CC BY
92
DOI: 10.24411/2226-0757-2019-12124
Изучение противопаркинсонической активности гармина гидрохлорида на различных моделях болезни Паркинсона
С.М. Адекенов, И.Г. Капица, Т.А. Воронина, А.А. Анаев, П.Ж. Жанымханова, Д.А. Абаимов, А.К. Сариев
Изучали противопаркинсоническое действие ß-карболинового алкалоида растительного происхождения гармина гидрохлорида (ГГ). С помощью основных фармакологических тестов для оценки противопаркинсонической активности лекарственных средств было установлено, что ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг ослабляет галоперидолиндуцированную каталепсию у крыс, а также уменьшает олигокинезию и ригидность при паркинсонизме, вызванном нейротоксином 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридином, у мышей линии C57BL/6. В ряде тестов ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг оказывал эффекты, сходные с таковыми леводопы в дозе 100 мг/кг. Полученные данные позволяют предположить, что ГГ обладает способностью проникать через гематоэнцефалический барьер и компенсировать дофаминергический дефицит в структурах экстрапирамидной системы головного мозга у лабораторных животных в различных моделях паркинсонического синдрома.
Ключевые слова: ß-карболиновые алкалоиды, гармина гидрохлорид, противопаркинсоническое действие, галопе-ридоловая каталепсия, 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин, двигательные тесты.
Болезнь Паркинсона (БП) является одним из самых распространенных дегенеративных заболеваний центральной нервной системы в возрастной группе старше 60 лет. Неуклонное старение населения в большинстве развитых
Сергазы Мынжасарович Адекенов - докт. хим. наук, профессор, академик Национальной академии наук Республики Казахстан, ген. директор АО "Международный научно-производственный холдинг "Фитохимия", Республика Казахстан, Караганда. Инга Геннадиевна Капица - канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаборатории психофармакологии ФГБНУ "НИИ фармакологии им. В.В. Закусова", Москва. Татьяна Александровна Воронина - докт. мед. наук, профессор, зав. лабораторией психофармакологии ФГБНУ "НИИ фармакологии им. В.В. Закусова", Москва. Алишер Анаевич Анаев - вед. инженер лаборатории технологии фитопрепаратов АО "Международный научно-производственный холдинг "Фитохимия", Республика Казахстан, Караганда.
Пернеш Жайдарбековна Жанымханова - зав. лабораторией химии алкалоидов АО "Международный научно-производственный холдинг "Фитохимия", Республика Казахстан, Караганда.
Денис Александрович Абаимов - канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаборатории гемореологии, гемостаза и фармакокинетики с клинической и лабораторной диагностикой ФГБНУ "Научный центр неврологии", Москва. Абрек Куангалиевич Сариев - докт. мед. наук, профессор, вед. науч. сотр. лаборатории гемореологии, гемостаза и фармакокинетики с клинической и лабораторной диагностикой ФГБНУ "Научный центр неврологии", Москва.
