CC BY
16
12. Segmentectomy or lobectomy for early stage lung cancer / B. Feichao [et al.] // European Journal of Cardio-Thoracic surgery. — Jul. 2014. — Vol. 46 (1). — P. 1-7.
13. Sublobar resection is equivalent to lobectomy for clinical stage 1A lung cancer in solid nodules / NK. Altorki [et al.] // Journal Thorac Cardiovasc Surg. — 2014. -Vol. 147, № 2.
14. Incomplete intrapulmonary lymph node retrieval after routine pathologic examination of resected lung cancer / R. A. Ramirez [et al.] // J Clin Oncol. — 2012 Aug. — Vol. 30 (23) — P. 2823-2828.
15. The value of large sections in surgical pathology / M. P. Foschini, C. Baldovini, Y. Ishikawa, V. Eusebi // Int J Breast cancer. — 2012 (Nov). — Vol. 2012. — 785947.
УДК 616-001.47-08-031.84:616.379-008.64.001.6
Е. А. СИНЕЛЬЩИКОВ1, В. К. ЕСИПОВ2, С. Д. ВАЛОВ2
ИЗМЕНЕНИЯ ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО-НЕйРОЭНДОКРИННОй СИСТЕМЫ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ АЛЛОКСАНОВОГО ДИАБЕТА У КРЫС В УСЛОВИЯХ РАНЕВОЙ ИНФЕКЦИИ ПРИ МЕСТНОМ ПРИМЕНЕНИИ ОКСИТОЦИНА
1 Городская клиническая больница имени Н. И. Пирогова, г. Оренбург
2 Оренбургский государственный медицинский университет
E. A. SINELSHCHIKOV1, V. K. ESIPOV2, S. D. VALOV2
CHANGES IN THE HYPOTHALAMIC-PITUITARY-NEUROENDOCRINE SYSTEM FOR MODELING OF ALLOXAN DIABETES AT RATS IN THE CONDITIONS OF A WOUND INFECTION AT LOCAL APPLICATION OF OXYTOCIN.
1 City clinical hospital n. a. N. I. Pirogov, Orenburg
2 Orenburg state medical university
РЕЗЮМЕ.
Проведено экспериментальное исследование по изучению изменений в гипоталамо-гипофизарной — нейроэндокринной системе в условиях аллоксанового диабета и раневой инфекции. С использованием цитологических и гистологических методов доказано, что использование препарата окситоцина в экспериментальных условиях положительно влияет на течение репаративных гистогенезов, что способствует более быстрому заживлению раневых дефектов.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ГАПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО-НЕЙРОЭНДОКРИННАЯ СИСТЕМА, САХАРНЫЙ ДИАБЕТ, ГНОЙНАЯ РАНА, ОКСИТОЦИН. SUMMARY.
An experimental study on changes in the hypothalamic-pituitary neuroendocrine system under alloxan diabetes and wound infections. Usingcytological and histological methods proved that the use of a preparation oxytocin in experimental conditions has a positive effect on the course of reparative histogenesis that promotes faster healing of wound defects.
Синельщиков Евгений Андреевич — к. м. н., врач-хирург 2-го хирургического отделения; тел. 89225498866; e-mail: sea.surgeon@ gmail.com
Есипов Вячеслав Константинович — З. вр. РФ, д. м. н., профессор, заведующий кафедрой общей хирургии, тел. 8 (3532) 358557; e-mail: [email protected]
Валов Сергей Дмитриевич — д. м. н., профессор кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ОрГМУ; e-mail: [email protected]
KEY WORDS: GAPOTALAMO-PITUITARY-NEUROENDOCRINE SYSTEM, DIABETES, PURULENT WOUND, OXYTOCIN.
Проблема лечения хирургической инфекции мягких тканей на фоне сахарного диабета сохраняет свою актуальность до настоящего времени. Это связано с ростом числа больных сахарным диабетом (СД) и увеличением у них гнойно-воспалительных осложнений [3]. Именно развитие гнойных осложнений у больных сахарным диабетом зачастую не обходится без оперативных вмешательств, послеоперационная летальность которых высока — 13-20% [6].
