7. Suvorov O., Martin M. Rukovodstvo po elektrokardiografii melkih domashnih zhivotnyh (Manual on electrocardiography of small pets), Moscow, Akvarium-Print, 2012,144 p.
8. SuterP. F., KonB. Bolezni sobak(Dog diseases), 10-e izdanie, pererab., dop., Moscow, Akvarium-Print, 2011,1360 p.
9. Karen Tobias, Spencer Johnston. Veterinary Surgery: Small Animal 1st Edition, Saunders 2011,2332 p.
10. Murata I., Ooi K., Sasaki H., Kimura S., Ohtake K., Ueda H., Uchida H., Yasui N., Tsutsui Y., Yoshizawa N., Hi-rotsu I., Morimoto Y., Kobayashi J. Characterization of systemic and histologic injury after crush syndrome and intervals of reperfusion in a small animal model, J. Trauma, 2011 Jim; 70(6), 1453-63. DOI: 10.1097/TA.0b013e31820ca00a.
11. Nelson R., Couto C. G. Small Animal Internal Medicine 5thEdition, Mosby 2014,1476 p.
12. Todd R. Tams, Handbook of Small Animal Gastroenterology, Saunders 2003, 608 p.
УДК 619:618.41.37
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ ШАШКИ «ТАМБЕЙ», ЕЕ ТЕРМОВОЗГОННОЙ ОСНОВЫ, ЭФИРНЫХ МАСЕЛ ЛИМОНА, ПИХТЫ И ИХ СМЕСИ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ НА ИХ ОСНОВЕ НОВЫХ ВЕТЕРИНАРНЫХ ПРЕПАРАТОВ
B. В. Маслова ' \ инженер - исследователь;
C. Ю. Солодников 1 . канд. мед. наук, доцент;
Г. А. Триандафилова ' . младший научный сотрудник; Е. И. Яковлева 2; Е. Д. Гапечкина 2
1 ФГБОУ ВО ПНИПУ НОЦ "ХимБи ". 614990, Пермский край, г. Пермь, Комсомольский проспект, д. 29.
2 ФГБОУ ВО ПГФА, 614990, Российская Федерация, Пермский край, г. Пермь, ул. Екатерининская, д. 101.
3 ФГБОУ ВО Пермский ГАТУ, 614990, Российская Федерация, Пермский край, г. Пермь, ул. Петропавловская, 23.
E-mail: vmaslova@mail.ru
Аннотация. Определена острая ингаляционная токсичность ветеринарного препарата -термовозгонной шашки «Тамбей», термовозгонной основы шашки, эфирных масел лимона, пихты и их комбинации. Исследования проводились на базе научно-образовательного центра прикладных химических и биологических исследований Пермского национального исследовательского политехнического университета. Токсичность термовозгонной шашки «Тамбей» изучалась при времени экспозиции 30 и 240 минут. Токсичность термовозгонной основы шашки, эфирных масел пихты, лимона и их комбинации исследовалась при экспозиции 30 минут. Острую токсичность изучали на белых мышах линии CD - 1. Исследуемые концентрации: пихтовое масло - 0,25 мг/л, 2,5 мг/л и 3 г/л, лимонное масло - 3 г/л, смесь масел - 0,6 г/л (0,3 г/л пихтового и 0,3 г/л лимонного масел) и Зг/л (1,5 мг/л пихтового и 1,5 мг/л лимонного масел). Для определения острой токсичности (CL50) термовозгонной шашки «Тамбей» и ее термовозгонной основы использовали концентрации в интервале 60 - 109 мг/л и 16-63 мг/л соответственно. Токсичность термовозгонной шашки определяется токсичностью ее термовозгонной основы, с увеличением времени экспозиции токсичность шашки возрастает. Токсичность эфирных масел пихты, лимона и их смеси позволяет отнести их к малотоксичным веществам (CL50 >3000 мг/л). Комбинация масел обладает выраженным угнетающим действием на центральную нервную систему. Комбинация масел лимона и пихты является перспективной для создания на её основе нового ветеринарного препарата.
Ключевые слова: термовозгонные шашки, эфнрные масла, острая токсичность.
