CC BY
22
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
37
2,5 и 5,0 мг/кг реализовался с высоким уровнем достоверности (р < 0,0001). Высоко достоверными (р < 0,0001) были различия при сравнении групп ЦП 2,5 мг/кг и ЦП 2,5 мг/кг + Диг, а также между группами ЦП 2,5 мг/кг + Диг и ЦП 5,0 мг/кг независимо от того, с каким «контролем» проводили сравнение — мыши с опухолью без воздействия или при введении Диг.
Заключение. Диг повышает противоопухолевое действие ЦП более чем в 2 раза в пересчете на дозу цитостатика, что превышает эффект от ЦП, достижимый на использованной экспериментальной модели при монотерапии цитостатиком.
Поддержано грантами РФФИ № 15-04-06991-а и № 16-34-01049 мол-а.
Е.А. Дудко, М.В. Родионова, О.М. Рябинина, А.Н. Гришанина, С.Д. Коломийцев, Н.О. Вихлянцева, Е.А. Богуш, В.Ю. Кирсанов, И. К. Воротников, Т.А. Богуш СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ И ИММУНОГИСТОХИМИИ В ОПРЕДЕЛЕНИИ ЭКСПРЕССИИ ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ АЛЬФА
ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Эстрогеновые рецепторы альфа (ЭРа) — клеточная мишень, которая положила начало развитию современной таргетной терапии, а тамоксифен — первый таргет-ный препарат, который с 1977 г. до наших дней занимает лидирующую позицию в адъювантной гормональной терапии рака молочной железы (РМЖ). На лечение тамоксифеном отвечают до 20 % пациентов с ЭР-негативными опухолями, а при наличии в опухоли ЭР в 20 % случаев положительный результат терапии отсутствует. Возможным объяснением этого факта могут быть эффекты антиэстрогена, не связанные с его взаимодействием с ЭР, а также ошибки при определении статуса ЭР в опухоли иммуногистохимическим (ИГХ) методом, который рутинно используется в клинике.
Цель исследования — сравнить информативность нового количественного иммунофлуоресцентного метода, ассоциированного с проточной цитофлуориметрией (ПЦФ), со стандартным ИГХ-анализом экспрессии ЭРа.
Материалы и методы. Оценка экспрессии ЭРа проведена в хирургических образцах РМЖ (n = 60). Использованы антитела к ЭРа — SP1, ab27614, вторичные — ab98510. Уровень экспрессии ЭРа (количество специфически окрашенных клеток относительно показателя при инкубации с вторичными антителами) анализировали с помощью программы FlowJo 10.0 и статистического критерия Колмогорова-Смирнова. Градация уровня экспрессии маркера: высокий — количество окрашенных клеток в опухоли > 40 %; низкий — < 40 %.
Результаты. 1. В целом по группе при использовании ИГХ-метода и ПЦФ показано совпадение показателей частоты встречаемости ЭРа-негативных (27 %) и ЭРа-позитивных (73 %) опухолей.
2. ИГХ-методом только у 20 % ЭРа-позитивных опухолей выявлен низкий уровень маркера, а у остальных уровень экспрессии ЭРа был более 70 %.
3. При оценке методом ПЦФ у 43 % опухолей уровень экспрессии ЭРа был < 40 % (33,6 ± 4,7 %), а у остальных — > 40 % (53,1 ± 8,8 %).
4. При сравнении экспрессии ЭРа по каждому из образцов показано, что среди опухолей, отнесенных по результатам ИГХ-исследования в группу ЭРа-негативных, методом ПЦФ в 33 % случаев выявлены ЭРа с уровнем экспрессии от 23 до 60 % (43,4 ± 18,3 %), а среди ЭРа-позитивных опухолей, напротив, в 12,5 % случаев ЭРа не определялись.
Заключение. Выявлена дискордантность показателей экспрессии ЭРа в опухоли при оценке ИГХ-методом и ПЦФ. Поскольку статус ЭРа в опухоли является важнейшим ориентиром при выборе тактики лечения РМЖ, а ПЦФ в отличие от полуколичественного ИГХ-анализа позволяет строго количественно определять экспрессию маркера, использование ПЦФ в клинике следует признать предпочтительным, а для верификации молекулярного диагноза при получении отрицательного результата при ИГХ-иссле-довании — необходимым.
Поддержано РФФИ (гранты №№ 15-04-06991-а и 16-34-01049 мол-а).