Проблема стимуляции репаративных и регенеративных процессов и борьбы с патогенной микрофлорой в гнойной ране на фоне сахарного диабета остается крайне насущной. В последние годы в схемы местной терапии при различных инфекционно-воспалительных процессах стали вводить препарат окситоцин [1, 2, 4]. Экспериментально-гистологическими исследованиями А. А. Стадникова [5] обоснована целесообразность использования этого нейропептида в комплексном лечении гнойных заболеваний мягких тканей. При этом показано, что положительный эффект от применения окситоцина обусловлен не только его стимулирующим влиянием на синтез ДНК фибробластами, эндотелиоцита-ми и адвентициальными клетками, улучшающими
репаративную регенерацию в ране, но и с антибиотическим воздействием данного пептида на микроорганизмы.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ — экспериментально-гистологическое обоснование целесообразности местного применения препарата окситоцина в лечении гнойных ран мягких тканей при сахарном диабете.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
Работа выполнена на 60 белых половозрелых беспородных крысах-самцах массой 180-250 г. У всех животных была создана модель сахарного диабета (ЭСД) путем однократного внутрибрюшинного введения аллоксана из расчета 150 мг/кг массы животного после 48 часового голодания (Баранов В. Г.,Соколоверо-ва И. М., 1958; Беляева Н. М., Корнеев Г. И., 1981) с соблюдением правил асептики и антисептики под эфирным наркозом.
Через 10 суток после воспроизведения модели ал-локсанового диабета в асептических условиях после удаления волосяного покрова и обработки кожи настойкой йода и спиртом выполнялось моделирование хирургических ран задних конечностей — неинфи-цированных и инфицированных. Создание инфицированных ран выполнялось путем введения в мягкие
Объем и структура исследования
ткани задних конечностей крыс 1 мл микробной взвеси штаммов золотистого стафилококка в дозе 2х106 микробных клеток и кишечной палочки в дозе 2х106 микробных клеток и 0,25 мл 25% раствора сульфата магния. В работе использованы музейные штаммы микроорганизмов, полученные в Институте клеточного и внеклеточного симбиоза УрО РАН (директор — член-корр. РАН, акад. РАМН, проф. О. В. Бухарин).
Гнойный очаг у подопытных животных отчетливо возникал через 4-7 суток. Он возвышался над окружающими тканями, появлялась гиперемия, отечность кожи, симптом флюктуации.
После получения экспериментальной модели гнойно-воспалительного очага производили его хирургическую обработку в объеме, обеспечивающем удаление нежизнеспособных тканей. Оперативное вмешательство выполняли под местной новокаиновой анестезией.
Все эксперименты выполнялись с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» согласно приказу МЗ СССР № 775 от 12.08.1977 г. и Федеральному закону РФ «О защите животных от жестокого обращения» от 01.12.1999 г.
№ Наименование серии опытов Кол-во Сроки наблюдения
n/n животных 3 сут. 7 сут. 14 сут.
I. ЭСД, неинфицированная рана без лечения 12 4 4 4
II. ЭСД, инфицированная рана (S. aureus), без лечения 6 2 2 2
ЭСД, инфицированная рана (E. coli), без лечения 6 2 2 2
III. ЭСД, инфицированная рана (S. aureus) + окситоцин 6 2 2 2
ЭСД, инфицированная рана (E. coli) + окситоцин 6 2 2 2
IV. ЭСД, инфицированная рана (S. aureus) + антибиотик 6 2 2 2
ЭСД, инфицированная рана (E. coli) + антибиотик 6 2 2 2
V. ЭСД, неинфицированная рана + окситоцин 12 4 4 4
Всего 60 20 20 20
РЕЗУЛЬТАТЫ.
Светооптические исследования супроаптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса крыс, у которых мы вызывали аллоксановый диабет, показали существенные изменения нейросекреторных клеток (НСК). Это прежде всего проявилось в возрастании числа пикноморфных элементов. Так, у интактных животных в составе данных ядер определялись в подавляющем большинстве крупные «светлые» НСК, с 1-2 ядрышками. В условиях аллоксанового диабета их численность к 10 суткам эксперимента уменьшалась в 1,5-2 раза, при одновременном возрастании количества клеток с признаками кариопикноза и цитолиза.
Данные изменения наиболее рельефно прослеже-
ны у животных с нанесением раневых дефектов задних конечностей крыс и особенно при инфицировании S. aureus и E. coli. В этих случаях мы отмечали явления отека нейросекреторных центров гипоталамуса, а также дегенеративные изменения нейросекреторных элементов. Ультраструктурный анализ показал, что на фоне гипертрофии терминалей НСК, проецируемых на уровне аксовазальных контактов в нейрогипофизе, возрастает число и размеры митохондрий с их последующей деструкцией. При этом, как правило, наблюдается картина распада элементарных секреторных гранул и дезорганизация процессов экзоцитоза их содержимого. Подобные тер-минали аксонов НСК принадлежат не только пикно-
морфным клеткам, но и дегенеративно измененным функционально активным («светлым») НСК. Последние отличаются пикнотическими ядрами и массовой дегенерацией мембранных органелл.