Контактная информация: Сариев Абрек Куангалиевич, [email protected]
стран мира ставит новые вызовы перед фармакологией. В частности, весьма актуальной задачей является расширение существующего спектра противопаркинсонических лекарственных средств. Перспективным направлением представляется изучение и внедрение различных физиологически активных препаратов растительного происхождения, а также их синтетических производных [1, 2]. Известно, что для лечения паркинсонизма ранее применялись галеновые препараты алкалоидоносного растения Atropa belladonna L., а позднее стали применять индивидуальные алкалоиды с холинолитическим действием - атропин, ско-поламин и др. [3]. На сегодняшний день группа алкалоидов по-прежнему представляет большой интерес в качестве источника потенциальных веществ-кандидатов для лечения БП и других заболеваний. Наименее изученной группой среди индольных алкалоидов являются такие соединения, как ß-карболины. Вместе с тем соединения этого класса обладают значительным потенциалом для медицинской химии и фармакологии, так как можно предположить у них сочетание биологических свойств, характерных для изомерных карболинов. Известно, что ß-карболиновые фрагменты гетероциклов природного происхождения входят в состав многих индольных алкалоидов, проявляя ценные фармакологические свойства. В литературе имеются примеры соединений, включающих в свой состав ß-карболиновый фрагмент и оказывающих антималярийное и цитотоксиче-ское действие на некоторые виды опухолевых клеток, а также представляющих большой интерес в качестве перспек-
Л
тивных препаратов для лечения заболеваний центральной нервной системы и сердечно-сосудистой системы [4, 5]. Одним из представителей этого класса являются индоль-ные алкалоиды Редапит Иагта!а L. В последнее время лекарственное растение Редапит Иагта!а L. помимо использования в качестве средства народной медицины широко применяется в лечении ряда серьезных заболеваний, в том числе онкологических [6-8]. Эффективность использования Редапит Иагта!а L. в различных целях обусловлена наличием в ее составе р-карболиновых алкалоидов - гарми-на, гармалина, гармалола и их производных [9].
Ранее в предварительных исследованиях был отмечен определенный противопаркинсонический потенциал гарми-на гидрохлорида (ГГ) - водорастворимой формы индольного алкалоида гармина, выделенного из этанольного экстракта корней Редапит Иагта!а L. (рис. 1) [10]. Целью настоящей работы являлось более детальное изучение антипаркинсо-нического действия ГГ с использованием основного набора методов оценки противопаркинсонической активности лекарственных средств в сравнении с эталонным препаратом (леводопа) на моделях галоперидоловой каталепсии и пар-кинсонического синдрома (ПС), индуцированного 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридином (МФТП).
Материал и методы
Для выявления противопаркинсонических эффектов ГГ использовались методики, рекомендованные в "Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств" [11]. Изучали антикаталептогенные свойства ГГ в тесте антагонизма с галоперидолом (бло-катором дофаминовых рецепторов), а также его антипар-кинсоническое действие на модели ПС при системном введении нейротоксина МФТП, вызывающего избирательное повреждение дофаминовых нейронов, на мышах линии C57BL/6 [12]. У животных в условиях данной модели производится оценка тремора, ригидности, олигокинезии на 1-е и 7-е сутки после введения МФТП.
Изучение антипаркинсонического действия ГГ проводилось при его однократном внутрибрюшинном введении в дозах 2,5 и 5 мг/кг. В качестве положительного контроля использовали препарат леводопа/бенсеразид-Тева ("Тева", Израиль, таблетки, содержащие 100 мг леводопы и 25 мг ингибитора дофа-декарбоксилазы бенсеразида); раствор готовился в пересчете на леводопу, которая использовалась в дозах 50 и 100 мг/кг.
Животным контрольной группы вводили дистиллированную воду в эквивалентном объеме (0,2 мл на 100 г массы тела для крыс и 1,0 мл на 100 г массы тела для мышей).
Галоперидоловая каталепсия. Исследование проводили на 60 беспородных белых половозрелых крысах-самцах массой 280-320 г, разделенных на 6 групп по 10 животных в каждой:
• интактный контроль (введение дистиллированной воды);
• активный контроль: галоперидол 1 мг/кг;
• ГГ 2,5 мг/кг + галоперидол 1 мг/кг;
• ГГ 5 мг/кг + галоперидол 1 мг/кг;
• леводопа 50 мг/кг + галоперидол 1 мг/кг;
• леводопа 100 мг/кг + галоперидол 1 мг/кг.
Каталепсию у крыс вызывали путем внутрибрюшинного введения галоперидола в дозе 1 мг/кг за 60 мин до начала наблюдения. Гармина гидрохлорид (2,5 или 5 мг/кг) и препарат сравнения (леводопа 50 или 100 мг/кг) вводили за 5-10 мин до галоперидола.
