Изучение денситометрических характеристик эозинофилов периферической крови при заболеваниях инфекционно-аллергической природы Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МЕЛНЦННСКНЕ ИНУКИ

ИЗУЧЕНИЕ ДЕНСИТОМЕТРИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК ЭОЗИНОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ИНФЕКЦИОННО-АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ

Т. П. Бондарь, Н. М. Ишкова, А. Б. Эльканова

THE STUDY OF THE DENSITY CHARACTERISTICS OF PERIPHERAL BLOOD EOSINOPHILS DISEASES INFECTIOUS ALLERGIC NATURE

Bondar T. P., Ishkova N. M., Elkanova A. B.

The article deals with optical, cytochemical, stereometric characteristics of granulocytic eosinophils in diseases of infectious-allergic genesis. Established cytochemical and stereometric differences normodansnyh and gipodansnyh eosinophils in patients, depending on the severity of infectious-allergic disease.

Hey words: eosinophils normodansnye and gi-podansnie, infectious and allergic diseases, cyto-chemical method, atomic force microscopy, computerized morphometry of eosinophil.

В статье рассмотрены оптические, цитохимические и стереометрические характеристики гранулоцитарных эозинофилов при заболеваниях инфекционно-аллергического генеза. Установлены/ цитохимические и стереометрические различия эозинофилов нормальной и пониженной плотности у пациентов в зависимости от тяжести течения инфекционно-аллергического заболевания.

Ключевые слова: эозинофилыi нормальной и пониженной плотности, инфекционно-аллерги-ческие заболевания, компьютерная морфометрия эозинофилов, атомно-силовая микроскопия.

УДК 621.385

Круг заболеваний, при которых наблюдаются гиперэозинофильные реакции крови достаточно обширен. Различают реактивные эозинофилии и эозинофилии, возникающие при заболеваниях системы крови. Эозино-филии инфекционно-аллергической природы относятся к реактивным состояниям (2).

При эозинофилиях изменяется кинетика эозинофилов, так на ранних стадиях созревания укорачиваются клеточные циклы, увеличивается митотический индекс, время генерации сокращается в три раза, эозино-филы появляются в периферической крови в два раза быстрее. Из циркуляции эозинофилы исчезают в течение 3 часов, а затем вновь возвращаются в кровоток из тканей. Длительность рециркуляции является одной из причин эозинофилии (4).

До сих пор недостаточно понятны механизмы, определяющие различия в ответе эозинофилов у разных людей на одни и те же патологические процессы. Доказано, что возникновение и выраженность эозинофи-лии при реактивных состояниях связано с ферментной активностью клеток или рецепторами их мембраны и выражается комплексом нарушений в виде дегрануляции и изменения цитохимического состава эозинофилов (3).

В настоящее время выделяют две основные субпопуляции эозинофилов, различающиеся по своей плотности. Рядом исследователей (1; 7; 8), было показано, что эози-нофилы являются гетерогенной популяцией по плотностным характеристикам. При центрифугировании в градиенте Перколла

(1,085) или метризамида клетки разделяются на две фракции: легкие (пониженной плотности) и нормальные (нормальной плотности) Нормоплотностные эозинофилы в зарубежной литературе получили название нор-модансных, пониженной - гиподансных (5). В эозинофилах пониженной плотности (активных) число гранул значительно уменьшается, клетки вакуолизируются, становясь менее плотными, чем эозинофилы нормальной плотности. Механизм активации реализуется за счет превращение О2 в супероксид О_2,путем передачи одного электрона от НАДФ. Эта реакция приводит к выделению из клеток повышенного количества эозино-фильной пероксидазы и увеличению синтеза катионного белка.

Механизм синтеза и дифференцировки низкоплотностных эозинофилов пока неизвестен. Существует несколько гипотез объяснения снижения плотностных характеристик эозинофилов (8):

1. Клетки с повышенной способностью генерировать супероксидный анион (О_2), более зрелые и метаболически активные.

2. Незрелые клетки, с незаконченным циклом созревания.

3. Различные линии в пуле пролифери-рующих эозинофильных гранулоцитов.

4. Комбинация из трех предыдущих гипотез.

