CC BY
13
ИЗМЕНЕНИЯ НАНОСТРУКТУРЫ МЕМБРАН КРАСНЫХ КЛЕТОК КРОВИ ПРИ КРОВОПОТЕРЕ НА ЭТАПАХ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ У БОЛЬНЫХ ПРИ ОПЕРАЦИЯХ НА СПИННОМ МОЗГЕ
В. В. Мороз1, В. А. Сергунова1, Б. Ф. Назаров1, Е. К. Козлова1, А. М. Черныш1, И. Б. Власов2
1 НИИ общей реаниматологии им. В. А. Неговского РАМН, Москва 2 Городская станция переливания крови, Москва
Changes in the Nanostructure of Red Blood Cells in Intraoperative Blood Loss during Spinal Cord Surgery
V. V. Moroz1, V. A. Sergunova1, B. F. Nazarov1, E. K. Kozlova1, A. M. Chemysh1, I. B. Vlasov2
V. A. Negovsky Research Institute of General Reanimatology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow
2 City Blood Transfusion Station, Moscow
Цель работы — показать изменения наноструктуры мембран эритроцитов при кровопотере в ходе хирургических операций на спинном мозге. Материал и методы. В исследование были включены 17 больных, оперированных в центре нейрохирургии Городской клинической больницы №19 по поводу заболеваний спинного мозга. Обследовали три группы больных: первая группа с кровопотерей до 300 мл, вторая группа с кровопотерей 600±200 мл, и третья группа c кровопо-терей 1500±200 мл. Изображения фрагментов структуры поверхности мембран эритроцитов получали с помощью атомного силового микроскопа (NT-MDT). Результаты. В работе представлена динамика изменения параметров hi для трех указанных групп больных. Через сутки после операции, у всех больных возрастала высота первого порядка h1. Показано, что в каждой из указанных групп динамика параметров h1, h2, h3 имела характерные особенности. В первой группе максимально возрастал второй порядок на первые сутки и первый порядок на третьи сутки. Во второй группе на первые сутки максимально возрастал первый порядок, в третьей группе отмечено возрастание всех трех порядков на третьи сутки. В первой и второй группе к пятым суткам параметры наноструктуры были близки к контролю, а при кровопотере 1500±200 мл на пятые сутки параметр hi в пять раз выше контроля. Выводы. При кровопотере в результате хирургических операций на спинном мозге в организме происходят изменения, которые непосредственно влияют на красные клетки крови. При кровопотере до 600±200 мл в 1—3-и сутки после операции параметры наноструктуры эритроцитов были изменены. К 5-м суткам эти изменения снижались до величин близких к контрольным. При кровопотере более 1500±200 мл такого снижения не наблюдали. Ключевые слова: кровопотеря, мембрана эритроцита, атомная силовая микроскопия.
Objective: to study impairments in the nanostructure of red blood cells in blood loss during spinal cord surgery. Subjects and methods. The study enrolled 17 patients operated on at the Center of Neurosurgery, City Clinical Hospital Nineteen, for spinal cord pathology. Examinations were made in 3 patient groups: 1) a blood loss of less than 300 ml; 2) 600±200 ml; 3) 1500±200 ml. Images of fragments of the surface structure of red blood cell membranes were obtained using an atomic force microscope (NT-MDT). Results. The study showed the time course of changes in the index hj for the three patient groups. 24 hours after surgery, the first-order height h4 increased in all the patients. The time course of changes in ht, h2, and h3 was shown to have distinguishing characteristics in each of the above groups. In Group 1, the second- and first-order heights maximally rose on days 1 and 3, respectively. In Group 2, the first-order height maximally increased on day 1; in Group 3, there was a rise in all three orders on day 3. In Groups 1 and 2, the values of the nanostructure were close to the control ones on day 5 and in the 1500±200-ml blood loss group, hi was 5 times greater than the control on the same day. Conclusion. Spinal cord surgical blood losses give rise to systemic changes that directly affect red blood cells: they alter their membrane nanostructure, shape, and size. The membrane flicker increases and the characteristics of the spectrin matrix and aggregation of protein clusters change. Key words: blood loss, red blood cell membrane, atomic force microscopy.