Введение. В настоящее время для лечения острых респираторных заболеваний (ОРЗ) сельскохозяйственных животных преимущественно используют антибиотики, сульфаниламиды и их комбинации [1-3]. Применение антибиотиков сопровождается определенными негативными последствиями - формированием устойчивости возбудителей к этим препаратам, возможностью попадания в организм человека с продуктами животноводства, необходимостью утилизации молока от больных животных. Лечение заболеваний верхних дыхательных путей и легких у животных включается в производственный цикл предприятия, что требует дополнительных затрат [4]. Разработка альтернативных методов лечения ОРЗ является актуальной задачей. Использование эфирных масел как альтернативы применения антибиотиков - это перспективный метод лечения, так как эссенциальные масла обладают противомикробным, иммуно-модулирующим, противогрибковым, антиги-поксическим свойствами, оказывая комплексное терапевтическое действие на организм животных [5, 6].
В настоящий момент в ветеринарной практике используется препарат - термовозгонная шашка "Тамбей . в состав которого в качестве действующего вещества входит пихтовое масло. Основными действующими веществами пихтового масла являются моно-терпеновые углеводороды (63,5 %) и эфиры (8,2 %), наиболее распространенные из которых а-пинен, |3-пинен, мирцен, камфен, тер-пинолен, лимонен, (¿-кадинен, трициклин, |3-кариофиллин, борнилацетат, борнеол и тер-пин-1-ен-4-ол, с которыми связывают основные биологические эффекты эфирных масел [7].
Комбинирование эссенциальных масел эфироносных растений, имеющих разное процентное содержание активных веществ, может привести к усилению эффекта вследствие проявления синергетических эффектов. Таким образом, комбинация эссенциальных масел является перспективной основой для разработки новых ветеринарных препаратов.
Цель работы - изучить острую ингаляционную токсичность ветеринарного препарата "Тамбей", комбинации эфирных масел пихты и лимона.
Задачи: изучить острую токсичность шашки, ее термовозгонной основы, изучить
острую токсичность эфирных масел и их комбинации.
Методика. Изучение острой токсичности проводилось на белых мышах линии CD-I в возрасте 3 месяцев, обоего пола. Животные были получены из лицензированного источника, имеющего действующую AAALAC аккредитацию, - НЛП «Питомник лабораторных животных» ФИБХ РАН (МО, г. Пущино). Животные содержались в поликарбонатных клетках (Bioskape) по 5 животных одного пола в каждой в соответствии со стандартом ЕС 2010/63/EU, на подстиле Rinofix МК 2000 (JRS, Германия). Для кормления животных использовался корм «Чара» для конвецио-нальных мелких лабораторных грызунов (мышей, крыс), производитель - ЗАО «Ассортимент Arpo», Россия. Вода ad libitum. Опыты проводились в условиях, максимально исключающих воздействие внешних раздражителей (перепады освещения, температуры влажности и неконтролируемых звуковых раздражителей). Животные использовались в опытах натощак. Экспериментальные группы состояли из животных обоего пола. Исследуемые вещества вводились мышам ингаляционно, однократно, использовалась затравочная камера объемом 0,16 м\ Животные находились в затравочной камере в течение 30 минут. Общая продолжительность наблюдения за животными в эксперименте составляла 14 дней, причем в первый день после введения веществ животные находились под непрерывным наблюдением. При определении острой токсичности препаратов, два раза в неделю фиксировалось общее состояние животных; особенности поведения, интенсивность и характер двигательной активности; наличие и характер судорог; нарушение координации движений; реакция на тактильные раздражители; частота дыхательных движений; состояние шерстного и кожного покрова; цвет слизистых оболочек; изменение цвета мочи; консистенция фекальных масс; потребление корма и воды. Регистрировались сроки развития интоксикации и гибели животных. Проводилось макроскопическое исследование органов погибших животных. Определение параметров острой токсичности проводилось с использованием методов Беренса с определением значений СЬ50 [8, 9].
Объекты исследований: пихтовое масло (производитель ИП "Савин В. Я."), лимонное масло (изготовитель ООО ТД «СиНам», г. Новосибирск), термовозгонная основа ветеринарного препарата «Тамбей» (производства ООО "Санветпрепарат плюс" г. Пермь).
Для определения острой токсичности термовозгонной шашки "Тамбей" время экспозиции составляло 30 и 240 минут. При изучении токсичности термовозгонной основы, пихтового, лимонного масел и их комбинаций время экспозиции составляло 30 минут. Острую токсичность пихтового масла изучали в концентрациях 0,25 мг/л, 2,5 мг/л, 3 г/л, лимонного масла - в концентрации 3 г/л, смесь масел - в концентрациях 0,6 г/л (0,3 г/л пихтового и 0,3 г/л лимонного масел), Зг/л (1,5 мг/л пихтового и 1,5 мг/л лимонного масел). Для определения острой токсичности (СЬзп) термовозгонной шашки «Тамбей» и ее термовозгонной основы использовали концентрации в интервале 60 - 109 мг/л и 16-63 мг/л соответственно.
