CC BY
46
УДК 547. 853. 3: 615. 214.
ИЗУЧЕНИЕ АНТИДЕПРЕССИВНОЙ АКТИВНОСТИ И МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ НОВОГО СОЕДИНЕНИЯ ПИР-03-52
Д. Г. Ковалев, Т. М. Лысенко
Кафедра фармакологии ВолГМУ, НИИ Фармакологии ВолГМУ
Проведено изучение психотропной активности новых производных аминоурацила и, в частности, антидепрессивной активности новых производных аминоурацила с использованием наиболее широко применяемых моделей фармакологического скрининга. Наиболее выраженный антидепрессивный эффект на этапе первичного фармакологического скрининга был выявлен у соединения ПИР-03-52 в дозе 10 мг/кг.
Ключевые слова: антидепрессивная активность, производные аминоурацила, фармакологический скрининг, крысы.
ANTIDERESSANT ACTIVITY STUDY AND MECHANISM OF ACTION OF THE NEW DERIVATIVE PIR-03-52
D. G. Kovalev, T. M. Lysenko
Abstract. Psychotropic effect of the new derivatives of aminouracil models were evaluated using the most common models of the pharmacological screening. The substance with the laboratory code PIR-03-52 in doses of 10 mg/kg demonstrated the most pronounced antidepressant activity effect at the stage of the primary pharmacological screening.
Key words: antidepressant activity, derivatives of aminouracyl, pharmacological screening, rats.
Связь между стрессогенными факторами и развитием депрессивных состояний неоднократно отмечалась рядом психиатров. Депрессивные расстройства у людей развиваются как вследствие острой психотравмирующей ситуации, так и при действии длительного психогенного стресса [5]. Депрессию относят к аффективным (эмоциональным) синдромам, при которых психопатологическое состояние проявляется в форме стойкого снижения настроения. При депрессии в патологический процесс вовлекаются эмоциональная, интеллектуальная, волевая и физическая сферы. Механизмы развития депрессии связывают со снижением в центральной нервной системе синтеза и обмена моноаминов - норадре-налина, серотонина, дофамина. В настоящее время особое значение придается серотонинер-гической теории депрессии. При этом считается, что основной причиной развития депрессивного состояния является дефицит серотонина в си-наптическом пространстве. Депрессивноподоб-ные состояния, развивающиеся у животных при хроническом повторении психотравмирующего воздействия, могут рассматриваться как аналогии психогенных (реактивных) депрессий у человека. Депрессивные расстройства являются одними из наиболее распространенных психических нарушений. По данным различных авторов, встречаемость депрессивного синдрома среди населения составляет от 6 до 20,6 %. Депрессия является хроническим рецидивирующим заболеванием, ухудшающим их профессиональное и социальное функционирование, а также качество
жизни. В 15 % наблюдений пациенты, страдающие депрессией, совершают суицидальные попытки, что составляет около 66 % от всех попыток самоубийства [7].
Несмотря на то, что к настоящему времени создан целый ряд антидепрессивных препаратов, проблема фармакотерапии депрессий далеко не решена. Известно, что назначение большинства антидепрессантов при курсовой терапии (6-8 недель) в адекватных терапевтических дозах приводит к терапевтическому эффекту лишь у 70 % больных [10]. При этом отсутствие клинического эффекта у оставшихся пациентов связано со значительными нарушениями когнитивной и социально-ориентированной деятельности. Кроме того, применяемые антидепрессанты имеют целый ряд недостатков: длительный латентный период действия, недостаточный диапазон терапевтического эффекта, высокую вероятность развития побочных эффектов, риск токсических реакций при передозировке [1].