Н.П. Ермакова, О.И. Коняева, Н.Ю. Кульбачевская, В. А. Чалей, А. А. Сергеев, К. А. Сережин, В.М. Бухман ИЗУЧЕНИЕ АЛЛЕРГИЗИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ОРМУСТИНА НА МОРСКИХ СВИНКАХ. ОЦЕНКА АНАФИЛАКТОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Новый препарат класса нитрозомочевин — Ормустин синтезирован в ИОС им. И.Я. Постовского УрО РАН. В лаборатории разработки лекарственных форм РОНЦ им. Н.Н. Блохина создана лиофилизированная лекарственная форма Ормустина и проводится ее доклиническое изучение.
Цель исследования — изучение аллергизирующих свойств Ормустина.
Материалы и методы. Исследования проведены на 60 морских свинках-самках массой тела 230—250 г. Ормустин вводили в суммарных дозах: 1 терапевтическая доза (ТД) — 67 мг/кг; 10ТД — 670 мг/кг; 2ТД — 134 мг/кг для морских свинок, пересчитанных с ТД для мышей. Режим и путь введения сенсибилизации: 1-й день — подкожно, 3-й и 5-й дни — внутримышечно. Для сенсибилизации препарат вводили 1 группе животных в разовых дозах, равных 1/3 ТД = 22,3 мг/кг, и 2 другим группам животных в разовых дозах 1/3 10ТД = 223 мг/кг через день. После введения сенсибилизирующей дозы, в 10 раз превышающей терапевтическую, наблюдали гибель всех морских свинок на 3—5-е сутки после последнего введения на фоне проявлений нефротоксичности (граница между корковым и мозговым слоями почек значительно увеличена, вишневого цвета). Поэтому была дополнительно введена группа животных с сенсибилизирующей разовой дозой Ормустина, равной 1/32ТД = 44,66 мг/кг. После сенсибилизации в этой группе наблюдали гибель 3 из 10 морских свинок на 4, 5 и 6-й дни. Для разрешения Ормустин вводили в суммарных дозах 1ТД и 2ТД/кг массы тела морской свинки. Препарат применяли в концентрации 2,45 % в 5 % растворе глюкозы. Разрешение проводили внутрисердечно на 18-й день после окончания сенсибилизации. В качестве контроля использовали 5 % раствор глюкозы и сыворотку крупного рогатого скота. Объемы
38
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
вводимых растворов не превышали 1,0 мл на животное при сенсибилизации и при разрешении. Интенсивность реакции оценивали по индексу Weigle.
Результаты. После сенсибилизации животных препаратом в 1ТД выявлено слабое аллергизирующее действие Ормустина, которое выражалось понижением температуры тела (> 1 °С) у 5 из 10 морских свинок. После сенсибилизации животных препаратом в 2ТД Ормустин проявил умеренные аллергизирующие свойства, которые выражались снижением температуры тела (> 2,5 °С) у 6 из 7 морских свинок, умыванием, взъерошенностью шерстного покрова. После сенсибилизации животных 5 % раствором глюкозы при разрешении Ормустином в 2ТД также выявлена слабая аллергическая реакция, которая выражалась в понижении температуры тела (> 1 °С) у 4 из 9 морских свинок.
Заключение. Ормустин обладает умеренными аллерги-зирующими свойствами.
Н.В. Ефремова, Е.К. Кречина, О. И. Ефимович, Ф.К. Мустафина, А. В. Рассадина ЭФФЕКТИВНОСТЬ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА ФГБУ «ЦНИИстоматологии и челюстно-лицевой хирургии» Минздрава России, Москва
Введение. В связи с высокой распространенностью заболеваний пародонта поиск методов антибактериальной терапии, к которым относится фотодинамическая терапия (ФДТ), является актуальным.
Цель исследования — изучение эффективности ФДТ при лечении воспалительных заболеваний пародонта.
Материалы и методы. Проведено клинико-лаборатор-ное обследование пациентов в возрасте 20—45 лет с воспалительными заболеваниями пародонта, которые были разделены на 2 группы, каждая по 60 человек: 1-я — с генерализованным хроническим пародонтитом (ХП) легкой степени; 2-я — с генерализованным ХП средней степени тяжести. Каждая группа была разделена на 3 подгруппы по 20 человек: в 1-й подгруппе проводили ФДТ с 1 % мети-леновым синим; во 2-й — ФДТ с 0,5 % фотодитазином; в 3-й — ФДТ с 1 % толуидиновым голубым. Результаты лечения оценивали с помощью полимеразной цепной реакции.