По данным ряда авторов, в здоровом организме доля эозинофилов низкой плотности (активных клеток) не превышает 10-20 %, тогда как при патологических состояниях она увеличивается до 35-65-90 % (1).

Целью исследования явилось изучение плотностных (оптических, цитохимических, стереометрических) характеристик эозино-филов периферической крови при заболеваниях инфекционно-аллергической природы.

Материалы и методы исследования. Для решения поставленных в исследовании задач обследовано 136 человек. В обследовании приняли участие 24 пациента (средний возраст 39,0±6,8 лет), с поражением бронхо-легочной системы (амброзийный поллиноз, обструктивный бронхит, бронхиальная астма) городского аллергологическо-го кабинета и пациенты гельминтологиче-

ского центра Ставропольской Краевой клинической инфекционной больницы с положительной серологической реакцией крови к токсокарозу. Из них 26 пациентов (средний возраст 44,7±6,1 лет) с клинически подтвержденным диагнозом: Токсокароз, висцеральная форма и 32 человека (средний возраст 41,0±7,1 лет) с неподтвержденным диагнозом и уровнем антител к тосокарозу ниже диагностических величин. Все пациенты были обследованы до назначения терапии.

Контрольную группу составили 54 добровольца с сопоставимыми возрастными и половыми характеристиками, не имеющих аллергических заболеваний в анамнезе и специфических антител к антигенам токсо-кар в крови.

Материалом для исследования служила венозная кровь, взятая из кубитальной вены утром до приема пищи. Взятие крови осуществлялось с применением специальных одноразовых вакуумных систем с напыленным на стенки пробирки К2-ЭДТА в качестве антикоагулянта, что гарантировало отсутствие в образце посторонних примесей.

Неоднородность плотностных и геометрических характеристик эозинофилов определяли методом компьютерной цитоморфо-метрии на аппаратно-программном комплексе «МЕКОС-Ц» (ЗАО «Медицинские компьютерные системы», Россия) состоящего из микроскопа с тринокуляром «NIKON», цифровой фотокамеры «Delta Pix - 300», персонального компьютера и программы «Анализ мазков крови».

В данном исследовании цитоморфомет-рическая оценка осуществлялась по следующим параметрам: диаметр (D), площадь клетки (S) - наиболее объективные показатели, содержащие информацию о размерах клетки и независящие от ее сложного контура. Площадь рассчитывается как сумма всех точек (пикселов), составляющих изображение, умноженная на масштаб изображения и отражает размеры изучаемых клеток. Суммарная площадь цитоплазмы эозинофила в исследовании рассчитывалась как разница значений площади клетки и площади ядра. Значение площади и диаметра эозинофилов

имеют характер логарифмического распределения.

При анализе цитологических изображений возникла необходимость измерения текстурных характеристик объекта, в частности зернистости для оценки неоднородности популяции клеток цитологического препарата. Для оценки параметров зернистости применяли распределение гистограммы яркости по объекту с помощью показателя удельной оптической плотности (УОП). УОП, измеряется в трех спектральных диапазонах видеокамеры - синем (УОПС), зеленом (УОПЗ), красном (УОПК). Оптической плотности по каждой из трех компонентов спектра соответствует своя область поглощения. Если область поглощения вещества лежит в видимой части спектра, то оно кажется окрашенным, при этом окраска определяется цветом тех лучей, которые вещество поглощает. Суммарная оценка спектрального диапазона отражает степень функциональной активности клетки. Для определения интегральной оптической плотности цитоплазмы в нашей работе выполнялся расчет индекса ИОП (формула 1):

ИОП = УСОП х 8ц (1), Бк

где УСОП - удельная суммарная оптическая плотность эозинофила (УСОП = УОПК + УОПз + УОПс), в усл. ед.;

_ площадь эозинофила, (мкм2). - площадь цитоплазмы эозинофила (мкм2), где Бц=Бк - Бя..

