CC BY
115
УДК 615.322'451.16:[547.915 962].015:616.13-004.6-092.9 ИЗУЧЕНИЕ ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТА ЛУКА МЕДВЕЖЬЕГО (ЧЕРЕМШИ) (ALLIUM URSINUM L.)
© 2011 К.А. Айрапетова, Е.О. Сергеева, Е.В. Компанцева, А.Ю. Терехов, Л.А. Саджая
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Поступила в редакцию 19.05.2011
Была изучена гиполипидемическая активность густого экстракта лука медвежьего (черемши) на твино-вой модели гиперлипидемии у крыс. Содержание триглицеридов в сыворотке крови и гомогенате печени определяли колориметрическим методом после гидролиза триглицеридов липазой. Определение в- и пре-в-липопротеидов проводили турбидиметрически по методу Бурштейна и Самай. Установлено, что введение экстракта в дозе 200 мг/кг оказывает нормализующее влияние на состояние показателей липидного обмена в крови, проявляется отчетливый гипохолестеринемический эффект, сопоставимый с препаратом сравнения трайкор.
Ключевые слова: экстракт лука медвежьего, триглицериды, липопротеиды, гиполимидеческое действие
Уменьшение продолжительности жизни населения развитых стран определило повышенное внимание общества к заболеваниям, развитие которых особенно прогрессирует у жителей крупных мегаполисов. К заболеваниям медико-социальной значимости, прежде всего, относится атеросклероз, последствия которого приводят к высокой смертности от ишемической болезни сердца (ИБС) и инсульта (по данным ВОЗ, 21% смертности в мире), к потере работоспособности и к инвалидности. Многочисленные экспериментальные, клинические и эпидемиологические исследования свидетельствуют, что одним из главных факторов риска развития атеросклероза являются нарушения обмена липидов и липопро-теинов (ЛП) (дислипопротеидемии атерогенного характера) среди них наиболее существенным является увеличение в крови атерогенных ЛП. Развитие дислипопротеидемии атерогенного характера обусловлено действием многих неблагоприятных факторов среды, сопутствующими заболеваниями, наследственной предрасположенностью. Одна из важных причин - нарушение функционального состояния печени, которая играет ключевую роль в обмене липидов и липопротеинов. В настоящее время гиполипидемическая лекарственная терапия признаётся главным способом снижения развития атеросклероза и его осложнений, поэтому гиполипидемические средства следует рассматривать и как антиатеросклеротические.
Айрапетова Карина Артуровна, аспирантка Сергеева Елена Олеговна, кандидат фармацевтических наук, преподаватель кафедры биохимии и микробиологии. E-mail@ maklea@yandex.ru
Компанцева Евгения Владимировна, доктор фармацевтических наук, профессор кафедры фармацевтической химии
Терехов Александр Юрьевич, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры биохимии и микробиологии. E-mail: tau200@yandex.ru Саджая Любовь Анатольевна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры биохимии и микробиологии
В связи с недостаточной эффективностью и побочным действием немногочисленных препаратов, применяющихся в качестве гиполипидеми-ческих и/или антиатеросклеротических средств, актуален поиск новых активных соединений. Интерес исследователей представляет поиск ги-полипидемических веществ, близких к естественным метаболитам организма, а также к соединениям, выделенным из растений.
Одним из таких растений является лук медвежий (черемша) (Allium ursinum L., сем. Al-liaceae), широко применяемый за рубежом в качестве антиоксидантного, противогрибкового, антибактериального, кардиотонического, гипо-лимидемического средства в виде спиртовых экстрактов и капсул с порошком измельченного сырья. Однако в России лук медвежий является малоизученным растением и не находит широкого применения в официальной медицине.
Цель исследования: получение экстракта надземной части лука медвежьего, собранного в 2011 г. на Северном Кавказе и изучение его ги-полипидемического действия.
Материалы и методы исследования. Изучение гиполипидемической активности проводили на 24 крысах-самцах линии «Wistar» весом около 250,0-280,0 г. Животные прошли двухнедельный карантин и содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении. Для изучения гиполипидемической активности экстракта черемши использовали твино-вую модель гиперлипидемии: однократное внут-рибрюшинное введение твина-80 в дозе 250 мг /100 г массы тела.
