CC BY
316. Monitoring mirovoy epizooticheskoy situatsii po chume melkikh zhvachnykh zhivotnykh i prognoz ee rasprostraneniya v 2015-2018 gg. [Monitoring of global epizootic situation of small ruminants pest and prognosis of its spreading in 2015-2018] / A.V.Knize, S.V.Parilov, M.V.Bolgova [et al.] // Aktualnye voprosy veterinarnoy biologii [Actual problems of veterinary biology]. - 2014. - № 4 (24). - P. 15-20.
7. Monitoring po virusnym infektsiyam zhivotnykh na territorii Respubliki Tadzhikistan i Kyrgyzskoy Respubliki v 2014 g. [Monitoring of animal viral infections in the territory of the Republic of Tajikistan and the Kyrgyzstan Republic in 2014] / Zh.K.Koshemetov [et al.] // Vestnik Krasnodar GAU. - 2016. - № 3. - P. 171-179.
8. Epizootologicheskaya situatsiya i mery borby po chume melkikh zhvachnykh zhivotnykh v mire i na territorii Respubliki Tadzhikistan [Epizootologic situation and control measures against small ruminants pest in the world and in the territory of Tajikistan Republic] / E.K.Koshemetov, A.R.Sansyzbaev, I.Sattori [et al.] // Doklady Tadzhikistan Akad. Selkhoz nauk. - 2014. - № 4. - P. 30-38.
9. Lunitsin, A.V. Chuma melkikh zhvachnykh zhivotnykh [Small ruminants pest] / A.V.Lunitsin, A.E.Gogin, P.V.Ilyasov // Veterinariya. - 2017. - № 5. - P. 3-9.
10. Massovaya gibel saygakov v Mongolii [Mass death of saigas in Mongolia] // Stepnoy bulletin. - 2017. - № 49. - P. 5.
11. Epizooticheskaya situatsciya po chume melkikh zhvachnykh v stranakh Sredney Azii [Epizootologic situation of small ruminants pest in countries of Middle Asia] / D.M.Mirzoev, A.O.Abdulloev, A.A.Kolomytsev [et al.] // Vestnik Krasnodar GAU. - 2014. - № 6. - P. 222-225.
12. Mischenko, A.V. O putyakh rasprostraneniya i mekhanizmakh peredachi virusa yaschura [On ways of spreading and the mechanisms of transmission of the foot and mouth disease virus] / A.V. Mischenko, V. A.Mischenko // Veterinariya. - 2015. - № 1. - P. 19-22.
13. O roli dikikh zhvachnykh zhivotnykh v rasprostranenii yaschura [About the role of wild ruminants in the spread of foot and mouth disease] / A.V.Mischenko, V. A.Mischenko, N.A.Yaremenko [et al.] // Veterinariya. - 2012. - № 11. - P. 3-5.
14. Problema klinicheskoy diagnostiki yaschura u ovets i koz [The problem of clinical diagnosis of foot and mouth disease in sheep and goats] / A.V.Mischenko, V.A.Mischenko, V.N.Shevkoplyas [et al.] // Veterinariya Kubani. - 2016. -№ 6. -P. 8-10.
15. Problema massovoy gibeli saygakov [The problem of mass death of saigas] / A.V.Mischenko, V.A.Mischenko, A.K.Karaulov [et al.] // Veterinariya segodnya. - 2016. - № 4 (19). - P. 40-45.
16. Chuma melkikh zhvachnykh zhivotnykh [Small ruminants pest] / A.V.Mischenko, V.A.Mischenko, V.P.Melnikov [et al.] // Veterinariya. - 2016. - № 9. - P. 3-9.
17. Problema virusnykh infektsiy u dikikh zhvachnykh zhivotnykh [The problem of viral infections in wild ruminants] / V.A.Mischenko, V.V.Dumova, A.V.Mischenko [et al]. // Veterinariya i kormlenie. - 2011. - № 5. - P. 8-9.
18. Infektsionnaya patologiya zhivotnykh: V 2 T. T. 1 [Infectious pathology of animals: In 2 Volums. Vol.1] / pod red. A.Ja.Samuylenko [et al.]. - M.: IKC «Akademkniga», 2006. - P. 251-263.
