CC BY
16
a This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License ^ by https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
5 ÜÜ RESEARCH ARTICLE | НАУЧНАЯ СТАТЬЯ © Mitina A. E., Illarionova E.A., 2022
( ^oi http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-l-50-56
Ш Принята 20.01.2022 | Accepted 20.01.2022
L_ 1 615.07:535.243
SOLATION, DETECTION AND QUANTIFICATION OF SAQUINAVIR IN BIOLOGICAL FLUIDS
Mitina A.E., Illarionova E.A.
Irkutsk State Medical University, Irkutsk, Russian Federation
ИЗОЛИРОВАНИЕ, ОБНАРУЖЕНИЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ САКВИНАВИРА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
Митина А.Э., Илларионова Е.А.
ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет», г. Иркутск, Российская Федерация
Abstract: HIV infection is one of the socially significant diseases. Saquinavir is an antiretroviral drug. As with all medicines, even with the exact observance of therapy, there is a threat of poisoning. Modern chemical and toxicological analysis do not have methods for isolating, identifying and quantifying saquinavir in biological fluids. This paper presents the results of the development of a technique for isolating, detecting and quantifying saquinavir in model samples of urine, saliva and blood plasma. The isolation of saquinavir from biological objects was carried out using liquid-liquid extraction. The influence of the following extraction factors has been studied: extraction: the nature of the organic solvent, the pH of the medium, the presence of electrolyte, the time and frequency of extraction. Optimal conditions of isolation of saquinavir have been selected: extractant - chloroform, pH 2, electrolyte - 20% sodium chloride solution, single extraction for 3 minutes. The identification of saquinavir in biological objects (urine, saliva, blood plasma) was carried out by thin-layer chromatography, the Rf value of the saquinavir spots obtained after extraction from biological fluids corresponded to the range of Rf values 0.74-0.76. The Rf value of the standard sample of the saquinavir witness was 0.75±0.01. For quantitative determination, UV
Аннотация: ВИЧ-инфекция является одним из социально значимых заболеваний. Саквинавир -препарат антиретровирусного действия. Как и для всех лекарственных средств даже при точном соблюдении терапии остается угроза отравления. Современный химико-токсикологический анализ не располагает методиками изолирования,
идентификации и количественного определения саквинавира в биологических жидкостях. В данной работе представлены результаты по разработке методики изолирования, обнаружения и количественного определения саквинавира в модельных образцах мочи, слюны и плазмы крови. Изолирование саквинавира из биологических объектов проводили с использованием жидкость-жидкостной экстракции. Изучено влияние следующих факторов экстракции: экстракции: природа органического растворителя, рН среды, наличие электролита, время и кратность экстракции. Подобраны оптимальные условия изолирования саквинавира: экстрагент - хлороформ, рН 2, электролит - раствор натрия хлорида 20%, однократная экстракция в течение 3 минут. Идентификацию саквинавира в биологических объектах (моча, слюна, плазма крови) проводили
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
spectrophotometry was used (solvent - hydrochloric acid solution 0.1M; analytical wavelength - 321 nm. When using the developed technique, the degree of extraction of saquinavir from a model sample of urine, saliva and blood plasma is 82.4 ± 2.9%; 72.5 ± 3.1% and 78.1 ± 3.5%, respectively. A validation evaluation of the developed methods was carried out, which indicates the suitability of the proposed methods for chemical and toxicological analysis. The relative standard deviation (RSD, %) in the evaluation of convergence and intra-laboratory reproducibility did not exceed 5% for all objects of analysis. Keywords: saquinavir, biological fluids, liquid-liquid extraction, isolation, chemical-toxicological analysis, thin-layer chromatography, spectrophotometry. методом тонкослойной хроматографии, значение Rf пятен саквинавира, полученных после извлечения из биологических жидкостей соответствовало интервалу значений Rf 0,74-0,76. Значение Rf стандартного образца свидетеля саквинавира 0,75±0,01. Для количественного определения использовали УФ-спектрофотометрию (растворитель - хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М; аналитическая длина волны - 321 нм. При использовании разработанной методики степень извлечения саквинавира из модельного образца мочи, слюны и плазмы крови составляет 82,4±2,9%; 72,5±3,1% и 78,1±3,5% соответственно. Проведена валидационная оценка разработанных методик, которая свидетельствует о пригодности предлагаемых методик для химико-токсикологического анализа. Относительное стандартное отклонение (RSD, %) при оценке сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости не превышало 5% для всех объектов анализа. Ключевые слова: саквинавир, биологические жидкости, жидкость-жидкостная экстракция, изолирование, химико-токсикологический анализ, тонкослойная хроматография, спектрофотометрия.