Оценку биоцидного потенциала клеток проводили с помощью оценки количества внутриклеточных катионных протеинов методом Шубича. Определение уровня эози-нофильной пероксидазы в исследовании проводили по методу Эпштейна. Дающая реакцию зернистость эозинофилов оценивалась полуколичественным методом определения среднего цитохимического коэффициента (СЦК) по 4 бальной шкале: 0 - реакция в клетках не определяется; I степень - в цитоплазме определяются единично окрашенные зерна, либо цитоплазма окрашена диф-фузно: II степень - исследуемое вещество в виде гранул заполняет почти всю цитоплаз-

му, но местами участки цитоплазмы не окрашены; III степень - интенсивно окрашенные зерна занимают всю цитоплазму и иногда проецируются над ядром (2).

Для изучения закономерности изменения структурных свойств мембраны эозинофилов на нанометровом пространственном разрешении использовали метод сканирующей зондовой микроскопии. Исследование проводилось при помощи атомно-силового микроскопа «Интегра Прима» в ИТЦКП «Нанотехнологии и наноматериалы» Ставропольского государственного университета. Попытка установить молекулярные изменения в топологии мембраны эозинофи-лов была предпринята в режиме полуконтактной резонансной атомно-силовой микроскопии с использованием зонда NSG-20. Для количественной оценки морфофунк-ционального состояния клеток использовали параметр высоты клетки, которую определяли как максимальную высоту профиля относительно подложки, имеющей установленную высоту h = 0. С помощью метода АСМ появилась возможность оценить органную специфичность изучаемых объектов и структуру их поверхности. При сканировании в фазово-контрастном режиме на поверхности мембраны четко контурировался рельеф цитоскелета эозинофила, имеющего неровную, бугристую поверхность. На трехмерном изображении поверхности мембраны выделялись контуры ядра и гранулы, находящиеся в цитоплазме клетки и над ядром.

Статистическую обработку данных проводили с привлечением методов параметрического анализа с использованием пакета "Microsoft Office XP" [10]. Определяли основные характеристики описательной статистики: среднее (Х), ошибку среднего (м) и среднеквадратичное отклонение (S). Достоверность различия средних определяли по критерию Стьюдента (t) для коэффициентов вариации, уровень значимости p выбран менее 0,05.

Результаты исследования и обсуждение. В результате статистической оценки изменения геометрических и цветояркост-ных параметров цифровых изображений эо-зинофилов установлено, что размер цирку-

лирующих эозинофилов у пациентов с эози-нофилией паразитарного и непаразитарного генеза характеризуется достоверным снижением размеров клеток за счет уменьшения площади цитоплазмы эозинофила, причем изменения размера ядра наблюдается не во всех случаях сравнения (таблица 1). Наименьшее значение площади эозинофила отмечается в группе пациентов-носителей специфических антител к токсокарозу.

Поскольку эозинофил является системой, в которой между разными типами элементов имеются строгие функциональные взаимоотношения, придающие им целостный характер, в процессе количественного

анализа оказывается возможным установить величину изменений одних структурных элементов через другие. По закону Бургера -Ламберта - Бэра оптическая плотность пропорциональна массе поглощающего света вещества (4), в нашем случае это комплекс «краситель-белки» цитоплазмы и гранулы эозинофилов.

При сравнении значений индекса ИОП отражающего суммарную оптическую плотность по красной (УОПК), зеленой (УОПЗ), и синей (УОПС), компоненте, в группах обследованных отмечается достоверное снижение показателя (р<0,05) во всех группах.

Таблица 1

Данные КЦМЭо, цитохимических показателей и АСМ эозинофилов у пациентов с эозинофилией непаразитарного, паразитарного генеза и здоровых взрослых обследуемых (Х±м, р)

Показатели/ Единицы измерения Контрольная группа(п=54) С эозинофи-лии непаразитарного генеза (п=24) Носители антител к токсокарозу (п=32) Больные токсокарозом (п=26)

Средняя площадь клетки, мкм2 162,91±3,6 * 152,78±3,2 145,25±2,42 *** 154,83±2,07

Средняя площадь цитоплазмы, мкм2 110,18±4,21 * 99,06±5,12 85,35±3,23 *** 100,07±4,11