Результаты. Лечение не отразилось на частоте выявления A. actinomycetemcomitans у пациентов 3-й подгруппы. Наилучший эффект был достигнут во 2-й подгруппе. ФДТ у больных 1-й подгруппы не повлияла на частоту идентификации P. gingivalis, во 2-й подгруппе она уменьшилась в 6,5 раза, а в 3-й — в 1,5 раза. Частота выявления ДНК P. intermedia у пациентов 1-й группы до и после проведенной терапии была статистически недостоверной. Это было связано с отсутствием разницы у больных 1-й и 3-й подгрупп. Тем не менее во 2-й подгруппе были получены хорошие результаты. Такая же разница в 1,5 раза в частоте выявления ДНК T. forsythia у пациентов 1-й группы до и после лечения была статистически достоверной. Хотя в 1-й и 3-й подгруппах разница была также статистически недостоверной, у больных 2-й подгруппы T. forsythia обнаруживалась в 13 раз реже (р = 0,0001). Подобная тенденция наблюдалась и у пациентов 2-й группы. Снижение частоты
выявления ДНК A. actinomycetemcomitans, P. intermedia, P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola после лечения было статистически недостоверным в 1-й и 3-й подгруппах. Во 2-й подгруппе после терапии все микроорганизмы идентифицировались в 2—3 раза реже.
Заключение. Таким образом, лечебные мероприятия, включающие ФДТ с 1 % метиленовым синим, не влияли на частоту выявления пародонтопатогенных видов бактерий у больных ХП легкой и средней степени. ФДТ с 0,5 % фотодитазином привела к значительному снижению бактериальной нагрузки у пациентов всех обследованных групп, в том числе к полной элиминации P. intermedia у больных ХП средней степени. В результате ФДТ с 1 % толуидиновым голубым произошло уменьшение частоты выявления пигментообразующих пародонтопатогенных видов бактерий и T. denticola. У больных ХП легкой и средней степени тяжести ФДТ с 1 % толуидиновым голубым не оказала влияния на элиминацию A. actinomycetemcomitans, P. intermedia и T. forsythia и привела к незначительному снижению частоты идентификации P. gingivalis и T. denticola.
С. С. Жумакаева1, Л.Е. Муравлева1, И.М. Омарова2,
Н.А. Кабилдина1, О.А. Пономарева1, Ю.М. Фоменко1
ВЛИЯНИЕ АРГЛАБИНА НА ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ
НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ И МЕТАБОЛИТЫ
ПУРИНОВОГО ОБМЕНА У БОЛЬНЫХ
МЕСТНО-РАСПРОСТРАНЕННЫМ РАКОМ
МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
1КГМУ, Караганда, Республика Казахстан;
2КГП «Областной онкологический диспансер», Караганда,
Республика Казахстан
Цель исследования — изучение биохимических показателей крови больных местно-распространенным раком молочной железы (МРРМЖ) при применении арглабина.
Материалы и методы. Объектом исследования являлась кровь 27 больных с узловой формой МРРМЖ (T2N1—3M0, T3—4N0—3M0) с гистологической и иммуногистохимиче-ской верификацией в возрасте 30—75 лет. В группу контроля вошли 32 практически здоровые женщины. Больным МРРМЖ проводили 4 курса неоадъювантной монохимиотерапии арглабином (370 мг/м2, 7 дней) каждые 21 день, радикальную мастэктомию, 4 курса адъювантной химиотерапии арглабином, лучевую терапию и гормонотерапию по показаниям. Всем больным МРРМЖ проведены исследования метаболитов пуринового обмена, внеклеточных нуклеиновых кислот, кислоторастворимой фракции (КРФ).
Результаты. У больных МРРМЖ в плазме крови зафиксировано повышение выше контрольных величин всех пуриновых интермедиатов, кроме мочевой кислоты. Наиболее значимые изменения зарегистрированы в отношении содержания гуанина в крови больных: при 11В стадии - на 31 %, 111А - на 72 %, 111В - в 1,97 раза, ШС — на 24 %. У больных II стадии, получавших арглабин, содержание интермедиатов пуринового обмена уменьшилось и приблизилось к значениям контроля. У больных МРРМЖ зафиксировано достоверное снижение уровня внеклеточных нуклеиновых кислот и КРФ в плазме крови. После применения арглабина при II стадии все показатели имели выраженную тенденцию к снижению, при III стадии