Антагонизм с галоперидолом оценивали по способности веществ уменьшать время каталептогенного состояния крыс. Продолжительность каталепсии измеряли через 60 и 120 мин после введения галоперидола. Как правило, каталептогенный эффект является наиболее выраженным через 120 мин после введения галоперидола.
В работе использовали метод оценки каталепсии на параллельных перекладинах по Морпурго. Передние и задние конечности животного помещали на параллельные перекладины (стенки) таким образом, чтобы спина животного была прямой. Фиксировали время пребывания крысы в неподвижном состоянии. Попытки придать животному нужную позу продолжали не более 1 мин. Максимальное время наблюдения составляло 120 с.
Паркинсонический синдром, вызванный путем введения нейротоксина МФТП. Исследование проводили на 60 половозрелых мышах-самцах линии C57BL/6, которые методом рандомизации были разделены на 6 групп по 10 животных в каждой:
• интактный контроль (введение дистиллированной воды);
• активный контроль: МФТП 30 мг/кг;
• ГГ 2,5 мг/кг + МФТП 30 мг/кг;
• ГГ 5 мг/кг + МФТП 30 мг/кг;
• леводопа 50 мг/кг + МФТП 30 мг/кг;
• леводопа 100 мг/кг + МФТП 30 мг/кг.
1 -метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 30 мг/кг; ГГ (2,5 или
150 г
5 100
Л
с;
Р
s §
о
CL
С
50
Через 60 мин
Через 120 мин
■ Интактный контроль
■ Активный контроль (галоперидол) Леводопа 50 мг/кг + галоперидол Леводопа 100 мг/кг + галоперидол
■ ГГ 2,5 мг/кг + галоперидол ГГ 5 мг/кг + галоперидол
Рис. 2. Влияние ГГ и леводопы на выраженность каталепсии у крыс в тесте параллельных перекладин по Морпур-го. Различия достоверны (p < 0,05) в сравнении с группой: * - интактного контроля; ** - галоперидола; *** - леводопы 100 мг/кг
5 мг/кг) и леводопу (50 или 100 мг/кг) вводили внутрибрю-шинно за 40 мин до введения нейротоксина.
Оценка двигательной сферы животных. Оценку эффективности изучаемых веществ проводили сразу после введения МФТП и в первые 2 ч, а затем через 7 сут. Регистрировали мышечную ригидность и показатели олигокинезии.
Оценку ригидности проводили визуально по появлению симптома "горбатости" и количественно - по изменению длины шага у мышей (stride length test) через 10-12 мин после введения нейротоксина. Согласно этой методике каждое животное помещали в узкий пенал (высота стенок 8 см, ширина 8 см, длина 50 см) с маркировочной лентой, предварительно лапы окрашивали специальным нетоксичным красителем (передние и задние - разным цветом). Измеряли расстояние (по прямой) между следами передней и задней лап в 5 шагах животного на ленте. Шаги в начале и в конце аллеи не учитывали.
Олигокинезию оценивали по изменению двигательной и ориентировочно-исследовательской активности (регистрировали горизонтальные перемещения, вертикальные стойки и заглядывания в отверстия установки) в условиях теста "открытое поле" (установка TS0501-M, ООО "НПК Открытая Наука", Россия). Учитывали средний показатель перемещений за 3 мин для каждой группы животных.
Моторный дефицит и нарушение координации движений у животных с ПС оценивали с помощью методик "вертикальный стержень" (инженерная установка) и "вращающийся стержень" (RotaRod for mice, идо Basile, Италия). Исследования по методике "вертикальный стержень" проводили через 100-110 мин после введения МФТП. Мышь помещали на вершину металлического или деревянного стержня (50 см высотой и 1 см в диаметре, обернутого бинтом с пробковым набалдашником диаметром 1,5 см) носом вверх и замеряли время, необходимое животному для ориентирования - поворота головой вниз и спуска вниз по стержню. В тесте "вращающийся стержень" мышей сажали на стержень диаметром 3 см, вращающийся с постоянной скоростью 10 или 30 об/мин и изменяющий направление вращения каждые 24 или 9 с соответственно или вращающийся с ускорением со следующими параметрами: минимальная скорость вращения - 10 об/мин, максимальная -30 об/мин, каждые 7 с скорость увеличивалась на 1 оборот. Максимальное время наблюдения составляло 2 мин.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с помощью программы Statistica 10.0. Нормальность распределения проверяли с использованием критерия Шапиро-Уилка. Для независимых переменных применяли непараметрический анализ (U-тест Манна-Уитни). Данные на рисунках представлены в виде средних значений и стандартной ошибки среднего. Различия между группами считали достоверными при p < 0,05.