REFERENCES [1] Barseghyan S.S., Salomatin E.M., Pleteneva T.V., Maksimova T.V., Dolinkin A.O. Methodological recommendations for validation of analytical techniques used in forensic chemical and chemical-toxicological analysis of biological material. Moscow: Russian Center of Forensic Medical Examination. 2014. 73 p. [2] The State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV edition / Federal Electronic Medical Library, Moscow, 2018. [Electronic resource] // Access mode: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php Date of application: 06.11.2021. [3] Kravchenko A.V., Rafalsky V.V. Antiretroviral drugs // Clinical microbiology and antimicrobial chemotherapy. 2003. Vol. 4. No. 5. pp. 360-379. [4] Onishchenko G.G. HIV infection-the problem of humanity // HIV infection and immunosuppression. 2009. Vol. 1. No. 1. pp. 5-9. [5] Remezova I.P., Lazaryan D.S., Voronkov A.V., Avramenko N.S., Svarych M.V. Isolation, detection and quantitative determination of olanzapine in biological objects // Fundamental Research. 2015. Vol. 24. No. 2. pp. 5416-5420. БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК [1] Барсегян С.С., Саломатин Е.М., Плетенева Т.В., Максимова Т.В., Долинкин А.О. Методические рекомендации по валидации аналитических методик, используемых в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе биологического материала. Москва: Российский центр судебно-медицинской экспертизы. 2014. 73 с. [2] Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание / Федеральная электронная медицинская библиотека, М., 2018. [Электронный ресурс] // Режим доступа: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php Дата обращения: 06.11.2021. [3] Кравченко А.В., Рафальский В.В. Антиретровирусные препараты // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2003. Т. 4. № 5. С. 360-379. [4] Онищенко Г.Г. ВИЧ-инфекция-проблема человечества // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2009. Т. 1. №. 1. С. 5-9. [5] Ремезова И.П., Лазарян Д.С., Воронков А.В., Авраменко Н.С., Сварыч М.В. Изолирование, обнаружение и количественное определение оланзапина в биологических объектах // Фундаментальные исследования. 2015. Т. 24. № 2. С. 5416-5420.
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
Author Contributions. Mitina A.E.— collection and processing of materials, writing a text, statistical data processing; Illarionova E.A. — literature revie, research concept and design. Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest.
Mitina A.E. — SPIN ID: 6496-7410; ORCID ID: 0000-0003-4088-1415
Research interests, number of main publications: Improvement of methods ofpharmaceutical and chemical-toxicological analysis using spectrophotometry and chromatography methods, more than 20 publications have been published, 1 of them in the Higher Attestation Commission and 14 in the RSCI.
Illarionova E.A. — SPIN ID: 8575-5511; ORCID ID: 0000-0002-3281-9489
Research interests, number of main publications: Improvement of methods ofpharmaceutical and chemical-toxicological analysis using spectrophotometry and chromatography methods, more than 30 publications have been published, 10 of them in SCOPUS, 3 in WoS, 14 in HAC and 3 in conference proceedings.
Вклад авторов. Митина А.Э. — сбор и обработка материалов, написание текста, статистическая обработка данных; Илларионова Е.А. — обзор литературы, концепция и дизайн исследования. Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Исследование одобрено этическим комитетом ИГМУ. До включения в исследование все здоровые добровольцы подписали информированное согласие установленной формы (протокол № 1 от 24.09.2021 г.).
Митина А.Э. — SPIN ID: 6496-7410; ORCID ID: 0000-0003-4088-1415
Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Совершенствование методов фармацевтического и химико-токсикологического анализа с использованием методов спектрофотометрии и хроматографии, опубликованы более 20 публикаций из них 1 в ВАК и 14 в РИНЦ.
Илларионова Е.А. — SPIN ID: 8575-5511; ORCID ID: 0000-0002-3281-9489
Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Совершенствование методов фармацевтического и химико-токсикологического анализа с использованием методов спектрофотометрии и хроматографии, опубликованы более 200 публикаций из них: 88 в ВАК, 19 в СКОПУС и WoS, 117 в РИНЦ.
