CC BY
46
УДК 619:616.993.192.1
Ключевые слова: кокцидии кур, кокцистат, никарбазин, фармкокцид, токсичность
Key words: coccidia, Coccistat, nicarbazin, farmcoccid, toxicity
Юшманов П. Н.
ИЗУЧЕНИЕ АНТИКОКЦИДИйНЫХ СВОйСТВ И острой ТОКСИЧНОСТИ КОКЦИСТАТА
THE STUDY OF ANTICOCCIDIAL PROPERTIES AND ACUTE TOXICITY OF COCCISTAT
ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства», СПб, Ломоносов Адрес: 198412, Санкт-Петербург, Ломоносов, ул. Черникова, д. 3. Тел. (812) 422-04-63
All-Russian Research Veterinary Institute of Poultry Science, Saint-Petersburg, Lomonosov Address: 198412, Russia, Saint-Petersburg, Lomonosov, Chernikov street, 3. Tel. +7 812 422-04-63
Юшманов Павел Николаевич, мл. науч. сотрудник отдела паразитологии
Yuschmanov Pavel N., Junior Research Scientist of the Dept. of Parasitology
Аннотация. При экспериментальном кокцидиозе, вызываемом кокцидиями трех видов Eimeria acervulina, E. maxima и E. tenella, кокцистат, состоящий из 1А профилактических доз никарбазина и фармкокцида, проявляет высокую специфическую активность на уровне препаратов, его составляющих, применяемых в полных дозах. Определение острой токсичности кокцистата показало, что ЛД50 составляет 1766,3 мг/кг корма и его можно отнести к препаратам малой токсичности.
Summary. In the experimental coccidiosis caused by coccidia of three types: Eimeria acervulina, E. maxima and E. tenella., Coccistat, consisting of % prophylactic doses of nicarbazin and farmcoccid, has a high specific activity at the level of preparations it is composed of used in full doses. Determination of acute toxicity of Coccistat showed that the LD50 is 1766,3 mg/kg of a forage and it can be related to the preparations of low toxicity.
Введение
Кокцидиозы, особенно в мясном птицеводстве, имеют важнейшее экономическое значение, несмотря на широкий ассортимент средств профилактики [9, 10]. Основные потери от кокцидиоза наблюдаются при субклиническом переболевании птицы на фоне применения кокцидиостатика, к которому у паразита имеется некоторая приобретенная резистентность. Как показывают многочисленные исследования, адаптация кокцидий к кокцидиостатикам заметно прогрессирует [4, 2].
Не исключается и такой вариант развития событий, когда в отдельно взятом птицехо-зяйстве не будет «работать» ни один кокци-диостатик.
Имеются различные подходы к борьбе с адаптацией паразита к препаратам. Одним из них является разработка смесей из нескольких кокцидиостатиков с различным механизмом действия на паразита [7, 8].
В задачу наших исследований входило создать препарат на основе никарбазина и фармкокцида, определить его антикокци-дийные свойства и острую токсичность.
Материалы и методы исследований
Кокцистат получен путем соединения никарбазина и фармкокцида в равных пропорциях 1 : 1.
Доза кокцистата для профилактики кокцидиоза составляет 125 мг/кг корма.
Антикокцидийные свойства кокцистата изучали при заражении двухнедельных цыплят смесью лабораторных штаммов E. acervulina, E. maxima и E. tenella.
Перед заражением цыплята по принципу аналогов были поделены на пять групп. Цыплята контрольной группы заражению не подвергались и кокцидиостатик не получали. Остальные группы цыплят были заражены смесью ооцист индивидуально. Из них одна группа получала кокцистат, другая ни-карбазин и следующая фармкокцид в дозах 125 мг/кг корма. Препарат начинали скармливать за день до заражения и продолжали давать в течение 11 суток. Зараженные цыплята четвертой группы препарат не получали - контроль заражения.
Наблюдение за птицей после заражения вели в течение 10 суток. Учитывали клиническое проявление кокцидиоза, патологоа-
натомические изменения у павшей и экспериментально убитой птицы, прирост массы тела, процент выживаемости. По результатам эксперимента рассчитывали противо-кокцидийный индекс (ПКИ) препаратов по Гусеву и соавторам (1969) [1].
Острую токсичность кокцистата, никар-базина и фармкокцида определяли на двухнедельных цыплятах путем расчета ЛД50. Для этого цыплята были распределены на группы по принципу аналогов и им однократно вводили препарат. Каждой последующей группе цыплят доза кокцидиостатика увеличивалась на определенный шаг до 100 % гибели птицы.
