CC BY
43
ИЗМЕНЕНИЕ поКАЗАТЕЛІ
перекисного окисления
И состояния ЭНДОТЕЛИЯ у БЕІ
с железодефицитной анемиеи на фоне лечения препаратом желі
ГИДРОКСИД ПОЛИМАЛьТОЗАТ
УДК 615.03:616.155.194:618.2 Поступила 22.09.2010 г.
В.Б. Кузин, д.м.н., профессор, зав. кафедрой общей и клинической фармакологии;
Л.В. Ловцова, к.м.н., доцент кафедры общей и клинической фармакологии;
А.Л. Барсук, к.м.н., доцент кафедры общей и клинической фармакологии;
АА Ганенков, аспирант кафедры общей и клинической фармакологии;
И.Е. Окрут, к.б.н., ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФПКВ
Нижегородская государственная медицинская академия, Н. Новгород
Цель исследования — изучение показателей перекисного окисления липидов и состояния эндотелия у беременных с железодефицитной анемией на фоне лечения препаратом железа (III) гидроксид полимальтозат.
Материалы и методы. В исследование включено 66 беременных, в том числе 35 — с железодефицитной анемией и 31 — без клинических и лабораторных признаков дефицита железа. Беременные 1-й группы получали препарат железа (III) гидроксид полимальтозат (феррум лек) по 1 таблетке 2 раза в сутки в течение 30 суток. Беременные контрольной группы находились под наблюдением акушера-гинеколога. Исследовались показатели перекисного окисления липидов (содержание диеновых и триеновых конъюгатов, оснований Шиффа) методом спектрофотометрии, активность антиоксидантной системы методом индуцированной биохемилюминесцен-ции. Показатели состояния эндотелия (уровень эндотелина (1—21) и активность фактора Виллебранда) определяли методом иммуно-ферментного анализа, содержание стабильных метаболитов оксида азота оценивали с помощью спектрофотометрического метода.
Результаты. В сыворотке крови беременных с железодефицитной анемией отмечаются более высокие исходные уровни всех изученных продуктов липопероксидации, а также активность антиоксидантной системы, содержание оксида азота и активность фактора Виллебранда по сравнению с беременными без признаков дефицита железа. Через 30 сут применения изучаемого препарата железа отмечается увеличение содержания диеновых конъюгатов и повышение активности антиоксидантной системы в сыворотке крови беременных с железодефицитной анемией. При этом существенного изменения показателей состояния эндотелия не выявлено.
Заключение. Учитывая необходимость длительного применения препаратов железа для лечения железодефицитной анемии, рекомендуется динамический контроль за показателями перекисного окисления липидов и состоянием эндотелия, особенно у пациентов с сопутствующими заболеваниями, сопровождающимися дисфункцией эндотелия.
Ключевые слова: железодефицитная анемия, препараты железа, перекисное окисление липидов, состояние эндотелия.
English
Alteration of the lipid peroxidation values and endothelium state in pregnant females with a ferrodeficient anemia at the background of treatment with a ferrum (III) hydroxide polymaltosate preparation
V.B. Kuzin, M.D., professor, head of a general and clinical pharmacology chair;
L.V. Lovtsova, c.m.s., assistant professor of a general and clinical pharmacology chair;
A.L. Barsuk, c.m.s., assistant professor of a general and clinical pharmacology chair;
AA Ganenkov, post-graduate of a general and clinical pharmacology chair;
Для контактов: Ловцова Любовь Валерьевна, тел. раб. 8(831)436-54-01, тел. моб. +7 960-196-86-58; e-mail: farmnnov@mail.ru.
I.E. Okruth, c.b.s., assistant of the PhQIF clinical laboratory diagnosis chair Nizhny Novgorod state medical academy, N. Novgorod
Aim of investigation is a study of the lipid peroxidation values and endothelium state in pregnant females with a ferrodeficient anemia at the background of treatment with a ferrum (III) hydroxide polymaltosate preparation.
