CC BY
26
tl 1 А.Г. Соловьева , Е.В. Крылова , Л.Н. Канцерова
ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРО- И АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМ ПЕЧЕНИ ПОД ВЛИЯНИЕМ УБИХИНОНА-10 ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРМИЧЕСКОЙ ТРАВМЕ
1ФГБУ «Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр» Минздрава России, Нижний Новгород, Россия ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», Нижний Новгород, Россия
Работа посвящена изучению влияния убихинона-10 на про- и антиоксидантные системы в печени крыс с термической травмой. Эксперимент проведен на белых крысах-самцах линии Wistar массой 180-220 г. Для оценки интенсивности перекисного окисления липидов и общей антиоксидантной активности использовался метод индуцированной биохемилюминесценции. Концентрацию малонового диальдегида, активность супероксиддисмутазы в печени определяли спектрофотометрическим методом. У животных с термической травмой отмечен рост показателей перекисного окисления липидов на фоне снижения антиоксидантных резервов, что привело к развитию оксидативного стресса. Установлено, что использование убихинона-10 в комплексном лечении экспериментальной термической травмы приводит к снижению интенсивности свободнорадикальных процессов в печени крыс и повышению антиоксидантной активности.
Ключевые слова: термическая травма, перекисное окисление липидов, убихинон-10
The work is devoted to study the effect of ubiquinone-10 on pro- and antioxidant systems in rat liver with thermal trauma. The experiment was carried out on white Wistar rats weighing 180-220g. The method of induced biochemiluminescence was used for the estimation of intensity of lipid peroxidation and total antioxidant activity. The concentration of malonic dialdehyde, the activity of superoxide dismutase in the liver were determined by spectrophotometrically. In animals with thermal injury showed an increase in indicators of lipid peroxidation on the background of the decrease of antioxidant reserves, leading to the development of oxidative stress. It was installed that the use of ubiquinone-10 in complex treatment of experimental thermal injury leads to a decrease in the intensity of free radical processes in the liver of rats and increase total antioxidant activity.
Key words: thermal injury, lipid peroxidation, ubiquinone-10
Термическая травма является тяжелой формой патологии и проявляется формированием синдрома системного воспалительного ответа, сопровождающегося усилением образования активных форм кислорода. Поэтому проблема поиска путей нормализации баланса про- и антиоксидантных систем организма после травмы является актуальной. Для коррекции метаболических нарушений у больных с тяжелыми ожогами может быть использован естественный антиоксидант убихинон-10 (Q10), который применяется для лечения и профилактики различных патологий [1-3, 5, 7]. При этом на сегодняшний день не хватает источников, свидетельствующих о его корригирующих возможностях при термической травме. Целью данной работы явилось изучение влияния убихинона-10 на про- и антиоксидантные системы в печени крыс с термической травмой.
Материал и методы исследования. Эксперимент проведен на 29 белых крысах-самцах линии Wistar массой 180-220 г. Все животные содержались в стандартных условиях вивария в клетках при свободном доступе к пище и воде на рационе питания, соответствующем нормативам ГОСТа «Содержание экспериментальных животных в питомниках НИИ» (1978 год). Сформировано 3 группы животных: 1 - интактная - здоровые животные (n=10); 2 -
контрольная - животные с термической травмой (п=10); 3 - опытная - животные с термической травмой, получавшие убихинон-10 (п=9).
Животным под наркозом (золетил+ксила) наносили контактный термический ожог на предварительно депилированную поверхность спины на площади 20% поверхности тела, экспозиция составила 5 секунд.
В контрольной группе животных в течение 10 дней осуществляли стандартное лечение: внутрибрюшинно вводили 1 мл изотонического раствора хлорида натрия и местно применяли мазь «Левомеколь». Животным опытный группы, аналогично контрольной, проводилось инфузионное и местное лечение, в дополнение к которому ежедневно скармливался убихинон в весовой дозе 15 мг/кг, смешанный с оливковым маслом. Использовали препарат порошкообразный убихинона-10 производства Кстовского завода БВК. На 11 -ый день животных выводили из эксперимента путем декапитации под наркозом. Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и оценку антиоксидантной системы организма проводили в гомогенате печени крыс. Активность ПОЛ изучали с помощью метода индуцированной биохемилюминесценции на БХЛ-06 (Н.Новгород). Оценивали следующие параметры хемилюминограммы: tg 2а - показатель, свидетельствующий об антиоксидантной активности; S - светосумма хемилюминесценции за 30 сек. отражает потенциальную способность биологического объекта к ПОЛ. Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли по методу М. МШага и М. исЫуата [6]. Активность СОД определяли по ингибированию образования продукта аутоокисления адреналина [4]. Статистическую обработку данных проводили с использованием программы Statistica 6.0.
