BIOLOGICAL SCIENCES
Changes of animals blood indicators at the lead intoxication
12 3
Korganbaeva Z. , Aidarbekova A. , Berdibekova A. , Shapalov Sh.4, Mamytova A.5(Republic of Kazakhstan) Изменения показателей крови животных при свинцовой интоксикации Корганбаева З. С.1, Айдарбекова А. С.2, Бердибекова А. Т.3, Шапалов Ш. К.4, Мамытова А. Ы.5 (Республика Казахстан)
1Корганбаева Зауре Сарыбаевна /Korganbaeva Zaure - кандидат биологических наук,
и. о. доцента,
кафедра фармакологии, фармакотерапии и клинической фармакологии, Южно-Казахстанская государственная фармацевтическая академия; 2Айдарбекова Айжан Сарыбаевна /Aidarbekova Aizhan - магистр биологии, преподаватель; 3Бердибекова Аягоз Токсанбаевна /Berdibekova Ayagoz - магистр биологии, преподаватель,
кафедра биологии;
4Шапалов Шермахан Куттыбаевич /Shapalov Shermakhan - магистр экологии,
старший преподаватель, кафедра безопастности жизнедеятельности и защиты окружающей среды, Южно-Казахстанский государственный университет имени М. Ауезова; 5Мамытова Асия Ырсымбековна /Mamytova Asia - магистр биологии, старший преподаватель,
кафедра биологии, Южно-Казахстанский государственный педагогический институт, г. Шымкент, Республика Казахстан
Аннотация: статья содержит информацию об исследовании гомогената печени и отрицательном влиянии на него ацетата свинца. В частности, приведены данные о снижении уровня содержания а-токоферола, сульфгидрильной группы, глютатион-пероксизады, глютатион-редуктазы и каталазы, которые являются основными параметрами антиокислительной системы гепатоцитов.
Abstract: this article contains information about research of liver homogenate and the negative effect of lead acetate on it. In particular presents data about decrease the content level of а-tocopherol, sulfhydryl group, glutathione peroxidase, glutathione reductase and catalase which are the basic parameters the hepatocytes antioxidant system.
Ключевые слова: свинцовая интоксикация, перекисное окисление токоферола, активность глютатион - пероксидазы, антирадикальная активность, антиокислительная система гепатоцитов.
Keywords: lead intoxication, peroxide oxidation of tocopherol, üctivity of glutathione peroxidase, antiradical activity, antioxidative system of hepatocytes.
Соединения свинца известны своей высокой токсичностью. Индивидуальная восприимчивость к отравлению свинцом сильно различается, и одни и те же дозы свинца могут давать больший или меньший эффект для разных людей. По степени воздействия на живые организмы свинец отнесен к классу высокоопасных веществ наряду с мышьяком, кадмием, ртутью, селеном, цинком и фтором [2, с. 3-5]. Опасность свинца для человека определяется его значительной токсичностью и способностью накапливаться в организме. Большая часть свинца поступает с продуктами питания, а также с питьевой водой, атмосферным воздухом, при курении, при случайном попадании в пищевод кусочков свинецсодержащей краски или загрязненной свинцом почвы [1, с. 66-68]. В последнее время все чаще стали
36
выявляться негативные последствия воздействия свинца в концентрациях, ранее считавшихся безопасными.
Данная работа является частью фундаментальных исследований по разработке препаратов из корня солодки, восстанавливающих функции печени [3, 26-29].
Материалы и методы исследований.
Исследования проводились в лаборатории кафедры фармакологии, фармакотерапии и клинической фармакологии Южно-Казахстанской государственной фармацевтической академии.
В работе использовали половозрелых белых самцов беспородных крыс массой 150-200 г. Эксперимент произведен на 50 животных. В соответствии с поставленными задачами животные разбивались на две группы. Контрольную группу составили 20 самцов белых крыс, содержащихся на общем режиме вивария. Опытную группу составили 30 самцов белых крыс. Интоксикация животных проводилась 5 % раствором ацетата свинца путем его введения в желудок через зонд. Доза составила 1 мл/кг массы тела.
Величину скорости перекисного окисления токоферола в плазме и эритроцитах определяли модифицированными методами Шилиной К. Н. [8, с. 150-154] и Paglia D. E. [9, р. 158-169], активность глютатион - пероксидазы определили по изменению поглащения неокисленного глютатиона после инкубации глюкатиона с перекисью водорода.
Активность глютатион-редуктазы определили методами Seldak I. и Lindsay H. R. [10, р. 192-205] - скорость окисления НАДФН определили методом спектрофотометрии при длине волны 320 нм, с участием окисленного глютатиона.
Исследование сульфгидрильной SH - группы в плазме крови проводили методом спектрофотометрии.
Активность супероксидисмутазы в составе крови определили по методу Чумакова В.Н. [6, с.712-716]. Активность каталазы определяли способом Королюка М. А. [4, с. 16-19], общую антиокислительную и антирадикальную активность липидов установили методом Рудаковой-Шилиной Н. К. [5, с. 19-21].
Результаты и их обсуждение.
