CC BY
1516. Там же, с. 130-136.
17. Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: В 2 т. - Мн.: Беларусь, 2000. - Т. 1. - С. 439-443.
18. Там же. - Т. 1. - С. 409-412.
19. Там же. - Т. 2. - С. 286-287.
20. Так же.- Т. 2. - С. 307-309.
21. Костюк В.А., Потапович А.И., Ковалева Ж.В. Простой и чувствительный метод определения активности супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина // Вопр. мед. химии, 1990. - Т. 36. - № 2. - С. 88-91.
22. Карпищенко А.И., Глушков С.И., Смирнов В.В. Глутатион-зависимая антиоксидантная система в некоторых тканях крыс в условиях ос-
трого отравления дихлорэтаном // Токсикол. вестник, 1997. - № 3. - С. 17-23.
23. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов пе-рекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой //Вопр. мед. химии, 1987. - Т. 33. - № 1. - С. 118-122.
24. Кундиев Ю.И., Стежка В.А., Дмитруха Н.Н. и др. Зависимость изменения иммунных и биохимических механизмов поддержания гомеос-таза от материальной кумуляции свинца в организме (экспериментальное исследование) // Мед. труда и пром. экол., 2001. - №5. - С. 11-17.
Материал поступил в редакцию 23.03.05.
N.V.Kitikova2, L.V.Polovinkin1, A.A.Ushkov\ I.L.Shashkova2, AJ.Ratko2, T.I.Polovinkina1, L.I.Soroko1, S.N.Yezheleva1
CORRECTIVE ACTION OF CALCIUM PHOSPHATES PREPARATIONS AT EXPERIMENTAL LEAD INTOXICATION
1State-owned Establishment «Republican Scientific and Practical Center for Hygiene» 2State-owned Scientific Establishment «Institute of General and Inorganic Chemistry», National Academy of Sciences of Byelarus, Minsk
Investigations were conducted on the action of calcium phosphates with different mole ratios of Ca:P on the rat organism under conditions of sub-chronic lead intoxication. It was shown that the use of calcium phosphates preparations leads to the normalization of liver and kidneys functions.
УДК 615.254.036.8
Е.Г.Доркина, М.В.Гаврилин, С.Ю.Бокарева, Л.А.Саджая, А.Ю.Терехов, Ю.А.Огурцов
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «УРОКАМ» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПОЧЕК
ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия»,
ООО «НПП Камелия»
В экспериментах на крысах изучено нефротоксическое действие сиропа «Урокам», содержащего экстракты листьев толокнянки, брусники, берёзы и сок плодов клюквы. Установлено, что профилактическое применение «Урокама» приводит к значительному купированию нефротического синдрома при поражении почек ртути дих-лоридом. По эффективности сироп «Урокам» превосходит препарат сравнения «Фитолизин».
Ключевые слова: нефротический синдром, сироп «Урокам», препарат «Фитолизин», сулемовый нефроз.
Введение. Одним из серьёзных проявлений токсического повреждения организма может быть развитие острого или хронического нефротического синдрома. При этом наблюдается тяжёлая дистрофия канальцевого эпителия, в дальнейшем приводящая к его кистозному расширению и атрофии. В этой связи, лечение и профилактика нефротического синдрома имеет важное значение для медицинской практики. Вместе с
тем, до настоящего времени медицина испытывает недостаток в эффективных и безопасных лекарственных препаратах, применяемых в этом случае. Учитывая длительность лечения и риск развития побочных эффектов, эффективными для лечения нефротического синдрома оказываются фитопрепараты. К числу таких фитокомпо-зиций следует отнести и созданный фирмой «Камелия» сироп «Урокам», в состав которого входят
экстракты листьев толокнянки, брусники, березы и сок плодов клюквы, сахар и вода.
В экстрактах листьев брусники и толокнянки содержится до 25% гликозида гидрохинона — арбутина. В организме арбутин гидролизуется с образованием гидрохинона, который оказывает уроантисептическое, спазмолитическое и противовоспалительное действие на мочеполовую систему. Клюквенный сок и экстракт листьев березы содержат до 9% танинов, которые обладают антивирусными и антибактериальными свойствами. Они предупреждают проникновение бактерий в мочевыводящие пути, обладают общеукрепляющим, мочегонным действием, улучшают состояние мочевыводящей системы [1].