Materials and methods. 66 pregnant females, including 35 ones with a ferrodeficient anemia and 31 — without the clinical and laboratory signs of a ferrum deficiency, are included into investigation. The pregnant females of the 1st group have been receiving a ferrum (III) hydroxide polymaltosate preparation (ferrum medicinal) by a tablet twice a day during 30 days. The pregnant females of a control group were observed by the obstetrician-gynecologist. The lipid peroxidation values (the dienic and trienic conjugate, Schiff’s base content) were investigated with a spectrophotometry method, the antioxidant system activity — with a method of induced biochemiliminescence. The endothelium state values (the endothelin level (1—21) and the Willebrand’s factor activity) were detected with a method of immunoenzymatic analysis, a content of the nitrogen oxide stable metabolites was assessed with a use of a spectrophotometric method.
Results. The higher initial levels of all the studied lipoperoxidation products as well as the antioxidant system activity, the nitrogen oxide content and the Willebrand’s factor activity are marked in a blood serum of pregnant females with a ferrodeficient anemia compared to pregnant females without the ferrum deficiency signs. An increase of the dienic conjugate content and the antioxidant system activity in a blood serum of pregnant females with a ferrodeficient anemia is observed in 30 days of the ferrum studied preparation use. Besides, a substantial alteration of the endothelium state values is not revealed.
Conclusion. A dynamic control of the lipid peroxidation values and endothelium state, especially in patients with attendant diseases, accompanied by the endothelium dysfunction, is recommended considering a necessity of the ferrum preparation durative use for a ferrodeficient anemia treatment.
Key words: ferrodeficient anemia, ferrum preparations, lipid peroxidation, endothelium state.
Железодефицитная анемия (ЖДА) сопровождается гипоксией тканей, при которой нарушаются транспорт электронов по цепи тканевого дыхания, структура и функция митохондрий, вследствие чего активируется процесс свободно-радикального окисления. Энергозависимое нарушение работы АТФ-зависимого кальциевого насоса приводит к увеличению концентрации кальция в клетке, что вызывает активацию протеаз и фосфолипаз, а следовательно, и гидролиз мембран. Данные процессы усиливают продукцию активных форм кислорода в митохондриях [1].
Оксидативный стресс является самым универсальным механизмом повреждения эндотелия сосудов [2]. Механизм воздействия свободных радикалов на функцию эндотелия связывают прежде всего с ускорением инактивации оксида азота [3]. Кроме того, супероксид-анион, реагируя с оксидом азота, может привести к образованию токсичного пероксинитрита, вызывающего некроз и апоптоз клеток [4]. Имеются также данные о влиянии оксидативного стресса на функцию ядра клетки и синтез белковых молекул, в том числе эндотелина и NO-синтазы [5]. Окисленные липопротеины низкой плотности уменьшают синтез оксида азота и увеличивают синтез эндотелина-1 в эндотелии сосудов [6].
Доказано, что дефицит железа обусловливает не только количественные, но и качественные изменения в популяции эритроцитов. Более ригидные (вследствие потери пластичности мембраны) эритроциты создают вращательный эффект в потоке крови и увеличивают вероятность столкновения тромбоцитов друг с другом, а также с сосудистой стенкой, приводя к травматиза-ции и нарушению функции эндотелия [7].
Вместе с тем известно, что неблагоприятным моментом является не только недостаток железа, но и его избыток, поскольку, являясь металлом с перемен-
ной валентностью, железо в ряде реакций (Фентона, Хабера—Вайса, Осипова) приводит к образованию активных форм кислорода и оказывает токсическое действие на функции печени, сердечно-сосудистой системы, нарушает гормональный статус, вызывает дисфункцию иммунной системы [8, 9].
В эксперименте показано, что передозировка препаратов железа приводит к отложению избыточного ферритина, в том числе и в эндотелиальных клетках, результатом чего может быть даже их гибель [10].
В связи с вышесказанным изучение влияния препаратов железа на процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ) и состояние эндотелия является актуальной задачей клинической фармакологии.
Цель исследования — изучение показателей перекисного окисления липидов и состояния эндотелия у беременных с железодефицитной анемией на фоне лечения препаратом железа (III) гидроксид полималь-тозат.
Материалы и методы. Исследования выполнены с использованием клинической базы ЦРБ Спасского района Нижегородской области и лабораторной базы Нижегородского областного клинического диагностического центра. Обследовано 189 беременных, из них в исследование включено 66, в том числе 35 — с ЖДА (1-я группа) и 31 — без клинических и лабораторных признаков дефицита железа (2-я, контрольная, группа).
