CC BY
50
ИЗМЕНЕНИЕ СОПРЯЖЕННЫХ СИСТЕМ ПОЛ, АОС И ГЕМОСТАЗА В ФОРМИРОВАНИИ СОСУДИСТЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ ЭСД И ИХ АНТИОКСИДАНТНАЯ КОРРЕКЦИЯ
С.Г. Дзугкоев, Л.Г. Хетагурова,
Ф.С. Дзугкоева
УРАН Институт биомедицинских исследований ВНЦ РАН и правительства РСО-Алания, ул. Пушкинская, 40, Владикавказ, РСО-Алания, Russia, 362019 тел: (918)-823-76-23; эл. почта: [email protected]
При ЭСД на фоне введения витамина Е и милдроната происходит активация антиокисли-тельной системы: СОД и каталазы и снижение содержания МДА в эритроцитах. Корреляционный анализ между концентрацией МДА и активностью каталазы показал прямую сильную связь, а между МДА и активностью СОД отрицательную. На фоне АО-терапии уменьшается плотность сосудистой стенки достоверно в БА, ПА правой и левой. Коэффициент корреляции между интенсивностью ПОЛ и показателями плотности сосудов на фоне витамина Е, милдроната выявляет прямую корреляционную связь. Данные МЦ (жидкостный обмен) показали улучшение перфузии из-за снижения плотности сосудистой стенки и повышения средней и систолической скоростей кровотока. Нормализация ПОЛ на фоне витамина Е и милдроната приводит к улучшению прокоагулянтного звена системы гемостаза и фибринолитической системы крови.
Ключевые слова: ПОЛ, АОС, микроциркуляция, гемостаз, витамин Е, милдронат.
Изучение метаболических и функциональных нарушений макро- и микрогемодинамики при СД является актуальной медико-социальной и экономической проблемой [1, 2, 7]. Наибольшую угрозу представляют микрососудистые осложнения, приводящие к инвалидизации и смертности больных [3, 4]. В этой связи представляется несомненно актуальным применение патогенетической терапии, включающей антиоксиданты.
Цель исследования — изучить состояния системы ПОЛ и АОЗ клеток, сопровождаемые изменениями микро-, макрогемодинамики и гемостаза под влиянием витамина Е и милдроната. Исследования проводили на 75 крысах-самцах линии Вистар массой 200—220 грамм, находящихся на стандартном пищевом рационе со свободным доступом к воде. Экспериментальный сахарный диабет (ЭСД), характеризующийся инсулиновой недостаточностью (ИЗСД), вызывали путем внут-рибрюшинного введения 5% водного раствора аллоксана в дозе 150—180 мг/кг
[4]. О наступлении ЭСД судили по уровню гипергликемии, увеличению диуреза в 2 и более раз. Состояние микроциркуляции и изменения в системе гемостаза оценивали через 2 недели после начала введения аллоксана на фоне хронического сахарного диабета, при этом уровень глюкозы крови был в среднем — 21,74 ± ± 0,59 ммоль/л. Исследовали макро- и микрогемодинамику ультразвуковым доп-плерографом ММ-Д-Ф фирмы «МИНИМАКС» (СПБ) у наркотизированных жи-
вотных. Для оценки системы гемостаза (СГ) определяли агрегацию тромбоцитов турбидиметрическим методом Борна на агрегометре класса Solar (Белоруссия) с применением индукторов АДФ (10 мкг/мл и 1 мкг/мл) и коллагена (20 мг/мл). Одновременно записывали коагулограмму. Об изменении структурно-функциональных свойств мембран эритроцитов и тромбоцитов судили по изменению концентрации МДА в крови по методу Osacawa et al. О состоянии АОС судили по активности СОД и каталазы в сыворотке крови. Активность каталазы определяли СФ методом М.А. Королюка и соавт. (1988) (6), а СОД — методом аутоокисления адреналина [7]. Статистическую обработку результатов производили методом вариационной статистики, принимая во внимание коэффициент вариации динамических рядов, и оценивали корреляцию, учитывая ее достоверность по стандартным таблицам (Л.С. Каминский) с использованием компьютерной программы статанализа Microsoft Excel.
Анализ данных показал, что при экспериментальном сахарном диабете активация системы СРО приводит к увеличению концентрации МДА в эритроцитах — универсальной модели тканевых клеток. В хронической стадии аллоксанового диабета выявлено статистически достоверное повышение в них концентрации МДА, снижение активности СОД в крови (р < 0,05), тогда как активность каталазы возрастает (р < 0,01). Анализ агрегационной способности тромбоцитов крыс с ЭСД в 42,4% случаев показал спонтанную агрегацию (без внесения индуктора после включения магнитной мешалки). У здоровых животных спонтанная агрегация отсутствовала [5]. Анализ системы гемостаза выявил повышение степени и скорости агрегации тромбоцитов при ЭСД, особенно выраженное при индукции АДФ (1 мкг/мл; 1 мг/мл) (на 38,72%,р < 0,01 и 19,5%, соответственно). Подобная активация тромбоцитов и повышение их чувствительности к различным индукторам при СД, по данным некоторых авторов, опосредуется через активацию ПОЛ и увеличение образования простагландина H2, тромбоксана А2.