Во многих работах показано, что наноструктура мембран влияет на жесткость эритроцита, а следовательно на реологические свойства в целом. Поэтому изучение наноструктуры мембраны красных клеток крови при оперативных вмешательствах, которые со-
Адрес для корреспонденции (Correspondence to):
Черныш Александр Михайлович (Chernush A. M.) E-mail: amchernysh@mail.ru
провождаются кровопотерями, является одной из актуальных задач реаниматологии [1—5].
Красные клетки крови представляют особый интерес в качестве объекта исследования, так как именно они определяют газотранспортную функцию крови. Хирургические вмешательства при операциях на спинном мозге часто сопровождаются кровопотерями, приводящими к изменениям функционального состояния циркулирующей крови и нарушениям структуры эритроцитов. В свою очередь, изменения структурных
свойств эритроцитов могут приводить к нарушению реологических свойств крови, ухудшающих качество периферического кровотока [6, 7].
Основным показателем функционирования эритроцита является стабильность наноструктуры мембраны на всех уровнях ее организации. Острые кровопоте-ри при хирургических вмешательствах могут вызывать гипоксию. Гипоксия, в свою очередь, инициирует окислительные процессы в крови, которые являются причиной нарушений наноструктуры мембраны красных клеток крови [6—10].
Нарушения наноструктуры мембран, как правило, вызывают изменения функций эритроцитов [11, 12]. Наиболее универсальным и информативным методом изучения наноструктуры мембраны является метод сканирующей зондовой микроскопии, в частности атомной силовой микроскопии (АСМ) [13—16]. Этот метод позволяет регистрировать наноструктурные параметры мембраны в широком диапазоне ее изменений — от микрона до долей нанометров. АСМ дает возможность обнаружить морфологические изменения при заболеваниях [18], при острой кровопотере [17] и при различных физико-химических воздействиях [13].
Цель данной работы — показать изменения наноструктуры мембран эритроцитов при кровопотере в ходе хирургических операций на спинном мозге.
Материал и методы
В исследование были включены 17 пациентов, оперированных в центре нейрохирургии Городской клинической больницы №19 по поводу патологии спинного мозга. Все они дали добровольное согласие на исследование своей крови, проводимое в соответствии с нормами этической комиссии НИИОР. Обследовали три группы больных: первая группа с кровопотерей до 300 мл, вторая группа с кровопотерей 600±200 мл, и третья группа c кровопотерей 1500±200 мл. В первую группу вошло 6 пациентов, во вторую группу — 6 пациентов и в третью группу — 4 пациента.
Больным первой группы оперативное вмешательство выполняли по поводу грыжи дисков поясничного отдела с элементами стабилизации. Во вторую группу вошли пациенты, перенесшие реконструктивные операции по поводу остеохондроза поясничного отдела (удаление грыжи). В третьей группе были пациенты, которым проводили операции по поводу травматической болезни спинного мозга со стабилизацией металлоконструкцией. Пациенту В. из этой группы проводилась гемотрансфузия (эритроцитарная масса — 300 мл, свежезамороженная плазма — 300 мл).
Забор крови для исследования эритроцитов методом АСМ проводили в контрольной группе и у больных на 1-е, 3-и и 5-е сутки после операции. Сразу после забора 10 мкл цельной крови наносили на предметное стекло и приготавливали монослой эритроцитов с помощью прибора «V-sampler, Vision Microscopy» (Австрия).
Изображения эритроцитов получали с помощью атомного силового микроскопа «NTEGRA Prima» (NT-MDT, Россия) в полуконтактном режиме. В качестве зондов использовали кан-тилеверы NSG01-A. Число точек сканирования 512 и 1024, поля сканирования 100X100 мкм, 10X10 мкм. Для каждого отдельного исследования анализировали не менее 100 клеток.