For citation: Mitina A.E., Illarionova E.A. SOLATION, DETECTION AND QUANTIFICATION OF SAQUINAVIR IN BIOLOGICAL FLUIDS // Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2022. - №1. Vol.24. - C. 50-56. Doi: http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-1-50-56.
Для цитирования: Митина А.Э., Илларионова Е.А. ИЗОЛИРОВАНИЕ, ОБНАРУЖЕНИЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ САКВИНАВИРА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". - 2022. - №1. Т.24. - С. 50-56. Doi: http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-1-50-56.
Введение. В настоящее время во всём мире заболеваемость, вызванная вирусом
иммунодефицита человека, является остро стоящей проблемой. Такое состояние для человека является крайне неблагоприятным, так как происходит резкое угнетение защитных функций организма, присоединяются
оппортунистические заболевания, которые затрудняют течение болезни. На сегодняшний день эпидемия ВИЧ находится под наблюдением, заболеваемость населения упорно растет. Используют поддерживающую
антиретровирусную терапию, которая препятствует прогрессированию вируса в организме, замедляет его репродукцию, к таким препаратам относится саквинавир [3,4].
Сложное и длительное лечение, возникновение побочных реакций, а также передозировка либо злоупотребление саквинавиром может привести к отравлениям. Клиническая картина отравлений саквинавиром является нехарактерной, поэтому для своевременной и объективной диагностики отравлений особое значение имеют результаты химико-токсикологического анализа. Как правило, отравление носит комбинированный характер, это связано с вынужденным лечением оппортунистических инфекций, возникающих в результате угнетения иммунной системы [3,4]. В литературных данных отсутствуют сведения по химико-токсикологическому анализу
саквинавира из биологических жидкостей. Отсутствуют схемы химико-токсикологического
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
анализа, с помощью которых можно надежно и оперативно диагностировать отравление и выбрать способ детоксикации. В связи с этим актуальной проблемой является разработка методик изолирования, идентификации и количественного определения саквинавира в биологических жидкостях.
Цель настоящего исследования - разработать методики изолирования, обнаружения и количественного определения саквинавира из модельных образцов мочи, слюны и плазмы крови для последующего использования в химико-токсикологическом анализе.
Материалы и методы. Объекты исследования -субстанция саквинавира с содержанием действующего вещества не менее 99,9%, соответствующая нормативной документацией, таблетки саквинавира по 500 мг. В качестве экстрагентов были взяты: дихлорметан, эфир, хлороформ, гептан, этилацетат. Реактивы: спирт этиловый 96%, вода очищенная, хлористоводородной кислоты раствор 0,1М, натрия гидроксида раствор 0,1М, спирт этиловый 96%. Растворы электролитов: натрия сульфата 5%, натрия сульфата насыщенный, натрия хлорида 20%, натрия хлорида насыщенный, аммония сульфата 20%, аммония сульфата насыщенный.
Изучение влияния некоторых факторов экстракции (природа органического растворителя, рН среды, природа электролита, время и кратность экстракции) проводили по следующей методике: 1 мл испытуемого раствора саквинавира помещали в пробирку, добавляли раствор хлористоводородной кислоты 0,1 М до рН 1,2,3,4,5,6, и раствор аммиака 10% до рН 7,8,9,10,11,12,13. Величину рН контролировали с помощью универсального ионометра ИТ-1101. Изолирование проводили, добавляя 3 мл органического растворителя. Раствор
перемешивали и переносили в делительную воронку. После разделения фаз экстрагировали в течение 3 минут. Экстрагент удаляли в естественных условиях. Сухой остаток растворяли в смеси спирта и воды. Отбирали 5 мл раствора и переносили в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки. Оптическую плотность определяли на спектрофотометре СФ-2000 в кюветах с
толщиной слоя 1 см при длине волны 321 нм на фоне раствора хлористоводородной кислоты 0,1 М.
Изучение влияния электролита, времени и кратности экстракции проводили по аналогичной методике, изменяя
соответствующие параметры экстракции.
Биологические объекты исследования: слюна в количестве 30 мл, моча в количестве 50 мл отбирались у здоровых добровольцев, не принимавших лекарственные препараты в течение 7 дней. Плазму использовали в количестве 50 мл.
