Научная статья на тему 'Изучение противоопухолевой активности безаллергенного экстракта из Rhus verniciflua'

Изучение противоопухолевой активности безаллергенного экстракта из Rhus verniciflua Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
157
29
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Вончель Цой, Смирнова З. С., Кубасова И. Ю., Барышников А. Ю.

Данная работа посвящена исследованию противоопухолевой активности безаллергенного экстракта из Rush verniciflua, названного соединением ACM909Q. Установлено, что 3 и 9% экстракты ACM909Q из Rush verniciflua в дозе 600 мг/кг вызывают торможение роста перевиваемого рака шейки матки РШМ-5 на 86% при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней. Терапевтический эффект на РШМ-5 сохраняется в течение двух недель после окончания лечения. На этой модели опухоли также выявлено увеличение продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контрольными животными на 51 %. Более низкий, но статистически достоверный, противоопухолевый эффект 3% экстракт из Rush verniciflua проявляет на аденокарциноме молочной железы Са-755 в дозе 300 мг/кг (ТРО = 45 %) и аденокарциноме толстой кишки АКАТОЛ в дозе 600 мг/кг (ТРО = 46%) при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Вончель Цой, Смирнова З. С., Кубасова И. Ю., Барышников А. Ю.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

INVESTIGATION ANTITUMOR ACTIVITY OF THE ALLERGENREMOVED EXTRACT FROM THE RHUS VERNICIFLUA

Our study is devoted to investigation of antitumor activity of allergen-removed extract from Rush verniciflua tree named as ACM909Q. There were used threeand nine percent extract concentrations of ACM909Q at per os administration during 5 or 10 days. It was shown that nine percent extract of ACM909Q in 600 mg/kg dose exerts antitumor effect causing growth inhibition ofutery cerrix cancer RShM-5 to 86%. Antitumor effect of ACM909Q was maintained during two weeks after treated. Life span of treatment animals was increased by 51% in comparison with control mice. Lower antitumor efficacy three percent extract of ACM909Q in 300 and 600 mg/kg doses at per os administration during 5 possesses on breast carcinoma Ca-755 (TGI = 45% and 36%). Life span of mice with Ca-755 in comparison with control animals was not observed in this scheme of administration of ACM909Q. In colon adenocarcinoma AKATOL antitumor efficiency of 3 % Rhus verniciflua extract was observed only at 600 mg/kgdose daily during 5 days (TGI = 46%).

Текст научной работы на тему «Изучение противоопухолевой активности безаллергенного экстракта из Rhus verniciflua»

INVESTIGATION ANTITUMOR ACTIVITY OF THE ALLERGEN-REMOVED EXTRACT FROM THE RHUS VERNICIFLUA

Choi WonCheol \ Z.S. Smirnova 2,I. Y. Kubasova2, A. Y. Baryshnikov2 1 K.H. W. Academician Zhu Institute, Inchon, Korea 2 N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS

ABSTRACT

Our study is devoted to investigation of antitumor activity of allergen-removed extract from Rush verniciflua tree named as ACM909Q. There were used three- and nine - percent extract concentrations of ACM909Q at per os administration during 5 or 10 days. It was shown that nine - percent extract of ACM909Q in 600 mg/kg dose exerts antitumor effect causing growth inhibition ofutery cerrix cancer RShM-5 to 86%. Antitumor effect of ACM909Q was maintained during two weeks after treated. Life span of treatment animals was increased by 51% in comparison with control mice. Lower antitumor efficacy three - percent extract of ACM909Q in 300 and 600 mg/kg doses at per os administration during 5 possesses on breast carcinoma Ca-755 (TGI = 45% and 36%). Life span of mice with Ca-755 in comparison with control animals was not observed in this scheme of administration of ACM909Q. In colon adenocarcinoma AKATOL antitumor efficiency of 3 % Rhus verniciflua extract was observed only at 600 mg/kgdose daily during 5 days (TGI = 46%).