19. O putyakh rasprostraneniya i mekhanizmakh peredachi virusa chumy melkikh zhvachnykh zhivotnykh / O.Yu. Chernykh, A.V.Mischenko, V.A.Mischenko [et al] [On ways of spreading and mechanisms of transmission of small ruminants pest virus] // Veterinariya Kubani. - 2016. - № 4. - P. 7-9.
УДК.619:616.98:579.842.14:636.4.
изучение эффективности применения иммуностимулирующих средств с целью совершенствования вакцинопрофилактики
сальмонеллеза свиней
М.О.Баратов - доктор ветеринарных наук, гл.н.с.
ФГБНУ«Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт», г.Махачкала (367000, Дагестан, Махачкала, ул.Дахаева,88; тел. +7(722) 68-27-01, e-mail:pznivi@bk.ru).
В настоящей работе изучена возможность повышения поствакцинального иммунитета некоторыми иммуностимулирующими препаратами (продигиазана, метилурацила, Т- и В-активина). Опыты проведены на 50 поро-сятах-аналогах20-дневного возраста в свинокомплексе с системой непрерывного опороса, где систематически наблюдается падеж поросят на фоне снижения иммунобиологического статуса. Проведенные гематологические и иммунологические исследования показали наличие иммунодефицитных состояний у поросят 2-х месячного возраста, связанное с распадом материнских иммуноглобулинов и затяжным переходом к синтезу собственных. Результативность специфической профилактики была низкая. Иммунизированным формол-вакциной порося-
VETERINARY MICROBIOLOGY, VIROLOGY AND EPIZOOTOLOGY
там вводили Продигиозан 2-х кратно с интервалом 7 дней, Метилурацил, ежедневно, перорально в течение недели (7дней), Т-активин, подкожно 3-х кратно с интервалом 2 дня, В-активин, 2-х кратно, подкожно, через 5-10 дней после иммунизации. У поросят с интервалом 5 дней в течение 30 дней отбирали кровь для определения титров специфических антител. Наличие антител определяли в РНГА с сальмонеллезным O-эритроцитарным диагностикумом. По результатам проведенных исследований, низкий стимулирующий поствакцинальный иммуногенез, показали препараты Продигиазан, Метилурацил и Т-активин и сравнительно высокую В-активин.
КЛючЕВЫЕ СЛОВА: сальмонеллез, поросята, иммунитет, поствакцинальный, иммунодефицитное состояние, антитела, вакцинопрофилактика, иммуноглобулины, противосальмонеллезные антитела.
Сальмонеллез в свиноводческих комплексах по-прежнему представляет серьезную опасность, вызывая большой экономический ущерб. Кроме того, являясь антропозоонозом, болезнь имеет огромное эпидемиологическое значение. Связано это с недостаточными знаниями о формировании и функционировании иммунной системы, как регулятора генетической целостности организма, на протяжении всей индивидуальной жизни, в условиях интенсивной технологии выращивания свиней. В промышленных комплексах участились случаи заболевания и гибели поросят от сальмонеллеза, несмотря на проводимую вакцинопрофилактику.
В этой связи, возникла практическая необходимость исследований, направленных на выявление причин низкой эффективности мер специфической профилактики и поиска более совершенных средств и методов вакцинации. Без учета данной специфики невозможно добиться успехов в решение ветеринарных задач.
Поэтому изучение особенностей функционирования системы иммунитета у свиней, в том числа, в связи с вакцинопрофилактикой сальмонеллеза, имеет практический и научный интерес и является весьма актуальным.
Цель работы. Изучить возможности применения ряда иммуностимулирующих средств, для повышения активности поствакцинального иммуногенеза, а также исследования некоторых иммунобиологических показателей у поросят, выращиваемых по интенсивной технологии.
Материалы и методы. В опыте использовали 90 поросят от 10 до 65 дневного возраста. Активность гуморального иммунитета изучали в 3-х возрастных группах: 1-я группа - 10-20 дней; 2-я - 35-40 дней; 3-я группа - 60-65 дней. Титры агглютининов к сальмонеллезным О-эритроцитарным антигенам в сыворотке крови, изучали в реакции непрямой гемагглютинации на 50 поросятах 20 сут возраста (пять групп по 10 поросят).