Основываясь на данные зарубежной литературы густой экстракт черемши вводили в дозе 200 мг/кг [1]. В качестве препарата сравнения использовали фенофибрат трайкор в терапевтической дозе 12,5 мг/кг. Исследуемые вещества в виде водной суспензии вводили в выше указанных дозах опытным группам крыс перо-рально в течение 10 дней до введения твина-80.
Биологические ресурсы: флора
Предварительное введение было направлено на насыщение действующими веществами ряда органов и тканей, связанных с метаболизмом липи-дов, что широко используется в случаях однократного применения агента, индуцирующего развитие гиперлипидемии. На 10-ый день животным внутрибрюшинно вводили твин-80 и через 12 часов осуществляли забой путем декапитации. Контрольной группе животных вводили в течение такого же срока дистиллированную воду, которая используется для приготовления суспензии веществ, на 10-ый день - внутрибрюшинно -твин-80 и через 12 часов осуществляли забой. Перед забоем животные голодали в течение 12 часов.
В сыворотке крови определяли содержание общего холестерина, триглицеридов (ТРГ) и общих липидов (ОЛ), содержание атерогенных ли-попротеинов низкой плотности (Р-липо-протеидов) и очень низкой плотности (пре-Р-липопротеидов). Полученные данные обрабатывали методами вариационной статистики и оценивали достоверность различий при помощи 1> критерия Стьюдента. Содержание триглицеридов в сыворотке (ммоль/л) определяли энзиматиче-ским колориметрическим методом, основанном на гидролизе ТРГ липазой с образованием жирных кислот и эквимолярного количества глицерина. Определение содержания общих липидов в сыворотке крови проводили по стандартному набору реактивов фирмы «Ьа СЬеша». Принцип метода основан на том, что липиды и жирные кислоты, фосфолипиды и холестерин взаимодействуют после гидролиза серной кислотой с фос-фованилиновым реактивом с образованием красного окрашивания. Содержание общих липидов выражали в г/л.
Количество холестерина в сыворотке крови (ммоль/л) измеряли ферментативным фотометрическим методом с использованием стандартного набора реактивов «Б1а8у8». При гидролизе
эфиров холестерина холестеринэстеразой образуется свободный холестерин. Образовавшийся в результате гидролиза и имеющийся в пробе холестерин окисляется кислородом воздуха под действием холестериноксидазы с образованием эквимолярных количеств перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного соединения, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации холестерина в пробе и измеряется фотометрически.
Определение в- и пре-в липопротеидов сыворотки крови проводили турбидиметрически по Бурштейну и Самай [3]. Метод основан на способности в- и пре-в липопротеидов образовывать с гепарином комплекс, который осаждается без денатурации в присутствии хлористого кальция. Степень мутности, измеряемая при длине волны 720±2 нм, пропорциональна содержанию в- и пре-в липопротеидов. Содержание в- и пре-в липопротеидов выражали в г/л.
Результаты и обсуждение. Как показывают результаты исследования, представленные в табл. 1, однократное внутрибрюшинное введение твина-80 сопровождалось развитием выраженной гиперлипидемии. Так, у животных контрольной группы отмечали достоверное по отношению к интактным значениям увеличение содержания ОЛ в крови на 200%, что связано с ростом концентрации в крови в и пре-в-ЛП на 391%, а так же ТРГ и общего холестерина на 229% и 71% соответственно. Данные изменения липидного спектра сыворотки крови соответствуют картине гиперлипопротеидемии 2 типа, а подтипа по классификации Фредриксона, принятой Всемирной организацией здравоохранения и основанной на фенотипических характеристиках сыворотки при нарушениях липидного обмена [2].
Таблица 1. Влияние густого экстракта черемши на состояние показателей липидного обмена в крови на фоне твиновой гиперлипидемии
Группы животных и количество Показатели
п=6 ОЛ крови, г/л в и пре-в-ЛП крови, г/л ТРГ крови, ммоль/л
интактные 1,4±0,29 0,54±0,681 0,90±0,057
контроль 4,2±0,23 РИ<0,001;+200% 2,65±0,272 РИ<0,01;+391% 2,96±0,072 РИ<0,01;+229%
густой экстракт черемши 3,0±0,28 Рк<0,01; -29%; РИ<0,01 1,55±0,164 Рк<0,001; -42%; РИ >0,1 2,53±0,031. Рк<0,001; -15%; РИ<0,01
трайкор 2,8±0,29 Рк<0,01; -33% ; РИ<0,005 1,43±0,362 Рк<0,001; -46% РИ >0,1 1,14±0,103 Рк<0,001; -61%; РИ >0,1
Примечание: РИ - уровень достоверной разницы по отношению к интактным значениям; РК - уровень достоверной разницы по отношению к контрольным значениям; п - количество животных в группе.
