УДК 636.09
Побережец Е.П.
аспирант кафедры ветеринария и зоотехния Астраханский государственный университет им. В.Н. Татищева
(г. Астрахань, Россия)
ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ СЕЛЕНООРГАНИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ДАФС-25 НА ЛАБОРАТОРНЫХ КРЫСАХ
Аннотация: в данной статье автором проведено исследование по изучению гепатопротекторных свойств селеноорганического препарата ДАФС-25 в случаях токсического поражении печени у крыс. Авторы приводят основные показатели состояния печени у крыс, рассматривают биохимические анализы крови, взятые в исследовательских группах на 7, 14, 21 сутки. Исследование показывает, что применение препарата ДАФС-25 способствует нормализации процессов патологических изменений в печени.
Ключевые слова: ДАФС-25, печень, крысы, кровь.
Гепатопатии (заболевания печени) - одна из наиболее распространенных патологий желудочно-кишечного тракта. И в то же время именно диагностика гепатопатий зачастую вызывает наибольшие затруднения у ветеринарных специалистов, ввиду малой доступности современных диагностических комплексов, а также из-за того, что симптомы болезней печени зачастую бывают неспецифичными. Важность и своевременная диагностика, а также последующее лечение данной патологии крайне необходима ввиду огромной роли печени в пищеварительном, метаболитическом и биосинтетических процессах, а также в процессе обезвреживания и выделения продуктов распада
[9].
Основная часть.
Гепатопротекторы - препараты, составляющие основу патогенетической терапии заболеваний печени, повышают устойчивость гепатоцитов к патологическим воздействиям, усиливающие их антитоксическую функцию и способствующие восстановлению нарушенных функций печеночных клеток.
Требования к идеальному гепатопротектору были сформулированы К Preisig [9] в 1970 г.: достаточно полная абсорбция, наличие эффекта «первого прохождения» через печень, выраженная способность связывать высокоактивные повреждающие соединения или предотвращать их образование, уменьшение чрезмерно выраженного воспаления, подавление фиброгенеза, стимуляция регенерации печени, естественный метаболизм при патологии печени, экстенсивная энтерогепатическая циркуляция, отсутствие токсичности. К сожалению, на сегодняшний день ни один из используемых в ветеринарной практике гепатопротекторов не удовлетворяет в полной мере этим требованиям, хотя в последние годы арсенал современных гепатозащитных средств расширился за счет появления, как синтетических препаратов, так и новых природных средств [6].
Общепринятой классификации гепатопротекторов не существует.
Селеносодержащий препарат ДАФС-25 содержит 25% селена в двухвалентной форме, как и в аминокислотах и белках живого организма, имеет очень низкую токсичность и усваивается организмом до 100% [3]. Обладает ярко выраженными антиоксидантными, антиканцерогенными,
иммуностимулирующими и гепатопротекторными свойствами, улучшает состав крови, нормализует белковый, углеводный и жировой обмен веществ [8]. Снижает степень тяжести отравления солями тяжелых металлов, фосфорорганическими соединениями, является антидотом при отравлении мышьяком и другими ядами, нейтрализует на клеточном уровне отрицательное воздействие на организм токсинами различной природы происхождения. Главная отличительная черта препарата ДАФС-25 состоит в том, что его
применение оказывает положительное влияние на организм и предупреждает развитие токсического действия на печень.
Методика исследований. Исследования проводились на крысах самцах, массой тела 180-240 граммов по 10 голов в каждой группе. Было сформировано три группы: контрольная (первая группа), которая получала 0.048 мг/гол селенорганического препарата, вторая опытная группа получала - 0.096 мг\гол, третья группа получала - 0.144 мг\гол. Всем животным вводили ежедневно в течении 21го дня внутрь 50% масляный раствор четыреххлористого углерода (СС14) в дозе 2мл/кг массы тела. Критерием токсичности биохимических показателей крови и поражения печени были АСТ, АЛТ, каталаза, малоновый деальдегид, глутатионпероксидаза, диеновые коньюгаты. Биохимические показатели крови исследовали на экспресс анализаторе SEAMATY-120 УР в условиях ветеринарной клиники г. Астрахань. Активность каталазы определяли по М.А Королюку, содержание МДА в пробах выявили методом В.С. Конюховой, диеновые коньюгаты - методом И.Д. Стальной [2].