Критерии включения беременных в исследование: срок беременности 12—36 нед; анемия железодефицитная легкой степени (уровень гемоглобина — 100—120 г/л; эритроциты — менее 4,2-1012/л; гипохро-мия эритроцитов; цветовой показатель — ниже 0,85; уровень сывороточного железа — ниже 12 мкмоль/л) [11]; уровень ферритина — менее 15 мкг/л. Критерии
исключения — сопутствующие заболевания (онкологические, эндокринные, системные, а также заболевания почек и сердечно-сосудистой системы, хронические инфекции, острая кровопотеря, гемолитическая анемия, наличие признаков активного воспалительного процесса, гестозы).
По возрасту и сроку беременности обследованные лица обеих групп были сопоставимы. В частности, средний возраст женщин 1-й группы составил 25,26±0,77 года, 2-й — 25,58±1,16 года; срок беременности — соответственно 24,00±0,89 и 23,63±1,09 нед.
Беременные с ЖДА получали препарат трехвалентного железа — железа (III) гидроксид полимальтозат (феррум лек, ф. Lek, Словения) по 1 таблетке 2 раза в сутки в течение 30 сут [11]. Беременные без признаков железодефицита (контрольная группа) находились под регулярным наблюдением акушера-гинеколога.
Активность процесса ПОЛ изучали с помощью метода индуцированной биохемилюминесценции [12]. Для регистрации данных использовали биохемилюми-нометр БХЛ-07 (НИИ «Биоавтоматика», Н. Новгород), сопряженный с компьютером IBM PC/AT в диалоговом режиме. Результат распечатывали в унифицированной форме в виде хемилюминограммы с расчетом показателя Imax/S, прямо пропорционального общей активности антиоксидантной системы, где Imax — максимальная интенсивность свечения, S — светосумма хемилюминесценции за 30 с [13]. Интенсивность свободно-радикального окисления липидов оценивали по содержанию молекулярных продуктов ПОЛ — диеновых (ДК) и триеновых (ТК) конъюгатов, оснований Шиффа (ОШ) — методом спектрофотометрии на спек-
Таблица 1
Динамика показателей перекисного окисления липидов (M±m)
Показатель Этап Группы обследованных
исследования 1-я (n=35) 2-я (n=31)
Содержание ДК, I обследование 34,15±4,19 pR<0,05 21,13±2,15
усл. ед. II обследование 52,90±4,94 p1; 1—2<0,001 30,75±3,14 p1<0,001
Содержание ТК, I обследование 0,28±0,05 рк<0,05 0,19±0,02
усл. ед. II обследование 0,25±0,05 p1<0,05 0,15±0,02 p1<0,001
Содержание ОШ, I обследование 39,03±3,79 pR<0,05 32,09±2,55
усл. ед. II обследование 35,13±3,44 p1; 1—2<0,001 17,99±2,10 p1<0,001
I обследование 0,11±0,01 рк<0,05 0,10±0,02
Imax/S II обследование 0,12±0,01 p1<0,01; p1—2<0,001 0,09±0,02 p1<0,001
Примечание: рк—уровень статистической значимости различий значений по сравнению с группой контроля; р, — с результатами I обследования; р1—2 — между показателя в 1-й и 2-й группах.
трофотометрах APEL PD 303 (Япония) и СФ 46 (Санкт-Петербург) [13].
Уровень эндотелина (1—21) и активность фактора Виллебранда (vWF) определяли методом иммунофер-ментного анализа на анализаторе Bio-Rad 680 (ф. BioRad Laboratories, США). Содержание оксида азота (NO) оценивали по суммарной концентрации его стабильных метаболитов (нитратов и нитритов), измерение которых проводили с помощью спектрофотометра APEL PD 303 (Япония).
Биохимические показатели оценивали до начала лечения (I обследование) и через 30 сут (II обследование) терапии указанным препаратом железа беременных с ЖДА (или наблюдения за беременными контрольной группы). Объектом исследования являлась сыворотка крови.
Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с использованием лицензионного статистического пакета STADIA 7.0/prof, оценивался уровень значимости различий между двумя выборками с помощью параметрических и непараметрических критериев [14]. Результаты представлялись в виде М±т, где М — средняя арифметическая, m — стандартная ошибка средней арифметической.