При этом наблюдается «зернистный распад» секреторных гранул, а также появление в тельцах Геринга (местах депонирования нонапептидных секреторных гранул) внутриклеточных скоплений мелкозернист-ного материала, сходного с содержимым незрелого секреторного продукта. Очень часто экстрагранулярный пул нейрогормонов наблюдается вне мест прямого контакта аксонов нейроцитов с базальной пластинкой эндотелия гемокапилляров задней доли гипофиза. Это явление часто отмечалось и в области синаптоид-ных контактов пептид- и моноаминергических нервных волокон с телами и отростками глиальных клеток задней доли гипофиза (питуицитами). Очевидно, в данных экспериментальных условиях активная и форсированная нейросекреция происходит по всей поверхности аксонов нервных клеток, а секретируемые ими продукты могут достигать стенки кровеносных сосудов и по межклеточным пространствам.
Наблюдаемое нами у контрольных животных с раневыми повреждениями повышение активности крупноклеточных (супраоптических и паравентри-кулярных) ядер гипоталамуса всегда проявляется в уменьшении визуально определяемого количества секреторных гранул в перикарионах и аксонах, а также в накоплении в терминалях «пустых пузырьков». При этом происходит значительное увеличение размеров «светлых» (т. е. функционально активных) нейросе-креторных клеток, их ядер и ядрышек, возрастание размеров и числа митохондрий и нейротубул. Следует особо подчеркнуть, что терминали аксонов, которые сосредоточены в контактных областях, как известно, являются важнейшими отделами нейросекреторной регуляторной системы, ответственными за высвобождение нейрогормонов в жидкостные среды организма.
Однако при моделировании аллоксанового диабета, в т. ч. при формировании раневых дефектов конечностей крыс, и особенно при экзогенном инфицировании бактериальными патогенами, наблюдается феномен блокирования высвобождения нонапептидного секреторного материала (у 57-67% нейросекреторных клеток гипоталамуса крыс).
При этом терминали аксонов данных нейроци-тов имели существенные признаки ультраструктурных дегенеративных изменений. Они проявлялись в дезинтеграции мембранных компартментов клеток, кариопикнотических изменениях, в уплотнении ней-роплазмы, увеличении и сегрегации липосом, ламел-лярных телец и аутофагосом. В этих условиях наиболее часто встречались НСК супраоптических и пара-вентрикулярных ядер с признаками фрагментации и
кольцевидности ядрышек, что свидетельствовало о снижении или подавлении синтеза РНК. Терминальными стадиями подобных изменений являются атрофия части НСК и их гибель.
таблица — Влияние раневого процесса на фоне аллоксанового диабета на соотношение количества пептидергических гранул к числу «пустых пузырьков» в терминалях аксонов НСК гипоталамуса (%) у крыс (М±m)
Интактные животные 0,78±0,09
Аллоксановый диабет (без раневого дефекта) 8,11±0,14
Аллоксановый диабет (раневой дефект) 9,88±0,61
Аллоксановый диабет (+ S. aureus) 11,61±1,08
Аллоксановый диабет (+ E. coli) 14,80±1,32
Деструктивно измененные терминали аксонов нейросекреторных клеток фагоцитировались питуи-цитами нейрогипофиза. Описанные нами явления в определенной мере можно трактовать с позиций закономерностей секреторного цикла нонапептидерги-ческих нейронов крупноклеточных ядер гипоталамуса (Поленов, 1993), который возможен в двух вариантах: спокойное функционирование и интенсивное — гиперсекреция. Мы лишь делаем акцент на том, что при хроническом стрессировании либо в условиях экспериментальной патологии (сахарный диабет, гнойная рана) длительная гиперсекреция нонапептидергиче-ских нейросекреторных клеток гипоталамуса происходит на грани истощения своих материальных ресурсов («физиологической дегенерации» [по А. Л. Поленову]), на фоне частичной или полной блокировки высвобождения нейросекреторного материала в общий кровоток. Это коррелировало с ограничением процессов репарации эпителия и стромальных элементов поджелудочной железы, а также с возрастанием числа клеточных элементов с признаками ультраструктурных нарушений.
Всё это свидетельствует о неблагоприятном характере структурно-функциональной реорганизации нонапептидергической нейросекреторной системы гипоталамуса, наблюдаемой в условиях аллоксанового диабета и усугубляемой раневым процессом в мягких тканях задних конечностей экспериментальных животных, особенно при инфицировании ран.
В своей совокупности эти обстоятельства, безусловно, лимитируют адаптивные возможности ги-поталамического нейроэндокринного регуляторного воздействия на функциональную деятельность тканей и их репарацию, что, в свою очередь, приводит к существенным ограничениям адаптивных возможностей данной регуляторной системы относительно регенераторных и пластических потенций тканей.