Средняя площадь ядра, мкм2 52,61±2,99 53,72±4,37 59,9±5,29 54,76±3,76

Средний диаметр, мкм 14,21±0,26 13,83±0,35 13,47±0,25 13,63±0,17

ИОП усл.ед. 0,721±0,02 * 0,733±0, 05 0,687±0,02 *** 0,736±0,02 **

Эозинофилы нормоплот-ностные % 82,1 74,5 54,2 64,5

Эозинофилы низкоплот-ностные % 17,9 25,5 45,8 35,5

СЦК пероксидазы, усл.ед. 2,52±0,63 * 1,65±0,44 **** 0,86±0,47 *** 1,73±0,30 **

СЦК кат. белков, усл.ед. 2,6±0,53 2,18±0,26 2,75±0,43 2,1±0,37

Высота (Ь)х10"у 0,29±0,04 * 0,59±0,06 **** 0,48±0,05 *** 0,63±0,07 **

Достоверность различия показателей в группах:

* - носителей антител к токсокарозу и контрольной группой;

** - больных токсокарозом и контрольной группой;

*** - носителей антител к токсокарозу и больных токсокарозом;

**** - с эозинофилией непаразитарного генеза и контрольной группой;

***** - с эозинофилией непаразитарного генеза носителей антител к токсокарозу.

Известно, что существующая между эо-зинофилами и клетками иммунной системы взаимонаправленность эффектов обусловлена, с одной стороны, иммунорегулирующим действием иммуноцитов и определяет эозинофилы как эффекторное звено иммунных реакций, а с другой - способностью эозино-фильных гранулоцитов синтезировать широкий спектр медиаторов, что указывает на их иммуномодулирующую функцию. Основываясь на факте, что обусловливающее значительное усиление цитотоксичности эозинофилов может быть повышение их де-грануляции, нами проведено изучение цитохимического состава эозинофилов на присутствие в клетках пероксидазы и внитрик-леточных катионных протеинов.

Как видно из таблицы 1, наименьшее значение СЦК пероксидазы в эозинофилах отмечается у носителей специфических антител к токсокарозу (СЦКп.= 0,86±0,47, р<0,05). У лиц страдающих висцеральной формой токсокароза и эозинофилией непаразитарного генеза, снижение среднего цитохимического коэффициента (СЦК), отражающего содержание пероксидазы менее выражено, но тенденция к снижению показателя по сравнению со значениями контрольной группы сохраняется. Активация циркулирующего пула эозинофилов приводит к выделению из клеток повышенного количества пероксидазы, что отражает существующее мнение об усилении кислоро-дозависимых механизмов киллинга в эози-нофилах периферической крови, и может быть связано с их повышенной функциональной активностью.

Сравнивая значения катионного белка в исследуемых группах, следует отметить тенденцию к повышению показателя в группе лиц с положительной серологической реакцией к токсокарозу и снижению показателя в группах пациентов с эозинофилией ин-фекционно-паразитарного генеза. Рост содержания лизосомальных катионных протеинов в эозинофилах можно рассматривать как маркер персистенции процесса в организме больного.

На современном этапе развития науки одним из важных направлений исследования

является изучение морфофункциональных особенностей клеточных мембран. Регуляция метаболизма клетки и его адаптационная реорганизация в ответ на различные воздействия в значительной степени связаны с физико-химическими процессами, происходящими в мембране. Сканирующая атомно-силовая микроскопия является перспективным методом, позволяющим исследовать особенности структуры поверхности и размеры изучаемых клеток при решении фундаментальных и практических задач.

Используя метод атомно-силовой микроскопии, с помощью специальной программы обработки изображений, оценивали максимальную величину микровыростов, перепада высот эозинофилов. В результате проведенного исследования отмечено, что при всех реактивных эозинофилиях отмечается изменение архитектоники клеток эози-нофильного звена периферической крови. При статистической обработке изображения эозинофилов, полученных методом атомно-силовой микроскопии, выявлены достоверные различия характеристик поверхности плазматической мембраны эозинофилов, у пациентов различных групп сравнения. Среднестатистические значения параметра высоты клетки представлены в таблице 1. Анализируя показатели высоты профиля мембраны эозинофилов, относительно нулевого уровня, оказалось, что перепад высоты мембраны эозинофилов у больных токсока-розом и пациентов с эозинофилиями непаразитарного генеза превышают контрольные значения в 2, а у носителей антител к токсокарозу в 1,5 раза.