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ БЕЗ АЛЛЕРГЕННОГО ЭКСТРАКТА ИЗ RHUS VERNICIFLUA

Цой Вончелъ З.С. Смирнова 2, И.Ю. Кубасова2, А.Ю. Барышников2 1 КН. W. Academician Zhu Institute, Inchon, Корея 2Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

РЕЗЮМЕ

Данная работа посвящена исследованию противоопухолевой активности безаллергенного экстракта из Rush verniciflua, названного соединением ACM909Q. Установлено, что 3 и 9% экстракты ACM909Q из Rush verniciflua в дозе 600 мг/кг вызывают торможение роста перевиваемого рака шейки матки РШМ-5 на 86% при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней. Терапевтический эффект на РШМ-5 сохраняется в течение двух недель после окончания лечения. На этой модели опухоли также выявлено увеличение продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контрольными животными на 51 %. Более низкий, но статистически достоверный, противоопухолевый эффект 3% экстракт из Rush verniciflua проявляет на аденокарциноме молочной железы Са-755 в дозе 300 мг/кг (ТРО = 45 %) и аденокарциноме толстой кишки АКАТОЛ в дозе 600 мг/кг (ТРО = 46%) при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней.

Введение. В настоящее время препараты растительного происхождения нашли широкое применение при лечении злокачественных новообразований. Это ингибиторы митоза: винкаалколоиды и таксаны, а также ингибиторы топоизомераз ДНК [3]. Поиск новых агентов природного происхождения, обладающих противоопухолевой активностью, является актуальной задачей.

Восточное лаковое дерево Rush verniciflua зарегистрировано в фармакопеи трех стран: Корее, Китае и Японии как лечебное средство. При использовании в медицине одного вещества из лакового дерева без каких-либо добавок в 0,01% случаев развивается аллергическая реакция в виде высыпаний и волдырей на коже.

К настоящему времени получен безаллергенный экстракт из Rush verniciflua, названный как препарат ACM909Q. Установлено, что 1С50 безаллергенного экстракта на клеточных линиях опухолей PC-3, SRB, SW-620, ACHN, А459 и MOLT-4F составляет свыше 2000мг/кг.

Целью нашего исследования являлось изучение противоопухолевой активности экстракта из Rush verniciflua (ACM909Q) на перевиваемых моделях опухолей мышей.

Материалы и методы. Работа выполнена на 610 мышах - разных линий: C57BL/6, СВ A, BALB/c, а также гибридах BDF, (C57BL/6 х DBA/2) массой 18-25 гр.

Животных получали из отдела экспериментальных животных РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН и содержали в виварии на обычном рационе питания.

Противоопухолевая активность экстракта из Rush verniciflua изучена на 5 моделях перевиваемых солид-. ных опухолей: аденокарциноме молочной железы Са-755 [4], меланоме В-16 [5], аденокарциноме толстой кишки АКАТОЛ [2] и раке шейки матки РП1М-5 [1], а также лимфоцитарной лейкемии Р-388 [5].

Для перевивки солидных опухолей, выделенную опухолевую ткань измельчали ножницами до гомогенной консистенции, добавляли среду 199 в соотношении 1:10 и 0,5 мл полученной суспензии (приблизительно 50 мг опухолевой массы) вводили подкожно в область правой подмышечной впадины мышам.

Клетки лимфоцитарной лейкемии Р-388 вводили внутрибрюшинно по 5х105 клеток в 0,3 мл среды 199.

Лечение солидных опухолей начинали через 48 часов, а лейкоза Р-388 через 24 часов после перевивки опухоли. Лечение проводили ежедневно в течение 5 или 10 дней при введении экстракта из Rush verniciflua внутрь. Наблюдение за мышами проводили до их гибели.

В опытах использовали 3% и 9% экстракты из Rhus verniciflua. Для сравнения противоопухолевого эффекта экстрактов разной концентрации вычисляли дозы активного начала - препарата ACM909Q в мг/кг.

Противоопухолевое действие экстракта из Rhus verniciflua на перевиваемых опухолях мышей оценивали по двум критериям: торможению роста опухоли (ТРО, %) и увеличению продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными (УПЖ, %).

Торможение роста опухоли вычисляли по формуле:

Vk- Vo

ТРО =--------------- х 100%,

Vk

где Vk - средний объем опухоли в контрольной группе на определенный срок измерения (мм3);

Vo - средний объем опухоли в опытной группе на определенный срок измерения (мм3).

Увеличение продолжительности жизни вычисляли по формуле:

СПЖо - СПЖк

УПЖ =-------------------х 100%,

СПЖк

где СПЖк - средняя продолжительность жизни животных в контрольной группе (дни);

СПЖо - средняя продолжительность жизни животных в опытной группе (дни).

Группы формировали с учетом получения статистически достоверных результатов: контрольная группа состояла не менее чем из 12 мышей, опытная группа

- 8 животных.

