CC BY
15ИЗМЕНЕНИЯ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА СТЕНОК КИШКИ ПРИ ДЕГИДРАТАЦИИ
Гусейнов Тагир Сайуллахович
доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой анатомии
человека
Гусейнова Сабина Тагировна
доктор медицинских наук, профессор, кафедра анатомии человека Дагестанский государственный медицинский университет
Изучение тучных клеток (ТК) и клеток рыхлой соединительной ткани тонкой кишки при дегидратации 3,6,10 суток обезвоживания.
На более 40 белых крысах исследовали морфологические, цитологические и гистологические особенности ТК стенок тонкой кишки при дегидратации в динамике от 3,6,10 суток.
При дегидратации 3 суток возрастает количество ТК в процентном соотношении в стенках тонкой кишки, а с 6 и 10 суток их содержание уменьшается. Такие же клеточные сдвиги наблюдаются в отношении и других клетоклимфоидного ряда.
Экстремальные факторы, как дегидратация, тормозят развитие и дифференцировку ТК и лимфоцитов в периферических органах лимфоцитопоэза.
Ключевые слова: тонкая кишка, белая крыса, тучные клетки (ТК), клеточный состав.
CHANGES IN THE CELLULAR COMPOSITION OF THE INTESTINAL WALLS DURING DEHYDRA TION
Study of TC of loose connective tissue of internal organs during dehydration 3,6,10 days of dehydration.
No more than 40 white rats were examined morphological, cytological and histological features of small intestine walls TC during dehydration in dynamics from 3,6,10 days.
With dehydration for 3 days, the amount of TC increases as a percentage in the walls of the small intestine, and from 6 and 10 days their content decreases. The same cellular shifts are observed in relation to other cells of the lymphoid series.
Extreme factors, such as dehydration, inhibit the development and differentiation of T ^nd lymphocytes in the peripheral organs of lymphocytopoiesis.
Keyword: small intestine, white rat, fat cells (TC), cellular composition.
DOI: 10.24411/2181-0443/2020-10021
Введение. Тучные клетки в кооперации с другими клетками (макрофаги, лимфоциты, плазмоциды и т.д.) играют значительное место в морфологии и физиологии тонкой кишки в условиях нормы, патологии ивоздействии экологических факторов.
Целью исследования является выяснение особенностей морфологии ТК при воздействии дегидратации на 3,6,10 сутки в оболочках стенок тонкой кишки и в ее лимфоидных узлах тонкой кишки.
Методика исследования. Опыты проведены на 40 половозрелых белых крысах по 4 сериям:
1) контрольные - 10 животных; 2) дегидратация 3 суток - 10 крыс; 3) дегидратация 6 суток - 10 крыс; 4) дегидратация 10 суток - 10 крыс.
Использованы гистологические, цитологические, морфометрические и медико-биологические статистические методы научных исследований.
Гистологические срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилин-эозином, азур П-эозином, пиронин - зеленым, азур - нитрофунгин-фуксином и гематоксилином, по Романовскому -Гимза, по Ван Гизон и Курнику (для выявления клеток, насыщенных нуклеиновыми клетками (лимфобластов)). Для выявления
аргирофильных волокон срезы окрашивали азотнокислым серебром по Футу, окраска коллагеновых волокон по Маллори. Окраска ТК толуидиновым синим в буферном растворе с рН=3,0.
Размеры морфологических и цитологических структур, их площади, плотности лимфатического русла и звеньев микрогемоциркуляторного русла модуля определяли с использованием аппаратно-программного комплекса "Мекос-Ц1" (Москва), производства ЗАО "Медицинские компьютерные системы".
Методы исследования. Для выполнения задач нашего исследования мы использовали микроскопические и макроскопические методы. После эвтанации животных и изъятия препаратов, часть материала окрашивали по Хельман (1934)для изучения лимфоидных узелков в стенке тонкой кишки. Для гистологического изучения лимфоидной ткани тонкой кишки материал фиксировали в 10% нейтральном формалине, спирт-формоле, жидкостях Карнуа и Буэна. После проведения материала по спиртам возрастающей концентрации кусочки тонкой кишки заливали в парафин. Затем на санном микротоме изготовлялись гистологические срезы толщиной 5-7мкм, которые окрашивали гематоксилин-эозином, азур-нитрофунгин-фуксином и гематоксилином по Т.С.Гусейнову, по Романовскому-Гимза (в модификации 1,2), поВан-Гизон и Курнику (для выявления клеток, насыщенных нуклеиновыми клетками(лимфобластов). Для выявления аргирофильных волокон срезы окрашивали азотнокислым серебром по Футу; окраска коллагеновых волокон проведена по Маллори.
