Изучение профилактического кардиопротекторного действия некоторых отечественных антигипоксантов при ишемии и сахарном диабете

Блинова Екатерина Васильевна; Курганов Николай Александрович; Блинов Дмитрий Сергеевич; Левина Ольга Федоровна; Гончаров Евгений Юрьевич; Яснецов Виктор Владимирович

УДК 615.2:616-005.4:616.379-008.64

ИЗУЧЕНИЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО КАРДИОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ НЕКОТОРЫХ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ АНТИГИПОКСАНТОВ ПРИ ИШЕМИИ И САХАРНОМ ДИАБЕТЕ

Е. В. Блинова, Н. А. Курганов, Д. С. Блинов, О. Ф. Левина, Е. Ю. Гончаров, В. В. Яснецов

На модели определения размеров зон ишемии и некроза доказана антиишемическая активность, проявляющаяся в сокращении размеров зоны некроза и отношения размеров зоны некроза и ишемии, у производных 3-гидроксипиридина, аминоэтансуль-фоновой и глутаминовой кислот при их профилактическом курсовом введении животным с экспериментальным стрептозотоциновым сахарным диабетом.

Актуальность. Ишемическая болезнь сердца, несмотря на все усилия, направленные на ее профилактику и лечение, по-прежнему поражает широкие массы населения. Предиктом формирования ишемического повреждения сердца нередко является сахарный диабет [2]. В механизме альтерации клеточных структур при повреждении миокарда различной этиологии большую роль отводят метаболическим расстройствам, в том числе чрезмерной активации процессов пере-кисного окисления липидов, нарушению внутриклеточной энергопродукции. Это является патогенетическим обоснованием для использования в клинике различных природных и синтетических ингибиторов сво-боднорадикальных реакций в качестве препаратов антиоксидантной терапии [1].

Предметом исследования явились 3-гидроксиэтилпиридина малат (этоксидол, ВНЦ БАВ, Россия), 20% раствор деанола ацеглумата (нооклерин, «Пик-фарма», Россия) и жидкая форма дезоксирибонуклеина-

Цель работы — изучить профилактическое кардиопротекторное действие 3-гидро-ксиэтилпиридина малата, деанола ацеглума-та и дезоксирибонуклеината натрия при ишемии и стрептозотоциновом сахарном диабете.

Материалы и методы исследования. Эксперименты проводились на половозрелых мышах и крысах обоего пола (табл. 1). Они находились в боксированных помещениях на стандартной диете с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях. Все болезненные манипуляции выполнялись под общей анестезией с применением водного раствора тиопентала натрия, вводимого внутри-брюшинно в дозе 50 мг/кг.

та натрия — препарат «Деринат» (НПО «Техномедсервис», Россия). Исследуемые соединения и препараты сравнения испытывали в эквитоксических дозах, составляющих 5,0 и 2,5 % от показателя LD50.

Таблица 1

Характеристика экспериментальных животных

Раздел исследования Вид животны1х п Масса, г

Изучение размеров зон ишемии и некроза Крысы 87 200 — 350

Исследование веществ на модели катехола-миновых микронекрозов Мыши 100 сч сч 8

У всех животных моделировали инсу-линзависимый сахарный диабет путем введения водного раствора противоопухолевого препарата стрептозотоцина в дозе 15 мг/кг, который разрушает р-клетки поджелудочной железы и вызывает развитие патологического состояния в течение 14 дней.

На первом этапе изучали противоишеми-ческое действие препаратов с помощью дифференциального индикаторного метода определения размеров зон некроза и ишемии у крыс. Наркотизированных белых крыс-самцов линии Vistar со срептозотоциновым сахарным диабетом на 15-е сутки переводили на искусственную вентиляцию легких, вскрывали грудную клетку и моделировали острую ишемию путем перевязки левой нисходящей артерии. Затем животных забивали, извлекали сердце и окрашивали его синькой Эванса (индикатор зоны ишемии) и красным формазаном (индикатор зоны некроза). Расчет зон повреждения проводили по следующей формуле:

у _ К1М1 + К2М2 Х 100

Х _ К1(М1 + М2) Х 10°' где для расчета зоны некроза: X — размеры зоны некроза к общей массе миокарда, %; К1 — содержание красного формазана в неповрежденном участке, мг/кг; К2 — содержание красного формазана в поврежденном участке, мг/кг; М1 и М2 — соответственно массы поврежденного и неповрежденного участков миокарда, г.

