Изучение антиоксидантной активности и острой токсичности комплексного растительного противодиабетического средства Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Тулесонова Аюна Сергеевна - канд. мед наук, старший преподаватель кафедры фармакологии и традиционной медицины медицинского факультета Бурятского государственного университета. 670002, Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36 а

Шантанова Лариса Николаевна - доктор биологических наук, профессор, зав. лабораторией безопасности биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. 670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, тел. (3012)433713, E-mail: [email protected].

Бальхаев Илларион Митрофанович - канд. мед. наук, доцент кафедры фармакологии и традиционной медицины медицинского факультета Бурятского государственного университета. 670002, Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36 а

Shantanova Larisa Nikolaevna - doctor of biological sciences, professor, head of the laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. 670047, Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6, ph. 43-37-13, E-mail: [email protected].

Tulesonova Ayuna Sergeevna - candidate of medical sciences, senior lecturer, department of pharmacology and traditional medicine, medical faculty, Buryat State University. 670002, Ulan-Ude, Oktyabrskaya str., 36 a.

Balkhayev Illarion Mitrofanovich - candidate of medical sciences, associate professor, department of pharmacology and traditional medicine, medical faculty, Buryat State University. 670002, Ulan-Ude, Oktyabrskaya str., 36 a.

УДК 615.1/.4

© Н.А. Чекина, С.М. Гуляев, С.А. Чукаев

Изучение антиоксидантной активности и острой токсичности комплексного растительного противодиабетического средства

В данной работе с использованием ABTS-теста in vitro установлена выраженная антиокси-дантная активность комплексного противодиабетического растительного средства. Токсикологические исследования показали, что испытуемый экстракт относится к относительно безвредным средствам.

Ключевые слова: сахарный диабет, антиоксидантная активность, острая токсичность.

N.A. Chekina, S.M. Gulyaev, S.A. Chukaev

The study of antioxidant activity and acute toxicity of complex plant antidiabetic remedy

In this study the expressed antioxidant activity of the complex antidiabetic plant remedy has been determined by means of the use the ABTS-test in vitro. Toxicological researches have shown that the subject extract refers to a relatively harmless remedy.

Keywords: diabetes mellitus, antioxidant activity, acute toxicity.

Вторая половина 20-го столетия характеризуется неинфекционной эпидемией сахарного диабета (СД) [10]. Заболеваемость СД увеличивается во всем мире, и особенно в промышленно развитых странах, в основном за счет больных СД 2-го типа. Большая социальная значимость данного заболевания состоит в том, что оно приводит к ранней инвалидизации и летальности, кото-

13

рые обусловлены наличием поздних сосудистых осложнений [4].

Ключевую роль в развитии сахарного диабета, наряду с генетическими, метаболическими факторами играет окислительный стресс, инициирующий образование свободных радикалов, которые, в свою очередь, запускают процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) цитоплазматических мембран

[3, 6, 11].

В последние годы достигнуты определенные успехи в понимании механизмов развития СД и его осложнений, но лечение больных не всегда оказывается достаточно успешным. Именно этим объясняются поиск и внедрение в клиническую практику новых лекарственных препаратов [1]. Несмотря на многочисленные фармакологические достижения по разработке и внедрению синтетических лекарств, фитотерапия сохраняет высокие позиции в лечебном процессе благодаря оптимальному сочетанию результативности и безопасности применения многих препаратов растительного происхождения [7]. Известно также, что лекарственные растения, содержащие в своем составе вещества полифенольной природы, обладают антиоксидантной активностью, что проявляется ингибированием патологического ПОЛ [8].

В Отделе биологически активных веществ (ОБАВ) Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (г. Улан-Удэ) разработано многокомпонентное растительное средство с противодиабетической активностью. Исходным сырьем для получения комплексного растительного средства явились следующие растения: побеги черники и пятилистника кустарникового, створки фасоли обыкновенной, корни лопуха большого и др. Получение экстракта сухого проводилось в лабораторных условиях; экстракция проведена методом мацерации.

В результате был получен экстракт сухой в виде аморфного порошка коричневого цвета, с приятным запахом и горьковатым вкусом, высокой степенью гигроскопичности, хорошо растворимый в воде.

К числу первоочередных проблем современной медицины и фармации по праву можно отнести вопрос безопасности лекарственных средств [2]. Создание лекарственных форм предусматривает проведение доклинических исследований, важнейшим из которых является оценка токсичности.

Цель: оценка антиоксидантной активности и острой токсичности комплексного растительного противодиабетического средства.