Результаты и обсуждение
Оценка антикаталептогенных эффектов ГГ. Внутрибрю-шинное введение галоперидола в дозе 1 мг/кг вызывает у крыс состояние каталепсии - сохранение искусственно приданной позы в течение длительного времени. Гармина гидрохлорид в обеих дозах (2,5 и 5 мг/кг) оказывал антикаталептическое действие, уменьшая выраженность каталепсии. На фоне введения ГГ в дозе 2,5 мг/кг продолжительность каталептогенного состояния у крыс через 60 мин была меньше в 2,33 раза (p < 0,01), а через 2 ч - в 1,23 раза (p < 0,05), чем у контрольных крыс с галоперидоловой каталепсией. При введении ГГ в дозе 5 мг/кг продолжительность каталепсии через 60 мин статистически значимо уменьшалась в 2,04 раза, а через 120 мин - в 1,15 раза, но только в виде тенденции (рис. 2).
Таким образом, действие ГГ в дозе 2,5 мг/кг в условиях галоперидоловой каталепсии было сопоставимо с эффективностью леводопы в дозе 50 мг/кг, при введении которой явления каталепсии уменьшались почти в 3 раза. Способность соединения снижать выраженность каталепсии, вызванной антагонистом дофаминовых Dj-рецепторов гало-перидолом, свидетельствует о дофаминергическом механизме действия ГГ.
Оценка эффектов ГГ на МФТП-индуцированной модели паркинсонизма. Динамическую оценку двигательных нарушений и их коррекцию путем применения ГГ у мышей линии
(а)
2
и
СО
3
Через 100 с Интактный контроль Леводопа 100 мг/кг + МФТП
7,5
2 7,0
0 ее
1 6,5 л
I
6,0
5,5
Активный контроль (МФТП) ГГ 2,5 мг/кг + МФТП
Через 7 сут Леводопа 50 мг/кг + МФТП ГГ 5 мг/кг + МФТП
Рис. 3. Влияние ГГ в сравнении с леводопой на ригидность у мышей С57В1/6 с ПС: а - острый эффект; б - отложенный эффект. Здесь и на рис. 6: различия достоверны (р < 0,05) в сравнении с группой: * - интактного контроля; ** - МФТП.
C57BL/6 проводили сразу после введения МФТП (30 мг/кг однократно внутрибрюшинно) и продолжали в течение 2 ч, а также через 7 сут после введения нейротоксина.
Ригидность оценивали по изменению длины шага мыши. Было установлено, что на фоне острого эффекта МФТП, через 15 мин после его введения, длина шага мышей уменьшилась в 1,6 раза в сравнении с группой интактного контроля, а под действием ГГ и леводопы это нарушение было выражено в значительно меньшей степени (рис. 3). Так, под влиянием ГГ в дозе 2,5 и 5 мг/кг длина шага у мышей С57В1/6 была, соответственно, в 1,14 и 1,17 раза больше, чем в группе МФТП, при этом она значимо не отличалась от показателя в группах животных, получавших леводопу в обеих дозах (см. рис. 3).