Лечебно-профилактическое введение густого экстракта черемши в дозе 200 мг/кг привело к достоверному по сравнению с контролем снижению содержания холестерина в сыворотке
крови на 46%, причем этот показатель полностью нормализовался, так как достоверно не отличался от значений у здоровых животных. Содержание триглицеридов и общих липидов в
крови достоверно снижались на 15% и 29% соответственно, но уровня нормы так и не достигли. Отмечали тенденцию к снижению содержания в крови в и пре-в-ЛП. Эти изменения были достоверны и их уровень, как и уровень холестерина, достиг значений интактных животных. В группе животных, получавших трайкор в дозе 12,5 мг/кг, отмечали восстановление до нормально уровня практически всех исследуемых показателей. Содержание в и пре-в-ЛП и ТРГ, снижаясь в 1,9 и 2,6 раза, соответственно, полностью нормализовалось. Содержание общих ли-пидов сыворотки крови достоверно уменьшилось на 33% по сравнению с контролем, но уровня нормы не достигло, оставаясь на 100% выше интактных значений. Уровень холестерина снизился на 56% (более, чем в 2 раза), при этом он стал даже ниже нормы на 25%.
Выводы. Применение густого экстракта черемши на фоне твиновой гиперлипидемии меняло липидный спектр сыворотки крови подобно тому, как это происходило под влиянием трайкора.
На основании проведенных исследований установлено, что в условиях твиновой гиперлипиде-мии лечебно-профилактическое введение густого экстракта в дозе 200 мг/кг оказывает нормализующее влияние на состояние показателей ли-пидного обмена в крови, проявляя отчетливый гипохолестеринемический эффект, сопоставимый с препаратом сравнения трайкор.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Al-Numair, Khalid S. Hypocholesteremic and antioxidant effects of garlic (Allium sativum L.) extact in rats fed high cholesterol diet / Khalid S. Al-Numair // Pakistan journal of nutrition. 2009. №8 (2) Р. 161-169.
2. Долгов, В.В. Лабораторная диагностика нарушений обмена липидов. Пособие для врачей / В.В. Долгов др. - Тверь.: Информационно-издательская фирма «Губернская медицина», 1999. 55 с.
3. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / В.Г. Колб, В.С. Камышников. - Минск : Беларусь, 1982. 336 с.
STUDYING OF HYPOLIPIDEMIC ACTION OF BEARDS ONION EXTRACT (RAMSON) (ALLIUM URSINUM L.)
© 2011 K.A. Ayrapetova, E.O. Sergeeva, E.V. Kompantseva, A.Yu. Terekhov, L.A .Sadzhaya
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
Has been studied hypolipidemic activity of a dense bearD onion extract (ramson) on tween model of hy-perlipidemia at rats. The maintenance of triglycerides in bloods serum and liver homogenate was defined by colorimetric method after hydrolysis of triglycerides by lipase. Definition of p - and pre - p-lipoproteins was made by turbodimetrical method of Burshtein and Samay. It was established that extract introduction in a dose of 200 mg/kg makes normalizing impact on condition of lipid exchange indicators in blood, distinct hypocholesterol-lowering effect comparable with comparison preparation of Traykor.
Key words: bearO onion extract, triglycerides, lipoproteins, hypolipidemic action
Karina Ayrapetova, Post-graduate Student Elena Sergeeva, Candidate of Pharmacy, Lecturer at the Biochemistry and Microbiology Department. E-mail@ maklea@yandex.ru Evgeniya Kompantseva, Doctor of Pharmacy, Professor at the Pharmaceutical Chemistry Department
Alexander Terekhov, Candidate of Pharmacy, Senior Lecturer at the Biochemistry and Microbiology Department. E-mail: tau200@yandex.ru
Lyubov Sadzhaya, Candidate of Pharmacy, Senior Lecturer at the Biochemistry and Microbiology Department
