CC BY
24
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
ПРЕИМУЩЕСТВА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭНТЕРОТОКСИНОВ СТАФИЛОКОККОВ
E.Е. Якименко, Т.С. Остапова, Л.С. Гурьева, Т.М. Бугакова, Е.В. Василенко
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Красноярском крае», г. Красноярск
Стафилококковые энтеротоксины являются наиболее частой причиной пищевых отравлений (ПТИ). В настоящее время установлено 6 серологических типов энтеротоксинов: А, В, С, D, E,
F. Лабораторная диагностика пищевых отравлений включает выделение возбудителя из образцов пищевых продуктов, продовольственного сырья, клинических материалов и определение способности выделенных культур продуцировать энте-ротоксины.
Для тестирования продовольственного сырья, пищевых продуктов и способности культур S. aureus продуцировать энтеротоксины ранее использовали биологический метод — биопробу на котятах или взрослых кошках. Этот метод не отличался высокой чувствительностью и специфичностью и не позволял определять тип энтеро-токсина. В настоящее время МУК 4.2.2429-08 регламентирует использование иммунохимических методов. Предел обнаружения энтеротоксинов с помощью RIDASCREEN® SET A, B, C, D, E — 0,7 нг/мл. Набор рекомендован для определения энтеротоксинов в пищевых продуктах и культу-ральных жидкостях, полученных при тестировании штаммов S. aureus. Использование метода ИФА при расследовании пищевых отравлений в период с 2008 по 2010 годы в детских учреждениях Красноярского края позволило выявить источник инфекции и факторы передачи. Так, при расследовании ПТИ в августе 2008 г. в оздоровительном лагере, выделены культуры S. aureus, продуцирующие энтеротоксин типа А из биологических материалов от больных, пищевых продуктов (пирожное «Картошка») и полуфабрикатов (смесь маргарина с сахаром). Всего было исследовано более 50 культур S. aureus, подавляющее большинство которых не продуцировали энтеротоксины. У одного сотрудника был выделен S. aureus, продуцирующий токсин типа Д. При расследовании ПТИ в сентябре 2009 г. в детском специализированном образовательном учреждении из пищевых продуктов, объектов окружающей среды и сотрудников было выделено 11 культур S. aureus, из которых 3 продуцировали энтеротоксин типа С — одна культура из пищевого продукта, который употребляли пострадавшие (кофе с молоком), две культуры от сотрудников учреждения, имеющих контакт с пищевыми продуктами (посудница, кладовщик). Остальные культуры S. aureus не обладали способностью продуцировать энтероток-сины.
Таким образом, использование иммунофер-ментного метода и набора RIDASCREEN® SET A, B, C, D, E позволяет не только обнаружить стафилококковый энтеротоксин, но и определить его тип, что имеет большое диагностическое и эпидемиологическое значение, учитывая широкое распространение S. aureus в объектах окружающей среды и частое носительство у людей.
НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА В ОРГАНИЗАЦИЯХ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
О.Н. Яковенко, Н.И. Владимиров, И.В. Кривогорницын, Н.А. Кравченко
ГБОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, г. Иркутск
Этиологическая природа инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП) определяется широким кругом микроорганизмов (по современным данным более 300), который включает в себя как патогенную, так и условно-патогенную флору, граница между которыми часто достаточно размыта. ИСМП обусловлена активностью микрофлоры, которая объясняется природной и приобретенной устойчивостью к повреждающим физическим и химическим факторам окружающей среды, относительной непритязательностью в процессе роста и размножения, тесным родством с нормальной микрофлорой, высокой контагиозностью, выраженной способностью к формированию устойчивости к антимикробным средствам, порой разное «поведение» in vitro и in vivo. Многочисленные наблюдения показывают, что наряду с видовой идентификацией возбудителя, в эпидемиологической и клинической практике более важным является характеристика свойств возбудителя, отражающая факторы его патогенности. Определение этих характеристик должны входить в микробиологический мониторинг, для оценки роли того или иного этиологического агента в развитии ИСМП. Введение стандартизованного определения не только устойчивости к антимикробным средствам для всех выделенных изолятов от пациента, персонала и окружающей среды учреждений здравоохранения, но и других свойств: токсинообразования, гемолитической активности, характеристик адгезив-ности, способности к размножению в био- и абиотической среде позволят эффективно лечить пациента и планировать экологически оправданные меры дезинфекции и других профилактических и противоэпидемических мероприятий по снижению ИСМП.
ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНОЙ МИКРОФЛОЫ КИШЕЧНИКА И ИНДИКАЦИЯ КРИПТОСПОРИДИЙ У ДЕТЕЙ С ДИСФУНКЦИЕЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
В.В. Яний
ФБУНМНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, Москва
Острые кишечные у детей представляют серьезную проблему, так как по уровню заболеваемости, широте распространения они уступают только респираторным заболеваниям.
При изучении роли условно — патогенных бактерий (УПБ) при диарейных заболеваниях важное значение имеет определение этиологической значимости отдельных видов УПБ и их ассоциации с другими микроорганизмами, вызывающими диарею, в частности — криптоспоридиями, которые относятся к зооантропонозным заболеваниям и в последнее время имеют тенденцию к росту.
Целью настоящего исследования было обнаружение УПБ, криптоспоридий при исследовании микрофлоры кишечника у детей, с дисфункцией желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), обратившихся в КДЦ.
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
Из 116 детей ооцисты криптоспоридий были обнаружены у 16 человек (14%), причем наиболее часто — у детей от 1 года до 3 лет (30%).
Микробиологические исследования основывались на определении качественного и количественного состава микрофлоры кишечника, дисбактериоз I—IV степени был выявлен у 98% — 114 человек.