Проводили следующие морфометрические исследования. На гистологических препаратах разных отделов тонкой кишки проведен подсчет размеров относительной площади структурных компонентов стенок тонкой кишки: слизистой оболочки, подслизистой основы, мышечной и серозной оболочек, размеров лимфоидных узелков с центрами и без центров размножения, лимфоидной ткани.
Исследовали количество лимфоидных узелков с герминативным центром и без такого центра в стенках тонкой кишки у интактных и экспериментальных животных.
Измеряли высоту и ширину лимфоидных узелков с герминативными центрами во всех частях тонкой кишки (в мкм).
Подсчет клеточного состава лимфоидных структур тонкой кишки (в лимфоидных узелках без герминативного центра, в мантии и герминативных центрах и в межузелковой зоне) осуществлялся на единице площади гистологического среза (880 мкм.кв) с помощью морфометрической сетки А.А.Глаголева в модифиации С.Б. Стефанова (1974). Определяли абсолютное
и относительное содержание разных видов клеток (в процентах) в стенках тонкой кишки.
Изучение микротопографии лимфоидных образований в стенке тонкой кишки, толщина ее слоев проведено с использованием микроскопа МБР-1 при увеличении: окуляр-1 Ох. объектив -8,40.
Статистическую обработку морфометрических и цитологических данных проводили с использованием компьютера Pentium-Ill. Статистическая обработка материалов проведена по СтенонГланц по программе Вю81а1Ехс«Медико-биологическая статистика» (1999) и А.Н.Герасимову (2007) на компьютерах PentiumIII (windows), с вычислениями параметрических и непараметрических статистических критериев.
После проведения обезвоживания и других процедур крыс забивали декапитацией под тиопенталовым наркозом. Когда забивали крыс учитывали
биоритмы лимфоидной ткани и поэтому забивали в одно и то же время суток -11 часов. С целью выяснения локальных морфологических особенностей реакций на дегидратацию выбраны различные участки тонкой кишки на всем протяжении.
Тонкая кишка является важнейшей и центральной частью пищеварительной системы, обеспечивающей организм животных и человека многочисленными функциями.
Выбор тонкой кишки для экспериментирования объясняется частотой ее поражения (энтериты, интоксикации, диарея, дегидратация и т.д.) и многочисленными функциями в организме и участие в водном обмене.
Основным органом пищеварения является тонкая кишка, где почти полностью завершается переваривание и всасывание экзогенных пищевых субстратов. Хотя тонкая кишка выполняет целый ряд различных функций, среди которых можно выделить метаболическую, секреторную, транспортную, эвакуаторную, депонирующую, гормональную, однако все они в той или иной степени обеспечения и всасывания нутриентов. Являясь связывающим звеном между организмом и внешней средой, тонкая кишка выполняет не только пищеварительную и транспортную, но и защитную, иммунную функции и участие в гидрологическом балансе воды и др.
Результаты исследования и их обсуждение. Результаты исследований показывают, что содержание клеточного состава в различных оболочках и структурах тонкой кишки зависит от локальных частей тонкой кишки (двенадцатиперстная, тощая, подвздошная), ворсинки, складки, крипты, одиночные и групповые лимфоидные узелки и гистотопографические особенности элементов гемомикроциркуляторного русла
(ГМЦР)(артериола,прекапилляр,гемокапилляр,посткапиллярная венула, венула).
ТК синонимы (4): лаброциты, мастоциты, тканевые базофилы имеют неправильную форму с отростками и специфическими зернами в цитоплазме. Ширина ТК 3-15 мкм, длина 20-23 мкм.
