Изучение профилактической и терапевтической эффективности нового отечественного химиопрепарата Ингавирин® в отношении возбудителя гриппа a (H5N1) Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

e

Изучение профилактической и терапевтической эффективности нового отечественного химиопрепарата Ингавирин® в отношении возбудителя гриппа А (Н5Ш)

С. Я. ЛОГИНОВА1, С. В. БОРИСЕВИЧ1, О. М. ШКЛЯЕВА1, В. А. МАКСИМОВ1, В. П. БОНДАРЕВ1, В. Е. НЕБОЛЬСИН2

' Филиал федерального государственного учреждения «48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны Российской Федерации» — «Вирусологический центр», Сергиев Посад;

2 ОАО «Валента Фарм», Москва

Prophylactic and Therapeutic Efficacies of Ingavirin®,

a Novel Russian Chemotherapeutic,

with Respect to Influenza Pathogen A (H5N1)

S. YA. LOGINOVA, S. V. BORISEVICH, O. M. SHKLYAEVA, V. A. MAKSIMOV, V. P. BONDAREV, V. E. NEBOLSIN

Virologic Centre, a Branch of the Central Research Institute No. 48 of the Ministry of Defense of the Russian Federation, Sergiev Posad Valenta Farm Co., Moscow

Экспериментальное изучение эффективности Ингавирина® на интраназально инфицированных вирусом гриппа А (Н5Ш) белых мышах в сравнении с препаратами Тамифлю® и Арбидол® выявило, что исследуемый препарат при применении по схемам профилактики, экстренной профилактики и лечения эффективно защищает животных от гибели. Эффективная доза для профилактики гриппозной инфекции составила 5 мг/кг (защитная эффективность 46,7%), для экстренной профилактики и лечения — 15 мг/кг (защитная эффективность 40,0 и 35,0% соответственно).

Ключевые слова: грипп A (H5N1), Ингавирин®, противовирусная эффективность, профилактика, экстренная профилактика, лечение.

The experimental study of the Ingavirin® efficacy against the influenza virus A (H5N1) on intranasally-infected albino mice vs. Tamiflue® and Arbidol® showed that when used for the prophylaxis, urgent prophylaxis and therapy it was effective in the protec-tiom of the animals from death. The efficient dose for the prophylaxis of the influenza infection was 5 mg/kg (protective efficacy of 46.7%) and for the urgent prophylaxis and therapy it was 15 mg/kg (protective efficacy of 40.0 and 35.0% respectively).

Key words: influenza virus A (H5N1), Ingavirin®, antiviral efficacy, prophylaxis, urgent prophylaxis, therapy.

Грипп и ОРВИ остаются серьёзной проблемой для здоровья людей практически во всех странах мира, так как во время ежегодных эпидемий заболевает от 5 до 15% всего населения планеты, а во время пандемий число заболевших возрастает в 4—6 раз.

Наибольшее значение в возникновении эпидемий и пандемий играет вирус гриппа типа А, по причине высокой пластичности его генома. В отличие от коронавируса IV генотипа, вызвавшего тяжёлый острый респираторный синдром, который был в 2003 г. своевременно идентифицирован, выявлены его основные носители (вивьерры, енотовидные собаки, летучие мыши),

© Коллектив авторов, 2010

Адрес для корреспонденции: 141306 Московская обл., Сергиев Посад-6. Филиал ФГУ «48 Центральный НИИ МО РФ «Вирусологический центр»

а сама передача возбудителя от человека к человеку была вовремя прекращена, ликвидировать многочисленные вспышки гриппа А, подтип Н5Ш, в странах Юго-Восточной Азии, Ближнего и Среднего Востока, Европы и Африки пока не удается. Вирус преодолел межвидовой барьер и вызывает тяжёлые заболевания людей (502 случая на 29 июля 2010 г.) с летальностью около 59,4% (по состоянию на 29 июля 2010 г.) [1].

Эпизоотии гриппа А (Н5Ш) охватили 62 государства мира (по состоянию на 29 июня 2010 г.). В Российской Федерации не было отмечено случаев заболевания людей, однако заболевание домашней птицы было зарегистрировано в 2005 г. в 79 населённых пунктах 10 регионов Сибирского и Центрального федеральных округов, в 2006 г. — в 88 населённых пунктах 14 регионов Южного и Сибирского федеральных округов, в 2007 г. — в 15

О

Є

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Таблица 1. Профилактическая эффективность Ингавирина® в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа А (Н5М) (п=3)*

Препарат

Доза препарата, мг/кг

Схема применения препарата

Защита от гибели,

%, Хсрд.+^х

Удлинение средней продолжительности жизни, сут, Хсрд.+ох

Ингавирин®

Тамифлю®

Арбидол®

5.0

13.0

30.0

-120 ч, -96 ч, -72 ч, -48 ч, -24 ч, -1 ч

46,7+2,4

55,0+0,0

45,0+0,0

2,9+0,2

3,6+0,2

2,5+0,3

Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: * — количество животных в каждой группе — 20 белых мышей. Срок наблюдения за животными — 14 суток. В контроле гибель животных составила 100%.

