CC BY
129
5-гидрокси-6-метилурацил (I) и6-метил-5- личились значения интегральных параметров морфолинометил-1-(тиетанил-3)урацил (X). ЛЗХЛ крови, что свидетельствует о повыше-3. Под действием препаратов I и X уве- нии резервных возможностей фагоцитов.
Сведения об авторах статьи:
Петрова Ирина Владимировна - м.н.с. ЦНИЛ ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8 (347) 273-61-45. E-mail: [email protected]
Катаев Валерий Алексеевич - д.фарм.н., зав. кафедрой послевузовского и дополнительного фармацевтического образования ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347)2-72-62-95. Мещерякова Светлана Алексеевна - к.фарм.н., доцент, зав. кафедрой общей химии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347)272-02-22.
Николаева Ксения Владимировна - ассистент кафедры послевузовского и дополнительного профессионального фармацевтического образования ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347)272-62-95.
Мунасипова Диана Айдаровна - аспирант кафедры общей химии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347)272-02-22.
Фархутдинов Рафагат Равильевич - д.м.н., профессор, заведующий ЦНИЛ ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347) 273-61-45. E-mail:[email protected]
ЛИТЕРАТУРА
1. Арчаков, А.И. Оксигеназы биологических мембран / А.И. Арчаков. - М., 1983. - 180 с.
2. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпов // Успехи химии. - 1985. - Т. 54, № 9. - С. 1540-1558.
3. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.М. Арачков. - М.: Наука, 1972. - 252 с.
4. Западнюк, И.П. Лабораторные животные, их разведение, содержание и использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария. - Киев, 1984. - 56 с.
5. Корнева, Е.А. Физиологические механизмы влияния стресса на иммунную систему / Е.А. Корнева, Е.К. Шхинек // Вестн. АМН СССР. - 1985. - № 8. - С. 44-50.
6. Рылова, М.Л. Методы исследования хронического действия вредных факторов среды в эксперименте. - М.: Медицина, 1964. -230 с.
7. Синтез и изомерия продуктов взаимодействия 5 (6)-нитро-2-хлорбензимидазола с эпитиохлоргидином / В.А. Катаев [и др.] // Журнал органической химии. - 2002. - Т. 38, № 10. - С. 1560-1562.
8. Фархутдинов, Р.Р. Методики исследования хемилюминесценции биологического материала на хемилюминометре ХЛ - 003. / Р.Р. Фархутдинов, С.И. Тевдорадзе // Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: сб. тез. докл. науч.-практич. семинара. - М., 2005. - С147-154.
9. Фархутдинов, Р.Р. Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в биологии и медицине / Р.Р. Фархутдинов, В.А. Лиховских. - Уфа, 1995. - 92 с.
10. Burgin, R. Repeated swim stress and peripheral; benzodiazepines receptors / R. Burgin, R. Weizman, M. Gavish// -Neuropsychobiology. - 1996. - Vol. 33. - p. 28-31.
УДК 577.357
© И.В. Петрова, М.М. Аль-Табиб, Р.Р. Фархутдинов, 2013
И.В. Петрова, М.М. Аль-Табиб, Р.Р. Фархутдинов ИЗМЕНИЕ ПРОЦЕССОВ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ТАБАЧНОГО ДЫМА IN VITRO И IN VIVO
ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
Изучено влияние табачного дыма на процессы свободнорадикального окисления методом регистрации хемилюминес-ценции в модельных системах, имитирующих генерацию активных форм кислорода и перекисное окисление липидов. Обнаружено, что в ротовой жидкости курящего человека сразу после воздействия табачного дыма люминолзависимая хеми-люминесценция резко угнетается, однако затем следует многократное ее усиление.
Ключевые слова: свободнорадикальное окисление, хемилюминесценция, табачный дым.
I.V.Petrova, M.M. А^ЫЬ, R.R.Farkhutdinov CHANGE OF FREE RADICAL OXIDATION PROCESSES UNDER THE INFLUENCE OF TOBACCO SMOKE IN VITRO AND IN VIVO
The effect of tobacco smoke on the processes of free radical oxidation has been studied by detecting chemiluminescence in model systems that simulate the generation of reactive oxygen species and lipid peroxidation. It was established that in the oral fluid of a smoker immediately after exposure to tobacco smoke luminol chemiluminescence is sharply suppressed but later it is followed by multiple amplification.