При дегидратации через 3 суток в собственной пластинке слизистой оболочке подвздошной кишки у белых крыс возрастает процент ТК с 0,70+- 18 (контроль) до 0,8+- 0,2 при Р< 0,05. Такое же положение наблюдается при учете содержания макрофагов. Так, у контрольных животных процент содержание макрофагов увеличивается до 2,3 +- 0,15, т.е. как бы происходит мобилизация клеток и их увеличение, ответственных за детоксикационную и гомеостатическую функции в собственной пластинке слизистой оболочки тонкой кишки.
Из клеток лимфоидного ряда (большие, средние и малые лимфоциты, плазмоциты) при депривации воды, наряду с ТК и макрофагами,
существенно происходит перераспределение в процентном отношении с уменьшением бластных клеток (лимфобластов), больших и средних лимфоцитов. У белых крыс на 6-10 сутки обезвоживания на гистопрепаратах не встречаются митозы клеток и бластных форм.
Изменениям подвергаются и лимфоидные скопления, расположенные в слизистой оболочке и в подслизистой основе. Прежде всего, следует отметить заметное уменьшение объема лимфоидных узелков с увеличением количества лимфоидных скоплений без центров размножения. Меняется в них и цитологическая картина: уменьшается процентное содержание лимфобластов, больших лимфоцитов, а также плазмобластов.
Наряду с указанным достоверно увеличивается количество макрофагов, тучных и деструктивно измененных клеток (р<0,05) на 3-й день обезвоживания.
Факт увеличения количества макрофагов и тучных клеток, при
одновременном уменьшении процентного содержания лимфо- и плазмобластов, может иметь свое объяснение. Оно, по - видимому, связано с тем, что экстремальные факторы, в том числе и обезвоживание, тормозят процесс дифференцировки лимфоцитов в периферических лимфоидных образованиях. В тоже время указанный фактор стимулирует защитные реакции организма на уровне неспецифической резистентности.
При 6-дневной дегидратации отмеченные выше структурные и цитологические сдвиги более выражены.
Достоверность уменьшения толщины оболочек, размеров ворсинок, диаметра млечных синусов, а также количества бластных форм клеток высокая (р<0,01), при одновременном росте количества клеток, находящихся в стадии деструкции. В лимфоидных узелках вовсе не выявляются клетки в состоянии митоза; в них отмечается 3-х кратное уменьшение количестваплазмоцитов, макрофагов и тучных клеток. Одновременно, в таких же соотношениях, увеличено число клеток в стадии деструкции.
Обобщая полученные данные следует отметить, что на длительноеобезвоживание реагируют, прежде всего, периферические лимфоидныеобразования значительными изменениями своего структурного и клеточногосостава в собственной пластинке слизистой оболочки и в лимфоидныхузелках (рис. 1,2,3).
Рисунок 1
Верхушка ворсинки двенадцатиперстной кишки содержит большое количество эозинофилов (1). Дегидратация 3 дня. Окраска азур II - эозином.
Увел. X 1600.
Рисунок 2
12перстная кишка. Хорошо сохраненный слой клеток лимфоидного ряда (1), расположенный непосредственно под криптами. В криптах видны мигрирующие лимфоциты(2). Дегидратация 3 дня. Окраска гематоксилин-
эозином. Увел. X 640.
Рисунок 3
Верхняя часть ворсинки двенадцатиперстной кишки содержит большоечислоэозинофилов (1), плазматические клетки встречаются редко (2). Часть лимфоцитов располагается в эпителии (3). Дегидратация в течение 6 дней. Окраска азур II -эозином. Увел. X 1600.
Таблица 1
Содержание тучных клеток (ТК) и макрофагов (МФГ) в собственной пластинке слизистой оболочке подвздошной кишки у белых крыс при
Сроки обезвоживания крыс ТК МФГ
Контроль 0,7+-0,18 1,4+-0,22
3 суток 0,8+-0,2 2,3+-0,15
6 суток 0,5+-0,18 1,1+-0,2
10 суток 0,37+-0,2 0,9+-0,2
Примечание: Р< 0,05 для критерия............по сравнению с дегидратацией Зсут.