Важнейшее свойство биологической мембраны состоит в ее способности пропускать в клетку и из нее различные вещества. Это имеет большое значение для саморегуляции и поддержания постоянного состава клетки. Такая функция клеточной мембраны выполняется благодаря избирательной проницаемости, т. е. способностью пропускать одни вещества и не пропускать другие. Процесс мембранного транспорта предполагает перенос ионов и других субстратов против градиента концентрации. Вероятнее всего набухание низкоплотностных эозинофилов

можно объяснить кратковременным раздражением механорецепторов, вследствие чего открываются механочувствительные ионные каналы, вызывающие трансмембранный ин-флюкс ионов внутрь клетки с последующим ее набуханием. Первоначальное набухание клетки вызывает открывание новой порции каналов. Такая петля позитивной обратной связи вызывает еще большее нарастание клеточного объема. Динамика перестройки мембраны в конечном счете и определяет функциональные характеристики эозино-филов (6).

Структурно-временная организация эо-зинофильного пула представлена комплексом основных динамических формообразовательных процессов - пролиферации, миграции и метаболизма, с определенными фазовыми и коррелятивными взаимоотношениями внутри данного комплекса. При этом морфо-цитохимические свойства эозинофи-лов достаточно лабильны и могут изменяться в зависимости от функционального состояния клетки, фазы ее клеточного цикла, возраста, степени дифференцировки и т. д.

Наибольшая метаболическая активность эозинофилов при эозинофилиях различного генеза проявляется изменением стереометрических, геометрических оптических и цитохимических характеристик, что характерно для эозинофилов пониженной плотности. В нашем исследовании наименьший размер клеток (Б кл=145,25±2,42), снижение уровня пероксидазы (СЦК=0,86+0,47), повышение уровня катионных протеинов

(СЦК=2,75+0,43) и наибольшая проницаемость света через эозинофилы замечена в группе пациентов с низким уровнем антител к токсокарозу (И0П=0,687±0,02).

Из-за отсутствия определенных данных оптической плотности эозинофилов не только при патологии, но и в норме, были получены норма-тивные морфометрические характеристики 310 эозинофилов из гематологических мазков группы здоровых взрослых. В связи с малым процентным содержанием эозинофилов в периферической крови здоровых людей, отбор эозинофилов осуществлялся не менее чем из 3-4 гематологических мазков каждого обследуемого.

При исследовании ИОП эозинофилов здоровых людей оказалось, что разброс показателей составляет от 0,647 до 2,341 усл. ед. Естественно, что при такой ситуации обработка материала традиционными методами с использованием критерия Стьюдента является некорректной. Для более детальной обработки полученные данные в группе здоровых лиц рассчитывали средний уровень ИОП (Х) и среднее квадратичное отклонение (5). В дальнейшем показатель уровня ИОП был сгруппирован в зависимости от величины 5, как со знаком «плюс», так и со знаком «минус». Полученные данные представлены в таблице 2.

Таблица 2

Дисперсия показателя ИОП в группе здоровых взрослых (п=130)

Пределы колебаний ИОП, усл. ед. п %

>Х+25 0,761 19 6,3

Х+15 0,741 26 8,4

Х±5 0,721 210 67,4

<Х-15 0,701 36 11,6

Х-25 0,681 19 6,3

Оказалось, что наибольшее количество активных эозинофилов с пониженной плотностью отмечается в группе пациентов с низким уровнем антител к токсокарозу. При этом помимо изменения плотностых характеристик клеток нами отмечено различие геометрических показателей и цитохимического состава низкоплотностных эозинофи-лов. Данные, полученные в результате сортировки эозинофилов по плотностным характеристикам (индекс интегральной оптической плотности менее или более 0,701 усл. ед.) здоровых и больных, представлены в таблице 4.

