CC BY
68
УДК 615.322(571.15)
ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИСАХАРИДНОГО КОМПЛЕКСА ХАТЬМЫ ТЮРИНГЕНСКОЙ ТРАВЫ, ПРОИЗРАСТАЮЩЕЙ НА ТЕРРИТОРИИ АЛТАЙСКОГО КРАЯ
Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул Федосеева Л.М., Мызникова О.А.
Цель работы - изучение качественного состава Сахаров и определение количественного содержания суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, произрастающей на территории Алтайского края. С помощью качественных реакций подтверждали наличие в сырье моно- и полисахаридов. Методом тонкослойной хроматографии идентифицировали моносахариды: арабинозу, глюкозу, галактозу. Методом гравиметрии установили содержание суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, заготовленной в разных районах Алтайского края: 6,85-8,39%. Ключевые слова: Lavatera thuringiaca L., полисахаридный комплекс.
The aim of the work is to study the qualitative composition of polysaccharides and determine the quantitative content of the sum of polysaccharides in the Lavatera thuringiaca herb growing on the territory of Altai Krai. By means of qualitative reactions, the presence of mono- and polysaccharides in the raw material was confirmed. Monosaccharides were identified by thin layer chromatography: arabinose, glucose, galactose. By the method of gravimetry, the content of the sum of polysaccharides in the Lavatera thuringiaca herb gathered in different regions of Altai Krai were established: 6,85-8,39%. Key words: Lavatera thuringiaca L., polysaccharide complex.
Введение
Растения семейства Мальвовые (Malvaceae Juss.) применяются в народной медицине в качестве отхаркивающего, противовоспалительного, обезболивающего, обволакивающего средств. В научной медицине используют только алтей лекарственный (Althaea officinalis L.) и алтей армянский (Althaea armeniaca Ten.), трава и корни которых содержат полисахаридные комплексы, что позволяет использовать их для лечения простудных, острых респираторных и некоторых других заболеваний [1].
На территории Алтайского края ареал распространения разных видов алтея очень ограничен: произрастают только в заказниках. Следовательно, возникает необходимость поиска дополнительных сырьевых источников среди близкородственных видов.
Одним из таких растений является хатьма тюрингенская (Lavatera thuringiaca L.). Среди преимуществ данного вида: структурное разнообразие комплекса биологически активных соединений (витамины, полисахариды, фенольные соединения); широкий ареал распространения на территории Алтайского края (встречается повсеместно) [2-3].
Целью настоящего исследования является изучение качественного состава сахаров и определение количественного содержания суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, произрастающей на территории Алтайского края.
Материал и методы
В качестве объекта исследования использовали хатьмы тюрингенскую траву, заготовленную на территории Бийского, Быстроистокского, Калманского, Красногорского, Первомайского, Солтонского и Целинного районов Алтайского края. Заготовку травы вели в 2017 году в различные фазы вегетации: бутонизация (начало июня), цветение (середина июля), плодоношение (конец августа).
Готовили водные извлечения из хатьмы тюрингенской травы в соотношении «сырье-экс-трагент» - 1:10. Для подтверждения наличия сахаров в извлечениях проводили качественные реакции: реакцию с реактивом Фелинга, реакцию серебряного зеркала, реакцию Молиша. Наличие полисахаридов подтверждали путем их осаждения спиртом этиловым 96%. Крахмал идентифицировали по реакции с раствором Люголя; слизи - по реакции с раствором щелочи [4-5].
Состав моносахаридов сырья изучали методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). Проводили гидролиз полисахаридов хлористоводородной кислотой концентрированной на кипящей водяной бане в течение 30 мин. К гидролизатам прибавляли по каплям натрия гидроксида раствор 40% до получения раствора с рН 4,0-4,5 [6]. На линии старта хроматографи-ческих пластинок <^огЬШ» наносили исследуемые растворы и растворы стандартных образцов (СО) моносахаридов: арабиноза, галактоза,
глюкоза, ксилоза, фруктоза. СО были приобретены у ЗАО «ВЕКТОН».
В качестве подвижной фазы использовали систему растворителей спирт н-бутиловый -уксусная кислота ледяная - вода (БУВ) 4:1:5 [7]. Проявляли хроматограммы путем последовательной обработки натрия карбоната раствором 20% и пикриновой кислоты раствором 1%. Пластинки нагревали в сушильном шкафу. Отмечали цвет пятен. Рассчитывали значения К1\
Количественное определение суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, заготовленной в разные фазы вегетации и из разных
Установлено, что в состав полисахаридного комплекса хатьмы тюрингенской травы входят слизи. Крахмал в исследуемом сырье не обнаружен.
Далее проводили кислотный гидролиз полисахаридов и изучали моносахаридный состав сырья методом ТСХ в системе БУВ 4:1:5. После
Из таблицы 2 следует, что моносахариды хатьмы тюрингенской травы представлены ара-бинозой (И=0,43±0,04), галактозой (^=0,34±0,03), глюкозой (^=0,37±0,03).
мест произрастания, проводили методом гравиметрии согласно Государственной фармакопее (ГФ) XIII издания [6]. Полученные данные статистически обрабатывали в соответствии с требованиями ГФ XIII издания (ФС.1.1.0013.15) [6].
Результаты и обсуждение
С водными извлечениями хатьмы тюринген-ской травы проводили качественные реакции на сахара. Положительные результаты реакций свидетельствуют о наличии свободных и связанных сахаров в исследуемом сырье (табл. 1).
хроматографирования пластинки высушивали на воздухе; обрабатывали натрия карбоната раствором 20% и пикриновой кислоты раствором 1%; нагревали в сушильном шкафу. Наблюдали появление оранжевых пятен на желтом фоне (рисунок 1). Рассчитывали значения ^ исследуемых и стандартных образцов (табл. 2).