Сироп «Урокам» предполагается к применению для профилактики и лечения (в качестве вспомогательного средства) хронических заболеваний мочевого пузыря и циститов, острых и хронических заболеваний почек, пиелонефритов, инфекционных и воспалительных заболеваний мочевыводящих путей, а также в качестве средства, препятствующего образованию мочевых камней, и в качестве мочегонного средства при отеках, связанных с почечной недостаточностью.
Целью настоящих исследований явилась доклиническая оценка эффективности при не-
фропатологии в сравнении с эталонным препаратом «Фитолизин» («Гербаполь», Польша), применяемым при инфекционно-воспалитель-ных заболеваниях мочевых путей и почечно-ка-менной болезни.
Материалы и методы исследований. Эксперименты проведены на белых крысах линии Wistar обоего пола, массой 180-280 г, содержащихся в стандартных условиях вивария на модели «сулемового нефроза» при лечебно-профилактическом введении исследуемых средств. Для создания модели животным подкожно вводили 0,1% водный раствор ртути дихлорида в дозе 4 мг/кг ежедневно в течение 5 дней [2] . «Урокам» в дозах 1,25, 2,5 мл/кг и «Фитолизин» в дозе 1,25 мг/кг начинали вводить перорально за 10 дней до введения ртути дихлорида, а затем совместно с ним. Забой осуществляли через сутки после последнего введения сулемы. Контрольная группа получала сахарный сироп (64% раствор сахарозы).
Для оценки эффективности действия «Уро-кама» и «Фитолизина» при нефропатологии контролировали общее состояние подопытных животных, летальность, диурез, измеряли весовой почечный коэффициент. В сыворотке крови измеряли содержание мочевины и креатини-
Таблица 1
Влияние курсового введения «Урокама» и «Фитолизина» на основные показатели мочи
у крыс с «сулемовым нефрозом»
Показатель Интактные Контроль («сулемовый нефроз») Урокам, мл/кг Фитолизин, 1,25 мг/кг
1,25 2,5
Объем мочи за 5 часов, мл/100 г 2,29±0,187 1,02+0,157** -55% 1,65+0,189* +62% 1,48+0,099 0,79+0,066
рН 6,05+0,096 5,5+0,258 5,75+0,214 5,75+0,214 5,75+0,171
Относительная плотность 1,014+0,0037 1,028+0,004** +14% 1,019+0,002 1,021+0,0027 1,028+0,0011**
Кетоновые тела, моль/л 0,042+0,035 0,63+0,062** +140% 0,21+0,077* -67% 0,33+0,053* -48% 0,70+0,163**
Глюкоза, ммоль/л - 25,7+2,33 6,0+1,83* -77% - 18,7+2,95
Белок, г/л 0,13±0,046 0,90+0,0434** +592% 0,33+0,033* -63% 0,36+0,11* -60% 0,48+0,11* -47%
Уробилиноген, мг/дл нет нет нет нет нет
Билирубин, мг/дл нет нет нет нет нет
Нитраты, нет нет нет нет нет
Лейкоциты, \¥ВС/ цЬ 4,17+4,17 62,5+8,54** +150% 58,3+5,27 58,3+8,33 58,3+5,27
на. Сыворотку получали из крови путем центрифугирования.
Интенсивность диуреза изучали за сутки до забоя после водной нагрузки (из расчета общего объема жидкости 25 мл/кг) перорально через желудочный зонд, помещали животных в мочесборники и собирали мочу в течение 5-ти ча сов. Из ме ря ли объем со бран ной мо чи и проводили общий анализ в соответствии с 3, 4 по следующим показателям: цвет, прозрачность, запах, рН, относительная плотность, ос мо ляль ность, со дер жа ние ке то но вых тел, глюкозы, уробилиногена, кровяных пигментов, билирубина, нитратов и лейкоцитов. В мо че про во ди ли опре де ле ние со дер жа ния креатинина.