При статистической обработке результатов опытов применяли метод Стьюдента-Фишера. Результаты считали статистически значимыми при р< 0,05.

Результаты и обсуждение.

1. Зависимость противоопухолевой активности 3% экстракта из Rhus verniciflua (препарат ACM909Q) от дозы и длительности введения.

Показано, что 3% экстракт из Rhus verniciflua -препарат ACM909Q в дозах 300 и 600 мг/кг при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней оказывает на аденокарциному молочной железы Са-755 статистически достоверный противоопухолевый эффект: ТРО = 45

- 36 % (табл. 1). Следует заметить, что при увеличении длительности лечения препаратом ACM909Q в дозе 300 мг/кг с 5 до 10 дней терапевтический эффект его несколько снижается по критерию торможения роста опухоли (45 —> 26%) и увеличивается по критерию УПЖ (91 -» 111%).

На аденокарциноме толстой кишки АКАТОЛ изучена противоопухолевая активность 3% экстракта из Rhus verniciflua при введении препарата ACM909Q внутрь в дозах 300, 600 и 1200 мг/кг в течение 5 и 10 дней (табл.2). Из данных таблицы видно, что препарат ACM909Q в дозе 600 мг/кг при ежедневном введении в течение 5 дней тормозит рост опухоли на 43 - 46%. Увеличение длительности введения препарата до 10 дней не приводит к увеличению его терапевтического эффекта. Установлено также, что при увеличении дозы препарата ACM909Q до 1200 мг/кг при ежедневном введении в течение 5 и 10 дней терапевтический эффект снижается до полного его исчезновения.

При изучении противоопухолевой активности 9% экстракта из Rhus verniciflua на лимфоцитарной лейкемии Р-388 препарат ACM909Q вводили в широком диапазоне доз от 300 до 3300 мг/кг ежедневно внутрь в течение 5 и 10 дней (табл. 3). Из данных таблицы 3 видно, что на этой модели опухоли не выявлено ни противоопухолевой активности, ни токсичности экстракта. Продолжительность жизни опытных мышей с Р-388 не отличается от продолжительности жизни животных в контроле.

2 . Зависимость противоопухолевой активности экстракта из Rhus verniciflua (препарат A CM909Q) от его концентрации.

Как было показано выше препарат ACM909Q в дозах 300 и 600 мг/кг при ежедневном пероральном введении в течение 5 дней оказывает на аденокарциному молочной железы Са-755 статистически достоверный противоопухолевый эффект (ТРО = 45 %). Разведение 3% экстракта из Rhus verniciflua в 2 и 5 раз и введение его в течение 5 и 10 дней в разных дозах активного начала приводит к резкому снижению терапевтического эффекта (табл. 4). Однако снижение противоопухолевой активности 1,5% и 0,6% экстрактов по критерию ТРО не приводит к уменьшению продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными.

На меланоме В-16 была изучена противоопухолевая активность 3% и 9 % экстракта из Rhus verniciflua (табл. 5). Как видно из таблицы, независимо от концентрации экстракта, длительности его введения (5 или 10 дней) препарат ACM909Q ни в одной дозе не проявил противоопухолевой активности на меланоме В-16.

На раке шейки матки РШМ-5 изучена противоопухолевая активность 3 и 9% экстракта из Rhus verniciflua в широком диапазоне доз активного начала от 150 мг/ кг до 3300 мг/кг. Данные, суммированные в таблице 6, показывают, что 3% экстракт из Rhus verniciflua в дозе 30 мл/кг (750 мг/кг активного начала) проявляет умеренный противоопухолевый эффект непосредственно после окончания ежедневного, перорального введения

в течение 5 дней: ТРО = 55% (р < 0,05). В то же время, 9% экстракт препарата АСМ909<3 в дозе 600 мг/кг вызывает длительный, в течение 2 недель, достаточно высокий противоопухолевый эффект, который проявляется торможением роста опухоли (84% —» 65%) и увеличением на 51% продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными. Увеличение дозы препарата АСМ909(^ до 2700 и 3300 мг/кг приво-

Таблица1

Изучение противоопухолевой активности 3% экстракта из Rhus verniciflua на аденокарциноме молочной железы мышей Са-755 при приеме внутрь в течение 5 и 10 дней

Доза (мг/кг) Курсовая доза (мг/кг) Дни введения ТРО, % УПЖ, % Гибель от токсичности

Дни от начала опыта

7 10

600 3000 2-6 36* 35 12 0/8

300 1500 2-6 45* 21 0/8

3000 2-11 26** 3 11 0/8

Примечание: * - р = 0,01; ** - р = 0,05 по отношению к контролю; *** - знак “+” - означает уменьшение продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контролем.