Результаты. Острая токсичность (СТ^п) термовозгонной шашки «Тамбей» составила 73,2±5,3 мг/л, время экспозиции 30 мин. При увеличении времени экспозиции до 240 минут СЬ50 составила 60,2±2,9 мг/л. Острая токсичность термовозгонной смеси (СЬ^,,) 25,4±4,8 мг/л.
При изучении острой токсичности шашки «Тамбей» и ее термовозгонной основы у животных наблюдалась схожая симптоматика. При ингаляции в токсических концентрациях у животных в течение первых 5-ти минут наблюдалось беспокойство, двигательное возбуждение и одышка. Наблюдение за общим состоянием в течение 14 дней после «затравки» показало, что в первые 24 часа у всех животных наблюдалась одышка и покраснение слизистых оболочек, эти симптомы сохранялись в течение двух суток. Дальнейшее наблюдение за выжившими животными в течение 14 дней показало, что изменений в поведении, характере двигательной активности, состоянии шерстного и кожного покровов, цвета слизистых оболочек, потребления корма и воды не зафиксировано. Спустя 14 дней проводили эвтаназию и макроскопическое исследование органов выживших животных.
Острая токсичность аэрозолей пихтового, лимонного масел и их смеси выше 3 г/л.
Наблюдение за общим состоянием показало, что в ходе изучения токсичности комбинации пихтового и лимонного масел в течение 30 минут животные принимали боковое положение и засыпали. По истечении полутора часов двигательная активность животных восстанавливалась .
Из полученных данных следует, что с увеличением времени экспозиции токсичность термовозгонной шашки «Тамбей» возрастает на 20%. Токсичность термовозгонной шашки определяется токсичностью термовозгонной основы, при тлении которой образуется оксид углерода (II), что подтверждается данными макроскопического исследования внутренних органов животных, погибших в ходе эксперимента. При патологоанатомиче-ском исследовании павших животных выявлены изменения, характерные для отравления оксидом углерода (II): ярко-розовая окраска слизистых оболочек, несвернувшаяся кровь, выраженное трупное окоченение. Все внутренние органы и скелетные мышцы имели розовый оттенок. Полости сердца были расширены, содержали алую жидкую кровь. Ткань легких отечна. Под плеврой, брюшиной — множественные кровоизлияния. Такие же кровоизлияния обнаруживались в слизистой оболочке желудка и кишечника [10]. При вскрытии выживших животных патологических изменений внутренних органов не выявлено.
Токсичность масел и их смеси позволяет отнести их к малотоксичным веществам (СЬ5п>3000 мг/л). В ходе изучения острой токсичности смеси масел выявлено угнетение функций центральной нервной системы, проявляющееся в принятии животными бокового положения и последующего засыпания. Снотворный эффект связан с такими компонентами эфирных масел пихты и лимона, как а-пинен, |3-пинен, мирцен, камфен, терпинолен, лимонен, с1-кадинсн. трициклин, Ь-кариофиллин, борнилацетат, борнеол и тер-пин-1-ен-4-ол [7, 11, 12]. Концентрация активных веществ, действующих на центральную нервную систему, за счет объединения масел лимона и пихты увеличилась, возможно, за счет лимонена, концентрация которого в масле лимона в 10 раз выше, чем в масле пихты [13].
Выводы. 1. Острая токсичность термовозгонной шашки «Тамбей» (СЬ50) составила
73,2±5,3 мг/л, время экспозиции 30 мин. При увеличении времени экспозиции до 240 минут (СЬ50) составила 60,2±2,9 мг/л. Острая токсичность термовозгонной смеси (СЬ50) при экспозиции 30 минут составила 25,4±4,8 мг/л.
2. Токсичность эфирных масел пихты, лимона и их комбинации выше 3000 мг/л, что позволяет их отнести к малотоксичны м веществам.
3. Комбинация эфирных масел лимона и пихты является перспективной для разработки на их основе новых ветеринарных препаратов.
Литература
1. Олейник А.В. Стратегия профилактики респираторных болезней телят // Молочное и мясное скотоводство. 2009. №6. С. 35-36.