Результаты. Исходное содержание всех изученных продуктов липопероксидации (ДК, ТК и ОШ), а также показатель Imax/S в сыворотке крови беременных с ЖДА (1-я группа) был выше, чем у беременных без признаков дефицита железа (2-я группа), p<0,05 по всем указанным показателям (табл. 1).
Через 30 сут лечения препаратом железа (III) гидроксид полимальтозат установлено увеличение кон-
центрации ДК относительно исходного уровня на 18,75±2,22 усл. ед. (54,9О%), тогда как у пациентов контрольной группы аналогичный показатель составил 9,62±1,79 усл. ед. (45,53%). Кроме того, на фоне лечения выявлено снижение концентрации ТК в сыворотке крови относительно исходного уровня на О,ОЗ±О,ОО6 усл. ед. (1О,71%), которое практически не отличалось от изменений аналогичного показателя в группе контроля (снижение на О,О4±О,ОО2 усл. ед. (21 ,О5%).
После курсового применения препарата железа (III) гидроксид полимальтозат зарегистрировано также статистически значимое снижение содержания ОШ по сравнению с результатами первого обследования на З,9О±О,89 усл. ед. (9,99%), в контрольной группе аналогичный показатель составил 14,1О±1,44 усл. ед. (43,94%). Следовательно, снижение содержания ОШ на фоне изучаемого препарата железа было менее выраженным по сравнению с группой контроля, а концентрация указанного показателя при повторном обследовании пациентов, соответственно, статистически значимо более высокой (см. табл. 1).
В результате повторного исследования установлено повышение показателя Imax/S относительно исходного уровня на фоне применения изучаемого препарата железа на О,О1О±О,ОО1 (9,О9%), тогда как в контрольной группе, напротив, отмечалось его снижение на О,О1О±О,ОО1 (1О,ОО%).
Результаты фонового изучения показателей, характеризующих состояние эндотелия, показали, что содержание NO, а также активность vWF у беременных с ЖДА значительно превышают аналогичные показатели в группе контроля ф<О,О1 и p^^5 соответственно). Уровень эндотелина (1—21) у данной категории пациентов также выше, однако статистически значимых различий по сравнению с группой контроля не выявлено (табл. 2).
Через ЗО сут лечения препаратом железа (III) гидроксид полимальтозат зарегистрирована тенденция к снижению концентрации NO в сыворотке крови беременных с ЖДА относительно исходного уровня, которая не
являлась статистически значимой. В контрольной группе выявлены аналогичные изменения указанного показателя. Установлено также незначительное снижение уровня эндотелина (1—21) по сравнению с исходным значением, тогда как у беременных контрольной группы его снижение было статистически значимым — на
0,07±0,01 фмоль/мл (18,42%; p<0,001).
На фоне лечения отмечалось также некоторое снижение активности vWF относительно исходных результатов. У беременных контрольной группы выявлено увеличение указанного показателя на 19,03±3,23% (см. табл. 2).
обсуждение. Комплексный анализ полученных результатов свидетельствует о том, что в сыворотке крови беременных с ЖДА регистрируется более высокое исходное содержание ДК, ТК, а также ОШ по сравнению с беременными без клинических и лабораторных признаков железодефицита, что согласуется с данными литературы о повышении активности процесса ПОЛ у больных ЖДА [15].
Одновременно с увеличением концентрации продуктов перекисного метаболизма у беременных с ЖДА при проведении настоящих исследований выявлено также повышение активности антиоксидантной системы, о чем свидетельствует увеличение показателя Imax/S, хотя в литературе имеются сведения о снижении активности указанной системы в условиях гипоксии [16]. По-видимому, такие изменения активности имеют стадийный характер в зависимости от степени тяжести анемии, и при ЖДА легкой степени повышение активности антиоксидантной системы следует рассматривать как проявление защитной реакции организма в ответ на увеличение интенсивности процесса свободно-радикального окисления.
