CC BY
19Проблемы медицинской микологии, 2020, Т.22, №3
резкое усиление дифференцировки моноцитов периферической крови уже через сутки после иммунизации, значительно повышает не только поглотительную, но и переваривающую активность макрофагов в отношении B. pertussis. Но также она способна оказывать выраженный цитотоксический и апоптогенный эффект на клетки иммунной системы, тем самым осложняя иммуногенез иммунопатологическими реакциями, и может приводить к формированию поствакцинального иммунодефицита.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости совершенствования коклюшного компонента вакцины, а также о возможности проведения в поствакцинальном периоде иммунокоррекции.
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ УТИЛИЗАЦИИ КСЕНОБИОТИКОВ I-II КЛАССА ОПАСНОСТИ С ПРИМЕНЕНИЕМ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ
Успанова Д.М.1, Нечаева О.В.1, Тихомирова Е.И.1, Шуршалова Н.Ф.2
'Саратовский государственный технический университет им. Гагарина Ю.А.; 2Саратовский научный исследовательский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского, Саратов, Россия
THE STUDY OF THE EFFECTIVENESS OF THE DISPOSAL OF XENOBIOTICS I-II HAZARD CLASS USING BIOTECHNOLOGICAL METHODS
Uspanova D.M.1, Nechaeva O.V.1, Tikhomirova E.I.1, Shurshalova N.F2.
'Saratov State Technical University; 2Saratov State University, Saratov, Russia
Цель - изучение способности штамма Bacillus pumllus к биодеструкции ксенобиотиков I-II класса опасности и обоснование возможности его использования при конструировании биопрепаратов.
Материалы и методы. Объекты исследования - образцы илов и нефтеза-грязенных почв разного возраста, полученных с полигона (Московская область, с. Колонтаево). Контролем служили образцы почвы, отобранные в с. Шевыревка (Саратовская область). Измерение массовой концентрации ионов тяжёлых металлов проводили на полярографе с электрохимическим датчиком «Модуль ЕМ-04», определение массовой концентрации нефтепродуктов - с помощью концен-тратомера КН-2, № 17664-98. С целью изучения потенциальной возможности утилизации ксенобиотиков использовали штамм сапрофитных бактерий Bacillus pumllus, который, согласно ранее проведенным исследованиям, характеризуется высокой ферментативной и антагонистической активностью, а также биологической безопасностью.
Результаты. В исследуемых образцах не было установлено превышения ПДК поллютантов. Выявили, что через 7 дней после внесения в образцы иловых отложений культуры B. pumllus происходило повышение содержания массовой концентрации ионов меди, кадмия и свинца с последующим снижением в динамике через 21 день экспозиции бактерий. Массовая концентрация ионов цинка в образцах илов снижалась в динамике в течение всего времени эксперимента. Внесение культуры B. pumllus в техногенно-измененные почвы, содержащие нефтепродукты, способствовало достоверному снижению их массовой концентрации, наиболее выраженной к 20-му дню эксперимента.
Заключение. Полученные результаты служат основанием рассматривать B. pumllus в качестве эффективного и безопасного компонента при разработке комплексных биопрепаратов для реабилитации антропогенно измененных почв.
БИФИДОБАКТЕРИИ В КАТАБОЛИЗМЕ ТРИПТОФАНА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ
Уткина Е.В. (научный руководитель - Ю.В. Захарова)
Кемеровский государственный медицинский университет, Кемерово, Россия
BIFIDOBACTERIA IN TRIPTOPHAN CATABOLISM IN HIV-INFECTED CHILDREN
Utkina E.V. (Supervisor - Yu.V. Zakharova) Kemerovo State Medical University, Kemerovo, Russia
При ВИЧ-инфекции активизируется кинурениновый путь распада триптофана, что ведет к нарушению мукозального иммунитета и увеличению микробной транслокации через слизистую оболочку кишечника. Метагеномные исследования показали, что более 140 родов микроорганизмов имеют отношение к метаболизму триптофана, но роль бифидобактерий в этом процессе до сих пор не ясна (Dillona S.M. et al. 2016; Yilmas C. et al., 2018).
Цель исследования - оценка способности бифидобактерий ВИЧ-инфицированных детей продуцировать триптофан и участвовать в его катаболизме по кинурениновому пути.
Материалы и методы. С помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ определяли содержание триптофана и кинуренина в экзометаболитах и клеточном гидролиза-те бифидобактерий у ВИЧ-позитивных (n=23 штамма) и ВИЧ-негативных детей (n=13 штаммов). Данные представлены в виде медианы и 25 и 75 квартилей (Me (LQ; UQ) в мкг на 1 г сухого вещества и 1 мл среды.