Суспензию препаратов готовили на 1,5%-м растворе карбометилцеллюлозы (КМЦ) и вводили цыплятам в зоб с помощью шприца и эластичного катетера.
ЛД50 рассчитывали по формуле:
Д. - 2 С • а)
ЛД50= —т— ■
Результаты исследований
Результаты, полученные при изучении антикокцидийной активности кокцистата и препаратов, его составляющих, представлены в таблице 1.
В течение опыта у цыплят контрольной группы и у птицы, получавшей кокцидиоста-тики, клинических признаков заболевания не отмечалось.
У зараженных и нелеченных цыплят заболевание кокцидиозом начало проявляться с 5 дня и на 6-8 сутки пало 6 голов. При вскрытии трупов в местах локализации кок-цидий (двенадцатиперстная кишка, средний участок кишечника и слепые отростки кишечника) имелись характерные патологоана-
томические изменения. В слепых отростках изменения носили наиболее выраженный характер на уровне трех-четырех баллов. В соскобах слизистой оболочки кишечника под микроскопом были обнаружены в большом количестве различные эндогенные стадии развития паразита (шизонты, гаметоци-ты) и сформировавшиеся ооцисты.
Из опытных групп через 144 часа после заражения было убито по 3 цыпленка и проведено их вскрытие. В местах локализации Е. acervulina и Е. maxima видимых изменений, напоминающих кокцидийные поражения, не наблюдалось. В соскобах слизистых оболочек при просмотре нескольких полей зрения обнаруживали одну из стадий эндогенного развития паразита. В слепых отростках кишечника имелись единичные точечные кровоизлияния. В содержимом слепых кишок при просмотре под микроскопом обнаруживали единичные шизонты и гаметоциты (в 10 полях зрения).
Выживаемость цыплят в опытных группах составила 100 %, а прирост массы тела по отношению к контрольной группе цыплят был на 4,4-11,5 % ниже. Масса тела цыплят, получавших кокцистат была несколько выше по сравнению с получавшими никарбазин или фармкокцид, но различия носили недостоверный характер.
Противококцидийный индекс всех трех препаратов был практически одинаковым и высоким: 195,6, 195,1, 191,8 балла соответственно для кокцистата, фармкокцида и никарбазина.
Результаты по острой токсичности кокцистата, никарбазина и фармкокцида представлены соответственно в таблицах 2-4.
Расчет ЛД50 каждого препарата показал, что для кокцистата она составляет 1766 мг/кг, для
Таблица 1.
Назначение групп Кол-во Препарат Доза Пало Выжива- Прирост ПКИ
голов назначения (мг/кг голов емость, массы
корма) % тела, %
1. Контрольная незараженная 15 - - - 100 184 200
2. Контрольная зараженная 15 - - 6 60 116 123
3. Опытная 15 Кокцистат 125 - 100 176 195,6
4. Опытная 15 Никарбазин 125 - 100 169 191,8
5. Опытная 15 Фармкокцид 125 - 100 175 195,1
Таблица 2.
Определение острой токсичности кокцистата
№ п/п Кол-во голов Доза препарата, мг/кг Объем введения, мл Пало Сумма павших птиц от 2-х послед. доз введения 50 % гибели от 2-х послед. доз введения препарата Интервал введения, мг/кг массы цыпленка мг/кг
1 6 400 0,5 - - - - 1766,3
2 6 800 1,0 - - м 400
3 6 1200 1,5 1 1 0,5 400
4 6 1600 2,0 1 2 1,5 400
5 6 2000 2,5 2 3 2,5 400
6 6 2400 3,0 6 8 4,0 400
7 6 КМЦ 1,5 % раствор 3,0 - - - -
Таблица 3. Определение острой токсичности никарбазина
№ п/п Кол-во голов Доза препарата, мг/кг Объем введения, мл Пало Сумма павших птиц от 2-х послед. доз введения 50 % гибели от 2-х послед. доз введения препарата Интервал введения, мг/кг массы цыпленка мг/кг
1 6 800 0,5 - - - - 2966,7
2 6 1600 1,0 1 - 0,5 -
3 6 2400 1,5 3 4 2,0 800
4 6 3200 2,0 3 6 3,0 800
5 6 4000 2,5 4 7 3,5 800
6 6 4800 3,0 6 10 5,0 800
7 6 КМЦ 1,5 % раствор 3,0 - - - м
Таблица 4. Определение острой токсичности фармкокцида
№ п/п Кол-во голов Доза препарата, мг/кг Объем введения, мл Пало Сумма павших птиц от 2-х послед. доз введения 50 % гибели от 2-х послед. доз введения препарата Интервал введения, мг/ кг массы цыпленка мг/кг
1 6 500 0,5 1 1 0,5 500 1084
2 6 1000 1,0 3 4 2,0 500
3 6 1500 1,5 4 7 3,5 500
4 6 2000 2,0 6 10 5,0 500
5 6 КМЦ 1,5 % раствор 2,0 - - - -
никарбазина -2966,7 мг/кг и для фармкокцида -1084 мг/кг массы цыпленка двухнедельного возраста. По классификации уровня токсично-
сти, предложенной Л. И. Медведем (1964) [3], кокцистат, фармкокцид и никарбазин можно отнести к препаратам малой токсичности.