Кровь брали утром в одни и те же часы (до кормления и водопоя), после отдыха и успокоения животного. Для предупреждения свертывания крови использовали антикоагулянт (на 10 мл крови), щавелевокислый натрий (калий) - 0,01-0,02 г. Антикоагулянт вносили в пробирку, в которую затем собирали кровь и тщательно смешивали. Для получения плазмы, стабилизированную кровь наливали в пробирку и центрифугировали в течение 10 мин при 1,5-2,0 тыс. оборотов в минуту, прозрачную жидкость - плазму, отсасывали и переносили в другую пробирку.
Для получения сыворотки, кровь ставили сначала в теплое место (на 15-20 мин), а потом в холодное. Образовавшийся сгусток отделяли от стенок сосуда стеклянной палочкой. Полученную сыворотку осторожно отсасывали.
Реакцию оседания эритроцитов (РОЭ) определяли не позже двух часов после взятия крови, по методу Панчен-кова. Гемоглобин определяли гемометром (ГС-2) Сали.
Подсчет количества эритроцитов производили в камере Горяева.
Лейкоцитарную формулу определяли в окрашенных мазках крови по Романовскому-Гимза.
Определение лейкоцитарного профиля. Для более точного и полного суждения об изменениях в лейкоцитарном составе крови определяли лейкоцитарный профиль, который выражает абсолютное содержание отдельных форм лейкоцитов в 1 мм3 крови. С этой целью подсчитывали общее количество лейкоцитов в 1 мм3 крови и выводили лейкоцитарную формулу. Затем количество лейкоцитов умножали последовательно на процент каждого вида клеток лейкоцитарной формулы и делили на 100.
Результаты исследований. Опыты проводили в свинокомплексе «Рассвет» Тарумовского района Республики Дагестан. В связи с тем, что у поросят в комплексе нередко отмечается нарушение функционирования жизненно важных систем, представлялось целесообразным вначале изучить клинико-гематологические и некоторые иммунологические показатели. В таблице 1 приведены результаты гематологических исследований.
Полученные данные указывают на то, что у поросят показатели гематокрита, гемоглобина и эритроцитов в возрасте 15-20 и 35-40 дней не имели статистически достоверных отличии (Р>0,05). Обращает на себя внимание низкое содержание гемоглобина в возрасте 3540 дней, при относительно нормальных показателях гематокрита и эритроцитов.
Количество лейкоцитов у поросят группы 1 и 2 существенно отличались с высокой степенью достоверности, и составляло соответственно 11,4 и 29,9 млрд./л.
Изучение лейкоформулы свидетельствовало о достоверном снижении с возрастом относительного количество лимфоцитов и увеличение количество палочкоядерных нейтрофилов. Показатели лимфоцитов 1 и 2 группы составили 50,4 и 35,3%, палоч-коядерных нейтрофилов 6,1 и 19,2%, соответственно. Остальные показатели лейкоформулы у опытных поросят не имели достоверных отличий. Следует,
отметит низкое количество сегментоядерных ней- зий по Мончини, в равномерном слое 0,15% агарового
трофилов в крови поросят 7,3 и 12,1%.
Важным показателем активности гуморального иммунитета является уровень иммуноглобулинов (I) сыворотки крови. Количество иммуноглобулинов (I в, I М), определяли в реакции радиальной иммунодиффу-
геля, содержащего моноспецифическую антисыворотку к иммуноглобулинам свиньи соответствующего класса. Эти показатели определяли у поросят 3-х возрастных групп, в возрасте 15-20; 35-40; и 60-65 дней. Результаты опыта представлены в таблице 2.