Результаты исследований. Забор крови проводился на 7, 14, 21 день исследования путем декопетации (декомпенсации). Результаты биохимического исследования крови были обработаны и сведены в таблицы.
На 7 день был взят биохимический анализ крови на показатели: АЛТ, АСТ, каталаза, диеновые коньюгаты , малоновый диальдегид, глутатинопероксидазу (табл.1). У животных 2 и 3 опытных групп по отношению к 1 группе было снижение показателей АЛТ и АСТ, МДА, диеновые коньюгаты, отмечается в опытных 2 и 3 группах увеличение каталазы и глутатионпероксидазы. [7].
Таблица 1. Биохимические показатели крови у крыс на 7 день.
Группа АЛТ, Е/л АСТ, Е/л МДА Нмоль/ мл Диеновые Коньюгаты ДДЕ Каталаза ЕД Глутатион пероксидаза ЕД/л
1-я группа +0.048мг/гол ДАФС -25 180,5 ±18.7 220,3 =8.8 2,01 =0,3 3,22+0,5 7,3+2,8 2025=28,4
2-я группа +0.096 мг/гол ДАФС-25 120,3 =20,2 155,4 =29,6 1,03 =0,3 1,18+0,6 11,3+4,7 4286=26,2
3-я группа +0.144 мг/гол ДАФС-25 135,6 =77,6 135,2 =31,5 1,07 =0,5 1,25+0,7 12,2+4,6 4325=22,7
Примечание: (р <0.05) по отношению к контрольной 1 группе.
На 14 день (табл. 2) в 1 опытной группе в сравнении с 2 и 3 группах явное поражение печени, что подтверждается повышением АЛТ, АСТ, МДА, диеновые коньюгаты и отмечается снижение каталазы и глутатионпероксидазы.
Таблица 2. Биохимические показатели крови у крыс на 14 день.
Группа АЛТ, Е/л АСТ. Е/л МДА Ннмоль/мл Диеновые Коньюгаты ДДЕ Катализа ЕД Глутатион Перокспдаза ЕД/л
1-я группа +0.048мг/гол ДАФС -25 195,5 ±31,8 230,3 ±34 2,23±0,8 3,35±0,5 5,2±2,9 193 2±3 6,5
2-я группа +0.096 мг/гол ДАФС-25 115,7 ±19,8 145,8 ±29 1,04±0,4 1,25±0,4 11,8±5 4545±24,7
3-я группа +0.144 мг/гол ДАФС-25 101,5 ±43,7 120,3 ±31,5 1,05±0,5 1,30±0,7 13,3±4,6 4355±22,7
Примечание:(р < 0.05) по отношению к контрольной 1 группе.
На 21 день исследования (табл. 3) в 1группе отмечалось ярко выраженное поражение печени, 2 и 3 группах показатели все были в пределах физиологической нормы. Гипербилирубинемия, отмеченная у всех опытных групп крыс, свидетельствовала о токсическом повреждении печени четырехлористым углеродом [4].
Таблица 3. Биохимические показатели крови у крыс на 21 день.
Группа АЛТ. Е/л АСТ, Е/л МДА Ннмольмл Дненовы Коныогаты ДДЕ Каталаза Ед Глутатион Пероксндаза ЕД/
1-я группа 197,8 235,3 2,45±0.8 3,5б±0.39 4,0±2?3 135 6=1=3 3,4
+0.048 мг/гол ±30,8 ±32
ДАФС-25
2-я 122,6 98,3± 1,17±0,б 2,07±0,9 13,5±1, 4675=1=31,8
группа+0.096 ±17,6 15,3 4
мг/гол ДАФС-
25
3-я группа 125,7 110,6 1,10±0,4 2,19±0,3 13,7±4, 4867±46,5
+0.144 мг/гол ±24,8 ±12,9 1
ДАФС-25
Примечание: (р <0.05) по отношению к контрольной 1 группе.
Сравнивая результаты, полученные в ходе анализа крови у животных на 7 и 21 день, отметим, следующее (рис. 1).
Нин
7й I 21й 7й 21й 7й 21й
1 группа 2 группа 3 группа
Рисунок 1. Сравнение результатов АЛТ и АСТ у крыс во всех группах на 7 и 21 день.
