CC BY
31
УДК 619:616.995.132:615.37
ИЗМЕНЕНИЯ В ОРГАНАХ ИММУНОГЕНЕЗА ПРИ ДИКТИОКАУЛЕЗЕ ОВЕЦ
Т.Ю. ДЕГТЯРЕВСКАЯ кандидат биологических наук Н.В. ЧЕБЫШЕВ академик РАО
Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова
Изучена динамика изменения содержания Т- и В-лимфоцитов в селезенке и брыжеечном лимфоузле при диктиокаулезе овец и при дегельминтизации альбеном и иммуностимуляции Т- и В-активинами. Комплексная терапия способствует повышению в селезенке содержания В-лимфоцитов в 2,4 и Т-лимфоцитов - в 2,8 раза, в брыжеечном лимфатическом узле - В-лимфоцитов - в 2,2 и Т-лимфоцитов - в 2,5 раза.
Ключевые слова: Т- и В-лимфоциты, альбен, Т- и В-активины, диктиокаулез, овцы, иммунный статус.
Особое место среди гельминтозов овец занимает диктиокаулез. В настоящее время большое внимание исследователей привлекает изучение вопросов эпизоотологии гельминтозов овец и повышению эффективности дегельминтизаций [1-3].
Целью наших исследований явилось изучение содержания Т- и В-лимфоцитов в лимфоидных органах при диктикаулезе овец после дегельминтизации альбеном и иммунности-муляции Т- и В-активинами.
Материалы и методы
В опытах использовано 20 здоровых и 80 спонтанно зараженных дик-тиокаулами овец (валушки) 10—11-месячного возраста породы советский меринос. Животные по принципу аналогов были разделены на 5 групп по 20 голов в каждой. Животные 1-й группы служили здоровым контролем.
Российский паразитологический журнал, 2008, № 2
Зараженных овец 2-й группы использовали в качестве контроля и лечению не подвергали. Овец 3-й группы де-гельминтизировали альбеном из расчета 2,5 г гранулята на 100 кг массы тела. Животных 4-й группы дегель-минтизировали альбеном в той же дозе и в качестве иммуномодулятора вводили В-активин внутримышечно в дозе 5 мкг/кг 1 раз в сутки в течение 5 суток. Пятую группу овец дегельмин-тизировали также альбеном в той же дозе и вводили Т-активин подкожно в дозе 2 мкг/кг 1 раз в сутки в течение 14 суток. В течение опыта все животные находились в равных условиях кормления и содержания.
Взятие материала для иммуно-морфологических исследований проводили до начала опытов (фон), а затем через 3, 7, 15 и 30 суток после начала опытов. В качестве антикоагулянта использовали Трилон Б.
Лимфоциты выделяли разделением в градиенте плотности фиколл-ве-рографин (плотность 1,077 г/мл). Определение В-лимфоцитов проводили в реакции комплементарного розеткооб-разования с эритроцитами быка. Определение популяции Т-лимфоцитов осуществляли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами кролика. Для приготовления клеточной суспензии после убоя животных тотчас брали селезенку, взвешивали и из средней части извлекали небольшой кусочек, который помещали в стеклянный гомогенизатор и добавляли среду № 199 из расчета 1 мл на 20 мг органа. Кусочек растирали в гомогенизаторе. В полученной суспензии с помощью 0,1%-ного раствора трипа-нового синего определяли число жизнеспособных клеток, а также лейкоцитов, содержащихся во всем органе.
Полученные цифровые данные обрабатывали статистически с использованием программ Statistica v 5.5 Windows 98 по Стьюденту (Лакин, 1980).
Результаты и обсуждение
Количество В-лимфоцитов в селезенке овец 1-й контрольной группы в течение опыта колебалось от 38,5 до 39,2 % (табл. 1). У овец 2-й группы количество В-лимфоцитов прогрессивно снижалось и к концу опыта составило 17,4±0,6 % против 38,5±1,2 % в контроле. Содержание В-лимфоцитов в селезенке овец 3, 4 и 5-й групп в процессе опыта увеличивалось. Самого высокого уровня показатель В-клеток достиг в селезенке овец 5-й группы к 15 суткам опыта, превысив показатель у контрольных животных в 1,08 , а у контрольные зараженных - в 2,43 раза.
Таблица 1
Динамика содержания В-лимфоцитов в селезенке овец при диктиокаулезе, %
Группа Фон Срок исследования через, суток
3 7 15 30
Первая (здоровые) 39,2±0,7 38,6±1,0 38,7±1,2 39,0±0,3 38,5±1,2
Вторая (зараженные) 28,4±1,4 26,1±1,3 22,0±0,8 20,3±-0,8 17,4±0,6
Третья (альбен) 29,3±0,8 30,6±1,5 32,7±0,8 34,3±1,1 33,1±1,3
Четвертая (альбен+В-активин) 28,2±1,1 33,6±1,0 37,4±0,6 39,4±0,9 39,0±0,7
Пятая (альбен+Т-активин) 29,0±0,7 35,6±0,9 39,6±0,9 41,4±0,6 42,3±0,9
Содержание Т-лимфоцитов в селезенке у овец 3-й группы, леченных аль-беном, достигло уровня контрольных не-зараженных к 15-м суткам после лечения, в 4-й - к 7 и в 5-й - к 3-м суткам (табл. 2).
Содержание В-клеток в брыжеечном лимфоузле овец 1 -й группы в течение опыта колебалось от 19,6 до 20,6 % (табл. 3). Количество В-лимфоцитов в брыжеечном лимфоузле овец 2-5-х групп было ниже в 1,1-
Российский паразитологический журнал, 2008, № 2
1,15 раза (на 1,9-2,7 %) показателей контрольных здоровых животных. В лимфоузле овец 3-й группы наблюдали незначительное повышение уровня В-клеток до уровня нижней границы контрольных показателей. Максимальное увеличение количества В-лимфоцитов регистрировали в лимфоузле овец 5-й группы, который превысил фоновый показатель контрольных незараженных животных на 3-и сутки.