2. Актинобациллез (лигниерелез) крупного рогатого скота / Ф.А. Мещеряков [и др.] // Вестник ветеринарии. 1999. № 1. С. 59-65.
3. Испытание пентациклина при заболеваниях телят / Г.В. Сноз [и др.] // Ветеринария. 2010. № 10. С.44-47.
4. Ackermann M.R. Bovine Respiratory Deseases. USA, 2010. Vol. 26, № 2. 426 p.
5. Foti M.C., Ingold K.U. Mechanism of inhibition of lipid peroxidation by y-terpinene animusual and potentially use-full hydrocarbon antioxidant // J. Agric. Food Chem. 2003. V. 51. №9. Pp. 2758-2765.
6. Antioxidant and free radical scavenging activities of essential oils / M.A. Saleh [et al.] // Eth.Diseases. 2010. № 20. Pp. 178-182.
7. Composition, antimicrobial and antioxidant activities of seven essential oils from the North American boreal forest /В. Poaty [et al.] //World J. Microbiol. Biotechnol. 2015. №31. Pp. 907-919.
8. Ветеринарная токсикология с основами экологии / М.Н. Аргунов [и др.]. М., 2005. 489 с.
9. Беленький M.JL Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. 2-е изд., перераб. и доп. Ленинград: Медгиз, 1963. 146 с.
10. Тимофеев В.Ф., Прокопьева Н.В., Руднев Ф.И. Комбинированное значение отравляющего действия окиси углерода и летучих продуктов горения полимерных материалов при исследовании крови погибших // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. 2003. №6. С. 76-85.
11. Dobetsberger С., Buchbauer G. Actions of essential oils on the central nervous system: An updated review // Flavour Fragr. J. 2011. Vol. 26. Pp. 300-316.
12. Damiro Pergentino de Sousa, Palloma de Almeida Soares Hocayen, Luciana Nalone Andrade and Roberto Andre-atini. A Systematic Review of the Anxiolytic-Like Effects of Essential Oils in Animal Models // Molecules. 2015. Vol. 20. Pp. 18620-18660.
13. Мишарина T.A., Теренина M. Б. Влияние состава эфирных масел лимона на их антиоксидантные свойства и стабильность компонентов // Химия растительного сырья. 2010. Вып. 1. С. 87-92.
THE STUDY OF ACUTE TOXICITY OF THE TAMBEI BLOCK, ITS THERMO-SUBLIMATORY BASE, ESSENTIAL OILS OF LEMON, FIR, AND THEIR MIXTURE FOR DEVELOPMENT OF NEW VETERINARY PREPARATIONS ON THEIR BASIS
V. V. Maslova Research Engineer;
S. U. Solodnikov2' , Cand. Med. Sci., Associate Professor;
G. A. Triandafilova . Junior Researcher;
E. I. Yakovleva 2;
E. D. Gapechkina 2
1 Applied Chemical and Biochemical Research Center Perm National Research Polytechnic University
29, Komsomolskiy Prospekt, Perm, 614990, Russia
2 Perm State Pharmaceutical Academy
101, Yekaterininskaya St., Perm, 614990, Russia
3 Perm State Agro-Technological University 23, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia
ABSTRACT
The acute inhalation toxicity of veterinary preparation called the Tambei thermo-sublimatory block, its thermo-sublimatory base, essential oils of lemon, fir, and their mixture was determined. The research was carried out in the Applied Chemical and Biochemical Research Center of the Perm National Research Polytechnic University. The toxicity of the Tambei®) preparation was studied at time of exposure equal to 30 and 240 minutes. The toxicity of the Tambei thermo-sublimatory base, essential oils of fir, lemon, and their mixture was studied at the exposure time of 30 minutes. Acute toxicity was investigated on the 1 white mice of CD line. The following concentrations were researched: fir oil -
0.25 mg/1, 2.5 mg/1 and 3 g/1, lemon oil - 3g/l, a mixture of oils - 0.6 g/1 (0.3 g/1 of fir oil and 0.3 g/1 of lemon oil) and 3 g/1 (1.5 mg/1 of fir oil and 1.5 mg/1 of lemon oil). Concentrations in a range from 60 to 109 mg/1 and from 16 to 63 mg/1, respectively, were used for determination of acute toxicity (CL50) of the Tambei preparation and its thermos-sublimatory base. It is established that toxicity of the ther-mo-sublimatory block is determined by the toxicity of its thermo-sublimatory base, which grows with an increase in time of exposure. The toxicity of essential oils of fir, lemon, and their mixture allows us to classify them as low-toxic substances (CL50> 3000 mg/1). The combination of oils has a pronounced inhibitory effect on the central nervous system. Mixture of lemon and fir oils represents a prospective combination for the development of new veterinary preparation on its basis. Key words: thermo-sublimatory block, essential oils, acute toxicity.