населённых пунктах 3 регионов Центрального и Южного федеральных округов, в 2008 г. — в одном населённом пункте Дальневосточного федерального округа, в 2009 г. — в 2 населённых пунктах Сибирского и Центрального федеральных округов, а в 2010 г. в одном населённом пункте Сибирского федерального округа [2].

По мнению специалистов, интенсивная циркуляция вируса среди синантропных домашних птиц и человека, а также высокая изменчивость возбудителя могут привести к появлению нового типа вируса, который будет обладать контагиоз-ностью обычного «сезонного» гриппа и летальностью «птичьего». В условиях отсутствия у людей иммунитета к этому заболеванию и отсутствия эффективных лекарственных препаратов, возможная в этом случае пандемия может по своим масштабам превосходить пандемию гриппа 1918 г. («испанку»), унёсшую более 40 млн жизней.

Складывающаяся эпидемиологическая и эпизоотологическая ситуация обосновывает актуальность поиска новых эффективных отечественных медицинских неспецифических защитных препаратов в отношении гриппа А (Н5Ш).

Целью настоящей работы явилась оценка профилактической и лечебной эффективности нового отечественного химиопрепарата Ингавирин® в отношении экспериментальной формы гриппозной инфекции у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа А (Н5Ш).

Материал и методы

Вирус. В работе использовали вирус гриппа, штамм А/курица/Курган/Россия/2/05 (Н5Ш), выделенный в октябре 2005 года специалистами филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ» из биопроб, доставленных из очага заболевания — Утятской птицефабрики Курганской области. Хранящийся в Специализированной коллекции филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ» возбудитель гриппа А, штамм А/курица/Курган/Россия/2/05 (Н5Ш), был охарактеризован с помощью биологических и молекулярно-биологических методов исследования, в том числе путём секвени-рования специфических областей генома возбудителя [3, 4].

Исследуемый препарат. Ингавирин® производства ОАО «Валента Фарм», Россия.

Препараты контроля. Тамифлю® (осельтамивир) — производства фирмы Хоффманн — Ля Рош Лтд., Швейцария. Арбидол® — производства ЗАО «Мастерлек», Россия.

Лабораторные животные. Для моделирования экспериментальной формы гриппа А использовали белых мышей массой 10—12 г, полученных из вивария филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ».

Наблюдение за инфицированными животными проводили в течение 14 суток. Титрование возбудителя гриппа А проводили на 9-суточных РКЭ (развивающиеся куриные эмбрионы).

Оценка противовирусной эффективности используемых лекарственных препаратов осуществлена в соответствии с требованиями Фармакологического государственного комитета РФ [5]. Основными критериями оценки эффективности in vivo являлись:

— показатели защиты лабораторных животных от гибели;

— средняя продолжительность жизни (СПЖ) животных в группе.

Результаты и обсуждение

Оценку эффективности Ингавирина® в отношении вируса гриппа, штамм А/курица/Курган/2/05 (H5N1), проводили на белых мышах массой 10—12 г, инфицированных интраназально в дозе 10—15 ЛД50. В качестве инфицирующего препарата использовали аллантоисную жидкость инфицированных РКЭ с биологической активностью 9,0 lg ЭЛД50/мл, 5,0 lg ЛД50/мл и 6,5 lg ЦВД^/мл.

Изучение профилактической эффективности Ингавирина® в отношении экспериментальной формы гриппа, вызванной вирусом гриппа, штамм А/курица/Курган/Россия/02/05 (H5N1), свидетельствует о том, что эффективность препарата выявлена в дозе 5 мг/кг массы лабораторного животного (соответствует равноэквивалентной дозе для человека — 30 мг/сутки) (табл. 1). В среднем показатель защиты от гибели составил 46,7%, увеличение СПЖ — 2,9 суток.

В качестве референс-препаратов использовали Арбидол® и Тамифлю®. Арбидол® в дозе 30 мг/кг защищал от гибели 45% инфицированных белых мышей. Увеличение СПЖ составило 2,5 суток. Тамифлю® в дозе 13 мг/кг в среднем защищает от гибели 55% инфицированных животных. Удлинение СПЖ составило 3,6 суток.

Ингавирин® и Арбидол® оказывают сопоставимый защитный эффект при профилактической схеме введения препаратов, но при этом используемая доза Ингавирина® в 6 раз меньше, чем у Арбидола®.