Обсуждение результатов
В течение последних нескольких десятков лет поиск новых, оригинальных кокцидио-статиков практически не ведется. Основная задача - продлить срок «службы» имеющихся кокцидиостатиков за счет схем и методов их применения, позволяющих замедлить развитие адаптации у кокцидий.
Известно, что антикокцидийные смеси, состоящие из двух и более кокцидиостатиков с различным механизмом действия на паразита, обладают более широким спектром действия и к ним развитие приобретенной резистентности у кокцидий протекает медленнее [5].
Кокцистат состоит из равных частей никар-базина и фармкокцида. Препараты, составляющие кокцистат, различают по механизму действия на паразита. Никарбазин является антиметаболитом цитохрома, а фармкокцид азотистых оснований у кокцидий.
Кокцистат проявил высокую антикок-цидийную активность при смешанной инвазии, вызванной Е. acervulina, Е. maxima и Е. tenella, показав, что сочетанное применение никарбазина и фармкокцида в пониженных концентрациях не уступает по своей эффективности им же, применяемым в полных дозах.
Острая токсичность кокцистата расположилась приблизительно между острой токсичностью никарбазина и фармкокцида. Нет признаков синергизма токсического действия никарбазина и фармкокцида в кокцистате.
Выводы
Кокцистат, содержащий 50 % никарба-зина и 50 % фармкокцида, в концентрации 0,0125 % к корму высокоактивен против кок-цидий Е. acervulina, Е. maxima и Е. tenella при смешанной инвазии.
Кокцистат не уступает по антикокцидий-ной активности никарбазину и фармкокци-ду, применяемым в концентрации 0,0125 % к корму.
Кокцистат относится к препаратам малой токсичности.
Список литературы
1. Гусев, В. Ф. Изучение кокцидиостатической активности различных препаратов /
В. Ф. Гусев, М. В. Крылов, А. И. Кириллов,
B. И. Лоскот // Ветеринария - М., 1969. - № 8. -
C. 52-52.
2. Мишин, В. С. Адаптация кокцидий кур к анти-кокцидийным препаратам и методы ее предупреждения / В. С. Мишин, В. М. Разбицкий, Н. П. Крылова // Болезни птиц в промышленном птицеводстве. - СПб, 2007. - С. 276-282.
3. Ступников, А. А. Токсичность гербицидов и ар-борицидов и профилактика отравлений животных / А. А. Ступников // Ленинград : Колос, 1975. - С. 13-18.
4. Chapman, H. D. Biochemical, genetic and applied aspects of drug resistance in Eimeria parasites of the fowl / H. D. Chapman // Avian Pathology. - 1997. - 26 : P. 221-244.
5. Joyner, L. P. The activity of methylbenzoguate and clopidol against E.maxima: synergy and drug resistance / L. P. Joyner, C. C. Norton // Parazitology. - 1978. -v. 76. - № 3. - P. 369-377.
6. Lim, P. K. A method for the ebaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchranic median doses / P. K. Lim et al // 1961. -vol. 30. - P. 336-352.
7. Morch, J. Forsog med coccidiosis - tatica / J. Morch // Nord Veter. Med. - 1978. - v. 30. - № 6. - P. 253-259.
8. Ryley, J. F. Lerbek, a synergistic mixture of methylbenzoguate and clopidol for the ptevention of chicken coccidiosis / J. F. Ryley // Parasitilogy. - 1975. -v. 70. - № 3. - P. 377-384.
9. Williams, R. B. A compartmentalized model for the estimation of the cost of coccidiosis to the world's chicken production industry / R. B. Williams // International Journal for Parasitology. - 1999. - 29 : P. 1209-1229.
10. Xie, M. Coccidiosis of domestic fowl in China / M. Xie, J. Cai, A. Li, X. Peng // Proceedings of the VIH-th international Coccidiosis Conference, Sydney, Australia, PalmCove. - 2001. - P. 153-154.