Key words: free radical oxidation, chemiluminescence, tobacco smoke.
Табачный дым является мощным источником оксидантов. Газовый компонент табачного дыма может содержать 1015 органических высокореактивных радикалов на одну затяжку
[4], в котором содержатся высокие концентрации реактивных диенов и оксида азота. Оксид азота и пероксинитрит, образующийся при его взаимодействии с супероксидом, оказывают
негативное влияние на ткани дыхательных путей и легких курильщика. Общеизвестно неблагоприятное влияние курения на различные функциональные системы организма, однако недостаточно изучен механизм развития местной воспалительной реакции в тканях контактных органов (слизистая полости рта и ротовая жидкость, дыхательные пути, легкие) [1].
Наибольшее значение в воспалительном ответе среди клеточных элементов играют фагоцитирующие клетки (нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы). Авторы [2,3] выстраивают следующую последовательность окислительных реакций при активации фагоцитов: стимулированный фагоцит продуцирует супероксиды, которые образуют H2O2. Оба продукта реакции принимают участие в модификации макромолекул. Кроме того, из них образуются более сильные окислители (гидроксил, гипо-хлорит, пероксинитрит), условно объединенные в группу активные формы кислорода (АФК). Они способны повреждать белки, ли-пиды, нуклеиновые кислоты. Модификация белков меняет их антигенные свойства, а пе-рекисное окисление липидов (ПОЛ) приводит к появлению хемоаттрактантов, увеличивающих миграцию фагоцитов. Таким образом, активация фагоцитов самопроизвольно усиливается.
Генерация АФК и ПОЛ являются главным звеном в процессах свободнорадикально-го окисления (СРО), лежащих в основе типовых патологических процессов, в частности воспаления.
Для оценки процессов СРО используется регистрация хемилюминесценции (ХЛ)-свечения, возникающего при взаимодействии свободных радикалов [3]. Существуют различные подходы и методы исследования ХЛ. Наиболее часто используются измерение лю-минолзависимого свечения и ХЛ, развивающиеся в липидах при добавлении ионов двухвалентного железа. Люминол избирательно усиливает свечение, связанное с образованием АФК. Индуцированная железом ХЛ липидов дает возможность оценить их способность подвергаться перекисному окислению.
Целью работы явилось изучение процессов свободнорадикального окисления in vitro и in vivo при воздействии табачного дыма. В задачи входило:
1. Исследовать влияние табачного дыма на модельные системы, имитирующие наиболее распространенные реакции СРО в организме: перекисное окисление липидов и образование АФК.
2. Изучить СРО в ротовой жидкости до курения и после курения в динамике.
Материал и методы
Для оценки влияния табачного дыма на процессы СРО in vitro были проведены исследования на трех модельных системах. Табачный дым пропускали через стеклянную колбу, содержащую модельные системы. В первой модельной системе генерировались активные формы кислорода, во второй протекали реакции перекисного окисления липидов, третьей модельной системой послужила ротовая жидкость [3]. ХЛ модельных систем характеризовалась спонтанным свечением, быстрой вспышкой и развивающейся медленной вспышкой. В исследуемых модельных системах определяли степень изменения ХЛ и пересчитывали в процентах от контроля. Статистическая обработка результатов проводилась стандартным набором программ «Statistica for Windows(release 5.0)».
Результаты
На рис. 1 приведены записи ХЛ модельной системы, в которой вызывалось образование АФК. В них можно выделить спонтанное свечение, быструю вспышку, латентный период, медленную вспышку. Табачный дым усиливал интенсивность свечения модельной системы более чем в 2 раза.
27.08
1
и
; Г',-:** ¿г
1 т^^
lit ■1 ■111 ■ ■-■. 1 1 1 1 " V. 1" i1 ■ '-■:
8.8 1.8 2.8 3.8 4.0 5.8
Врег^ Мин
Рис. 1. ХЛ модельной системы, генерирующей активные формы кислорода: 1- до пропускания табачного дыма; 2 - после пропускания
В модельной системе липосом (рис. 2) воздействие табачного дыма приводило к увеличению ХЛ в 3 раза, особенно спонтанного свечения (в 6 раз).