Таким образом, более чем у 82 % эози-нофилов здоровых взрослых значение ИОП оказалось выше 0,701 усл. ед., что и было принято за контрольное значение в наших исследованиях. Для более детального исследования эозинофильных гранулоцитов, основываясь на данных ИОП компьютерной цитоморфометрии, из массива полученных

клеток, эозинофилы были разделены по плотностным характеристикам на 2 группы - нормальной и пониженной плотности. Критерием отбора явилось значение ИОП менее 0,701 усл. ед. Результаты отбора представлены в таблице 3.

Как видно из таблицы 4, группы эози-нофилов, выделенных по плотностным характеристикам, имеют достоверные различия как по размерам, так и по цитохимическому составу. На молекулярном уровне функциональное сходство белков может достигаться схожестью архитектоники клетки. Реализуя принцип индивидуального подхода к детальному анализу, характеристика каждого клеточного объекта и анализ цитохимических состава позволил выделить

несколько характерных признаков эозино-филов нормальной и пониженной плотности. Установлено достоверное снижение средней площади клеток за счет снижения площади цитоплазмы, уменьшение СЦК пе-роксидазы, повышения СЦК катионных белков и высоты профиля относительно нулевого значения.

В процессе сканирования методом атомно-силовой микроскопии выявлено несколько популяций эозинофилов, которые были условно разделены на 3 группы по высоте выступания над нулевым уровнем ядра и цитоплазмы. Результаты исследования приведены в таблице 5.

Таблица 3

Данные распределения эозинофилов по индексу ИОП у пациентов с эозинофилией непаразитарного, паразитарного генеза и здоровых взрослых обследуемых (Х±м, р)

Показатели / Единицы измерения Контрольная группа (п=54) С эозинофилии непаразитарного генеза (п=24) Носители АТ к токсокарозу (п=32) Больные токсокарозом (п=26)

Эозинофилы нормоплотностные % 82,1 74,5 54,2 64,5

Эозинофилы низкоплотностные % 17,9 25,5 45,8 35,5

Таблица 4

Данные КЦМЭо, цитохимических показателей и АСМ эозинофилов нормальной

и пониженной плотности(Х±м, р)

Показатели/ Единицы измерения Эозинофилы нормоплотностные Эозинофилы низкоплотностны е

Средняя площадь клетки, мкм2 160,48±2,58* 145,14±2,24

Средняя площадь цитоплазмы, мкм2 107,83±2,15* 87,66±1,99

Средняя площадь ядра, мкм2 57,48±0,976 52,64±0,69

Средний диаметр, мкм 14,19±0,11 13,46±0,11

СЦК пероксидазы, усл.ед. 3,27±0,04* 1,25±0,03

СЦК кат. белков, усл. ед. 2,78±0,01* 3,75±0,03

Высота (Ь)х10"9 0,173±0,01* 0,834±0,07

Достоверность различия показателей в группах: * - эозинофилов нормальной и пониженной плотности.

Таблица 5

Высота рельефа мембраны эозинофилов различной плотности

Высота Высота

Эозинофилы ядра 10-9м цитоплазмы 10-9 м

Нормоплотностные 0-0,2 0-0,12

Низкоплотностные с

низким уровнем СЦКп 0,2-0,6 0,6-1,2

Низкоплотностные с

низким уровнем СЦКп и СЦКкб 0,6-1,2 0,6-1,6

Таким образом, для нормоплотностных эозинофилов характерные признаками явились низкая высота ядра и цитоплазмы, для низкоплотностных эозинофилов с пониженным уровнем пероксидазы - высокая высота ядра и низкая высота цитоплазмы, а для для низкоплотностных эозинофилов с пониженным содержанием пероксидазы и катионных белков - высокая высота ядра и цитоплазмы.

В результате исследований с помощью атомно-силовой микроскопии установлено, что одним из проявлений высокой реактивности поверхности эозинофила служит изменение её топографии, а целый ряд химических агентов вызывает изменение общей морфологии эозинофила. При этом у серо-позитивных к токсокарозу лиц, без проявления заболевания, отмечено появление значительно количества низкоплотностных эози-нофилов с пониженным уровнем пероксида-зы и нормальным количеством катионных протеинов. В группах пациентов, страдаю-

щих токсокарозом и эозинофилией непаразитарного генеза, отмечается повышенное количество низкоплотностных эозинофилов с низким уровнем пероксидазы и катионных белков.