Все это определяет необходимость дальнейшего поиска эффективных антидепрессивных препаратов. Однако для изучения новых антидепрессантов необходимо воссоздать адекватные и воспроизводимые модели депрессивных состояний животных [8]. Правомочность использования моделей депрессивноподобного состояния основана на выполнении ряда критериев:
1) сходная симптоматика, напоминающая проявления патологии у людей;
2) сходная этиология;
3) сходный нейрохимический субстрат;
4) сходный эффект на проводимую терапию.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Экспериментально изучить психотропную и, в частности, антидепрессивную активность новых производных аминоурацила с использованием наиболее широко применяемых моделей фармакологического скрининга. Изучить различные аспекты механизма антидепрессивного действия наиболее активного соединения ПИР-03-52 с помощью методов анализа фармакологического взаимодействия с основными нейромедиатор-ными системами. Провести углубленное изучение антидепрессивного эффекта ПИР-03-52 на экспериментальных моделях депрессии с использованием препаратов сравнения.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Для изучения психотропной активности использовались модели фармакологического скрининга: "открытое поле", методика приподнятого крестообразного лабиринта [2], методика выработки условной реакции пассивного избегания [11], методика определения порога вокализации [2], тест принудительного плавания [12].
Изучение аспектов механизма действия проводилось с помощью тестов фенаминовой стереотипии, апоморфиновой и клофелиновой гипотермии, 5-окситриптофанового гиперкинеза, методики ареколинового тремора и судорожного эффекта пикротоксина [2].
Углубленное изучение антидепрессивной активности соединения ПИР-03-52 проводилось на модели экспериментальной депрессии, вызванной введением резерпина, и на модели "выученной беспомощности" в условиях 14-дневного введения [13].
В работе были использованы 680 беспородных крыс обоего пола весом 230-250 г. Все соединения вводились внутрибрюшинно за 60 мин до тестирования.
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы "Biostastistics 4.03" с использованием однофак-торного дисперсионного анализа и критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони [3].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Изученные соединения проявили разнонаправленную активность на моделях фармакологического скрининга. Так, соединения ПИР-03-45 и ПИР-03-53 в дозе 50 мг/кг, ПИР-03-53, ПИР-03-56 в дозе 10 и 50 мг/кг увеличивали вертикальную активность; а вещества ПИР-03-47, ПИР-03-62, ПИР-03-63 в дозе 50 мг/кг, напротив, снижали вертикальную активность. Соединения ПИР-03-45 и ПИР-03-50 в дозе 50 мг/кг, ПИР-03-56 в обеих дозах повышали горизонтальную двигательную активность, а ПИР-03-47, ПИР-03-50, ПИР-03-58 в дозе 50 мг/кг снижали горизонтальную
двигательную активность в тесте "открытого поля". В тесте "плюс" лабиринт вещества ПИР-03-47 и ПИР-03-48 в дозе 50 мг/кг проявил транквилизирующее (антифобическое) действие.
Соединения ПИР-03-45, ПИР-03-46, ПИР-03-56 в дозах 10 и 50 мг/кг увеличивали время иммобилизации по сравнению с контрольной группой, тем самым проявляя психодепремирующую активность в тесте принудительного плавания.
Вещество с лабораторным шифром ПИР-03-52 в дозах 10 и 50 мг/кг достоверно снижало время иммобилизации в тесте принудительного плавания, что свидетельствует о наличии у него выраженной антидепрессивной активности (см. табл.).
Антидепрессивная активность ПИР-03-52 в тесте принудительного плаванья (n = 9-10), М±т
Соединение Доза, мг/кг Длительность иммобилизации, с Количество прыжков
Контроль,
физ. раствор 0 99,4±14,6 0,3±0,2
ПИР-03-52 10 33,7±7,4* 0,3±0,1
ПИР-03-52 50 47±16,9* 2,5±2,1
Примечание. * - изменения, достоверные по сравнению с контрольной группой (р<0,05); критерий Крускала-Уоллиса, критерий Даннета - для множественных сравнений.
При изучении влияния соединения ПИР-03-52 на некоторые медиаторные системы мозга установлено, что при введении соединения в дозе 10 мг/кг отмечалось статистически достоверное уменьшение количества "встряхиваний" головой у мышей в тесте 5-ОТФ гиперкинеза, что может указывать на блокирующее действие этого соединения на 5-НТ2А и 5-НТ3А постсинаптические серотониновые рецепторы, и достоверно увеличивало количество стереотипных движений, вызванных введением фенамина в тесте фенами-новой стереотипии (рис. 1). Введение ПИР-03-52 в дозе 10 мг/кг ослабляет гипотермию, вызванную введением клофелина, что свидетельствует о его активирующем влиянии на адренергиче-скую нейротрансмиссию (рис. 2).
k
*
* *
_ * 1 \ •
т ■ тИ- * з
в ^ аШ Ж: гтИ1 цЩ1 1
105 120
Время, мин.