Количественные оценки изменений наноструктуры мембран получены с помощью пространственного преобразования Фурье [13]. Для каждой группы строили изображения фрагментов поверхностей мембран трех порядков, измеряли прост-
Рис. 1. Измененные дискоциты (а, б) в поле атомного силового микроскопа у хирургических больных после операции, (в) профиль дискоцита с большой сквозной порой.
ранственные периоды Li и высоты hi для каждого порядка данной клетки. Методика разложения поверхности мембраны на три порядка подробно описана нами ранее [6, 19]. Строили круговые диаграммы статистического распределения по форме и по размеру клеток, проводили интервальную оценку ошибок измерений. Математическую обработку данных проводили с помощью программного обеспечения «Origin».
Результаты и обсуждение
У здорового человека основную массу составляют эритроциты двояковогнутой формы — дискоциты (80—90%). В норме диаметр эритроцита составляет 7500±500 нм. Максимальная высота тора дискоцита в монослое — 1500 нм, высота впадины — 420 нм.
На рис. 1 представлены эритроциты с локальными дефектами, которые встречались у больных на отдельных этапах хирургического лечения. В ряде клеток форма эритроцита не изменялась, но на поверхности их мембран наблюдали рыхлые домены (рис. 1, а). На других клетках глубина впадины (рис. 1, б) достигала 700 нм и практически образовывала крупную сквозную пору в мембране. Это показано на профиле такой клетки на рис. 1, в. Морфология клеток также изменялась. Наблюдали дискоциты, близкие по форме к контрольным, плоские («надутые») клетки, эхиноциты различной выраженности и клетки с большими сквозными порами.
Для оценки изменений наноразмерных параметров мембраны выделяли три разных уровня (порядка) параметров исходного состояния мембраны. Высоты каждого порядка количественно характеризовали дефекты мембран каждой клетки.
На рисунке 2 представлены гистограммы типичных репрезентативных представителей трех групп — трех больных первой группы (пациент А — 54 года, мужского пола), второй группы (пациент Б — 32 года
мужского пола) и третьей группы (пациент В — 22 года мужского пола из III группы) в первый, третий и пятый дни наблюдений (p<0,05).
Ранее в наших работах показано, что состояние наноструктуры мембраны эритроцитов определяется в большой степени процессами гипоксии, кровопотерей и последующей реинфузией [6, 18, 19]
В качестве контроля использовали параметры наноповерхности эритроцитов больных до операции.
В первой группе пациентов в первый день наблюдений высота первого порядка h1 увеличилась по отношению к контролю в 3 раза, высота второго порядка в 2 раза, высота третьего порядка оставалась на уровне контроля. В третий день наблюдений высота h; увеличивалась в 5 раз. Высоты второго и третьего порядков оставались на уровне контроля. На пятый день h1 снизилась по отношению к первому и третьему дню, но оставалась увеличенной по отношению к контролю в 2 раза.
Во второй группе пациентов высота h1 в первый день наблюдений увеличилась по отношению к контро-
Рис. 2. Динамика изменения наноструктуры поверхности мембраны эритроцитов хирургических больных после операции. Усреднение происходило по 10 клеткам одного больного.
I группа пациент А; II группа пациент Б; III группа пациент В.
Рис. 3. Статистическое распределение формы клеток у хирургических больных I группы на третьи сутки наблюдения.
а — дискоцит; б — глубокий дискоцит; в — плоская клетка; г — эхиноцит.
лю в 9 раз, высота второго и третьего порядка оставались на уровне контроля. В третий день снизилась по отношению к первому дню, но оставалась увеличенной по отношению к контролю в 7 раз. На пятый день высота первого порядка снизилась по отношению к первому и третьему дню, но оставалась увеличенной по отношению к контролю в 3 раза.
В третьей группе пациентов, перенесших кровопо-терю 1500±200 мл в первый день после операции высота увеличилась по отношению к контролю в 3 раза, высота второго и третьего порядка оставались на уровне контроля. В третий день высота первого порядка оставалась увеличенной по отношению к контролю в 3 раза. На пятый день Ь1 увеличилась по отношению к контролю в 5 раз.