References
1. Olejnik A.V. Strategiya profilaktiki respiratomyh boleznej telyat (Strategy of prevention of respiratory diseases in calves). Molochnoe i myasnoe skotovodstvo, 2009, No. 6, pp. 35-36.
2. Aktinobacillez (lignierelez) krnpnogo rogatogo skota (Actinobacillosis (lignierelosis) of cattle), F.A. Meshcherya-kov [i dr.], Vestnik veterinarii, 1999, No. 1, pp. 59-65.
3. Ispytanie pentaciklina pri zabolevaniyah telyat (Examination of pentacycline in diseases of calves), G.V Snoz [i dr.], Veterinariya, 2010, No. 10, pp. 44-47.
4. Ackermann M.R. Bovine Respiratory Deseases, USA, 2010, Vol. 26, No. 2,426 p.
5. Foti, M.C., Ingold K.U. Mechanism of inhibition of lipid peroxidation by y-terpinene anunusual and potentially usefull hydrocarbon antioxidant, J. Agric. Food Chem, 2003, Vol. 51, No. 9, pp. 2758-2765.
6. Antioxidant and free radical scavenging activities of essential oils, M.A. Saleh [et al.], Eth.Diseases, 2010, No. 20, pp. 178-182.
7. Composition, antimicrobial and antioxidant activities of seven essential oils from the North American boreal forest, B. Poaty [et al.], World J. Microbiol. Biotechnol, 2015, No. 31, pp. 907-919.
8. Veterinamaya toksikologiya s osnovami ehkologii (Veterinary toxicology with the basics of ecology), M.N. Ar-gunov [i dr.], M., 2005, 489 p.
9. Belen'kij M.L. Elementy kolichestvennoj ocenki farmakologicheskogo ehffekta (Elements of quantitative assessment of the pharmacological effect), 2-e izd., pererab. i dop, Leningrad, Medgiz, 1963, 146 p.
10. Timofeev V.F., Prokop'eva N.V., Rudnev F.I. Kombinirovannoe znachenie otravlyayushchego dejstviya okisi ugleroda i letuchih produktov goreniya polimemyh materialov pri issledovanii krovi pogibshih (Combined value of the toxic effect of carbon monoxide and volatile products of combustion of polymeric materials in the study of blood of deceased), Izbrannye voprosy sudebno-medicinskoj ehkspertizy, 2003, No. 6, pp. 76-85.
11. Dobetsberger C., Buchbauer G. Actions of essential oils on the central nervous system: An updated review, Flavour Fragr, J, 2011, Vol. 26, pp. 300-316.
12. Damiro Pergentino de Sousa, Palloma de Almeida Soares Hocayen, Luciana Nalone Andrade and Roberto Andre-atini. A Systematic Review of the Anxiolytic-Like Effects of Essential Oils in Animal Models, Molecules, 2015, Vol. 20, pp. 18620-18660.
13. Misharina T.A., Terenina M. B. Vliyanie sostava ehfimyh masel limona na ill antioksidantnye svojstva i stabil'nost' komponentov (Effect of composition of essential oils of lemon on their antioxidant properties and stability of components), Himiya rastitel'nogo syr'ya, 2010, Vol. 1, pp. 87-92.
УДК 637.523.22:636.5.084.1
ОСОБЕННОСТИ ОБВАЛКИ БЕДЕР И ГОЛЕНЕЙ
ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В КОРМЛЕНИИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ
РАЗНЫХ ФОРМ САПРОПЕЛЯ
С. Ю. Николаева, аспирант;
Ю. В. Аржанкова, д-р биол. наук, доцент,
ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА,
пр-т Ленина, д.2, г. Великие Луки, Псковская область, Россия, 182112 E-mail: dina350@mail,ru
Аннотация. Научно-хозяйственный опыт проводился в условиях вивария кафедры зоотехнии и технологии переработки продукции животноводства ФГБОУ ВО «Великолукская государственная сельскохозяйственная академия» Псковской области. Целью исследований явля-