Наиболее часто выделялись микробы энтеробак-тер (16%), на втором месте по частоте обнаружения — протеи (14%). Бактерии рода цитробактер, серрация и клебсиелла — в небольшом проценте случаев (4%).
У детей, выделяющих криптоспоридии также часто обнаруживалось преобладание лактозанегатив-ных эшерихий (44%) 8 человек, у 20% (4 чел) преобладание эшерихий со смешанной ферментативной активностью.
В 18% случаев (3 чел) отмечали значительное снижение эшерихий по сравнению с нормой. Гемолитические варианты кишечной палочки встречались в 11% случаев (2 чел).
Таким образом, проведенные исследования позволили выявить значительные изменения микрофлоры кишечника у детей с дисфункцией ЖКТ, с выделением у них УПБ и наличием криптоспоридий (14%).
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РАССЛЕДОВАНИЯ ВСПЫШКИ ПИЩЕВОЙ ТОКСИКОИНФЕКЦИИ СТАФИЛОКОККОВОЙ ПРИРОДЫ
Е.С. Ясная1, Т.А. Христенко1, Н.В. Зубчонок13, В.А. Бондарев13, И.А. Щукина23, И.В. Ярковская23, Н.М. Фатина2, С.Н. Бабанин23
'ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Липецкой области, г. Липецк; 2Управление Роспотребнадзора по Липецкой области, г. Липецк; 3ГБОУ ВПО Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург
В январе 2011 г. на территории области была зарегистрирована вспышка, охватившая 57 детей в возрасте от 5 месяцев до 5-ти лет с клиникой пищевой токсикоинфекции (ПТИ) и острого гастроэнтеро-колита. В ходе эпидемиологического расследования установлено, что заболевание было связано с употреблением в пищу продукции («Наринэ», творог), изготовленной по рецептуре в детской молочной кухне (ДМК).
В ходе расследования вспышки были проведены отбор клинического материала от больных, персонал ДМК, смывов с оборудования, продукции и заквасок. Для выявления приоритетных патогенов использовались как экспресс-методы (ПЦР с применением тест-систем «АмплиСенс Shigella spp., и EIEC/Salmonella spp./Campylobacter spp.; «АмплиСенс Rotavirus/Norovirus/Astrovirus-FL»), так и классические (бактериологический, химический). В результате бактериологической диагностики из клинического материала (рвотные массы, промывные воды желудка, фекалии), персонала ДМК (мазки из полости носа) и образцов продукции ДМК был выделен S. aureus. Идентификацию микроорганизмов проводили общепринятыми методами. Все штаммы золотистого стафилококка обладали типичными для данного вида биологическими и биохимическими свойствами. Количество микроорганизмов варьировало от 4 х 104 до 5,9 х 105 КОЕ/мл
у больных и 1 х 102 до 5 х 102 КОЕ/мл у сотрудников ДМК. Изучение антибиотикорезистентности проводили на 27 штаммах S. aureus. В 37% случаев выявлена устойчивость к оксациллину и 7,4% — к эритромицину. Внутривидовую дифференциацию и эпидемиологическое маркирование проводили на штаммах, выделенные из клинического материала детей, сотрудников ДМК и продукта «Наринэ». Результат фа-готипирования показал, что большинство штаммов S. aureus, обнаруженных в продуктах детского питания, биологическом материале сотрудников ДМК и клиническом материале больных детей относились к фаготипам 29, 52, 52А, I литической группы.
Проведенные исследования показали, что применение комплекса методов типирования штаммов, определение продукции энтеротоксинов позволяет сделать диагностику ПТИ стафилококковой природы более целенаправленной и достоверной, а также собрать необходимую доказательную базу для удовлетворения исков о возмещении морального и материального вреда при регистрации групповой и вспышечной заболеваемости.
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОМ НАДЗОРЕ ЗА ОСТРЫМИ РЕСПИРАТОРНЫМИ ВИРУСНЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ
С.Б. Яцышина, А.Н. Миненко, М.Н. Прадед, А.В. Горелов, Г.А. Шипулин
ФБУН«Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора», Москва
В структуре инфекционной патологии острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) занимают до 90%, что обусловливает актуальность эпидемиологического надзора. Причиной ОРВИ может быть инфицирование представителями 6-ти основных семейств вирусов (Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, Picornaviridae, Adenoviridae, Coronaviridae, Parvoviri-dae). Регистрация заболеваемости гриппом, острыми инфекциями верхних дыхательных путей, вне-больничными пневмониями в России проводится на основании клинического диагноза, без учета данных лабораторной диагностики по идентификации инфекционного агента. Причем, клиническая картина лабораторно-подтвержденного гриппа зачастую не имеет характерных симптомов гриппа, и наоборот, ряд возбудителей ОРВИ (например, респираторно-синцитиальный вирус, метапневмо-вирус, коронавирусы, аденовирусы) могут вызывать гриппоподобныезаболевания.Сцельюоптимизации лабораторной диагностики ОРВИ в ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора разработан и поставлен на производство комплекс наборов реагентов «АмплиСенс Influenza virus A/B-FL», «АмплиСенс Influenza virus А-тип-FL», «АмплиСенс Influenza virus A/H1-swine-FL», «АмплиСенс ОРВИ-скрин-FL», предназначенный для выявления и дифференциации НК возбудителей гриппа и 13ти видов вирусных возбудителей ОРЗ (респираторно-синцитиальный вирус (RSv), метапневмовирус (Mpv), вирусы парагриппа тип 1—4 (Piv), коронавирусы 229E, OC43, HKUI, NL63 (Cov), риновирусы (Rv), бокавирус (Bov), аденовирусы В, С, Е (Adv) методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией. Наборы реагентов зарегистрированы и разрешены для использования в РФ в целях диагностики и эпи-