Через сутки после операции, у всех больных возрастала высота первого порядка Ь1. Наибольший рост высоты первого порядка наблюдался у пациентов второй группы (средняя кровопотеря). К пятым суткам у больных первой и второй группы высота первого порядка стремилась к контролю, а высота первого порядка у третьей группы оставалась увеличенной по отношению к контролю в 5 раз.
В контроле до операции 75±7% клеток — дискоци-ты, а 25±5% — клетки с глубокой впадиной.
После операции наблюдалось изменение формы клеток (рис. 3). В первый день после операции у боль-
ных первой группы в монослое преобладали дискоциты - 73±8%. В третий день наблюдали как дискоциты (рис. 3, а), так и дискоциты с глубокой впадиной (рис. 3, б), а также эхиноциты (рис. 3, в) и плоские эритроциты (рис. 3, г). На пятый день в монослое преобладали уже только дискоциты — 90±5% с небольшим количеством эхиноцитов — 10±4%.
У больных второй группы в первый день преобладали дискоциты — 76±5%. Дискоциты с глубокой впадиной составили 10±3%, эхиноциты 13±7%. В третий и пятый день в монослое преобладали дискоциты 94±6%.
В первый день у исследуемых больных с максимальной кровопотерей преобладали дискоциты — 61±10%, дискоциты с глубокой впадиной составили 39±7%. В третий день после операции в монослое преобладали дискоциты — 54±4%, количество плоских клеток составило 37±8%, эритроциты с дефектами — 5±1%, и по 2±1% эхиноцитов и дискоцитов с глубокой впадиной.
Количество дискоцитов у пациентов в первой и второй группах к пятым суткам приближалось к контрольным значениям. У больных с максимальной кровопотерей третьей группы за тот же период количество дискоцитов уменьшилось в два раза по отношению к контролю.
На рис. 4, а представлено изображение красных клеток крови в поле АСМ 100X100 мкм. На этом изображении показаны различные размеры эритроцитов в одной и той же пробе.
Рис. 4. Статистическое распределение красных клеток крови по размеру.
а — АСМ изображение эритроцитов; б — динамика распределения эритроцитов на этапах хирургического лечения со средней кровопотерей. I — нормациты (7—8 мкм); II — макроциты (> 8 мкм); III — микроциты (< 7 мкм). * — р<0,05 по сравнению с контролем.
Статистическое распределение красных клеток крови по размеру после операций было следующим: при операциях с кровопотерей до 300 мл у больных в первый день наблюдалось 60±13% эритроцитов нормального размера — 7,5 мкм, 31±8% — большего размера (>8 мкм) и 10±4% меньшего размера (<6 мкм). На третий и на пятый день тенденция не изменилась.
У больных с кровопотерей 600±200 мл (рис. 4, б) в первый день после операции наблюдалось 58±7% эритроцитов нормального размера, 28±7% — большего размера и 14±6% — меньшего размера. На третьи сутки наблюдалось 71 ± 16% больших и 29±14% нормальных клеток. На пятые сутки наблюдения нормальных клеток стало 80±5%, больших 16±7% и меньших 4±1%.
У больных с кровопотерей 1500±200 мл в первый день после операции наблюдалось 57±7% эритроцитов нормального размера, 36±8% меньшего размера и 7±3% большего размера. На третьи сутки количество нормальных клеток практически не изменилось и составило 53±5%. Увеличилось количество больших клеток до 30±7%, а меньших уменьшилось до 17±5%. На пятые сутки нормальных клеток стало 78±4%, больших — 8±3% и меньших — 14±7%.
Рис. 5. Изображение фрагмента мембраны в поле 2400X2400 нм пациента с массивной кровопотерей (а) и ее профиль (б).
Стрелки указывают места локальных дефектов.