В первой группе показатели крови АСТ и АЛТ в течение исследования увеличились на 40 и 37 единиц соответственно. По сравнению с контрольной группой, во второй и третьей группе данные показателя АСТ снизились, а АЛТ во второй группе остался таким же, а в третьей группе - снизился.
Рисунок 2. Сравнение результатов МДА, диеновые коньюгаты и каталаза у крыс во всех группах на 7 и 21 день.
Анализируя показатели МДА, диеновые коньюгаты и каталаза отмечена следующая закономерность, так в контрольной первой группе отмечается увеличение этих показателей, кроме каталазы, которая снизилась на 43%. Во второй и третьей группах отмечено нарастание активности каталазы к 21 дню исследования, также незначительный рост отмечается по показателю МДА, а показатель диеновые коньюгаты увеличивается почти в 2 раза.
Рисунок 3. Сравнение результатов глутатионпероксидаза у крыс во всех группах на 7 и 21 день.
Введение препарата ДАФС-25 способствует нормализации процессов патологических изменений печени, что также отражается на каталитических свойствах и регуляции активности фермента глутатионпероксидазы. Таким образом, с помощью данных биохимического анализа крови мы смогли оценить характер патологического процесса в печени, свидетельствующего о токсическом повреждении органа.
Заключение. Исследования показали, что при введении внутрь животным СС14 отмечено токсическое поражение печени 1 контрольной группы, о чем свидетельствуют данные биохимических показателей, тогда как у крыс 2 и 3 групп изучаемые биохимические показатели чуть выше или в приделах нормы, что указывает на целесообразность применения препарата ДАФС-25 при токсическом поражении печени. И он обладает явно выраженными гепатопротекторными свойствами. В результате исследования было отмечено, что при токсическом поражении эффективной дозой является 0.096 мг/гол.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма. -СПб.: Фолиант, 2000. - 104 с.;
2. Архипов А.В., Аврутина А.Я., Миронов Ю.А. Методические рекомендации по проведению научных исследований по физиологии и биохимия сельскохозяйственной птицы. - Всесоюз. акад. с.-х. наук им. В. И. Ленина. Секция птицеводства. - Москва: 1971. - 44 с.;
3. Ветеринарная токсикология: учебно-методическое пособие / Т.Н. Родионова [и др.]. - Саратов: Наука, 2015. - 148 с.;
4. Губергриц Н.Б., Фармакотерапевтические эффекты и клинические возможности эталонного препарата силимарина / Н.Б. Губергриц, П.Г. Фоменко, Г.М, Лукашевич, О.А., Голубова // Донецк ФАРМАТЕКА. - 2012. - №2. - С. 2431;
5. Захараш, А. Д. Компьютерная морфометрия в диагностике хронического гепатита / А. Д. Захараш // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол, колопроктол. -2005. - т. XV, № 1. - с. 65;
6. Комарова Д.В., Цинзерлинг В.А. Морфологическая диагностика инфекционных поражений печени: практическое руководство. - СПб. Сотис,1999. - 244 с.;
7. Контроль качества лекарственных препаратов: учеб. пособие / Т.Н. Родионова [и др.]. - Саратов: Наука, 2015. - 131 с.;
8. Левина Т.Ю., Андреева С.В., Данилова Л.В. Использование биологически активной добавки в продукте для профилактики болезней печении желчевыводящих путей // Аграрный научный журнал. - 2015. - № 5. - С. 52-55;
9. Preisig R. Supplements to the editorial «Liver protection therapy». Schweiz Rundsch Med Prax - 2007. - Vol. 59. - P. 1559-1560.
Poberezhets E.P.
Astrakhan State University (Astrakhan, Russia)
INVESTIGATION OF HEPATOPROTECTIVE PROPERTIES OF SELENIUM-ORGANIC DRUG DAFS-25 IN LABORATORY RATS
Abstract: in the article, the author conducted a researcher the hepatoprotective properties of the selenium-organic drug DAPS-25 in cases of toxic liver damage in rats. The authors give the main indicators of the liver condition in rats, consider biochemical blood tests taken in research groups on the 7 th, 14 th and 21st days. The researcher confirms that the use of the feed additive DAFS-25 contributes to the normalization of the processes of pathological changes in the liver.
Keywords: DAFS-25, liver, rats, blood.