Далее проводили количественное определение суммы полисахаридов хатьмы тюрингенской травы методом гравиметрии по методике ГФ XIII издания [6]. Результаты исследования представлены в таблице 3.
Таблица 1
Результаты качественных реакций на моносахариды и полисахариды хатьмы тюрингенской травы
Наименование реактивов (реакций) Результаты реакций Наличие БАС
Реактив Фелинга Выпадение кирпично-красного осадка Присутствуют восстанавливающие сахара
Серебра нитрата аммиачный раствор 2,5% (реакция серебряного зеркала) Выпадение бурого осадка
а-нафтола спиртовой раствор 20%, серная кислота концентрированная (реакция Молиша) Образование кольца красного цвета на границе раздела двух фаз Присутствуют моносахариды, дисахариды, полисахариды
Спирт этиловый 96% (реакция осаждения полисахаридов) Выпадение студенистого осадка Присутствуют полисахариды
Натрия гидроксида раствор 30% Ярко-желтое окрашивание Присутствуют слизи
Люголя раствор Коричневое окрашивание Отсутствует крахмал
Таблица 2
Результаты определения моносахаридного состава хатьмы тюрингенской травы методом ТСХ в системе
БУВ (4:1:5)
№ СО Наименование СО Величина Rf СО Величина Rf моносахаридов сырья
2 L(+)-Арабиноза 0,43±0,03 0,43±0,04
3 D(+)-Галактоза 0,34±0,03 0,34±0,03
4 D(+)-Глюкоза 0,37±0,04 0,37±0,03
5 D(+)-Ксилоза 0,49±0,05 -
6 D(-)-Фруктоза 0,45±0,04 -
Рисунок 1.
Хроматограмма Сахаров хатьмы тюрингенской травы в системе БУВ (4:1:5): 1 - водное извлечение хатьмы
тюрингенской травы, 2-6 - СО моносахаридов
Таблица 3
Результаты количественного определения суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, заготовленной в разные фазы вегетации и в разных районах произрастания
Фенологическая фаза
Фаза бутонизации Фаза цветения Фаза плодоношения
Район заготовки сырья
Бийский Быстроистокский Калманский Красногорский Первомайский Солтонский Целинный
Метрологические характеристики, Р=95%, n=5, f=2,78
Х±ЛХ, % s £, %
7,63±0,15 0,09 1,18
7,60±0,18 0,10 1,35
6,82±0,16 0,09 1,33
Метрологические характеристики, Р=95%, n=5, f=2,78
х±Лх, % s £, %
7,60±0,18 0,10 1,35
7,78±0,15 0,09 1,14
8,39±0,16 0,10 1,08
7,67±0,19 0,11 1,48
8,18±0,24 0,14 1,69
7,28±0,18 0,10 1,42
6,85±0,17 0,10 1,42
Установлено, что наибольшее накопление
Результаты исследования свидетельствуют
суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве происходит в фазы бутонизации (июнь) и цветения (июль). Следовательно, данный период является оптимальным для заготовки сырья.
Далее сравнивали количественное содержание суммы полисахаридов в траве, заготовленной в разных районах Алтайского края, отличающихся по климатическим и экологическим условиям (табл. 3). Установили, что содержание суммы полисахаридов изменяется незначительно и составляет 6,85-8,39% (рисунок 2).
о возможности заготовки хатьмы тюрингенской травы повсеместно на территории Алтайского края.
Выводы
1. В ходе работы установлено, что хатьмы тюрингенской трава содержит углеводы различной структуры: моносахариды и полисахариды. Моносахариды представлены арабинозой, глюкозой, галактозой. В состав полисахаридного комплекса входят слизи.
Рисунок 2.
Содержание суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве в зависимости от района заготовки
2. Максимальное накопление полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве происходит в фазы бутонизации и цветения.
3. Содержание суммы полисахаридов в хатьмы тюрингенской траве, заготовленной в разных районах Алтайского края, составляет 6,85-8,39%.
Результаты исследований позволяют рассматривать хатьмы тюрингенской траву в качестве альтернативного источника лекарственного растительного сырья.
Список литературы
1. Дроздова И.Л. Фармакогностическое изучение некоторых представителей семейства Мальвовых: Дис. ... канд. фарм. наук. Курск, 2000.
2. Федосеева Л.М., Мызникова О.А., Кудри-кова Л.Е. Изучение фенольных соединений надземной части хатьмы тюринген-ской, произрастающей на территории Алтайского края. Химия растительного сырья. 2017; 2: 107-112.
3. Федосеева Л.М., Мызникова О.А. Определение состава БАС хатьмы тюринген-ской травы, произрастающей на территории Алтайского края. Актуальные проблемы фармакологии и фармации. 2016; 13: 191-197.
4. Брюханов В.М., Федосеева Л.М. Бадан толстолистный. Барнаул, 2006.
5. Коноплёва, М. М. Фармакогнозия: природные биологически активные вещества. Витебск, 2010.
6. Государственная фармакопея Российской Федерации [Электронный ресурс]: Министерство здравоохранения Российской Федерации. М.: 2015. Доступно по: http://www.femb.ru/feml.
7. Беликов В.Г., Меньков С.В., Лигай Л.В. Изучение динамики накопления полисахаридов в хатьме тюрингенской. Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных трудов. Пятигорск, 2005; 60: 185-187.
Контактные данные
Автор, ответственный за переписку: Мызникова Ольга Александровна, аспирант кафедры фармации Алтайского государственного медицинского университета, г. Барнаул. 656038, Алтайский край, г. Барнаул, пр. Ленина, 40.
Тел. (3852) 24-02-78.
E-mail: [email protected]