Таблица 1
Результаты гематологических исследований поросят
Показатель Контроль Возраст поросят, в днях
15-20 (1-гр) 35-40(2-гр)
Эритроциты, 1012 /л 5,9±0,11 5,6±0,67 5,8±0,23
Лейкоциты, 109 /л 13,2±0,69 11,4±0,44 29,9±0,26
Гемоглобин, г/л 97,6±0,69 85,3±0,25 54,8±1,23
СОЭ, мм/час 3,3±0,10 3,1±0,17 3,5±0,37
Нейтрофилы, % палочкоядерные 3,8±0,20 6,1±0,5 19,2±0,8
Нейтрофилы, % сегментоядерные 18,7±0,56 7,3±0,12 12,1±0,45
Эозинофилы, % 3,4±0,30 3,1±0,39 3,5±0,69
Базофилы, % -
Моноциты, % 5,6±0,20 5,1±0,40 5,4±0,61
Лимфоциты, % 54,5±4,90 50,4±1,39 35,3±0,81
Таблица 2
Показатели гуморального иммунитета
Группа(п=10) Иммуноглобулины I, г/л
I в I М
Контрольная 16,9±0,12 1,34±0,2
Опытная (возраст 10-20 дней) 12,3±0,18 1,01±0,5
Опытная (возраст 35-40 дней) 8,4±0,72 0,81±0.10
Опытная (возраст 60-65 дней) 14,5±1,2 0,7±0,24
Полученные данные указывают на то, что с возрастом количество I в достоверно снижается до определенного момента, а затем постепенно повышается. Так у поросят 1, 2, и 3 группы, эти показатели составили 12,3±0,18; 8,4±0,72 и 14,5±1,2 г/л, соответственно.
Результаты изучения уровня I М свидетельствуют, что у растущих поросят количество их до 2-х месячного возраста постепенно снижается, причем примерно до 40 дневного возраста этот процесс протекает более интенсивно. Полученные результаты совпадают с данными литературы, констатирующими факт наличия возрастных физиологических иммунодефицитных состояний у поросят, обусловленных естественным распадом иммуноглобулинов, полученных от свиноматок и переходом к синтезу собственных.
В исследуемом хозяйстве на протяжении ряда лет отмечалось повышение заболеваемости и гибель поросят от сальмонеллеза. Специфическая профилактика была неэффективной. Приведенные выше результаты исследования в определенной степени указывают на функциональную недостаточность за-
щитных систем организма поросят. Это послужило основанием для поиска средств активизирующих поствакцинальный иммуногенез у поросят.
С целью экспериментального изучения возможности стимуляции иммунитета, отобрали 5 групп поросят-аналогов, 20-дневного возраста. Всех животных иммунизировали формол-вакциной Гожульской биофабрики, согласно наставлению по применению. Поросятам 1 группы, вводили Продигиозан 2-х кратно с интервалом 7 дней, 2-й группы - метилурацил, ежедневно, перорально в течение недели (7дней), 3-й группы - Т-активин, подкожно 3-х кратно с интервалом 2 дня, 4-й группы - В-активин, 2-х кратно, подкожно, через 5-10 дней после иммунизации. Пятая группа служила контролем.
Помимо клинического наблюдения у поросят с интервалом 5 дней в течение 30 дней отбирали кровь для определения титров специфических антител. Наличие антител определяли в РНГА с сальмонеллезным О-э-ритроцитарным диагностикумом. В таблице 3 представлены результаты исследования.
VETERINARY MICROBIOLOGY, VIROLOGY AND EPIZOOTOLOGY
Таблица 3
Титры агглютининов к сальмонеллезным О - эритроцитарным антигенам в сыворотке крови поросят в
РНГА
Группа(n=10) Титры антител к антигенам
Возраст, дни
20 25 30 35 40 45
Опытная 1 63±1,30 1 62±0,20 1:57±1,2 1 60±0,56 1 44±1,60 1 54±0,79
Продигиазан 1 52±0,23 1 58±1,27 1:59±0,78 1 57±0,89 1 61±0,95 1 56±0,51
Метилурацил 1 43±0,64 1 48±1,24 1:47±1,45 1 50±1,52 1 49±0,59 1 46±0,33
Т-активин 1 60±0,45 1 54±0,50 1:55±1,28 1 53±0,62 1 50±0,88 1 49±1,28
В-активин 1 56±0,16 1 58±0,40 1:74±1,2 1 82±0,71 1 87±0,13 1 88±0,83
Как видно из таблицы заметной разницы в динамике титров противосальмонеллезных антител поросят всех групп, за исключением 4 группы, не выявлено. У поросят 4 группы обработанных В-ак-тивином, титры антител в 35-45 дневном возрасте, достоверно были выше.