При всем этом у указанной категории пациентов отмечаются более высокое исходное содержание NO, а также более высокая активность фактора Виллебран-да по сравнению с показателями у беременных без признаков железодефицита. Учитывая широкий спектр биорегуляторных эффектов NO, в частности его вазо-
Таблица 2
Динамика показателей состояния эндотелия (M±m)
Показатель Этап исследования Группы обследованных
1-я (n=35) 2-я(n=31)
Содержание оксида азота, мкмоль/л I обследование 179,80±7,87 p,<0,01 153,10±4,12
II обследование 177,10±5,42 153,04±4,06
Уровень эндотелина (1—21), фмоль/мл I обследование 0,53±0,03 0,38±0,05
II обследование 0,47±0,09 0,31±0,05 p1<0,001
Активность фактора Виллебранда, % I обследование 91,57±5,61 pR<0,05 75,97±3,18
II обследование 89,57±6,02 p1—2<0,001 95,00±5,57 p1<0,001
Примечание: рк — уровень статистической значимости различий значений с группой контроля; р, — с результатами I обследования; р1—2 — между показателями в 1-й и 2-й группах.
дилатирующие, антикоагулянтные и антиагрегантные свойства, способствующие улучшению микроциркуляции [17], можно предположить, что увеличение концентрации N0 у беременных с ЖДА легкой степени является проявлением компенсаторной реакции, направленной на улучшение метаболизма тканей в условиях гипоксии. Увеличение активности фактора Вил-лебранда может рассматриваться как проявление его защитной функции, а также как следствие изменения активности эндокринной системы [18].
Препарат железа (III) гидроксид полимальтозат через 30 сут терапии увеличивает содержание ДК в сыворотке крови беременных с ЖДА, что свидетельствует об интенсификации процесса ПОЛ и накоплении первичных молекулярных продуктов липопероксидации. Аналогичные данные были получены Е.А. Петровой при исследовании показателей ПОЛ на фоне препарата железа (III) гидроксид полимальтозат у беременных с ЖДА в другом биологическом объекте (ротовой жидкости) [19]. Концентрация ТК при приеме изучаемого препарата железа снижается практически так же, как в группе контроля. Этот факт также согласуется с данными литературы, свидетельствующими о том, что при применении препарата железа (III) гидроксид по-лимальтозат концентрация вторичных молекулярных продуктов ПОЛ, в частности малонового диальдегида, снижается [20]. Обращает на себя внимание факт, что хотя у пациентов, принимавших изучаемый препарат железа, и регистрируется аналогичное группе контроля снижение содержания ОШ относительно исходного значения, в то же время это снижение менее выражено, а уровень изучаемого показателя, соответственно, более высокий по сравнению с контрольной группой. При этом антиоксидантная активность на фоне препарата железа (III) гидроксид полимальтозат через 30 сут терапии увеличивается в отличие от ее снижения в группе контроля.
Результаты исследования показателей, характеризующих состояние эндотелия, свидетельствуют о том, что препарат железа (III) гидроксид полимальтозат не оказывает существенного влияния на состояние эндотелия у беременных с ЖДА при применении его в течение 30 сут. Однако, учитывая, что фармакологическое действие препаратов трехвалентного железа проявляется в более поздние сроки по сравнению с препаратами двухвалентного железа в связи с особенностями их фармакокинетики (препараты трехвалентного железа первоначально накапливаются в ретикулоэндотелиаль-ной системе [21]), а также принимая во внимание данные литературы о стадийности изменения активности процесса липопероксидации при применении препаратов железа [22], можно предположить, что активация процесса ПОЛ, зарегистрированная через 30 сут применения препарата железа (III) гидроксид полимальтозат, впоследствии может привести к изменению состояния эндотелия.
Полученные результаты позволяют обосновать вывод о необходимость динамического контроля за показателями ПОЛ и состоянием эндотелия в процессе применения препаратов железа, особенно у пациентов
с ЖДА и сопутствующими заболеваниями, в частности сердечно-сосудистой системы, при которых отмечается дисфункция эндотелия.
Заключение. Через 30 сут применения препарат железа (III) гидроксид полимальтозат интенсифицирует процесс ПОЛ, способствует накоплению первичных молекулярных продуктов липопероксидации (диеновых конъюгатов), а также увеличивает активность антиоксидантной системы в сыворотке крови беременных с железодефицитной анемией. На состояние эндотелия изучаемый препарат железа при применении его в течение указанного периода существенного влияния не оказывает. Однако, учитывая необходимость длительного (в течение нескольких месяцев) применения препаратов железа для лечения железодефицитной анемии, следует рекомендовать динамический контроль за показателями ПОЛ и состоянием эндотелия, особенно у пациентов с сопутствующими заболеваниями, сопровождающимися дисфункцией эндотелия.