Материалы и методы

Для определения степени выраженности антиоксидантной активности испытуемого средства использовали ABTS-тест, представляющий собой модельную систему генерации свободных радикалов in vitro [12]. Антиокси-дантную активность оценивали по изменению продукции свободных радикалов в реакционной среде спектрофотометрически при ^=734 нм.

Токсикологические исследования были проведены на 26 крысах линии Wistar обоего пола массой 210-220 г, распределенных на 2 группы. Животным 1-й (n=11) и 2-й групп (n=15) экстракт (разведенный водой очищенной)

14

вводили соответственно внутрижелудочно и внутрибрюшинно в повышающих дозах - от 2 000 до 11 000 мг/кг. Наблюдение за каждым животным вели с момента введения средства непрерывно в течение первых 3 ч, далее через каждый час в течение 12 ч, в последующие сутки - один раз в день. Регистрировали общее состояние животных, характер поведения, признаки интоксикации и случаи их гибели [5, 9]. Продолжительность эксперимента составила 14 суток, в течение которого после гибели животных их вскрывали и изучали изменения в органах.

Результаты исследований

Установлено, что испытуемое средство при повышении концентрации с 0,01 мг/мл до 1,0 мг/мл в модельной реакционной среде снижает концентрацию свободных радикалов: величина регистрируемого параметра уменьшалась на 18,7-20,6% по сравнению с контролем (рис. 1). Повышение содержания тестируемого агента в реакционной среде (С=0,3-1,0 мг/мл) уменьшало величину экстинкции реакционной среды на 33,3-68,0%.

В ходе работы по оценке острой токсичности в опытах на животных обнаружено, что при внутрижелудочном введении экстракта признаков интоксикации и гибели животных при максимально возможном разведении средства

не наблюдали.

0,6

ё 0,5

| И О,4

I Я 0,3

5 В 0,2

О 0,1 0

Рис. 1. Оценка антиоксидантных свойств комплексного фитосредства с помощью ЛБТБ-теста

При внутрибрюшинном введении животным больших доз фитоэкстракта через 20 мин наблюдали признаки интоксикации, выражающиеся в замедлении ориентировочных реакций, снижении порога болевой и тактильной чувствительности, увеличении частоты и глубины дыхания. Спустя 40 мин с момента введения фитоэкстракта животные находились в лежачем состоянии, практически не реагировали на раздражители, что говорило о нарастании токсического действия испытуемого средства. Через 1,5 ч часть животных погибала от угнетения дыхания. В дозах от 7 500-11 000 мг/кг погибло 75100% животных.

При осмотре трупа животного видимых изменений обнаружено не было. При вскрытии погибших животных в брюшной полости обнаружили жидкость коричневого цвета (цвет сухого экстракта), полнокровие внутренних органов, печень, почки и селезенка были без видимых изменений, слизистая желудка и кишечника - без кровоизлияний, эрозий и язв.

15

Спустя первые сутки у выживших животных после внутрибрюшинного введения фитоэкстракта отмечали нормализацию общего состояния. Животные становились более активными, реагировали на внешние раздражители, хорошо принимали воду и корм. В дальнейшем на протяжении опыта среди оставшихся животных летальных исходов не наблюдалось.

Определение параметра острой токсичности многокомпонентного сухого экстракта по методу Кербера для белых крыс показало, что полулетальная доза (ЛД50) составляет 7 062 мг/кг.

Заключение

Таким образом, результаты проведенных экспериментов свидетельствуют о том, что комплексное растительное средство обладает существенной анти-оксидантной активностью; очевидно, это объясняется присутствием в составе полифитоэкстракта комплекса природных соединений, обладающих соответствующими свойствами.

По параметрам острой токсичности на животных фитоэкстракт может быть отнесен по классификации К.К. Сидорова к относительно безвредным средствам. Полученные результаты обосновывают целесообразность дальнейшего, более детального изучения фармакологической активности данного многокомпонентного экстракта сухого в качестве средства профилактики и коррекции патологических состояний, вызванных сахарным диабетом.

Литература

1. Авандия и авандамет в лечении больных СД 2-го типа: влияние на секрецию некоторых гормонов жировой ткани / Г.Г. Мамаева и др. // Терапевтический архив. - 2008. - № 10. - С. 21-26.

2. Верстакова О.Л. Методологические принципы токсикологической экспертизы в системе государственной регистрации лекарственных средств: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. - Старая Купавна, 2010.

3. Влияние таурина и тиоктацида на углеводный обмен и антиоксидантную систему крыс при экспериментальном диабете / Н.С. Сапронов и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2008. - Т. 71. - № 3. - С. 34-35.