Таблица 2

Изучение противоопухолевой активности 3% экстракта из Rhus verniciflua на аденокарциноме толстой кишки мышей AKATOL при приеме внутрь в течение 5 и 10 дней

Доза (мг/кг) Курсовая Доза (мг/кг) Дни введения ТРО, % Гибель от токсичности

Дни от начала опыта

7 15 20 26

300 1500 2-6 9 15 11 16 0/8

3000 2-11 +12* +5* +8 9 0/8

600 3000 2-6 19 46** 42*** 46 0/7

6000 2-11 +3* 6 18 14 0/8

1200 6000 2-6 +3* +7* 0 29 0/8

12000 2-11 +7* +9* 3 2 0/8

Примечание: * - знак “+” - означает стимуляцию роста опухоли, но р > 0,05; ** - р = 0,02 и *** - р = 0,01 по отношению к контролю.

Таблица 3

Изучение противоопухолевой активности 9% экстракта из Rhus verniciflua на лимфоцитарной лейкемии Р-388 при приеме внутрь в течение 5 и 10 дней

Доза (мг/кг) Курсовая доза (мг/кг) Дни введения Средняя продолжительность жизни (дни)* УПЖ,% Гибель от токсичности

300 1500 1-5 10,4 + 0,4 4 0/7

3000 1-10 9,7 ± 0,4 +3 0/6

600 3000 1-5 10,1+0,5 1 0/7

6000 1-10 9,3 ± 0,6 +7 0/6 -

900 4500 1-5 10,3+0,3 3 0/7

9000 1-10 9,0 ± 0,4 +10 0/6

1200 6000 1-5 10,0 + 0,5 0 0/7

12000 1-10 10,7 + 0,3 7 0/6

1500 7500 1-5 10,7 + 0,3 7 0/6

2100 10500 1-5 9,7 ± 0,6 +3 0/6

2700 13500 1-5 10,2 + 0,5 2 0/6

3300 16500 1-5 10,5 ± 0,4 5 0/6

Примечание: *- СПЖ мышей в контрольной группе - 10,0 ± 0,3 дня.

дит к снижению терапевтического эффекта на РШМ-

5. Эти данные свидетельствуют о том, что нами выявлена высокочувствительная опухоль - РШМ-5 к экстракту из Rhus verniciflua, а также, что терапевтический эффект на этой модели зависит от концентрации экстракта.

Кроме того, данные по противоопухолевой активности экстракта из Rhus verniciflua дают основание предполагать, что в клинике препарат ACM909Q будет обладать терапевтическим действием лишь в отношении некоторых видов опухолей.

Таблица 4

Изучение противоопухолевой активности экстракта из Rhus verniciflua разной концентрации на аденокарциноме молочной железы Са-755 при приеме внутрь в течение 5 и 10 дней

Концентрация экстракта, % Доза (мг/кг) Курсовая доза (мг/кг) Дни введения ТРО, % УПЖ, % Гибель от токсичности

Дни от начала опыта

7 10

3 600 3000 2-6 36* п 35 12 0/8

3 300 1500 2-6 45 21 12 0/8

3000 2-11 26* 3 11 0/8

1,5 150 750 2-6 +15** 0 0/8

1500 2-11 +37** 3 0/8

0,6 120 20 2-11 10 +28** +4 0/8

0,6 60 300 2-6 13 +12** 6 0/8

600 2-11 +15** +32** 7 0/8

Примечание: * - р < 0,05 по отношению к контролю; ** - знак “+” означает стимуляцию роста опухоли и уменьшение продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными, р > 0,05.