Для расчета зоны ишемии: X — размеры зоны ишемии к общей массе миокарда, %; К1 — содержание синьки Эванса в неповрежденном участке, мг/кг; К2 — содержание синьки Эванса в поврежденном участке, мг/кг; М1 и М2 — соответственно массы поврежденного и неповрежденного участков миокарда, г.

На втором этапе изучали профилактическое кардиопротекторное действие препаратов при адреналиновом повреждении миокарда крыс. Для этого адреналина гидрохлорид в дозе 200,0 мкг/кг (0,1% раствор в ампулах по 1 мл, АО «Московский эндокринный завод», Россия) инъецировали внут-рибрюшинно на 15-е сутки после однократного внутрибрюшинного введения раствора стрептозотоцина. Предварительно (за 2 — 3 мин до инъекции катехоламина) проводили интратрахеальную инстилляцию эфира для наркоза в объеме 0,1 мл/кг с помощью микропипетки. У подопытных животных ре-

гистрировали ЭКГ во II стандартном отведении. Критерием эффективности на данной модели являлась летальность животных, а также частота развития эктопических аритмий и блокад проведения.

Результаты исследования. При выполнении первого этапа исследований были проведены одна серия опытов на интакт-ных крысах (контроль-1) и 11 серий опытов на белых крысах-самцах линии Vistar на 15-е сутки после внутрибрюшинного введения животным стерптозотоцина. Формирование инсулинзависимого сахарного диабета сопровождалось эскалацией тяжести ишеми-ческой альтерации сердца, что проявлялось в первую очередь в увеличении объема зоны гибели миокарда — он статистически достоверно увеличивался в среднем до 45 % от общей массы миокарда. Свидетельством тяжести поражения явилось и то, что у двух животных в серии воспроизведение инфаркта миокарда закончилось летально. Профилактическое введение цитопротекторов: парентеральное 3-гидроксиэтилпиридина ма-лата (3-ГПМ) и дезоксирибонуклеината натрия и энтеральное — деанола ацеглумата, подобно препаратам сравнения пропраноло-лу и триметазидину, ограничивает альтера-тивные процессы в миокарде крыс с инсу-линзависимым сахарным диабетом преимущественно за счет уменьшения размера зоны некроза и увеличения соотношений размеров зоны ишемии к зоне некроза (рис.). При этом сила эффекта 3-гидроксиэтилпиридина малата превосходит таковую структурного аналога мексидола, поскольку антиишеми-ческое действие яблочнокислой соли оксипи-ридина сохраняется и в дозе, пропорциональной 2,5 % от показателя LD50.

На втором этапе нашей работы в контрольной серии опытов внутривенное введение адреналина гидрохлорида в дозе 100 мкг/кг сопровождалось развитием желудочковой аритмии и блокад проведения у всех животных с сахарным диабетом, что сопровождалось тотальной гибелью мышей на 13 — 16-й минутах опыта вследствие асистолии (табл. 2).

Первый препарат сравнения — пропра-нолол — в дозе 1,0 мг/кг достоверно снижал частоту развития нарушений ритма и проводимости, однако не предотвращал летальность животных, причиной которой, как правило, также была асистолия. Мы наблюдали лишь тенденцию к увеличению времени гибели мышей до 21 ± 5 мин.

I [контроль-1

^^ЭПропранолол 1,0 мг/кг

— нДсаиппа ацеглумат 125,0 мг/кг ^^ШТриметазидин 2,0

Зконтроль-2 ЗДН 7,5 мг/кг 33-ГПМ 14,0 мг/кг

Мексидол 14,0 мг/кг ДН 3,8 мг/кг 3-ГПМ 7,0 мг/кг

Рис. Отношение размеров зон некроза к общей массе миокарда сердца крысы с сахарным диабетом через 4 ч после ОКА, %

Таблица 2

Эффективность исследуемых веществ при профилактическом введении при адреналиновой интоксикации мышей с сахарным диабетом

Условия опыта, доза, мг/кг/сут п С желудочковой аритмией С AV-бло-кадой Погибло мышей Время гибели, мин

Контроль 14 14 14 14 13 ± 3

Пропранолол, 1,0 14 5* 6* 11 21 ± 5

Мексидол, 22,0 14 12 11 11 64 ± 3*

3-ГПМ, 22,0 14 11 11 7* 134 ± 12*

Деанола ацеглумат, 250,0 14 11 12 8* 74 ± 7*#

ДН, 12,0 14 12 12 9* 52 ± 8*#

Примечание. * отличия от группы контроля достоверны при р < 0,05; # отличия от группы животных, получавших 3-ГПМ, достоверны при р < 0,05 (¿-критерий Стьюдента).