Эозинофильные гранулоциты могут находиться в кровяном русле в стадиях прай-мирования, преактивации и покоя (8). Любое физико-химическое воздействие вызывает активацию клетки. Однако для проявления реактивности необходимо, чтобы этот стимул обладал адекватной силой воздействия, поскольку слабое воздействие вызовет лишь кондиционирование клетки, сопровождающееся биохимическими перестройками, но не идентифицирующееся морфологически и функционально. Такой стимул может спровоцировать развитие толерантности. Тогда как чрезмерная сила воздействующего фактора может привести к срыву адаптации и защитных организмов.

Выявленная в процессе исследования закономерность, разрешает высказать предположение, что главным запуском защитных механизмов, при развитии эозинофилии ин-фекционно-паразитарного генеза, являются кислородозависимые реакции, которые проявляются в повышенном синтезе пероксида-зы в гранулах. Повышение уровня внутриклеточных катионных протеинов являются показателем персистенции процесса в организме больного, что, возможно, и приводит к изменению количественных и морфологических показателей эозинофильного звена периферической крови и определяет сроки и тяжесть течения основного заболевания.

ЛИТЕРАТУРА

1. Анаев Э. X Эозинофилы и эозинофилии / Э. X Анаев // Атмосфера. Пульмонология, аллергология. - 2002. - Т. 6. - № 3. - С. 15-18.

2. Алексеев Н. А. Клинические аспекты лейкопении, нейтропении, и функциональных нарушений нейтрофилов / Н. А. Алексеев. -СПб.: Фолиант, 2002. - 416 с.

3. Бондарь Т. П. Использование атомно-силовой микроскопии для изучения морфо-функционального состояния эозинофилов у больных токсокарозом / Т. П. Бондарь,

Н. М. Ишкова Е. А. Мельченко А. Б. Эльканова // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2010. - №4 (20). - С. 51-55.

4. Козинец Г. И. Кровь и инфекция / Г. И. Кози-нец, В. М. Погорелов. - М.: Триада-фарм, 2001. - 537 с.

5. Козинец Г. И. Клетки крови - современные технологии их анализа / Г. И. Козинец, В. М. Погорелов, Д. А. Шмаров. - М.: Триа-да-фарм, 2002. - 534 с.

6. Махонина М. М., Богданова О. Д. // Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского: серия «Био-

9.

логия, Химия». - 2007. - Т. 20. - № 4. - С. 130-137.

Уэй Т. Основы молекулярной биофизики / Т. Уэй. - М, 2009. - 400 с. Conesa A. Hypodense eosinophils: characterization of surface molecule expression / A. Conesa, P. Tassinari, H. Rivera // Allergy and Asthma Proceedings. - 2002. - № 8. -P. 117-124.

Fukuda Т. Heterogeneity of human eosinophils / J. T. Fukuda, G. J. Gleich // Clin Immunol. -1989. - Vol. 83 - P. 369-373.

Об авторах

Бондарь Татьяна Петровна, ГОУ ВПО «Ставропольский государственный университет», доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой физико-химических основ медицины, лабораторной диагностики и фармакологии. Сфера научных интересов - изучение особенностей гемопоэза, систем адаптации у здоровых людей и при патологических состояниях в условиях метаболического стресса. Автор более 250 научных работ, из них 2 монографии. 1айапа_Ъоп^1 @ mail.ru

Ишкова Наталья Михайловна, ГОУ ВПО

«Ставропольский государственный университет», кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник кафедры физико-химических основ медицины, лабораторной диагностики и фармакологии. Сфера научных интересов - изучение особенностей гранулоцитов при патологических состояниях и в норме. Автор 15 научных статей.

is-hkjva@ yandex/ru

Эльканова Айшат Борисовна, ГОУ ВПО

«Ставропольский государственный университет», аспирант 1 года кафедры физико-химических основ медицины, лабораторной диагностики и фармакологии Сфера научных интересов - изучение морфофункционального состояния эозинофилов при инфекционно-аллерги-ческих заболеваниях. Автор 10 научных статей. aishat.elkanowa@ yandex.ru