Кровопотеря вызывала изменения на поверхности наноструктуры мембран эритроцитов. Наибольшие изменения были характерны для высот I порядка во всех наблюдаемых случаях. Эти изменения определяются колебаниями поверхности мембран, называемыми «flickering» [20]. Пространственный период и высоты таких колебаний имели величины L1 — 1000 нм±200; hj — 12±5 нм.
У пациентов третьей группы на третий день после операции h2 превышала контроль в 4 раза. Это, наиболее вероятно, связано с нарушением структуры спектрино-вого матрикса. Такое предположение основано на том, что величина пространственного периода L2 соизмерима с ячейкой спектриновой сетки — 100 нм. Такая корреляция была подробно показана в нашей работе [13, 21].
В третьей группе на третьи сутки наблюдения высота третьего порядка превышала контроль в 16 раз. Этот редкий рост, вероятно, возник в результате фликкера мембраны на агрегацию белковых кластеров band 3 [22]. Произошло изменение тонких наноструктур мембраны эритроцита. Их размер не превышал 60±12 нм. На рисунке 5, а представлен фрагмент мембраны эритроцита с дефектами III порядка (стрелки) в формате 3D, а на рис. 5, б показан профиль этих дефектов. Эти изменения наноструктуры мембраны у пациентов III группы вероятно связаны
с агрегацией протеиновых кластеров band 4.3 и band 3. В работе [21] показано, что изменение наноструктур мембраны третьего порядка коррелирует с кластерами протеинов band 3 и band 4.3. Такая кластеризация и стала причиной столь больших изменений значения h3.
Заключение
При кровопотере в результате хирургических операций на спинном мозге в организме происходят системные изменения, которые непосредственно влияют на красные клетки крови: изменения нано-
Литература
1. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования. Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1995; 81 (6): 122-129.
2. Котовская Ю.В. Метаболический синдром: прогностическое значение и современные подходы к комплексной терапии. Сердце. 2005; 4 (5): 236-241.
3. Ройтберг Г.Е. (ред.). Метаболический синдром. М.: МЕДпресс-ин-форм; 2007.
4. Шилов А.М., Мельник М.В. Артериальная гипертония и реологические свойства крови. М.: БАРС; 2005.
5. Мороз В.В., Кирсанова А.К., Новодержкина И.С., Александрин В.В., Назарова Г.А. Мембранопротекторное действие перфторана на эритроциты при острой кровопотере (экспериментальное исследование). Общая реаниматология. 2011; 7 (1): 5—10.
6. Мороз В.В., Черныш А.М., Козлова Е.К., Кирсанова А.К., Новодержкина И.С., Александрин В.В., Борщеговская П.Ю., Близнюк У.А., Ры-саева Р.М. Атомная силовая микроскопия структуры мембран эритроцитов при острой кровопотере и реинфузии. Общая реаниматология. 2009; 5 (5): 5—9.
7. Мороз В.В., Голубев А.М., Афанасьев А.В., Кузовлев А.Н., Сергуно-ва В.А., Гудкова О.Е., Черныш А.М. Строение и функция эритроцита в норме и при критических состояниях. Общая реаниматология. 2012; 8 (1): 52—60.
8. Skoumalovä A., Herget J., Wilhelm J. Hypercapnia protects erythrocytes against free radical damage induced by hypoxia in exposed rats. Cell Biochem. Funct. 2008; 26 (7): 801—807.
9. Girotti A.W., Thomas J.P. Damaging effects of oxygen radicals on resealed erythrocyte ghosts. J. Biol. Chem. 1984; 259 (3): 1744—1752.
10. Мороз В.В., Голубев А.М., Черныш А.М., Козлова Е.К., Васильев В.Ю., Гудкова О.Е., Сергунова ВА., Федорова М.С. Изменения структуры поверхности мембран эритроцитов при длительном хранении донорской крови. Общая реаниматология. 2012; 8 (1): 5—12.
11. TUrrini F., Mannu F., Arese P., Yuan J., Low P.S. Characterization of the autologous antibodies that opsonize erythrocytes. Blood. 1993; 81 (11): 3146—3152.