Терапевтический эффект препарата сравнения мексидола в исследуемой дозе проявлялся в статистически достоверном увеличении времени гибели животных и тенденции к снижению экспериментальной летальности, в то же время эктопическая активность в миокарде мышей и нарушения проведения импульса по проводящей системе сердца сохранялись на высоком уровне, близком к контрольным значениям.

Спектр фармакологических эффектов 3-

гидроксиэтилпиридина малата, деанола аце-глумата и дезоксирибонуклеината натрия на данной модели повторял спектр мексидола: противоаритмического действия не регистрировали, не наблюдалось предотвращения развития блокад проведения, в то время как соединения увеличивали время наступления гибели животных с достоверным снижением числа погибших мышей. При этом наибольшее профилактическое действие проявило производное 3-гидроксипиридина малата, уве-

личивавшее продолжительность жизни животных с адреналиновой интоксикацией в среднем до 134 с.

Выводы

1. У животных со стрептозотоциновым сахарным диабетом 3-гидроксиэтилпириди-на малат, деанола ацеглумат и дезоксирибо-нуклеинат натрия при курсовом профилактическом введении в дозах, пропорциональных с учетом правил межвидового переноса, 5,0 и 2,5 % от показателя LD50, проявляют

антиишемическую активность: у крыс через 4 ч после развития острого инфаркта миокарда вещества ограничивают размеры зоны некроза.

2. При катехоламиновом повреждении миокарда мышей со стрептозотоциновым сахарным диабетом профилактическое введение 3-гидроксиэтилпиридина малата, деано-ла ацеглумата и дезоксирибонуклеината натрия сопровождается снижением летальности и увеличением продолжительности жизни животных.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Ланкин В. З. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / В. 3. Ланкин, А. К. Тихазе, Ю. Н. Беленков // Кардиология. 2000. № 7. С. 48 61.

2. Маколкин В. И. Ишемическая дисфункция миокарда и пути ее коррекции / В. И. Макол-кин // Ишемическая болезнь сердца. 2000. Т. 2. С. 2 5.

Поступила 07.12.2012.

УДК 616-005.1:615.225

ИЗМЕНЕНИЕ РЕАКЦИИ ЛИНЕЙНОЙ СКОРОСТИ КРОВОТОКА НА ВВЕДЕНИЕ ДОПАМИНА В УСЛОВИЯХ ДИСЛИПЕДИМИИ И СОЧЕТАННЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ

А. В. Зорькина, О. В. Артемьева, С. Д. Табачков

На спектре моделей метаболических нарушений в эксперименте показано изменение линейной скорости кровотока в брюшном отделе аорты крыс: снижение пиковой скорости при моделировании дислипидемии, повышение средней скорости кровотока при моделировании гипергликемии и сочетанных метаболических нарушений. Продемонстрировано изменение эффекта допамина: на фоне дислипидемии более выраженный рост пиковой и средней скоростей кровотока, чем при введении допамина интактным животным, на фоне гипергликемии и сочетанных метаболических нарушений снижение эффекта препарата.

Метаболические нарушения могут стать причиной изменения фармакодинамики лекарственных препаратов. Так, наблюдаются более значительные изменения локального кровотока под влиянием внутривенного введения норадреналина, дофамина и серото-нина в условиях метаболических нарушений,

вызванных длительной гипокинезией [6]. Изучение эндотелийзависимой дилатации коронарных артерий также показало, что, в отличие от здоровых людей, у которых ацетил-холин вызывает зависимую от дозы релаксацию коронарных артерий, его введение в измененные атеросклеротическим процессом

Текст научной работы на тему «Изучение профилактического кардиопротекторного действия некоторых отечественных антигипоксантов при ишемии и сахарном диабете»