При анализе результатов, полученных через 7 дней после однократного системного введения МФТП, было выявлено наличие ригидности у животных, получавших нейро-токсин: имела место характерная сгорбленность, значимое укорочение (на 13%) длины шага по сравнению с показателями группы интактного контроля. Длина шага у животных опытных групп, получивших ГГ в дозе 2,5 мг/кг или леводо-пу в обеих дозах, не отличалась от показателей контрольных групп и статистически значимо превышала показатели в группе МФТП. В то же время обнаружено, что ГГ в дозе 5 мг/кг не оказывал значимого эффекта на ригидность. Таким образом, ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг проявлял антипаркин-соническую активность, сопоставимую с таковой леводо-пы, в тесте галоперидоловой каталепсии у крыс.
Оценка МФТП-индуцированной олигокинезии в тесте "открытое поле". Уже через 90 мин после введения МФТП у животных всех групп отмечалась высокая степень олигокинезии, что выражалось в статистически значимом уменьшении двигательной активности у мышей с ПС в тесте "открытое поле" в сравнении с интактными животными. У животных, получавших только МФТП, также отмечались периоды фризинга (замирания), стереотипия, неустойчивость походки, бег на задних лапах, ротационные дви-
жения. Введение ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг способствовало статистически значимому уменьшению проявлений олигокинезии, вызванной путем однократной инъекции МФТП в дозе 30 мг/кг. Так, на фоне действия ГГ в дозе 2,5 мг/кг это выражалось в повышении как горизонтальной, так и вертикальной двигательной активности в 4,2 и 3,8 раза соответственно, а также в увеличении в 2,96 раза числа за-глядываний в норки по сравнению с показателями в группе, получавшей только нейротоксин. На фоне введения мышам с паркинсоническим синдромом ГГ в дозе 5 мг/кг отмечалось значимое превышение (в 2 раза) числа горизонтальных перемещений и в 2,8 раза (в виде тенденции) - числа вертикальных стоек в сравнении с группой, получавшей только МФТП.
При регистрации проявлений олигокинезии в тесте "открытое поле" у мышей с ПС через 7 сут после однократного введения МФТП в дозе 30 мг/кг отмечено статистически значимое снижение горизонтальной (в 1,82 раза) и вертикальной (в 1,94 раза) двигательной активности и значимое снижение (в 2,2 раза) числа заглядываний в норки в сравнении с интактным контролем. Введение ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг также способствовало статистически значимому уменьшению проявлений олигокинезии у мышей с ПС: увеличивалось число горизонтальных перемещений в 1,7 и 1,6 раза соответственно и число заглядываний в отверстия в сравнении с группой, получавшей нейротоксин (рис. 4). При этом эффекты ГГ в дозе 2,5 мг/кг на олигокинезию у мышей с ПС через 90 мин после введения нейротоксина были сопоставимы с эффектами препарата сравнения -леводопы в дозе 100 мг/кг, а эффекты ГГ в дозе 5 мг/кг не отличались от соответствующих показателей в группе леводопы 50 мг/кг (см. рис. 4). Различий между группами мышей, получавших ГГ в дозе 2,5 и 5 мг/кг, в сопоставлении с группами контроля и группами препарата сравнения по показателям горизонтальной, вертикальной двигательной активности и числу заглядываний животных в норки на 7-е сутки эксперимента выявлено не было (см. рис. 4).
Горизонтальная Вертикальная Норковый активность активность рефлекс
Горизонтальная Вертикальная Норковый активность активность рефлекс
■ Интактный контроль
■ Активный контроль (МФТП) Леводопа 50 мг/кг + МФТП Леводопа 100 мг/кг + МФТП
■ ГГ 2,5 мг/кг + МФТП ГГ 5 мг/кг + МФТП
Рис. 4. Влияние ГГ в сравнении с леводопой на олигокине-зию у мышей C57BL/6 с ПС, вызванным МФТП: а - острый эффект (через 90 мин); б - отложенный эффект (через 7 сут). Здесь и на рис. 5: различия достоверны (p < 0,05) в сравнении с группой: * - интактного контроля; ** - МФТП; *** - леводопы 100 мг/кг
Таким образом, в тесте "открытое поле", проведенном на мышах линии C57BI/6 с МФТП-индуцированным паркинсонизмом, было установлено, что влияние на олигокине-зию ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг сопоставимо с действием леводопы в дозах 100 и 50 мг/кг при регистрации как срочного (90 мин после введения МФТП), так и отложенного (через 7 сут после введения МФТП) эффекта нейротоксина.