12. DAgostino P.D., Colomb D.G.Jr., DeanJ.B. Effects of hyperbaric gases on membrane nanostructure and function in neurons. J. Appl. Physiol. 2008; 106 (3): 996—1003.
13. Moroz V.V., ChernyshA.M., KozlovaE.K., BorshegovskayaP.Y., Bliznyuk U.A., Rysaeva R.M., Gudkova O.Y. Comparison of red blood cell membrane microstructure after different physicochemical influences: Atomic force microscope research.J. Crit. Care. 2010; 25 (3): 1—12.
14. Ji XL, Ma Y.M., Yin T., Shen M.S., Xu X., Guan W. Application of atomic force microscopy in blood research. World J. Gastroenterol. 2005; 11 (11): 1709—1711.
15. Girasole M, Cricenti A., Generosi R., Congiu-Castellano A., Boffi F., Arcovito A., Boumis G., Amiconi G. Atomic force microscopy study of erythrocyte shape and membrane structure after treatment with a dihy-dropyridinic drug. Appl. Phys. Lett. 2000; 76: 3650—3652.
16. Betz T, Bakowsky U., Müller M.R., Lehr C.M., Bernhardt I. Conformational change of membrane proteins leads to shape changes of red blood cells. Bioelectrochemistry. 2007; 70 (1): 122—126.
17. Zhang Y, Zhang W, Wang S., Wang C., Xie J., Chen X., Xu Y., Mao P. Detection of erythrocytes in patients with multiple myeloma using atomic force microscopy. Scanning. 2012; 34 (5): 295—301.
18. Мороз В.В., Черныш А.М., Козлова Е.К., Сергунова В.А., Гудкова О.Е., Федорова М.С., Кирсанова А.К., Новодержкина И.С. Нарушение наноструктуры мембран эритроцитов при острой кровопотере и их
структуры мембраны эритроцитов, формы клеток и их размера.
В данной работе рассмотрены изменения наноструктуры мембраны эритроцитов у больных, перенесших операции, сопровождающиеся кровопотерей различной степени. В работе анализируются нарушения поверхности мембраны с помощью атомного силового микроскопа. Показано, что при малых и средних объемах кровопотерь показатели наноструктуры мембраны стремятся к контрольным значениям к пятому дню после операции. При больших кровопотерях наибольшие нарушения в наноструктуре мембран красных клеток крови наблюдаются на третьи сутки после операции.
коррекция перфторуглеродной эмульсией. Общая реаниматология. 2011; 7 (2): 5—9.
19. Черныш А.М., Козлова Е.К., Мороз В.В., Борщеговская П.Ю., Близнюк У.А., Рысаева Р.М. Поверхность мембран эритроцитов при калиброванной электропорации: исследование методом атомной силовой микроскопии. Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2009; 148 (9): 347—352.
20. Park Y., Best C.A., Auth T., Gov N.S., Safran S.A., Popescu G., Suresh S., Feld M.S. Metabolic remodeling of the human red blood cell membrane. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010; 107 (4): 1289—1294.
21. Kozlova E., Chernysh A., Moroz V., Sergunova V., Gudkova O., Fedorova M., Kuzovlev A. Opposite effects of electroporation of red blood cell membranes under the influence of zinc ions. Acta Bioeng. Biomech. 2012; 14 (1): 3—13.
22. Кононенко ВЛ. Фликкер эритроцитов. 2. Результаты экспериментальных исследований. Биол. мембраны. 2009; 26 (6): 451—467.
References
1. Katyukhin L.N. Reologicheskie svoistva eritrotsitov. Sovremennye metody issledovaniya. [Red blood cell rheological properties. Current studies]. Rossiisky Fiziologichesky Zhurnal im. I.M. Sechenova. 1995; 81 (6): 122—129. [In Russ.]
2. Kotovskaya Yu.V. Metabolichesky sindrom: prognosticheskoe znachenie i sovremennye podkhody k kompleksnoi terapii. [Metabolic syndrome: prognostic value and current approaches to complex therapy]. Serdtse. 2005; 4 (5): 236—241. [In Russ.]