Результаты изучения эффективности Ингавирина® при применении препарата по схеме экстренной профилактики свидетельствуют о том, что при пероральном использовании его эффективность выявлена в дозе 15 мг/кг массы лабораторного животного (табл. 2). В среднем защита от гибели составила 40,0%, увеличение СПЖ — 2,4 суток.

-о-

Таблица 2. Эффективность Ингавирина® в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа А (Н5№), при введении его по схеме экстренной профилактики (п=3)*

Препарат Доза препарата, Схема применения Защита от гибели, Удлинение средней продолжительности

мг/кг препарата Хсрд.+^х жизни, сут, Хсрд+^х

Ингавирин® 15,0 + 1 ч, +24 ч, 40,0+0,0 2,4+0,1

Тамифлю® 25,0 +48 ч, +72 ч, 50,0+0,0 2,7+0,1

Арбидол® 135,0 +96 ч, +120 ч 25,0+5,0 1,4+0,3

Таблица 3. Эффективность Ингавирина® в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей,

интраназально инфицированных вирусом гриппа А (Н5Ж), при введении его по лечебной схеме (п=3)*

Препарат Доза препарата, Схема применения Защита от гибели, Удлинение средней продолжительности

мг/кг препарата Хсрд.+ох жизни, сут, Хсрд+^х

Ингавирин® 15 +24 ч, +48 ч, 35,0+2,9 2,0+0,0

Арбидол® 135 +72 ч, +96 ч, 10,0+0,0 1,1+0,1

Тамифлю® 25 + 120 ч 44,0+5,0 3,8+0,2

Арбидол® в дозе 135 мг/кг защищал от гибели 25% инфицированных белых мышей, увеличение показателя СПЖ — 1,4 суток. Защитная эффективность Тамифлю® в дозе 25 мг/кг составила в среднем 50,0%. При этом наблюдалось удлинение СПЖ на 2,7 суток. Следовательно, по схеме экстренной профилактики Ингавирин® не уступает и даже несколько превосходит по защитной активности препарат Арбидол®. Однако в сравнении с Тамифлю® он несколько уступает по протектив-ной эффективности.

При пероральном использовании лечебная эффективность Ингавирина® выявлена в дозе 15 мг/кг массы лабораторного животного (табл. 3). В среднем защита от гибели составила 35,0%, увеличение СПЖ — 2,0 суток.

ЛИТЕРАТУРА

1. http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table _2010 _07_29/єп/Мєх.Мш1

2. http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/ai_timeline/ єп/і^єх.Мші

3. Сыромятныкова С. И., Борисевич С. В., Хамитова М. Ф. и др. Обоснование выбора штамма гриппа А, подтип Н5Ш, предназначенного для оценки защитной эффективности существующих и вновь разрабатываемых в Российской Федерации лекарственных средств и медицинских иммунобиологических препаратов. Труды второго съезда военных врачей медико-профилактического профиля «Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы Развития», 15—17 ноября 2006 г., г. Санкт-Петербург. Вестн Росс Военн-мед акад 2006; 1: 15: Приложение.

Арбидол® в дозе 135 мг/кг защищал от гибели 10% инфицированных белых мышей, увеличение показателя СПЖ — 1,1 суток. При применении Тамифлю® в дозе 25 мг/кг защитная эффективность составила в среднем 44%. При этом наблюдали удлинение СПЖ на 3,8 суток.

Полученные результаты профилактической и лечебной эффективности Ингавирина® в отношении вируса гриппа А (Н5Ш) согласуются с ранее полученными данными в отношении гриппа А (Н3Ш) [6, 7].

Таким образом, результаты противовирусной активности Ингавирина® в отношении вируса гриппа А (Н5Ш) свидетельствуют о возможности его использования в качестве лечебного и профилактического препарата выбора.

4. Мельников Д. Г., Меркулова О. В., Маношкин А. В. и др. Лабораторная диагностика гриппа А (Н5№) во время эпизоотий 2005—2007 гг. на территории Российской Федерации. Матер. докл. международной научно-практической конференции «Проблемы совершенствования межгосударственного взаимодействия в подготовке к пандемии гриппа», 9—10 октября 2008 г., Новосибирск. Новосибирск, 2008; 34—35.

5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Минздрав РФ, 2005.

6. Логинова С. Я., Борисевич С. В., Максимов В. А. и др. Изучение лечебной эффективности нового отечественного препарата Ингавирин® в отношении возбудителя гриппа А (Н3К2). Антибиотики и химиотер 2008; 53: 7—8: 27—30.

7. Логинова С. Я., Борисевич С. В., Максимов В. А. и др. Изучение профилактической эффективности нового отечественного препарата Ингавирин® в отношении возбудителя гриппа А (Н3К2). Там же 2008; 53: 11—12: 19—21.

О