Результаты и их обсуждение. Полученные результаты показали, что у крыс с термической травмой светосумма хемилюминесценции в печени статистически значимо увеличилась на 69% по сравнению с интактной группой животных (рис. 1). Отмечено снижение интенсивности ПОЛ у животных, получавших убихинон-10, на 48,7% по сравнению с контрольной группой крыс.
20 п
ш 12
4 -2 -
0 -I---,---,---
интактные контроль уВихинон
жиитныр
Рис. 1. Динамика изменения светосуммы хемилюминесценции в печени крыс с термической травмой при лечении убихиноном-10 (примечание: * — различия статистически значимы по сравнению со интактной группой (р<0,05); ** — различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой (р<0,05))
Таблица. Содержание малонового диальдегида и динамика изменения показателя tg 2а в _печени крыс с термической травмой при лечении убихиноном-10
Условия эксперимента МДА, мкмоль/л 1§2а, усл. ед.
Интактные крысы 6,2±0,35* 0,752±0,015
Контроль 11,39±0,24* 0,4±0,025*
Убихинон-10 10,85±0,14* 0,76±0,046**
Примечание'. * — различия статистически значимы по сравнению с интактной группой (р<0,05); ** — различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой
(р<0,05))
При ожоге выявлено статистически значимое повышение вторичного продукта липопероксидации, МДА, в печени в 1,8 раза по сравнению со здоровыми животными, что
также отражает усиление процессов перекисного окисления липидов. После лечения термической травмы с применением убихинона-10 содержание МДА в печени статистически значимо уменьшилось на 4,7% по сравнению с контрольной группой (таблица).
Уменьшение ПОЛ под влиянием убихинонона, вероятно, связано с его антиоксидантным действием, обусловленным главным образом его восстановленной формой (Со QH2). Реакцию нейтрализации свободных радикалов восстановленным коферментом Q можно записать следующим образом: 2LOO• + Со QH2 ^ 2LООН + Со Q. Кроме того, кофермент Q восстанавливает антиоксидантную активность витамина Е — а-токоферола [5].
При термической травме отмечена тенденция к снижению общей антиоксидантной активности в печени крыс на 46,3% по сравнению со здоровыми животными. Убихинон-10 вызвал повышение показателя tg 2а в печени крыс на 0,4% и 87% по сравнению со здоровыми животными и крысами с ожогом соответственно, снижая степень окислительного стресса в организме (таблица). Выявлено, что термическая травма привела к понижению активности СОД в печени крыс на 3,32% по сравнению с интактными животными (рис. 2). Применение убихинона при лечении термической травмы способствовало повышению активности СОД в печени на 49,4% по сравнению с контролем и на 44,4% по сравнению со здоровыми крысами.
Рис. 2. Активность СОД в печени крыс с термической травмой под влиянием убихинона (примечание: обозначения - аналогично рис. 1)
Заключение. Полученные результаты по данным биохемилюминесценции, концентрации МДА и активности СОД позволяют заключить, что использование убихинона-10 в комплексном лечении экспериментальной термической травмы приводит к снижению интенсивности свободнорадикальных процессов в печени крыс по сравнению с контрольной группой животных. Показано повышение общей антиоксидантной активности под влиянием Q-10 по сравнению со стандартным лечением.
Список литературы:
1. Захарова И.Н., Обыночная Е.Г., Скоробогатова Е.В., Малашина О.А. Влияние антиоксиданта на основе убихинона - Кудесана на активность перекисного окисления липидов и антиоксидантную защиту при пиелонефрите у детей // Педиатрия. 2005. №4. С.30-38.
2. Ключников С.О., Гритнева Е.С. Убихинон (коэнзим Q10). Клинические аспекты // Лечащий врач. 2007. №7. С. 103-110.
3. Крылов В.Н., Лукьянова Л.Д., Корягин А.С., Ястребова Е.В. Влияние убихинона-10 на энергетический обмен и ПОЛ в миокарде крыс при ишемии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. Т. 130, №7. С. 35.
4. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопросы медицинской химии. 1999. Т.45, № 3. С.109-116.
5. Linnane A.W., Eastwood H. Coenzyme Q10-Antioxidant, Redox Mitochondrion. 2004. Р.1-
11.
6. Mihara M., Uchiyama M. Biochemistry. N.Y.: Med., 1980. 271 р.
7. Rosenfeldt F., Haas S.J, Krum H. Hadj A., Leon J.Y., Watts G.F. Coenzym Q10 in the treatment of hypertension: a meta-analysis of clinical trials // Journal of Human Hypertension. 2007. Vol. 21, №4. Р. 297—306.