Обращает на себя внимание тот факт, что перед вакцинацией в 20-дневном возрасте у 76% поросят обнаруживали противосальмонеллезные антитела в крови в титрах 1:4-1:16. Это можно объяснить наличием у поросят колостральных (молозивных) антител, хотя уровень этих антител сам по себе весьма низкий, что может быт, объяснено несовершенством схемы вакцинации супоросных свиноматок, а также нарушением всасывания иммуноглубулинов в кишечнике новорожденных поросят, первые дни жизни.
Таким образом относительный эффект стимуляции был выявлен у поросят обработанных В-активи-ном, что может быт использовано в свиноводческих хозяйствах для повышения иммунного статуса поро-сят-отъемышей.
Заключение. У поросят в хозяйстве при иммунизации формол-вакциной против сальмонеллеза свиней установлена сниженная гуморальная иммунная реакция.
При клинико-гематологических и иммунологических исследованиях поросят обнаружено недостаточное количество сегментоядерных нейтрофилов, а также выраженное снижение уровней I в и I М в 20-35 дневном возрасте.
Применение Продигиазана, Метилурацила и Т-активина не способствовало стимуляции поствакцинального иммуногенеза у поросят иммунизированных формол-вакциной против сальмонеллеза свиней.
В условиях комплекса, в связи с иммунодепрес-сией у поросят для достижения высокой эффективности вакцинопрофилактики возможно использование для иммуностимуляции В-активин.
В связи с хозяйственными трудностями обеспечения полноценных условий содержания и кормления молодняка свиней в комплексе, представляется целесообразным дальнейшее изыскание стимуляторов специфической и общей резистентности организма поросят.
С целью снижения экономического ущерба от сальмонеллеза и других инфекционных заболевании, необходимо создать оптимальные условия содержания животных, а также обеспечить полноценное сбалансированное питание.
Литература
1. Ахмедов, A.M. Сальмонеллезы молодняка / А.М.Ахмедов. - М.: Колос, 1983. - 240 с.
2. Бакулов, И.А. Эпизоотология с микробиологией / И.А.Бакулов, В.А.Ведерников, А.Н.Семенихин; под ред. И.А.Бакулова. - М.: Колос, 2000. - 481 с.
3. Зависимость иммуносупрессивного действия липополисахарида от степени патогенности сальмонелл / Е.В.Борисова, В.М.Бондаренко, О.С.Моложавая, В.А.Борисов // Журнал Микробиологии Эпидемиологии и Иммунобиологии. - 2001. - № 1. - С. 40-43.
4. Бухарин, О.В. Сальмонеллы и сальмонеллезы / О.В.Бухарин, Ю.Д.Каган, А.Л.Бурмистрова. - Екатеринбург: Уро РАН, 2000. - 258 с.
5. Гайдамака, А.В. Исследование иммунологического статуса свиней в промышленном комплексе в связи с вакцинопрофилактикой сальмонеллеза: автореф. дис. ... канд. биол. наук / А.В.Гайдамака. - Харьков, 1990. - 23 с.
6. Кленова, И.Ф. Ветеринарные препараты в России / И.Ф.Кленова, Н.А.Яременко. - М.: "Сельхозиздат",
2001. - 543 с.
7. Орешкин, А.С. Роль условно-патогенной микрофлоры в заболеваниях молодняка / А.С.Орешкин // Ветеринарная газета. - 2000. - № 20. - С. 4.
8. Раицкая, В.И. Как предотвратить падеж молодняка / В.И.Раицкая, Н.И.Шкиль // Ветеринарная газета. -
2002. - № 2. - С. 2.
9. Серегин, И.Г. Еще раз о профилактике сальмонеллеза у убойных животных / И.Г.Серегин, А.Л.Яцута // Мясная индустрия. - 2001. - № 1. - С. 43-46.
10. Сальмонеллез на комплексе / М.Сидоров, В.Субботин, Р.Корнелаева [и др.] // Свиноводство. - 1991. -№ 3. - С. 29-30.
11. Справочник Видаль. Лекарственные средства ветеринарного назначения в России: справочник. - М.: Астра Фарм Сервис, 2001. - 528 с.
12. Научно-обоснованная система получения здорового молодняка и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят (рекомендации) / В.В.Субботин, Н.С.Ивкин, Э.А.Шегидевич [и др.] // Ветеринарный консультант. - 2002. - № 19-20. - С. 2-4.