Таблица 2
Содержание (в%) тучных клеток (ТК) и макрофагов (МФГ) в лимфоидныхузелках (ЛУ) подвздошной кишки у белых крыс (Х+5х) при
Сроки обезвоживания крыс ЛУ без центров размножения ЛУ с центрами размножения
ТК МФГ ТК МФК
Контроль 0,56+-0,03 1,6+-0,2 1,95+-0,2 1,3+-0,01
3 суток 2,2+-0,3 1,64-0,2 1,05+-0,2 1,3+-0,01
6 суток 1,1+-0,1 1,44-0,4 0,94-0,02 0,94-0,01
10 суток 0,74-0,02 0,9+-0,1 0,6+-0,01 0,64-0,01
Примечание: р<0,05 для критерия.... по сравнению с контролем.
Наши наблюдения подтверждают описание (3) в отношении выделения 4 ступеней дегрануляции ТК:
1) «О» степень - отсутствие дегрануляции;
2) 1-я степень - слабая дегрануляция;
3) 2-я степень - умеренная дегрануляция;
4) 3-я степень - сильная дегрануляция (4).
Однако мы отмечаем, что степень дегрануляции зависит от сроков деградации.Так, при 3-суточной дегрануляции преобладает слабая дегрануляция, а при 6,10 суточной деградации не выражены 1,2 и 3 степени дегрануляции.
При длительном обезвоживании ТК истощены гранулами. О перспективности исследования ТК не только при воздействии экологических и экспериментальных факторов, но и важность их в исследованиях при космических полетах указывает (5).
По нашим наблюдениям плотность расположения ТК высока около лимфатических капилляров и лимфатических сосудов, звеньев микрогемоциркуляторного русла собственной пластинки слизистой оболочки и подслизистой основы, чем в мышечной и серозной оболочках. Также обнаружены локальные особенности распределения ТК по длине тонкой кишки, их плотность больше в подвздошной кишке. В литературе описание морфологии ТК приведено (13-18), однако при дегидратации недостаточны.
Заключение. Экспериментальные факторы, как дегидратация, тормозят развитие и дифференцировку ТК и лимфоцитов в периферических органах лимфоцитопоэза.
Проблема дегидратации, лимфостимуляции, реологии и транспорта жидкостей и их коррекция (физ.раствор, полиглюкин, плазмозаменители, перфторан и т.д.) является актуальной и повседневной потребностью практического здравоохранения и медицинской науки при лечении эксикоза у больных людей и осложнений при дегидратации.
Проведенные нами научные исследования углубляют наши познания и обогащают анатомию, лимфологию, иммунологию и гастроэнторологию и вносят существенный вклад при расшифровке механизмов развития дегидратации и ее коррекции физ. раствором и перфтораном. Полученные нами новые сведения о морфометрических, морфологических, цитологических, гистологических изменениях лимфоидных органов и лимфатического русла тонкой кишки может быть использованы в определенной степени при терапии больных с обезвоживанием организма, наступающего при ряде патологичесчких состояний (энтериты, диарея, холера, интоксикации, перегревание, тяжелые травмы, обезвоживание и т.д.).
ЛИТЕРАТУРА:
1. Гусейнов Т.С. Морфологическая характеристика иммунных органов при дегидратации // Региональный вестник молодых ученых. Махачкала. 2014. №1 -С. 86-87.
2. Гусейнов Т.С. Макро- и микроскопическая анатомия групповых лимфоидных узлов при 3-х суточной дегидратации // Материалы ПВсерос. научно-прак. конференции: Махачкала, 2015. -С. 120-121.
3. Савельева Л.В., Малиновский С.В., Васильева Т.В. Морфофункциональная характеристика тучных клеток лимфатических узлов белых крыс при воздействии бальнеологических факторов // XI Международная конф.Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии:Новосибирск, 2013. - С. 276-279.
4. Линдер Д.П., Коган Э.М. Тучные клетки как регуляторы тканевого гемеостаза и их место в ряду биологических регуляторов // Арх. пат. - 1976. - Т. 38, -№ 28. С.3-14.
5. Атякшин Д.А., Быков Э.Г. Состояние тучных клеток тонкой кишки монгольских песчанок после космического полета / / Анатомия и гистопатология. - 2014. - № 3. - С. 15-27.