В ротовой жидкости курильщика уровень свечения сразу после курения резко снижался (рис. 3), затем наблюдалась постепенная тенденция к усилению, а через 30-60 мин было зафиксировано увеличение интенсивности ХЛ ротовой жидкости примерно в 2,4 раза.
ет его прооксидантные свойства. В ротовой жидкости табачный дым оказывает модулирующее действие на параметры ХЛ: угнетает генерацию АФК сразу после курения и, наоборот, стимулирует продукцию свободных радикалов через некоторое время. Вероятно, это связано с тем, что вначале табачный дым повреждает клетки ротовой жидкости, а потом
раздражающее действие дыма стимулирует продукцию активных форм кислорода - супероксида, перекиси водорода, пероксинитрита, которые участвуют в модификации процессов свободнорадикального окисления и повреждают биологические мембраны клеток ротовой полости, бронхов и ткани легких. Необходимо отметить, что изучение воздействия табачного дыма на параметры СРО является перспективным и актуальным в условиях высокого распространения курения для выяснения общих закономерностей и механизмов местного и общего токсического действия экзогенных табачных радикалов. Выводы
1. Выявлена способность табачного дыма усиливать генерацию АФК и ПОЛ в модельных системах.
2. В ротовой жидкости курящего человека сразу после воздействия табачного дыма резко угнетается люминолзависимая ХЛ, но далее прослеживается тенденция к усилению процессов свободнорадикального окисления.
Сведения об авторах статьи:
Петрова Ирина Владимировна - м.н.с. ЦНИЛ ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина,
3. Тел./факс 8 (347) 273-61-45. Е-шаН: [email protected].
Аль-Табиб Мохаммед Мохаммед - аспирант кафедры терапевтической стоматологии ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8 (347) 273-61-45. Е-шаИ: [email protected].
Фархутдинов Рафагат Равильевич - д.м.н., профессор, заведующий центральной научно-исследовательской лабораторией ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел./факс 8(347) 273-61-45. Е-mail:[email protected].
ЛИТЕРАТУРА
1. Прощаев, К.И. Локальные и системные нейроиммуноэндокринные сдвиги под влиянием поллютантов в контексте преждевременного старения: анализ состояния пароблемы / К.И. Прощаев, А.Н. Ильницкий [и др. ] // Фундаментальные исследования. -2011. - № 6 - С. 150-153.
2. Соодаева, С.К. Роль свободнорадикального окисления в патогенезе ХОБЛ / С.К. Соодаева // Пульмонология и аллергология. -2002. - № 1. - С. 24-25.
3. Фархутдинов, Р.Р. Хемилюминесцентные методы исследования свободно-радикального окисления в биологии и медицине / Р.Р. Фархутдинов, В.А. Лиховских. - Уфа, 1995. - 92 с.
4. Чучалин, А. Г. Хронические обструктивные болезни легких / А.Г. Чучалин. - М.: Издательство БИНОМ, 1999. - 512 с.
УДК 615.014.425:[637.143.6:636.1]
©А.Г. Валиев, Т.А. Валиева, Р.Р. Фархутдинов, 2013
А.Г. Валиев, Т.А. Валиева, Р.Р. Фархутдинов ОЦЕНКА МЕТОДОВ ПОВЫШЕНИЯ СТАБИЛЬНОСТИ СУБЛИМИРОВАННОГО
КОБЫЛЬЕГО МОЛОКА
ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
Цель работы: изучить возможность применения антиоксидантов кверцетина и бисалкофена для хранения сухого кобыльего молока при комнатной температуре в течение 12 месяцев. Продукт анализировали поквартально. О состоянии пере-
35.80
31.50 28.80 2ч.50 21.80 17.50 14.00
1
и
Рис. 2. ХЛ модельной системы, в которой протекают процессы перекисного окисления липидов: 1 - до пропускания табачного дыма; 2 - после пропускания
11.98 10.28 8.58
; / Г
| /
2 V-..-,. ''•.'-.'.'п'Ч''.1'- 1 1 1 1 1 1 1 111111 '_■■ 1 1 1 1 1 1 1 V. 1■1111 ■ :
Рис. 3. Запись ХЛ ротовой жидкости: 1 - до курения; 2 - сразу после курения; 3 - через 30 мин после курения
Таким образом, выявлена способность табачного дыма усиливать генерацию АФК и ПОЛ в модельных системах, что характеризу-