Модельные образцы были приготовлены по следующей методике: к 35 мл мочи, 10 мл плазмы, или 5 мл слюны добавляли спиртовой раствор саквинавира в концентрации 0,5; 1,0; или 1,5г, соответвенно. Полученные смеси оставляли на 24 часа при комнатной температуре. Изолирование саквинавира из модельных образцов мочи, слюны и плазмы крови проводили следующим образом: к объекту добавляли хлористоводородной кислоты раствор до рН 2, электролит - раствор натрия хлорида 20% и 3 мл хлороформа. Содержимое экстрагировали в течение 3 минут. После разделения фаз отделяли слой органического растворителя. Экстрагент удаляли при комнатной температуре.
Идентификацию и
количественное определение саквинавира в извлечениях методом УФ-спектрофотометрии проводили по следующей методике: сухой остаток растворяли в смеси спирта и воды. Отбирали 5 мл раствора, переносили в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Для идентификации электронный спектр измеряли на спектрофотометре в кюветах с толщиной слоя 10 мм, в диапазоне длин волн 220-400нм. В качестве раствора сравнения использовали раствор хлористоводородной кислоты 0,1 М.
Для количественного
определения измерение оптической плотности испытуемого раствора производили на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 321±1нм с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали раствор хлористоводородной кислоты 0,1 М. Параллельно измеряли оптическую плотность рабочего стандартного образца (РСО) саквинавира.
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
Методика приготовления раствора РСО саквинавира: точную массу субстанции саквинавира (около 0,0500 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 30 мл спирта этилового 96%, объем раствора доводят до метки этим же растворителем. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят до метки с помощью раствора хлористоводородной кислоты 0,1 М.
Для обнаружения саквинавира в извлечениях из биологических жидкостей методом тонкослойной хроматографии использовали следующую методику: на линию старта хроматографической пластины «Силуфол» микропипеткой наносили по 0,2 мл спиртовых растворов исследуемых извлечений. Пластину высушивали на воздухе в течение 10 минут, затем помещали в камеру с системой: этанол: 25% раствор аммиака (40:1) и хроматографировали. После прохождения фронта растворителей пластину вынимали и сушили на воздухе. Детекцию пятен проводили с помощью УФ-света при длине волны 254 нм.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с использованием пакета программ для Windows XP (Microsoft Excel) и с применением t-критерия Стьюдента. Различия считали достоверными при доверительной вероятности p < 0,05 [2].
Результаты и обсуждение. Для разработки методики изолирования саквинавира из биологических жидкостей необходимо подобрать условия его экстракции из водных растворов, которые зависят от таких факторов как: природа органического растворителя, рН среды, влияние электролита, время и кратность экстрагирования
[5].
В интервале значений рН от 1 до 13 была изучена зависимость степени изолирования саквинавира от природы растворителя (дихлорметан, эфир, хлороформ, гептан, этилацетат). Степень извлечения саквинавира в зависимости от рН среды и органического растворителя представлена на рисунке 1. Как можно видеть из рисунка 1 саквинавир максимально извлекается из водных растворов при рН 2,0 хлороформом. Степень извлечения составляет 80,2%.
Рис.1 - Зависимость степени извлечения саквинавира из растворов от рН среды и природы органического растворителя
Fig.1 - Dependence of the degree of saquinavir extraction from solutions on the pH of the medium and the nature of the organic solvent
" (NH4)2SO4 20% и (NH4) 2SO4
Изучение влияния на экстракцию 6 растворов электролитов - №С1 20%, №С1 насыщенный, №2804 5%, №2804 насыщенный,
и (N^4)2^04 насыщенный позволило определить, что высаливающий эффект оказывают 3 электролита - растворы №С1
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
насыщенный и 20%, а также раствор (NH4)2SO4 20% раствор. Наибольшее высаливающее действие происходит при добавлении раствора №С1 20%, степень извлечения при этом составляет 92,2%.
Дальнейшим этапом экспериментальных исследований являлось исследование влияния времени и кратности на степень экстракции саквинавира из водных растворов. В ходе эксперимента было доказано, что увеличение времени экстракции до 7 минут не привело к значительному изменению степени экстракции, оптимальным временем является - 3 минуты и саквинавир достаточно полно изолируется при однократной экстракции, степень извлечения составляет - 92,3%.
Данные условия были использованы для разработки методики изолирования саквинавира из биологических объектов - моча, слюна, плазма крови.