□ Контроль (0.9% NaCl + фенамин, 5 мг/кг ■ ПИР-03-52, 2.5 мг/кг + фенамин, 5 мг/кг И ПИР-03-52, 10 мг/кг +фенамин, 5 мг/кг
ц с 10
5
0
Рис. 1. Влияние соединения ПИР-03-52 на фенамино-вую стереотипию: * - р<0,05 по сравнению с контрольной группой
■0,9% NaCl Время, мин
'0,9% NaCl+клофелин 0,1мг/кг 'ПИР-03-52 2,5 мг/кг+ клофклин 0,1мг/кг 'ПИР 03-52 10мг/кг+ клофелин 0,1мг/кг
Рис. 2. Влияние соединения ПИР-03-52 на гипотермию, вызванную введением клофелина: * - р <0,05 по сравнению с контролем
На этапе углубленного исследования соединение ПИР-03-52 (10 мг/кг) по сравнению с препаратом сравнения "Имипрамином" (10 мг/кг) оказывало более выраженное антидепрессивное действие на модели "резерпиновой депрессии", достоверно сокращая время иммобилизации в тесте Порсольта, приближая показатели активности животных к уровню интактной группы крыс.
Антидепрессивный эффект двухнедельного введения соединения ПИР-03-52 (10 мг/кг) при коррекции стресс-индуцированного депрессивно-подобного состояния на модели "выученной беспомощности" значительно превосходил эффект препарата сравнения "Имипрамина" (10 мг/кг).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, наиболее выраженный антидепрессивный эффект на этапе первичного фармакологического скрининга был выявлен у соединения ПИР-03-52 в дозе 10 мг/кг. На модели
"резерпиновой депрессии" эффект ПИР-03-52 (10 мг/кг) при однократном внутрибрюшинном введении крысам превосходит действие препарата сравнения имипрамина (10 мг/кг). А на модели стресс-индуцированного депрессивноподобного состояния в условиях 14-дневного внутрибрю-шинного введения соединение ПИР-03-52 (10 мг/кг) более эффективно восстанавливает показатели поведения животных, чем препарат сравнения имипрамин (10 мг/кг). Антидепрессивный эффект ПИР-03-52, вероятно, обусловлен блокирующим действием этого соединения на 5-НТ2А и 5-НТ3А постсинаптические серотониновые рецепторы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ахапкин Р. В. // Психиатр. и психофармакотер. -2003. - Т. 5, № 3. - С. 103-106.
2. Воронина Т. А. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000. - С. 138-147.
3. Гланц С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. - М.: Практика, 1998. - 459 с.
4. Гельман В. Я. // Физиол. журн. СССР. - 1990. -Т. 76, № 4. - С. 553-556.
5. Калуев А. В. Окна в мозг. Краткий глоссарий терминов в области экспериментального моделирования тревожности и депрессии. - Киев: КСФ, 1999. - 90 с.
6. Малин Д. И. // Психиатр. и психофармакотер. -2002. - Т. 4, № 5. - С. 190-194.
7. Мосолов С.Н. Применение современных антидепрессантов в терапии депрессии // Там же. - 2000. -Т. 1, № 1.
8. Петров В. И., Григорьев И. А., Сергеев В. С. и др. // Вестн. ВолГМА. - 1999. - Т. 55, № 5 - С. 40-44.
9. Смулевич А. Б. Депрессии в общей медицине. -М., 2001. - 256 с.
10. Anderson I. M. // J. Affective Disorders. - 2000. -Vol. 58. - P. 19-36.
11. Bures J., Buresova O., Houston D. P. (Буреш Я. и др.) Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. - М.: Высш. шк. - 1991. -399 с.
12. Porsolt R. D,, Le Pichon M,, Jalfre M. // Nature. -1977. - Vol. 266, № 21. - P. 730-732.
13. Petty F. // Pharmacol. Biochem. and Behav. -1992. - Vol. 43. - P. 361-367.