Результаты. Количество триптофана в клеточных гидролизатах бифидобак-
терий у ВИЧ-позитивных детей составило 25,3 (22,8; 27,3) мкг/г, в экзометаболитах - 62,2 (62,2; 64,8) мкг/мл. В группе сравнения данные показатели были 4,4 (3,3; 4,3) мкг/г и 0,31 (0,11; 0,33) мкг/мл соответственно. В клеточных лизатах и экзометаболитах бифидобактерий у ВИЧ-негативных детей содержание кинуренина было сходным и составило 54,4 (52,4; 55,1) мкг/г и 51,6 (50,3; 52,5) мкг/мл соответственно. У ВИЧ-инфицированных детей содержание кинуренина в клеточном лизате регистрировали на уровне 53,3 (52,4; 55,4) мкг/мл, а в экзометаболитах - 215,5 (210; 217,1) мкг/г.
Выводы. Бифидобактерии у ВИЧ-инфицированных детей являются активными продуцентами триптофана, но способность снижать уровень кинуренина в кишечнике путем накопления его в клеточных структурах у них снижена, что раскрывает перспективы для поиска пробиотических штаммов с высокой способностью накапливать кинуренин.
ИССЛЕДОВАНИЕ ФАГОЦИТОЗА MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS АЛЬВЕОЛЯРНЫМИ МАКРОФАГАМИ ПРООПЕРИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ, БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ, В EX VIVO КУЛЬТУРЕ
Уфимцева Е.Г.1, Еремеева Н.И.2, Вахрушева Д.В.2, Скорняков С.Н.2
'Научно-исследовательский институт биохимии Федерального исследовательского центра фундаментальной и трансляционной медицины, Новосибирск; 2Уральский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии - филиал национального медицинского исследовательского центра фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний, Екатеринбург, Россия
ANALYSIS OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS UPTAKE BY ALVEOLAR MACROPHAGES OF TUBERCULOSIS PATIENTS IN EX VIVO CULTURE
Ufimtseva E.G.1, Eremeeva N.I.2, Vakhrusheva D.V.2, Skornyakov S.N.2
'Research Institute of Blochemlstry, Federal Research Center of Fundamental and Translational Medicine, Novosibirsk; 2Ural Research Institute for Phthlslopulmonology, National Medical Research Center of Tuberculosis and Infectious Diseases, Yekaterinburg, Russia
Ранее был разработан способ получения первичных культур альвеолярных макрофагов из резецированных участков легких пациентов, больных туберкулезом легких (ТБ), который позволил в течение первых послеоперационных дней оценить их зараженность Mycobacterium tuberculosis (Mtb) и определить функциональный статус патогена в ex vivo культуре.
Цель - исследование способности альвеолярных макрофагов к фагоцитозу Mtb в первичных клеточных культурах.
Материалы и методы. Альвеолярные макрофаги, полученные из резецированных отделов легких четырех пациентов, больных ТБ, и почти не содержавших Mtb, инфицировали ранее выделенными в нашей работе высоковирулентными клиническими изолятами Mtb в разных концентрациях (1, 10, 50 и 500 Mtb/макрофаг) на 18 ч ex vivo культивирования. Оценили количество клеток с кислотоустойчивыми Mtb на разных сроках после экспериментального инфицирования, присутствие патоген-ассоциированных паттернов на клеточной стенке Mtb и рецепторов их распознавания на плазматической мембране альвеолярных макрофагов на цитологических и гистологических препаратах методами иммуно-флуоресцентного и гистохимического по Цилю-Нильсену окрашивания, световой и конфокальной микроскопии.
Результаты. В ex vivo клеточных культурах обнаружили отсутствие фагоцитоза альвеолярными макрофагами пациентов клинических изолятов Mtb, содержавших на клеточной стенке такие паттерны, как факторы вирулентности липо-арабиноманнан LAM и гликопротеин Ag38, и лабораторного штамма H37Rv при экспериментальном инфицировании во всех использованных концентрациях бактерий, в том числе и очень высокой. В основе наблюдавшегося феномена, вероятно, лежала передислокация паттерн-распознающих рецепторов CD14, TLR2 и CD11b c плазматической мембраны альвеолярных макрофагов, где рецепторы были представлены на гистологических срезах тканей, в цитоплазмати-ческие везикулы клеток в ex vivo культуре, возможно, как результат манипуляций при их выделении из резектатов легких пациентов.
Заключение. Установлено, что как в ранее, так и здесь представленной работе ex vivo исследованные клетки с Mtb были получены, прежде всего, из тканей легких пациентов, а не при фагоцитозе бактерий в первичных клеточных культурах. Следовательно, результаты наших исследований в ex vivo культурах альвеолярных макрофагов характеризуют Mtb-инфицированность клеток-хозяев, характерную для тканей легких пациентов, больных ТБ, на момент оперативного вмешательства.
ОСНОВНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ЭВОЛЮЦИИ ВИРУСОВ ГРИППА А(Н1N1)PDM09 В ТЕЧЕНИЕ 10 ЛЕТ ПОСЛЕ ПАНДЕМИИ
Фадеев А.В., Жилинская И.Н.
Научно-исследовательский институт гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