Изменение перечисленных показателей у животных, получавших препараты, оценивали по сравнению с контрольной и интактной группами животных.
Результаты и обсуждение. У животных, которым инъецировали ртути дихлорид, развивалась выраженная почечная недостаточность, которая сопровождалась снижением веса, гиподинамией, угнетением общего состояния, пониженным аппетитом, а также значительным угнетением функции почек. Полученные результаты представлены в табл. 1-3.
Как следует из представленных результатов, лечебно-профилактическое применение сиропа «Урокам» на фоне «сулемового нефроза» оказало достаточно выраженный защитный эффект в обеих дозах. В отдельных случаях измеряемые нами показатели, характеризующие поражение почек, при введении более высокой дозы «Урокама» улучшались в большей степени, как, например, усиление экскреции креатини-
на, уменьшение весовых индексов почек и др., но в целом заметного усиления эффективности действия «Урокама» при повышении дозы не отмечалось. Так, у животных, которые получали «Урокам» в дозе 1,25 мл/кг, по сравнению с контролем, увеличился на 65% объем мочи, на 67% снизилось содержание в моче кетоновых тел, на 77% — глюкозы и на 63% — белка (табл. 1).
У животных, получавших «Урокам» в дозе 2,5 мл/кг, объем мочи достоверно не отличался от контроля, кетоновые тела в моче снизились на 48%, белок — на 60%, глюкоза в моче не обнаруживалась (табл. 1). Гипоазотемическое действие «Урокама» в дозе 2,5 мл/кг хотя и было несколько более выраженно, чем в дозе 1,25-мл/кг, но достоверные отличия при этом между ними отсутствовали: введение «Урокама» в дозе 1,25 мл/кг привело к снижению уровня креатинина в крови на 79%, а мочевины — на 52%, при введение его в дозе 2,5 мл/кг эти показатели снизились по сравнению с контролем соответственно на 52 и 66% (табл. 2).
Осмоляльность мочи у крыс, получавших «Урокам» в дозе 1,25 мл/кг уменьшилась на 45%, а в дозе 2,5 мл/кг — не изменилась по сравнению с контролем (табл. 2). Весовые индексы почек также уменьшились в несколько большей степени при введении «Урокама» в дозе 2,5 мл/кг — левой почки на 30%, а правой — на 33%. Введение же «Урокама» в дозе 1,25 мл/кг снизило весовые индексы почек соответственно на 21 и 23%, но и в этом случае достоверной разницы между группами, получавшими разные дозы «Урокама», не выявлено (табл. 3).
Таким образом, исходя из результатов анализа мочи и крови и измерения весовых индексов почек, можно сделать вывод, что «Урокам» и в
Таблица 2
Влияние лечебно-профилактического применения «Урокама» и «Фитолизина» на некоторые показатели сыворотки крови и мочи при сулемовом нефрозе
Показатель Интактные Контроль («сулемовый нефроз») Урокам, мл/кг Фитолизин 1,25 мл/кг
1,25 2,5
Креатинин сыворотки, мкмоль/л 99,7±7,35 300,9±19,85# +202% 63,2±8,55* -79% 54,8+10,32* -82% 159,5+17,34* -47%
Мочевина сыворотки, ммоль/л 5,62±0,414 29,30±2,71# +421% 14,0+1,743* -52% 10,00+1,291* -66% 26,84+3,278
Креатинин мочи, мкмоль/5 часов 29,2±3,15 16,2±1,48# -45% 27,2+3,14* +68% 30,3+2,67* +87% 20,1+1,31
Осмоляльность мочи, милиОсм/кг 177,0±23,42 724,0±83,08# +309% 422,6+50,04* -42% 551,2+60,38 713,2+49,62
Примечание. Здесь и в табл. 3:# — р<0,05по отношению к интактным животным; * — р < 0,05 по отношению к контролю; кол-во животных в каждой группе — 6
Таблица 3
Влияние лечебно-профилактического применения «Урокама» и «Фитолизина» на относительную массу почек при сулемовом нефрозе
Показатель Интактные Контроль, («сулемовый нефроз») Урокам, мл/кг Фитолизин, 1,25 мг/кг
1,25 2,5
Весовой индекс почек, г/100 г
левая 0,33±0,009 0,57±0,022# +73% 0,45+0,019* -21% 0,40+0,027* -30% 0,47+0,026* -18%
правая 0,34±0,012 0,61+0,027" +80% 0,47+0,042* -23% 0,41+0,023* -33% 0,49+0,028* -20%
дозе 1,25мл/кг и в дозе 2,5 мл/кг обладал примерно одинаковой эффективностью нефроза-щитного действия. При этом нужно отметить, что у крыс, получавших «Урокам» и в той и в другой дозе осталось высоким содержание лейкоцитов в моче (этот показатель по отношению к контролю достоверно не изменился).