Оценка влияния ГГ на МФТП-индуцированные моторные нарушения в тесте "вертикальный стержень". Поведение мышей в тесте "вертикальный стержень" изучали через 100 мин и 7 сут после введения МФТП. В тесте, проведенном через 100 мин после введения нейротокси-на, было установлено, что животным, получившим только
МФТП, потребовалось гораздо больше времени для правильной ориентации в пространстве и спуска по стержню. Так, под действием нейротоксина время поворота мышей увеличилось на 13,3 с, а время спуска - на 5,9 с (рис. 5). В опытных группах, получавших ГГ, время поворота мышей с ПС относительно показателей группы интактного контроля не изменялось, тогда как время спуска увеличивалось в сравнении с показателем в группе животных, которым вводилась леводопа (см. рис. 5). В этом тесте ГГ способствовал уменьшению моторного дефицита и улучшению координации животных с МФТП-паркинсонизмом, причем наиболее выраженно при его использовании в дозе 5 мг/кг, под действием которой не только в 3,2 раза уменьшилось время поворота относительно показателя группы МФТП, но и не увеличилось время спуска относительно показателя группы интактного контроля, причем оно не отличалось от показателя группы леводопы 100 мг/кг (см. рис. 5). Значимого нарушения моторных функций у животных в группе МФТП на 7-е сутки эксперимента не выявлено. Поведение мышей с ПС, получавших ГГ и леводопу, на 7-е сутки после введения нейротоксина не отличалось от поведения ин-тактных животных (на рис. 5 не представлено).
Оценка влияния ГГ на МФТП-индуцированные моторные нарушения в тесте "вращающийся стержень". При оценке поведения животных через 120 мин после введения нейротоксина было выявлено наличие выраженного моторного дефицита при тестировании в обоих режимах вращения стержня (с постоянной скоростью - 10 об/мин с изменением направления вращения стержня каждые 24 с и с ускорением вращения - от 10 до 30 об/мин) в сравнении с группой интактного контроля.
Гармина гидрохлорид в обеих изученных дозах не оказывал значимого влияния на МФТП-индуцированные нарушения. Леводопа в дозе 100 мг/кг способствовала уменьшению выраженности двигательных нарушений при обоих режимах вращения стержня, а в дозе 50 мг/кг - только при вращении стержня с ускорением. При этом статистически значимых различий между группами леводопы и ГГ не обнаружено (на рис. 6 не представлено).
Через 7 сут после введения нейротоксина у животных, получавших МФТП, продолжали регистрироваться моторные нарушения в тесте "вращающийся стержень". Так, при вращении стержня с ускорением (от 10 до 30 об/мин) время удержания животных в группе МФТП было в 1,63 раза меньше, а при более жестком режиме (постоянная скорость вращения 30 об/мин с изменением направления вращения каждые 9 с) - в 3,37 раза меньше, чем в группе интактного контроля.
На фоне использования ГГ в дозе 2,5 мг/кг на 7-й день после введения нейротоксина время удержания мышей с ПС на стержне при его вращении с ускорением было в 1,4 раза больше, чем в группе МФТП. Подобные показатели регистрировались и в группе леводопы 100 мг/кг, при этом
30 Г
20
s аз о. m
10
Поворот
Спуск
■ Интактный контроль
■ Активный контроль (МФТП) Леводопа 50 мг/кг + МФТП Леводопа 100 мг/кг + МФТП
■ ГГ 2,5 мг/кг + МФТП ГГ 5 мг/кг + МФТП
Рис. 5. Влияние ГГ в сравнении с леводопой на поведение мышей С57BL/6 с ПС в тесте "вертикальный стержень" через 100 мин после введения МФТП.
