отраженной в научной литературе, нами обнаружены противовирусные свойства в отношении вирусов гриппа у видов Phellinus igniarius и Ph. conchatus. Судя по литературным данным, такие виды, как Ph. hartigii (Allesch. et Schnabl) Pat., Ph. laevigatus (Fr.) Bourdot et Galzin, Ph. laricis (Jacz. ex PilSt) Pil6t, Ph. lundellii Nieme^, Ph. punctatus (Fr.) Pil6t, Ph. tremulae (Bondartsev) Bondartsev et P.N. Borisov, встречающиеся в Западной Сибири, являются перспективными для их изучения на наличие различных типов биологической активности.
Библиографический список
1. Денисова Н.П. Лечебные свойства грибов. Этномикологический очерк. — СПб.: Изд-во СПбШУ, 1998. — 59 с.
2. Song T.Y., Lin H.C., Yang N.C., Hu M.L. Antiproliferative and antimetastatic effects of the ethanolic extract of Phellinus igniarius (Lin.: Fr.) Quelet // J. Ethnopharm.
— 2008. — Vol. 115. — No. 1. — P. 50-56.
3. Jeong S.C., Cho S.P., Yang B.K.,
Jeong Y.T., Ra K.S., Song C.H.
Immunomodulating activity of the exopolymer from submerget mycelial culture of Phellinus pini // J. Microbiol. Biotechnol. — 2004. — Vol. 14. — No. 1. — P. 15-21.
4. Hanat S.B., Lee C.W., Jeon Y.J., Hong
N.D., Yoo I.D., Yang K.H. et al. The inhibitory effect of polysaccharides isolated from
Phellinus linteus on tumor growth and metastasis // Immunopharm. — 1999. —
Vol. 41. — P. 157-164.
5. June W.L., Seong J.B., Woo C.B.,
Jeong M.P., Yong S.K. Antitumor and
antioxidant activities of the extracts from fruiting body of Phellinus linteus // Mycobiol.
— 2006. — Vol. 34. — No. 4. — P. 230-235.
6. Zhu T. Kim S.H., Chen C.Y. A medicinal mushroom: Phellinus linteus // Curr. Med. Chem. — 2008. — Vol. 15. — No. 13. — P. 1330-1335.
7. Lee J.J., Kwon H.K., Lee D.S., Lee S.W., Lee K.K., Kim K.J., Kim J.L. Mycelial extract of Phellinus linteus induces cell death in A549 lung cancer cell and elevation of nitric oxide in raw 264.7 macrophage cells // Mycobiol. — 2006. — Vol. 34. — No. 3. — P. 143-147.
+ + +
УДК 579.017.8 И.Б. Бороздина
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭПИФИТНОЙ МИКРОФЛОРЫ
Ключевые слова: питательные среды, эпифитная микрофлора, Pseudomonas, Bacillus, МПА, ТСЭМ, питательная среда на основе свекольного отвара.
Эпифитные микроорганизмы, в состав которых входят некоторые представители родов Pseudomonas и Bacillus, на протяжении длительной эволюции приспосабливались питаться выделениями растений. Недостаток питательных веществ на поверхности экологических ниш филлосферы, по мнению учёных, является основным экологическим фактором, обуславливающим развитие эпифитных микроорганизмов [1].
В ходе исследования мы изучали бактерии родов Pseudomonas и Bacillus, населяющие различные экологические ниши филлосферы (гемисферу, филлоплан, поверхность цветков, спермосферу).
Бактерии родов Pseudomonas и Bacillus в малых количествах населяют различные экологические ниши филлосферы, а при
массовом обсеменении могут приводить к возникновению бактериозов [2].
Изучение бактерий родов Pseudomonas и Bacillus при культивировании на искусственных питательных средах вызывает большой интерес микробиологов ввиду их широкого распространения в природе и участия в различных биологических процессах. Они объединяют большое количество как сапрофитных, так и условно патогенных и патогенных видов [2].
В связи с этим актуальными являются работы по поиску новых доступных и экономически оправданных компонентов, использование которых позволит усовершенствовать имеющиеся и разработать новые эффективные питательные среды для культивирования эпифитных микроорганизмов, в состав которых входят некоторые представители родов Pseudomonas и Bacillus, а также обусловит перспективы получения на их основе высокоэффективных препаратов для борьбы с фитопатогенными микроорганизмами.