4. Клебанова Е.М., Балаболкин М.И., Креминская В.М. Значение жировой ткани и ее гормонов в механизмах инсулиновой резистентности и развития сахарного диабета 2-го типа // Клиническая медицина. - 2007. - № 7. - С. 20 - 27.

5. К вопросу доклинического изучения мелоксикама и его лекарственных форм в экспериментах на животных / Р. А. Мустафин и др. // Современные наукоемкие технологии. - 2010. -№ 2. - С. 16-19.

6. Липидснижающее и антиоксидантное действие мексикора у больных сахарным диабетом / Е.М. Клебанова и др. // Терапевтический архив. - 2006. - № 8. - С. 67 - 70.

7. Рябков А. Н. Комплексное биохимическое исследование токсикологических фармакологических свойств препарата из биомассы культуры ткани полисциаса папоротниколистного: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. - Рязань, 2008.

8. Сопоставление антиоксидантных свойств новых препаратов, производных биофлаво-ноидов и дубильных веществ / Л. В. Яковлева и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2001. - Т. 64. - № 2. - С. 55-59.

9. Хабриев Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.

10. Boosalis M.G. The role of selenium in chronic disease // Nutr. Clin. Pract. - 2008. - Vol. 23. № 2. - P. 152-160.

16

Гунзынов Г.Д. и др. Опыт хирургического лечения больных с высокими доброкачественными Рубцовыми стриктурами гепатикохоледоха_

11. Dave G., Kalia K. Hyperglycemia induced oxidative stressin type 1 and type 2 diabetic patients with and without nephropathy // Cell. Mol. Biol. - 2007. - Vol. 30. № 53. - P. 68-78.

12. Re R., Pellegrini N., Proteggente A. et.al. // Free Radic. Biol. & Med. - 1999. Vol. 26. -№ 9/10. - P. 1231-1237.

Чекина Наталия Алексеевна - аспирант Бурятского государственного университета; тел: 89247744102; e-mail: [email protected].

Гуляев Сергей Миронович - ст. науч. сотр. Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, канд. мед. наук; e-mail: [email protected].

Чукаев Сергей Александрович - зав. кафедрой фармакологии и традиционной медицины Бурятского государственного университета, канд. мед. наук; доцент; e-mail: s [email protected].

Chekina Natalia Alexeevna - postgraduate student, Buryat State University. ph.: 89247744102; e-mail: [email protected].

Gulyaev Sergey Mironovich - senior researcher, Institute of General and Experimental Biology SB RAS; e-mail: [email protected].

Chukaev Sergey Alexsandrovich - head of the department of pharmacology and traditional medicine, Buryat State University; e-mail: s [email protected]

УДК 616/37-002.4-084

© Г.Д. Гунзынов, В.Е. Хитрихеев, Е.Н. Цыбиков, Б.Г. Гармаев, В.П. Саганов, В.П. Будашеев, Ч.В. Содномов

Опыт хирургического лечения больных с высокими доброкачественными рубцовыми стриктурами гепатикохоледоха

С 1994 по 2011 г. в хирургическом отделении № 1 Республиканской клинической больницы им. Н. А. Семашко прооперировано 20 больных с высокими рубцовыми стриктурами гепатикохоледоха, обусловленными ятрогенным повреждением гепатикохоледоха во время холе-цистэктомий, у 11 (55%) пациентов - после холецистэктомии лапаротомным доступом, а у 9 (45%) - после лапароскопической холецистэктомии. Гепатикоэнтероанастомоз выполнен в 3 вариантах: прецизионный, на едином транспеченочном и комбинированный. В раннем послеоперационном периоде осложнения наблюдались у 8 больных. Летальных случаев не отмечено.

Ключевые слова: лапароскопическая холецистэктомия, доброкачественная стриктура ге-патикохоледоха, гепатикоэнтероанастомоз, транспеченочное дренирование

G.D. Gunzynov, V^. Khitrikheev, E.N. Tsybikov, B.G. Garmaev, V.P. Saganov, V.P. Budasheev, Ch.V. Sodnomov

The experience of surgical treatment of patients with high benign cicatrical strictures of hepaticocholedochus

From 1994 through 2011, 20 patients with high cicatrical strictures of hepaticocholedochus have been surgically operated in surgical department № 1 of the Republican clinical hospital named after N. A. Semashko, their deseases have been caused by iatrogenic hepaticocholedochus injury during cholecystecomies, in 11 (55%) patients - after cholecystecomy by laparotomy access and in 9 (45%)

17