Эффективность защитного действия «Фитолизина» в дозе 1,25 мг/кг по исследуемым показателям мочи и крови была выражена еще в меньшей степени, чем эффективность действия «Урокама» в дозах 1,25 и 2,5 мл/кг. Как видно из данных табл. 1-3, у крыс, получавших «Фитоли-зин», объем собранной мочи, концентрация в ней кетоновых тел, глюкозы и содержание лейкоцитов достоверно не отличались от соответствующих значений у контрольных животных с «сулемовым нефрозом». Содержание белка в моче уменьшилось на 47% по сравнению с контролем, т.е. в меньшей степени, чем при применении «Урокама». То же самое можно отметить и в отношении содержания креатинина в сыворотке крови — его содержание снизилось только на 47% При этом содержание мочевины в сыворотке крови, содержание креатинина в моче и осмоляльность мочи остались на уровне контрольных значений, т.е. «Фитолизин» не оказал влияния на эти показатели. В меньшей степени, чем при применении «Урокама», восстанавливались весовые индексы почек — относительная масса левой почки у животных, получавших «Фитолизин», уменьшилась по сравнению с контролем на 18%, а правой почки — на 20% .
Гистологическое изучение почек контрольных животных показало, что в канальцах всех уровней отмечаются значительные дистрофические изменения эпителия, которые проявляются в набухании и отделении эпителиальных клеток от базальных мембран и друг от друга, потере значительным количеством ядер базофилии, кариолизисе и десквамации эпителиальных клеток. Просветы канальцев значительно расширены. В интерстиции наблюдается выражен-
ный отек, лимфоцитарная и нейтрофильная инфильтрация, которая особенно ярко выражена в мозговой зоне и имеет очаговый характер. В отдельных зонах истонченные канальцы сливаясь, образуют кистоидные участки. Просветы большинства канальцев заполнены аморфным эозинофильным содержимым смешанными с эритроцитарными массами и слущенным эпителием канальцев.
Гистологическая картина почек крыс, получавших «Урокам» в дозе 1,25 мл/кг, также характеризуется наличием патологических изменений. В канальцевом аппарате имеются признаки дистрофических изменений, однако, эти изменения выражены значительно меньше, чем у контрольных животных. В отличие от контрольной группы, в которой обтурация канальцев аморфными массами наблюдается по всей толще среза в данной группе эти изменения носят очаговый характер и локализуются преимущественно в зоне перехода коркового вещества в мозговое. Степень десквамации эпителия и патологических изменений ядер (кариолизис) также значительно менее выражены, чем в контроле.
Заключение. Применение сиропа «Урокам» может быть эффективным при остром или хроническом нефротическом синдроме, так как он способен восстанавливать функции канальце-вого эпителия.
Список литературы
1. Лекарственное растительное сырьё. Фармакогнозия. /Подред Г.П.Яковлева и К. Ф.Блиновой. — ПСб.: СпецЛит, 2004. — 765 с.
2. Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. — М., 2000. — 352 с.
3. Колб В.Г., Камышников В. С. Справочник по клинической химии. — Минск: Беларусь, 1982. — 336 с.
4. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. проф. В.В.Меньшикова. — М.: Медицина, 1984. — 287 с.
Материал поступил в редакцию 11.05.05.