Таблица 5

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Изучение противоопухолевой активности 3% и 9% экстракта из Rhus verniciflua на меланоме В-16 при приеме внутрь в течение 5 и 10 дней

Концентрация экстракта, % Доза (мг/кг) Курсовая доза (мг/кг) Дни ведения ТРО, % УПЖ, % Гибель от токсичности

Дни от начала опыта

7 10

3 300 1500 2-6 20 42 12 0/8

3000 2-11 2 2 0 0/8

3 600 3000 2-6 5 0 4 0/8

6000 2-11 0 12 0 0/8

3 1200 6000 2-6 7 0 2 0/8

12000 2-11 3 2 +8 0/8

9 300 3,3 2-6 29 23 14 0/8

600 6,7 2-6 17 2 14 0/8

1200 13,3 2-6 37 12 6 0/8

Таблица 6

Изучение противоопухолевой активности 3% и 9% экстракта из Rhus verniciflua на раке шейки матки РШМ-5 при приеме внутрь в течение 5 дней

Концентрация экстракта, % Доза (мг/кг) Курсовая доза (мг/кг) ТРО, % СПЖ (дни ± т) УПЖ, %

Дни от начала опыта

7 13 20

3 150 750 +8 9 +5 39,8 ±5,1 12

300 1500 21 16 13 44,5 ± 12,55 25

450 2250 29 17 3 45,4 ±4,75 28

600 3000 21 6 16 48,8 ±3,89 38*

750 3750 55* 35 13 42,1 ±3,51 19

9 300 1500 20 20 20 46,6 ±2,77 35

600 3000 84* 86* 65* 53,6 ±3,63 51*

900 4500 89 49 35 46,0 + 5,19 33

2100 10500 63* 16 12 49,4 + 3,57 45

2700 13500 63* +16** +18 43,4 ±6,42 26

3300 16500 39 +17 +19 37,4 ±1,85 8

Примечание: * - р < 0,05 по отношению к контролю; ** - знак “+” - означает стимуляцию роста опухоли.

Выводы.

1. На аденокарциноме молочной железы Са-755 и аденокарциноме толстой кишки AKATOJI выявлен кратковременный, но статистически достоверный противоопухолевый эффект 3% экстракта из Rhus verniciflua (ТРО - 45 и 46%, соответственно) в дозах 300 и 600 мг/кг при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней. На этих моделях не выявлено зависимости терапевтического эффекта от длительности введения экстракта.

2. Не выявлен противоопухолевый эффект 3% и 9% экстракта из Rhus verniciflua на меланоме В-16 и 9% экстракта на лимфоцитарной лейкемии Р-388.

3. Установлена высокочувствительная опухоль -РШМ-5 к 9% экстракту из Rhus verniciflua, на которой препарат ACM909Q в дозе 600 мг/кг проявляет достаточно высокий противоопухолевый эффект в течение двух недель: ТРО = 84 - 65% и УПЖ = 51%.

4. Установлена зависимость противоопухолевого эффекта экстракта из Rhus verniciflua от его концентрации. Уменьшение концентрации 3% экстракта из Rhus verniciflua в 2 и 5 раза на Са-755 приводит к резкому снижению его терапевтического эффекта. Увеличение концентрации экстракта из Rhus verniciflua на РШМ-5 с 3% до 9% вызывает более высокий и длительный, в течение двух недель, терапевтический эффект.

5. Не выявлены проявления токсичности (гибели опытных мышей раньше контрольных) экстракта из Rhus verniciflua при введении внутрь максимально возможного объема 9% суспензии (0,7 мл/мышь), что составляет дозу активного соединения - 3300 мг/кг.

6. Терапевтическая доза препарата ACM909Q на чувствительных к нему перевиваемых опухолях мышей составляет 600 мг/кг при ежедневном введении внутрь в течение 5 дней.

ЛИТЕРАТУРА

1. АманджоловБ.С., ИрдЕ.А., СофьшаЗ.П. Характеристи-

ка перевиваемого рака шейки матки (РШМ-5). // Вопр. онкологии, 1972,18, № 5, С. 96-98.

2. Зинзар С.Н., Лейтина Б.И., Тунян Б.Г. Злокачественные опухоли, возникшие из сингенных трансплантатов эмбрионального желудочно-кишечного тракта. // Вопр. онкологии, 1972,18, № 4, С. 89-92.

3. Химиотерапия опухолевых заболеваний. Под ред. Н.И.-Переводчиковой, 2000, С. 12-25.

4. Dunham L.J., Stewart H.L. A survey of transplantable and transmissible animal tumors. // J.Nat. Cancer Inst., 1953, 13, №5, P. 1299-1377.

5. GeranR.S., Greenberg N.H., Macdonald M.M. Protocols for screening chemical agents and natural products against animal tumors and other biological systems. // Cancer Chemother. Rep., 1972, Part 33,3, № 2, P. 9-11.

№4/том1/2002 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.