и
а> т
8. а>
5
со
*
а.
а>
к 2 Ф О.
ш
250
200
150
100
50
Режим с реверсом
Режим с ускорением
■ Интактный контроль
■ Активный контроль (МФТП) Леводопа 50 мг/кг + МФТП Леводопа 100 мг/кг + МФТП
■ ГГ 2,5 мг/кг + МФТП ГГ 5 мг/кг + МФТП
Рис. 6. Влияние ГГ в сравнении с леводопой на поведение мышей С57BL/6 с ПС в тесте "вращающийся стержень" на 7-й день после введения МФТП.
ни одна из опытных групп не имела статистически значимых различий с группой МФТП. В группах с введением ГГ в дозе 5 мг/кг и леводопы в дозе 50 мг/кг не только не уменьшались двигательные нарушения у мышей с ПС в тесте "вращающийся стержень" при его проведении в режиме нарастающего ускорения по сравнению с группой МФТП, но и отмечались значимые различия по регистрируемому
показателю с группой интактного контроля (см. рис. 6). Однако в более жестких условиях тестирования, таких как вращение стержня с высокой постоянной скоростью с реверсом, время удержания мышей с ПС на стержне во всех опытных группах было значимо больше, чем в группе, получившей только нейротоксин. Так, у животных, которым вводили ГГ в дозах 2,5 и 5 мг/кг, уменьшение моторных нарушений выражалось в увеличении времени удержания на стержне в 2,7 и 2,1 раза соответственно, а у животных, получавших леводопу в дозах 50 и 100 мг/кг, - в 1,9 и 2,5 раза соответственно относительно группы МФТП (см. рис. 6). Полученные в тесте "вращающийся стержень" показатели поведения животных при введении ГГ не отличались от соответствующих данных опытных групп, получавших леводо-пу (см. рис. 6).
Таким образом, в проведенном исследовании было выявлено отчетливое противопаркинсоническое действие ГГ. Препарат способствовал снижению каталепсии, вызванной галоперидолом, у крыс, уменьшению ригидности и двигательных нарушений у мышей линии C57BL/6 с МФТП-индуцированным ПС. Эти данные определяют целесообразность дальнейших исследований ГГ при двигательных расстройствах.
Список литературы
1. Kulikova OI, Berezhnoy DS, Stvolinsky SL, Lopachev AV, Orlova VS, Fedorova TN. Neuroprotective effect of the carnosine-a-lipoic acid nanomicellar complex in a model of early-stage Parkinson's disease. Regulatory Toxicology and Pharmacology 2018 Jun;95:254-9.
2. Levites Y, Weinreb O, Maor G, Youdim MB, Mandel S. Green tea polyphenol (-)-epigallocatechin-3-gallate prevents N-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-induced dopaminergic neurodegeneration. Journal of Neurochemistry 2001 Sep;78(5):1073-82.
3. Куцик Р.В., Зузук Б.М., Недоступ А.Т., Пецко Т. Толокнянка обыкновенная Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng. Аналитический обзор. Провизор 2003;18. Доступно по: http://provisor.com.ua/ archive/2003/N18/art_27.php Ссылка активна на 14.10.2019.
4. Arzel E, Rocca P, Grellier P, Labaeíd M, Frappier F, Guéritte F, Gaspard C, Marsais F, Godard A, Quéguiner G. New synthesis of benzo-5-carbolines, cryptolepines, and their salts: in vitro cytotoxic, antiplasmodial, and antitrypanosomal activities of 5-carbo-lines, benzo-5-carbolines, and cryptolepines. Journal of Medicinal Chemistry 2001 Mar;44(6):949-60.
5. Смирнова О.Б., Головко Т.В., Граник В.Г. Карболины. Часть 1. Сопоставление некоторых методов синтеза a-, у- и 5-кар-болинов [обзор]. Химико-фармацевтический журнал 2010;44(12):6-30.