В условиях разбалансированности гепатоламо-ги-пофизарной нейроэндокринной системы обоснована целесообразность использования нейропептида (ок-ситоцина) в комплексном лечении гнойных заболеваний мягких тканей.
Под действием препарата окситоцина уже на 3 сутки в ране происходили позитивные изменения в сторону активации пролиферативных процессов: появление клеточных элементов грануляционной ткани. При тщательном морфологическом исследовании слоев грануляционной ткани отмечалась дифференци-ровка клеточных элементов, в частности, фибробла-стов, а также отмечено резкое увеличение количества лейкоцитов. В значительной мере усиливался процесс васкулогенеза. В этой фазе заживления гнойных ран отмечалась трансформация моноцитов в макрофаги с последующим резким увеличением их количества, росло и число лаброцитов. Наличие данного факта и последующая утилизация продуктов распада обеспечивают эффективное очищение очага воспаления и последующего развития репаративных процессов эпителиальных и соединительнотканных структур.
Отмечалось и опережение процессов краевой эпителизации у животных, к которым применялся окситоцин. К 7 суткам картина острого гнойно-некротического воспаления существенно уменьшалось, обнаруживалась отчетливая картина формирования малодифференцированной (грануляционной) ткани.
По краям раны был виден нарастающий на грануляционную ткань тонкий слой эпителия, в последующие дни его ширина увеличивалась. При гистологическом изучении ростовой зоны эпителия были замечены обширные очаги митотического деления камбиальных клеток, что способствует ускорению эпителизации раневых дефектов. В соединительнотканном слое увеличивалось количество коллагено-вых волокон. Значительный рост фибробластов и эпителиальных клеток на 7 и 14 сутки, при применении
окситоцина, свидетельствуют о преобладании пролиферативных процессов, ускорении регенерации и более раннем появлении эпителизации.
Таким образом, применение препарата окситоци-на создает более благоприятные условия для последующей дифференцировки грануляционной ткани и продолжающегося новообразования кровеносных сосудов микроциркуляции, органотипической регенерации гистоструктур кожи и ее дериватов, что приводит к более эффективному заживлению раневой области.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Гавриленко, В. Г. Клиническое обоснование применения окситоцина в комплексном лечении диабетических гнойно-некротических поражений стоп : автореф. дис. ... канд. мед. наук / В. Г. Гавриленко. — Оренбург, 2000. — 25 с.
2. Курлаев, П. П. Экспериментально-клиническое обоснование применения окситоцина в комплексной антибактериальной терапии гнойных заболеваний мягких тканей : автореф. дис. ... канд. мед. наук / П. П. Курлаев. — Пермь, 1986. — 24 с.
3. Новые подходы в организации помощи больным с синдромом диабетической стопы / Ю. И. Павлов [и др.] // Материалы IX Всероссийского симпозиума по хирургической эндокринологии. — Челябинск, 2007. — С. 323-327.
4. Сивожелезов, К. Г. Комплексное лечение гнойно-воспалительных заболеваний пальцев и кисти : автореф. дис.... канд. мед. наук/К. Г. Сивожелезов. — Оренбург, 2005. —18 с.
5. Стадников, А. А. Роль гипоталамических ней-ропептидов во взаимодействии про— и эукариот : структурно-функциональные аспекты / А. А. Стад-ников. — Екатеринбург : УрО РАН, 2001. — 245 с.
6. Apelvist, J. What is the most effective way to reduce incidence of amputation in the diabeticfoot? / J. Apelvist, J. Lars-son // Diabetes Metab Res. Rev. — 2000. — Vol. 16. — P. 75-83.
УДК 616.31-089.5(091)
П. Ю. СТОЛЯРЕНКО1, И. П. СТОЛЯРЕНКО2
ЗНАМЕНАТЕЛЬНЫЕ ДЛЯ СТОМАТОЛОГИИ ОТКРЫТИЯ, ДАТЫ И ЛЮДИ
1 Самарский государственный медицинский университет
2 Самарская стоматологическая поликлиника № 3
P. YU. STOLYARENKO1, I. P. STOLYARENKO2
MEMORABLE FOR DENTISTS OPEN, DATE AND PEOPLE
1 Samara State Medical University
2 Samara Dental Clinic N 3
РЕЗЮМЕ.
Статья посвящена истории стоматологии и обезболивания. Уточнены многие исторические факты, публикуются редкие документы и иллюстрации.
Представлены краткие сведения о вкладе Пьера Фо-шара, Уильяма Мортона, Василия Анрепа, Генриха Брауна, Фридриха Штольца, Франца Флэхера, Альфреда Айнхорна.