Ye.G.Dorkina, M.V.Gavrilin, S.Yu.Bokareva, L.A.Sadzhaya, A.Yu.Terekhov, Yu.A.Ogurtsov
INYESTIGATION OF EFFICACY OF USING THE PREPARATION «UROKAM» AT EXPERIMENTAL TOXIC AFFECTION OF KIDNEYS
«State Pharmaceutical Academy of Pyatigorsk», Ltd Company «NNP Kamelia»
In experiments on rats, investigations were conducted on nephrotoxic action of the preparation «Urokam» containing extracts from cowberry, bearberry and birch leaves and fenberry fruit jus. It was found out that a prophylactic application of «Urokam» leads to a significant cupping of nephrotoxic syndrome in kidneys affected by dichloride mercury. The efficacy of the syrup «Urokam» is much higher that that of the comparison preparation «phytolysine».
УДК 597.554.3: 577.17
Н.И.Силкина, В.Р.Микряков
ВЛИЯНИЕ СУБЛЕТАЛЬНЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ИОНОВ КАДМИЯ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА РЫБ
Институт биологии внутренних вод им. И.Д.Папанина РАН, пос. Борок Ярославской области
Показано, что сублетальные концентрации ионов кадмия приводят к повышению общих липидов, сдвигу ли-пидных фракций, активизации процессов перекисного окисления липидов и снижению антиоксидантов в сыворотке крови, тканях печени, селезенки и почек карпа. Показана зависимость исследованных показателей от вида ткани и времени экспозиции.
Ключевые слова: кадмий, карп, липиды, перекисное окисление липидов, антиокислительная активность.
Введение. Кадмий занимает среди тяжелых металлов одно из ведущих мест по степени токсичности для водных организмов, его поглощению из воды и накоплению в тканях [5, 14]. Негативное воздействие кадмия связано с его способностью повреждать клеточные мембраны, блокировать дыхательные процессы в митохондриях, сдви гать ион ный го ме ос таз, из ме нять эндокринную функцию, вызывать нарушения ряда функций и др. [11, 14, 15]. Ранее нами было показано, что воздействие кадмия приводит к токсическому поражению почек, образованию очаговых некрозов, изменению картины крови, появлению признаков вторичного иммунодефицита, изменению липидного обмена в тканях [4, 8]. Рыбы на воздействие неблагоприятных факторов среды реагируют усилением свободнорадикальных и перекисных процессов, снижением антиоксидантов, возникновением оксидативного стресса.
Несмотря на ряд работ, раскрывающих негативное влияние этого ксенобиотика на рыб, не ясен характер воздействия низких концентраций кадмия на липидный обмен иммунокомпе-тентных органов и тканей в условиях токсического стресса. При этом такая информация актуальна и необходима для экологического мониторинга и оценки состояния здоровья рыб.
Цель настоящей работы состояла в исследовании хронического действия сублетальных
концентраций ионов кадмия на количественный и качественный состав липидов, перекисное окисление липидов и общую антиокислительную защиту в иммунокомпетентных тканях.
Материал и методы исследования. Материалом для исследования служили годовики карпа средней массой 90 г. Эксперименты проводили в пластиковых аквариумах объемом 150 л, где создавались условия постоянного газового и температурного режима воды. Опытных рыб содержали в растворе соли Сё^03)2 в концентрации 5 мг/л по иону металла, что соответствовало 0,2 от установленной 96-час СЬ50, а контрольных — в аналогичных условиях в чистой воде. Раствор токсиканта меняли через день. Кормили рыб сухим гранулированным кормом 1 раз в сутки, исходя из массы тела и температуры воды по принятым в прудовом рыбоводстве нормам. Пробы от 5 особей отбирались через 1, 7, 14, 21 и 28 суток от начала опыта. Липиды из гомогенатов тканей экстрагировали общепринятым методом по Фолчу [12] и фракционировали методом тонкослойной хроматографии на силикагелевых пластинках «8Пи1Ы». Об интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) в тканях судили по накоплению малонового диальдегида (МДА) [1]. По кинетике окисления восстановленной формы 2,6-дихлорфенолиндофенола кислородом воздуха в присутствии и отсутствии тканевых экстрактов устанавливали общую ан-