2
Таблица 3
Динамика содержания В-лимфоцитов в брыжеечном лимфоузле
при диктикоулезе, %
Таблица 2
Динамика содержания Т-лимфоцитов в селезенке овец при диктиокаулезе, %
Группа Фон Срок исследования через, суток
3 7 15 30
Первая (здоровые) 29,0±1,3 29,1±1,2 28,6±0,9 30,1±1,0 28,9±0,8
Вторая (зараженные) 21,4±0,9 17,9±0,9 15,6±0,5 10,2±0,7 12,3±0,5
Третья (альбен) 22,5±0,5 24,4±1,2 26,7±1,1 28,9±0,8 28,1±1,2
Четвертая (альбен+В-активин) 21,9±0,5 26,2±0,7 28,4±1,2 32,6±0,8 31,7±0,8
Пятая (альбен+Т-активин) 22,1±0,9 30,2±0,4 32,7±1,1 36,6±0,5 34,2±0,6
Группа Фон Срок исследования через, суток
3 7 15 30
Первая (здоровые) 20,3±0,7 20,6±0,2 19,7±0,9 20,2±0,4 19,60±0,6
Вторая (зараженные) 17,6±0,9 16,2±0,5 14,3±0,5 13,6±0,7 11,2±0,4
Третья (альбен) 18,4±0,5 19,0±0,7 19,9±0,7 19,8±0,8 19,4±0,9
Четвертая (альбен+В-активин) 17,1±0,6 18,7±0, 18,9±0,6 19,0± 0,8 18,9±0,8
Пятая (альбен+Т-активин) 20,0±0,5 20,2±0,7 20,1±0,7 22,0±0,8 22,8±0,6
В брыжеечном лимфоузле овец 1-й группы содержание Т-лимфоцитов колебалось на уровне от 30,2 до 32,0 %. Уровень Т-клеток овец 2-5-й групп к началу опытов уменьшился в 1,18-1,23 раза по сравнению с показателями животных контрольной группы. Содержание Т-лимфоцитов в брыжеечном лимфоузле овец 2-й группы в течение опыта снижалось и к концу опыта достигло 16,1±0,6 %. Уровень Т-лимфоцитов в брыжеечном лимфоузле овец 3-й группы повышался, но уступал показателям овец 1-й группы. Более выраженное повышение уровня Т-лимфоцитов наблюдали в лимфоузле овец 4-й группы. Самого высокого уровня показатель Т-лимфоцитов достиг в лимфоузле овец 5-й группы. К 7-м суткам опыта его уровень был максимальным и превышал
показатели незараженных животных.
Таким образом, стимуляция Т-активином приводит к более быстрому восстановлению иммунокомпетентных клеток в селезенке и лимфоузлах зараженных животных. Изменения в органах иммуногенеза подтверждают наши данные по аналогичным исследованиям крови (Дегтяревская, Чебышев, 2006) и свидетельствуют о развитии иммунносу-прессивного состояния при данном заболевании. Дегельминтизация и иммуно-стимуляция способствуют не только освобождению животных от гельминтов, но и постепенному восстановлению иммунного статуса. Наши исследования согласуются с данными литературы [4-6]. Комплексная терапия альбеном и В-активином способствует более быстрому восстановлению иммунного статуса.
Таблица 4
Динамика содержания Т-лимфоцитов в брыжеечном лимфоузле
при диктикаулезе, %
Группа Фон Срок исследования через, суток
3 7 15 30
Первая (здоровые) 32,0±0,7 31,7±0,7 30,9±1,1 31,6±1,4 30,2±0,8
Вторая (зараженные) 26,4±0,9 23,2±0,0,7 20,4±0,9 18,7±1,7 16,1±0,6
Третья (альбен) 25,9±1,1 27,7±1,1 28,7±1,3 29,3±0,5 28,4±1,5
Четвертая (альбен+В-активин) 26,3±0,9 28,6±1,0 29,9±0,7 32,6±1,2 31,4±1,3
Пятая (альбен+Т-активин) 27,1±1,2 30,9±1,2 33,7±1,3 42,8±1,0 40,3±0,5
Литература
1. Даугалиева Э.Х. Курочкина К.Г. // Матер. Всерос. симп. - М., 1997. - С.
18.
2. Даугалиева Э.Х., Филлипов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельскохозяйственных животных. - М ., 1989. - С. 221.
3. Земсков В.М. // Успехи соврем. биол. - М., 1991. - № 5. - С. 707-721.
4. Курочкина К.Г. // Бюл. Всерос. ин-та гельминтол. - М., 1996. - Вып. 56. -С. 39-41.
5. Мамыкова О.И. Оценка иммунобиологического статуса животных после дегельминтизации и пути его коррекции: Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - М., 1989.
6. Понамаръ С.И. Иммунобиологическая реактивность свиней при аскари-дозно-трихоцефаллезной инвазии и пути ее коррекции: Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - М., 1990.
The changes in organs of immunogenesis at dictyocaulosis of sheep T.Ju. Degtjarevskaja, N.V. Chebyshev
Dynamics of change of Т- and B- lymphocytes quantity in spleen and mesenteric lymphonodus at dictyocaulosis of sheep after gehelminthization by alben and immunostimulation by Т- and B-activines is investigated. Complex therapy promotes increase in spleen quantity of B-lymphocytes in 2,4 and Т-lymphocytes - in 2,8 times, in mesenteric lymphonodus - B-lymphocytes - in 2,2 and Т-lymphocytes - in 2,5 times.