6. McKenna DJ, Towers G. Ultra-violet mediated cytotoxic activity of P-carboline alkaloids. Phytochemistry 1981;20(5):1001-4.
7. Pérez Martín JM, Labrador V, Fernández Freire P, Molero ML, Ha-zen MJ. Ultrastructural changes induced in HeLa cells after photo-toxic treatment with harmine. Journal of Applied Toxicology 2004 May-Jun;24(3):197-201.
8. Sobhani AM, Ebrahimi SA, Mahmoudian M. An in vitro evaluation of human DNA topoisomerase I inhibition by Peganum harmala L. seeds extract and its beta-carboline alkaloids. Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 2002 Jan-Apr;5(1):19-23.
9. Shi CC, Liao JF, Chen CF. Spasmolytic effects of three harmala alkaloids on guinea-pig isolated trachea. Pharmacology & Toxicology 2001 Nov;89(5):259-64.
10. Турмухамбетов А.Ж., Агедилова М.Т., Нурмаганбетов Ж.С. Синтез четвертичных солей алкалоидов Редапит Иагта!а 1_. Химия природных соединений 2009;4:504-7.
11. Воронина Т.А., Вальдман Е.А., Неробкова Л.Н., Капица И.Г. Методические рекомендации по доклиническому изучению лекарственных средств с противопаркинсонической активностью. В кн.: Руководство по проведению доклинических иссле-
дований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. Миронова А.Н. Издание ФГБУ "Минздравсоцразвития НЦЭМСП". М.: Гриф и К; 2013: 219-34.
12. Ставровская А.В., Воронков Д.Н., Гущина А.С., Ольшанский А.С., Ямщикова Н.Г. Особенности моделирования ранней клинической стадии болезни Паркинсона. Нервные болезни 2018;4:50-5. >
Study of Antiparkinsonian Activity of Harmine Hydrochloride in Various Models of Parkinson's Disease
S.M. Adekenov, I.G. Kapitsa, T.A. Voronina, A.A. Anaev, P.Zh. Zhanymkhanova, D.A. Abaimov, and A.K. Sariev
Antiparkinsonian effect of harmine hydrochloride, a plant-derived P-carboline alkaloid, was studied. Using basic pharmacological tests for evaluation of drug antiparkinsonian activity, it was shown that harmine hydrochloride at a dose of 2.5 and 5 mg/kg reduced haloperidol-induced catalepsy in rats and also alleviated oligokinesia and rigidity in parkinsonism due to 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine in C57BL/6 mice. It was found that in a number of tests harmine hydrochloride at doses of 2.5 mg/kg and 5 mg/kg showed effects similar to those of levo-dopa at a dose of 100 mg/kg. These results suggest that harmine hydrochloride has the ability to cross the blood-brain barrier and compensate for dopaminergic deficiency in structures of the extrapyramidal system in laboratory animals in various parkinsonism models. Key words: P-carboline alkaloids, harmine hydrochloride, antiparkinsonian activity, haloperidol-induced catalepsy, 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, motor testing.
Продолжается подписка на научно-практический журнал
"НЕРВНЫЫЕ БОЛЕЗНИ"
Журнал входит в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученых степеней доктора и кандидата наук.
Журнал выходит 4 раза в год. Стоимость подписки на полгода по каталогу агентства "Роспечать" - 920 руб., на один номер - 460 руб. Подписной индекс 81610.
Продолжается подписка на научно-практический журнал
"АтпосФЕРй. новости кардиологии"
Журнал входит в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученых степеней доктора и кандидата наук.
Журнал выходит 4 раза в год. Стоимость подписки на полгода по каталогу агентства "Роспечать" - 840 руб., на один номер - 420 руб. Подписной индекс 37211.
"V
Подписку можно оформить в каждом отделении связи России и СНГ. Редакционную подписку на любой журнал издательства "Атмосфера" можно оформить на сайте http://atm-press.ru или по телефону: (495) 730-63-51
л