3. Roitberg G.E. (ed.). Metabolichesky sindrom. [Metabolic syndrome]. Moscow: MEDpress-inform; 2007. [In Russ.]
4. Shilov A.M., Melnik M.V. Arterialnaya gipertoniya i reologicheskie svoistva krovi. [Arterial hypertension and blood rheological properties]. Moscow: BARS; 2005. [In Russ.]
5. Moroz V.V., Kirsanova A.K., Novoderzhkina I.S., Aleksandrin V.V., Nazarova G.A. Membranoprotektornoe deistvie perftorana na eritrotsity pri ostroi krovopotere (eksperimentalnoe issledovanie). [Membrane-protecting effects of perfluorane on red blood cells in acute blood loss (an experimental study)]. Obshchaya Reanimatologiya. 2011; 7 (1): 5—10. [In Russ.]
6. Moroz V.V., Chernysh A.M., Kozlova Ye.K., Kirsanova A.K., NovoderzhkinaI.S., Aleksandrin V.V.,BorshchegovskayaP.Yu., Bliznyuk UA., Rysaeva R.M. Atomnaya silovaya mikroskopiya struktury membran eritrotsitov pri ostroi krovopotere i reinfuzii. [Atomic force microscopy of the structure of red blood cell membranes in acute blood loss and reinfusion]. Obshchaya Reanimatologiya. 2009; 5 (5): 5—9. [In Russ.]
7. Moroz V.V., Golubev A.M., Afanasyev A.V., Kuzovlev A.N., Sergunova V.A., Gudkova O.E., Chernysh A.M. Stroenie i funktsiya eritrotsita v norme i pri kriticheskikh sostoyaniyakh. [The structure and function of a red blood cell in health and critical conditions]. Obshchaya Reanimatologiya. 2012; 8 (1): 52—60. [In Russ.]
8. Skoumalova A., Herget J., WilhelmJ. Hypercapnia protects erythrocytes against free radical damage induced by hypoxia in exposed rats. Cell Biochem. Funct. 2008; 26 (7): 801—807.
9. Girotti A.W., Thomas J.P. Damaging effects of oxygen radicals on resealed erythrocyte ghosts. J. Biol. Chem. 1984; 259 (3): 1744—1752.
10. Moroz V.V., Golubev A.M., Chernysh A.M., Kozlova E.K., Vasilyev V.Yu., Gudkova O.E., Sergunova V.A., Fedorova M.S. Izmeneniya struktury poverkhnosti membran eritrotsitov pri dlitelnom khranenii donorskoi krovi. [Structural changes in the surface of red blood cell membranes during long-term donor blood storage]. Obshchaya Reanimatologiya. 2012; 8 (1): 5—12. [In Russ.]
11. Turrini F., Mannu F., Arese P., Yuan J., Low P.S. Characterization of the autologous antibodies that opsonize erythrocytes. Blood. 1993; 81 (11): 3146—3152.
12. D'Agostino P.D., Colomb D.G.Jr.., DeanJ.B. Effects of hyperbaric gases on membrane nanostructure and function in neurons. J. Appl. Physiol. 2008; 106 (3): 996-1003.
13. Moroz V.V., Chernysh A.M., Kozlova E.K., Borshegovskaya P.Y., Bliznyuk U.A., RysaevaR.M., Gudkova O.Y. Comparison of red blood cell membrane microstructure after different physicochemical influences: Atomic force microscope research.J. Crit. Care. 2010; 25 (3): 1 — 12.
14. Ji X.L., Ma Y.M., Yin T., Shen M.S., Xu X., Guan W. Application of atomic force microscopy in blood research. World J. Gastroenterol. 2005; 11 (11): 1709—1711.
15. Girasole M, Cricenti A., Generosi R., Congiu-Castellano A., Boffi F., Arcovito A., Boumis G., Amiconi G. Atomic force microscopy study of erythrocyte shape and membrane structure after treatment with a dihy-dropyridinic drug. Appl. Phys. Lett. 2000; 76: 3650—3652.