Для идентификации саквинавира методом тонкослойной хроматографии проводили
хроматографирование с использованием системы: этанол: 25% раствор аммиака (40:1) восходящим методом. Значение пятна
стандартного образца свидетеля саквинавира 0,75±0,01 соответствовало интервалу значений пятен извлечений саквинавира из биологического материала 0,74-0,76.
Для идентификации саквинавира методом УФ-спектрофотометрии сравнивали УФ-спектр стандартного образца саквинавира с УФ-спектром саквинавира, полученным после извлечения из биологических жидкостей. УФ-спектр стандартного образца саквинавира в растворе хлористоводородной кислоте 0,1 М характеризуется максимумом поглощения при длине волны 321±1нм, что соответствует максимуму поглощения саквинавира в извлечениях, полученных из биологических объектов. УФ-спектр рабочего стандартного образца саквинавира представлен на рисунке 2.
Рис. 2 - УФ-спектр рабочего стандартного образца саквинавира Fig.2 - UV spectrum of the working standard sample of saquinavir
Результаты количественного определения саквинавира в извлечениях из модельных образцов биологических жидкостей (моча, слюна, плазма крови) представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание саквинавира в модельных образцах (моча, слюна, плазма крови)
Добавлено саквинавира, г Метрологические характеристики (n=6)
Моча Слюна Плазма крови
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
0,5 г х"= 80,7%; RSD, % = 2,64; Е~ % = 2,78. х"= 82,4%; RSD, % = 2,73; Е~ % =2,86. х"= 79,1%; RSD, % = 3,49; Е~ % = 3,66.
1,0 г х"= 72,5%; RSD, % = 2,95; Е~ % = 3,09. х"= 70,3%; RSD, % = 2,12; Е~ % = 2,22. х"= 71,4%; RSD, % = 2,48; Е~ % = 2,60.
1,5 г х"= 73,8%; RSD, % = 3,51; Е~ % = 3,68. х"= 75,1%; RSD, % = 3,25; Е~ % = 3,42. х"= 78,1%; RSD, % = 4,29; Е~ % = 4,50.
Table 1
The content of saquinavir in model samples (urine, saliva, blood plasma)
Added saquinavir, g Metrological characteristics (n=6)
Urine Saliva Blood plasma
0,5 г x"= 80,7%; RSD, % = 2,64; E~ % = 2,78. x"= 82,4%; RSD, % = 2,73; E~ % =2,86. x"= 79,1%; RSD, % = 3,49; E~ % = 3,66.
1,0 г x"= 72,5%; RSD, % = 2,95; E~ % = 3,09. x"= 70,3%; RSD, % = 2,12; E~ % = 2,22. x"= 71,4%; RSD, % = 2,48; E~ % = 2,60.
1,5 г x"= 73,8%; RSD, % = 3,51; E~ % = 3,68. x"= 75,1%; RSD, % = 3,25; E~ % = 3,42. x"= 78,1%; RSD, % = 4,29; E~ % = 4,50.
Из таблицы 1 видно, что с использованием разработанной методики из модельных образцов мочи, слюны и плазмы крови изолируется 82,4±2,9%; 72,5±3,1% и 78,1±3,5% соответственно. Валидационная оценка разработанных методик [1] свидетельствует о их пригодности для химико-токсикологического анализа. Относительное стандартное отклонение (RSD, %) при оценке сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости не превышало 5% для всех объектов анализа.
Выводы. Разработаны методики изолирования, идентификации и количественного определения саквинавира из модельных образцов мочи слюны и плазмы крови методами жидкость-жидкостной экстракции, тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии, которые могут быть рекомендованы для химико-токсикологического анализа данного лекарственного препарата.
Corresponding Author: Mitina Anastasia Eduardovna - postgraduate student of the Department of Pharmaceutical and Toxicological Chemistry, Irkutsk State
Medical University, Irkutsk, Russian Federation
E-mail: nastyamitina98@mail.ru
Ответственный за переписку: Митина Анастасия Эдуардовна — аспирант кафедры фармацевтической и токсикологической химии, ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет», г.
Иркутск, Российская Федерация,
E-mail: nastyamitina98@mail.ru
Номер свидетельства: ЭЛ № ФС 77 — 76345 от 02.08.2019, выдан Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций, включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК при Министерстве образования
и науки Российской Федерации ---—