Водный раствор ацетата свинца в количестве 100 мг/кг веса вводились интрагастрально в животных в течение 10 дней. В результате отравления у животных наблюдался «гиперпероксидационный» синдром. Это один из основных патогенетических факторов разрушения клеток печени, а уточнение механизма его влияния является основной задачей исследования. Результаты исследования показаны в таблице 1.
Таблица 1. Состояние антиокислительной системы клеток печени животных инъекцированных ацетатом свинца
Показатели Группы
Контрольная группа Ацетат свинца (5% мг/кг массы)
Результат в % Результат в %
а-токоферол 47,1+1,7 100 36,6+2,1 р<0,05 77
SH - сульфгидрильная группа (мкмоль/г) 3,78+0,06 100 2,54+0,04 р<0,01 67,2
СОД (ед/кг) 56,4+2,3 100 32,6+0,3 р<0,05 57,8
Глютатион-пероксизада (мМ геМкг. мин) 27,4+0,5 100 16,4+0,43 добавить 59,8
Глютатион-редуктаза (мМ НАДФН/кг. мин) 11,6+0,7 100 5,9+0,17 р<0,01 50,8
Каталаза (ед /кг) 7,29+0,03 100 4,3+0,14 р<0,01 58,9
АОФ(ед) 34,1+2,3 100 22,3+0,01 р<0,01 65,4
АРА (ед) 57,3+2,2 100 38,4+1,9 р<0,01 67
Примечания: АРА - антирадикальная активность; АОА - антиоксидантная активность р - показатель погрешности
Наблюдалось снижение уровня альфа-токоферола, который является одним из антиокислительных факторов. Под влиянием ацетата свинца в гомогенате печени уровень природного антиоксиданта - витамина Е на 10-й день исследования снизился до 77 % по сравнению с контрольной группой, так что уровень снижения составил 23 %, по сравнению с исходным содержанием. Уровень содержания сульфгидрильной группы в гомогенате печени на 10-й день наблюдений составил 67,2 % по сравнению с тем же показателем у животных контрольной группы. Эти данные подтверждают и дополняют труд Шарипова О. К. [7, с. 113-116].
Активность супероксидисмутазы - основной энзим свободных радикальных процессов, уничтожающий радикалы супероксиданионы - под влиянием ацетата свинца на 10-й день опытов снизился на 42,8 %.
Активность глютатион-пероксидазы и глютатион-редуктазы - ферментов, контролирующих обмен глютатиона, в гомогенате печени крыс на 10 день наблюдений составил соответственно 59,8 % и 50,8 %. Значит уровень их снижения составил 40,2 % и 49,2 % по сравнению с контрольной группой.
На 10-й день опытов в гомогенате печени активность каталазы - фермента, разлагающего перекись водорода, составла 58,9 %. Это показатель ниже на 40,1 % чем соответствующий показатель у здоровых животных.
В гомогенате печени один из основных интегральных показателей антиокислительной системы - антирадикальная активность, в сравнении с контрольной группы, снизилась на 32 %, в то время как уровень антиокислительной активности крови снизился на 34,6 %.
Результаты показали, что под влиянием ацетата свинца:
1.Ускоряются процессы закиси свободно-радикальных липидов.
2.Снижаются активность и уровень энзимов и природных антиоксидантов гомогенате печени опытных животных.
Литература
1. Жукова Т. В. Адаптационные реакции организма как критерии регламентации химических загрязнений окружающей среды / Т. В. Жукова // Гигиена и санитария, 1997. — № 6. - С.66-68.
2. Измеров Н. Ф. Роль профилактической медицины в сохранении здоровья населения / Н. Ф. Измеров // Медицина труда и промышленная экология, 2000. -№ 1. - С.3-5.
3. Корганбаева З. С. Крргасынмен уыттану кезiнде кан жэне бауырдьщ закымдануына мия тамырынан алынган фитопрепараттардыц протекторлык; эсерш непздеу. //Автореф. Дисс.на соиск. кан. биол. наук. Алматы. - 2008. - 29с.
4. Королюк М. А., Иванова Л. М., Майрова М. Г., Токарев В. Е. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. - 1988. - № 1. - С. 16-19.
5. Рудакова-Шилина Н. К., Матюхова Н. П. Оценка антиоксидантной системы организма // Лабораторное дело. - 1982. - № 1. - С.19-21.
6. Чумаков В. Н., Осинская Л. Ф. Количественный метод определения активности цинк-медь-зависимой супероксиддисмутазы в биологическом материале // Вопр. мед. химии. - 1977. - № 5. - С. 712-716.
7. Шарипов К. О. Нарушение обмена липидов в печени при свинцовой интоксикации и его коррекция // Астана медициналык журналы. - 2000. - № 2. - С. 113-116.
8. Шилина К. Н., Чернавина Г. В. Соотношение показателей перекисного окисления липидов печени, плазмы и эритроцитов больных при недостаточности функции печени // Вопр. мед. химии. - 1980. - № 2. - С. 150-154.
9. Paglia D. E., Valentine W. N. Studies on the guantitative and gualitative characterization of erythrocyte glutathione peroxidase // J. Lab. Clin. Med. - 1967. - Vol. 70, N 1. -Р. 158-169.
10. SeldakI., Lindsay R. H. // Analyt. Biochem. - 1968. - Vol. 25. - P. 192-205.