16. Betz T., Bakowsky U., Müller M.R., Lehr C.M., Bernhardt I. Conformational change of membrane proteins leads to shape changes of red blood cells. Bioelectrochemistry. 2007; 70 (1): 122—126.
17. Zhang Y., Zhang W., Wang S., Wang C., Xie J., Chen X., Xu Y., Mao P. Detection of erythrocytes in patients with multiple myeloma using atomic force microscopy. Scanning. 2012; 34 (5): 295—301.
18. Moroz V.V., Chernysh A.M., Kozlova E.K., Sergunova V.A., Gudkova O.E., Fedorova M.S., Kirsanova A.K., Novoderzhkina I.S. Narushenie nanos-
truktury membran eritrotsitov pri ostroi krovopotere i ikh korrektsiya perftoruglerodnoi emulsiei. [Nanostructure of red blood cell membranes in acute blood loss and their correction with perfluorocarbon emulsion]. Obshchaya Reanimatologiya. 2011; 7 (2): 5—9. [In Russ.]
19. Chernysh A.M., Kozlova E.K., Moroz V.V., Borshchegovskaya P.Yu., Bliznyuk U.A., Rysayeva R.M. Poverkhnost membran eritrotsitov pri kalibrovannoi elektroporatsii: issledovanie metodom atomnoi silovoi mikroskopii. [Surface of red blood cell membranes during calibrated electroporation: atomic force microscopy examination]. Byulleten EksperimentalnoiBiologii iMeditsiny. 2009; 148 (9): 347—352. [In Russ.]
20. Park Y., Best C.A., Auth T., Gov N.S., Safran S.A., Popescu G., Suresh S., Feld M.S. Metabolic remodeling of the human red blood cell membrane. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010; 107 (4): 1289—1294.
21. Kozlova E., Chernysh A., Moroz V., Sergunova V., Gudkova O., Fedorova M., Kuzovlev A. Opposite effects of electroporation of red blood cell membranes under the influence of zinc ions. Acta Bioeng. Biomech. 2012; 14 (1): 3—13.
22. Rononenko V.L. Flikker eritrotsitov. 2. Rezultaty eksperimentalnykh issledovanii. [Red blood cell flicker. 2. Results of experimental studies]. Biologicheskie Membrany. 2009; 26 (6): 451—467. [In Russ.]
Поступила 21.06.12
КАЛЕНДАРЬ НАУЧНЫХ КОНГРЕССОВ, КОНФЕРЕНЦИЙ,
СИМПОЗИУМОВ, ШКОЛ, СЕМИНАРОВ В 2013 гг.
13—15 мая, Геленджик, Россия
XII Всероссийская научно-методическая конференция 1—4 июня, Barcelona, Spain
с международным участием Euroanaesthesia 2013
«Стандарты и индивидуальные подходы www.euroanaesthesia.org
в анестезиологии и реаниматологии»
www.kubanesth.narod.ru июнь, Москва, Россия
X Научно-практическая конференция
22—24 мая, Москва, Россия «Безопасность больного
XIII Международный конгресс по антимикробной в анестезиологии — реаниматологии»
терапии MAKMAX/ESCMID www.infomedfarmdialog.ru
www.antibiotic.ru
20—21 июня, Архангельск, Россия
23—25 мая V Беломорский симпозиум
Obstetric Anaesthesia 2013 www.anesth.ru/Belomorski 2013.pdf
www.oaa-anaes.ac.uk
27—29 июня, Иркутск, Россия
24—25 мая, Москва, Россия X Байкальский конгресс
II Международный Симпозиум по Нейрореанимации «Актуальные проблемы анестезиологии
(НИИ нейрохирургии им. Н. Н. Бурденко) и реаниматологии»
www.nsicu.ru
Дополнительная информация:
май, Одесса, Украина http://www.researchraven.com/conferences/
«Анестезия и интенсивная терапия category/acute-care.aspx
в акушерстве и гинекологии»
www.anest-cfo.ru