13. Salmonella typhimurium phage type DT 104 in Belgian livestok / H.Imberehts, M.De.Filette, C.Wray [et al.] // Veter. Rec. - 1998. - Vol. 143, № 15. - P. 424-425.
14. Urbanek, D. Zum Impfstoffeinsatz und Impfkalender in der Schweineproduktion / D.Urbanek, I.Koban // Monatshefte fur Veterinarmedizin. - 1988. - № 19/20. - P. 705-71.
studying the efficacy of immunostimulating agents to improve the vaccine prophylaxis of pig salmonellosis
Baratov M.O. - Doctor of Veterinary Sciences.
Caspian Zonal Research Veterinary Institute of Russian Academy of Agricultural Sciences, Mahachcala
(e-mail: pznivi@bk.ru).
In the present work, the possibility of increasing postvaccinal immunity by some immunostimulating drugs (Prodigiazan, Methyluracil, T- and B-Activin) has been studied. Experiments were carried out on 50 pigs analogues of 20-day-old in a pig complex by a continuous farrowing system, where the cases of piglets mortality were systematically observed against the background of a decrease in the immunobiological status. Hematological and immunological studies have shown the presence of immunodeficient conditions in piglets of 2 months of age connected with the disintegration of maternal immunoglobulins and a protracted transition to the synthesis of their own. The resultiveness of specific prophylaxis was poorly effective. Using immunized form-vaccine the piglets were administered Prodigiozan 2 times with an interval of 7 days, Methyluracil, daily, orally for a week (7 days), T-activin, subcutaneously 3 times at intervals of 2 days, B-activin, 2-fold, subcutaneously, 5-10 days after immunization. Piglets were sampled blood at intervals of 5 days for 30 days to determine the titers of specific antibodies. The presence of antibodies was determined in the Indirect Hemagglutination Reaction with salmonella O - erythrocyte diagnosticum. According to the results of the studies, the weak stimulating post-vaccination immunogenesis was shown by the preparations, Prodigiazan, Methyluracil and T-Activin and comparatively high - by B-activin.
KEYWORDS: salmonellosis, piglets, immunity, postvaccinal, immunodeficiency state, antibodies, vaccine prophylaxis, immunoglobulins, antisalmonella antibodies.
References
1. Akhmedov, A.M. Salmonellezy molodnyaka [Salmonellosis of young animals ] / A.M.Akhmedov. - M.: Kolos, 1983. - 240 p.
2. Bakulov, I.A. Epizootologiya s mikrobiologiey [Epizootology with microbiology] / I.A.Bakulov, V.A.Vedernikov, A.N.Semenikhin; edited by I.A.Bakulov. - M.: Kolos, 2000. - 481 p.
3. Zavisimost immunosupressivnogo deystviya lipopolisakharida ot stepeni patogennosti salmonell [Dependence of the immunosuppressive action of lipopolysaccharide on the degree of pathogenicity of Salmonella] / E.V.Borisova, V.M.Bondarenko, O.S.Molozhavaya, V.A.Borisov. // Zhurnal Mikrobiologii Epidemiologii i Immunobiologii. - 2001. -
№ 1. - P. 40-43.
4. Bukharin, O.V. Salmonelly i salmonellezy [Salmonella and salmonellosis]. O.V.Buharin, Yu.D.Kagan, A.L.Burmistrova. - Ekaterinburg: Uro RAN, 2000. - 258 p.
5. Gaydamaka, A.V. Issledovanie immunologicheskogo statusa sviney v promyshlennom komplekse v svyazi s vaktsinoprofilaktikoy salmonelleza: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk [The study of the immunological status of pigs in the industrial complex in connection with the vaccine prophylaxis of salmonellosis: abstract from dissertation for Candidate of Biological Sciences] / A.V.Gaydamaka. - Harkov, 1990. - 23 p.
6. Klenova, I.F. Veterinarnye preparaty v Rossii [Veterinary preparations in Russia ] / I.F.Klenova, N.A.Yaremenko. -M.: "Selkhozizdat", 2001. - 543 p.
7. Oreshkin, A.S. Rol uslovno-patogennoy mikroflory v zabolevaniyakh molodnyaka [The role of the conditionally pathogenic microflora in young animals diseases ] / A.S.Oreshkin. - Veterinarnaya gazeta. - 2000. - № 20. - P. 4.