Корреляционный анализ показателей гемодинамики артериальных сосудов (БА, ПА) показал, что при СД снижается сила и достоверность связей между системой коагуляционно-тромбоцитарного гемостаза и характером кровотока в крупных артериальных сосудах, направление связей практически не меняется. Для коррекции нарушений ПОЛ, АОС, показателей ДН, микро- и макрогемодинамики и системы гемостаза вводили крысам с ЭСД в течение месяца АО и мембранопротекторные вещества: а-токоферол-ацетат, милдронату (7). Эффекты милдроната сравнивали с действием а-токоферола. По истечении периода введения исследовали показатели ПОЛ, АОС, состояние микро- и макрогемодинамики, коагуляционный и тромбоцитарный гемостаз. Анализ данных выявил значительное ингибирование ПОЛ по данным МДА в крови на фоне введения витамина «Е», а также на фоне мембранопротектора милдроната.
Для выявления эффективности действия антиоксидантов на интенсивность ПОЛ и активность ферментов АОЗ мы провели корреляционный анализ между концентрацией МДА, активностью СОД и каталазы. На фоне введения милдрона-
та выявляется прямая сильная корреляционная связь между концентрацией МДА и активностью каталазы, тогда как выявлены слабые связи между уровнем снижения концентрации МДА и повышением активности СОД. На фоне АО терапии уменьшается плотность сосудистой стенки достоверно в БА, ПА пр., ПА лев. Коэффициенты корреляции между интенсивностью ПОЛ и показателем плотности сосудов на фоне витамина «Е» и милдроната следующие: в БА г = 0,55; г = 0,50; в почечных артериях г = 0,49; г = 0,6; т.е. выявляется прямая корреляционная связь.
Результаты исследования МЦ (жидкостный обмен) показывают улучшение перфузии, из-за снижения плотности сосудистой стенки и повышения средней и систолической скоростей кровотока. Анализ корреляционной связи между концентрацией МДА и скоростью кровотока демонстрирует отрицательную сильную связь на фоне витамина «Е», (коэффициент корреляции: г = -0,71), на фоне милдроната выявляется отрицательная корреляционная связь, но не сильная (г = -0,33). Что касается плотности сосудов микроциркуляции, то она не только снижается, но находится в прямой взаимосвязи с активностью ПОЛ (коэффициенты корреляции: витамин Е — г = 0,43; милдронат — г = 0,60). Нормализация ПОЛ на фоне витамина «Е» и милдроната способствует улучшению состояния прокоагулянт-ного звена системы гемостаза и фибринолитической системы крови.
Таким образом, проведенное комплексное исследование состояния системы гемостаза, макро- и микрогемодинамики у крыс в норме и при экспериментальном аллоксановом диабете показало повреждение эндотелий-зависимой регуляции тонуса сосудов, вызванное изменением физико-химических свойств мембран эритроцитов, тромбоцитов и сосудистой стенки вследствие ПОЛ и угнетения АОС.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет. — М., 2003.
[2] Дедов И.И., Никонова Т.В., Смирнова О.М. и др. Роль цитокинов в регуляции иммунного ответа и механизмы гибели Р-клеток при различных вариантах лечения сахарного диабета типа I // Проблемы эндокринологии. — 2005. — Т. 51. — № 3. — С. 3.
[3] Балаболкин М.И. Роль окислительного стресса в патогенезе диабетической нейропатии и возможность его коррекции препаратами а-липоевой кислоты // Проблемы эндокринологии. — 2005. — № 3. — С. 22—33.
[4] Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.Я. Патогенез и механизмы развития ангиопатий при сахарном диабете // Кардиология. — 2000. — 10. — С. 74—87.
[5] Хаютина Т.Л., Балаболкин М.И., Коновалов Г.А. и др. Пути коррекции липидного обмена у больных СД 2 типа // Ж. доказательной мед. для практикующих врачей. — 2004.
[6] Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. — 1988. — № 1. — С. 16—19.
[7] Кокорева Е.В. Экспериментальное обоснование эффективности некоторых антиоксидантов при сахарном диабете: Автореф. канд. дисс... — Саранск, 2002. — 19 с.
[8] Кулагин О.Л., Лебедева Е.А. Перекисное окисление липидов в ткани печени, почек, поджелудочной железы, в плазме крови крыс с аллоксановым диабетом // Сборник научных работ «Клиническая эндокринология». — Саратов, 1999. — С. 59—61.
[9] Bowker J.H., Pfeifer M.A. 2001. Levin and O’Neals. The diabetic foot. — 6th edition/ ed.
[10] Yin X., Zhang Y., Yu J. et al. The antioxidative effects of astragalus saponin I protect against development of early diabetic nephropathy // J Pharmacol Sci. — 2006. — Jun; 101 (2). — P. 166—73.
THE CHANGE OF THE CONCOMITANT SYSTEMS OF POL,
AOS AND HEMOSTASIS IN VASCULAR COMPLICATIONS FORMING UNDER THE EXPERIMENTAL DIABETES MELLITUS AND THE IR ANTIOXIDANT CORRECTION
S.G. Dzugkoev, L.G. Khetagurova,
F.S. Dzugkoeva
ERAS Institute of biomedical researches Pushkinskaya str., 40, Vladiкavкaz, RNO-A, Russia, 362019 tel. (918)-823-76-23, еmail: [email protected]
In ESD experimental diabetes mellitus on the background of vitamin E and mildronate introduction, an activation of amino acid system: SOD and catalaza and decrease of MDA content in erythrocytes. Normalization of POL on the background of vitamin E and mildronate leads to improvement of a pro-coagulant chain in homeostasis and fibrinolytic blood system.
Key words: the FLOOR, AOC, microcirculation, a hemostasis, vitamin E, mildronat.