Литература
1. Евсеева М.А., Евсеев А.В., Правдивцев В.А., Шабанов П.Д. Механизмы развития острой гипоксии и пути ее фармакологической коррекции. Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии 2008; 1: 2—24.
2. Саенко Ю.В., Шутов А.М. Роль оксидативного стресса в патологии сердечно-сосудистой системы у больных с заболеваниями почек (Сообщение II. Клинические аспекты оксидативного стресса). Нефрол и диализ 2004; 6(2): 138—144.
3. Thomas S.R., Schulz E., Keaney J.F.Jr. Hydrogen peroxide restrains endothelium-derived nitric oxide bioactivity — role for iron-dependent oxidative stress. Free Radic Biol Med 2006 Aug 15; 41(4): 681—688.
4. Pacher P., Beckman J.S., Liaudet L. Nitric oxide and per-oxynitrite in health and disease. Physiol Rev 2007; 87(1): 315—424.
5. Provost C., Choufani F., Avedanian L., Bkaily G., Gobeil F., Jacques D. Nitric oxide and reactive oxygen species in the nucleus revisited. Can J Physiol Pharmacol 2010 Mar; 88 (3): 296—304.
6. Sakurai K, Sawamura T. Stress and vascular responses: endothelial dysfunction via lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1: close relationships with oxidative stress. J Pharmacol Sci 2003; 91(3): 182—186.
7. Кистенев Б.А., Максимова М.Ю., Лагутин А.В. Ишемический инсульт у больного, страдающего железодефицитной анемией. Атмосфера. Нервные болезни 2007; 2: 27—31.
8. Dimitrov J.D., Vassilev T.L., Andre S. et al. Functional variability of antibodies upon oxidative processes. Autoimmun Rev 2008; 7(7): 574—578.
9. Weinberg E.D. Iron out of balance: arisk factor for acute and chronic diseases. Hemoglobin 2008; 32(1—2): 117—122.
10. Braumann A, Wulfhekel U., Nielsen P., Balkenhol B., Dul-lmann J. Pattern of iron storage in the rat heart following
'шшттшттштштшттшттштштшттшттштштшттшттштштшттштш/ш/ы Изменение показателей перекисного окисления липидов и состояния эндотелия у беременных ... СТМ J 2010 - 4 55
iron overloading with trimethylhexanoyl-ferrocene. Acta Anat (Basel). 1994; 150(1): 45—54.
11. Протокол ведения больных. Железодефицитная анемия. М: Ньюдиамед; 2005; 76 с.
12. Кузьмина Е.Н., Нелюбин А.С., Щенникова М.К. Применение индуцированной ХЛ для оценок свободнорадикальных реакций в биологических субстратах. В кн.: Биохимия и биофизика микробиологов. Горький; 1983; с. 41—48.
13. Конторщикова К.Н. Перекисное окисление липидов в норме и патологии. Н. Новгород; 2000; 24 с.
14. Кулаичев А.П. Методы и средства комплексного анализа данных. М: ФОРУМ ИНФРА-М; 2006; 512 с.
15. Литвицкий П.Ф., Дворецкий А.И., Заспа Е.А., Боле-вич С.Б. Свободнорадикальные процессы у больных железодефицитной анемией. Клиническая патофизиология 2006; 1: 10—14.
16. Маркиянова С.С. Эффекты производных янтарной кислоты при комбинированном катехоламиновом повреждении сердца в эксперименте. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. Саранск; 2008.
17. Артюшкова Е.Б. Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции препаратами с
различными механизмами действия (экспериментальное исследование). Автореф. дис. ... докт. биол. наук. Старая Купавна; 2009.
18. Головченко Ю.И., Трещинская М.А. Современные представления о физиологии и патологии эндотелия сосудов головного мозга. УкраЫський хiмiотерапев-тичний журнал 2008; 1—2(22): 22—28.
19. Петрова Е.А. Влияние препаратов ионного и неионного железа на состояние иммунитета и показатели пе-рекисного окисления липидов полости рта у беременных с железодефицитной анемией. Автореф. дис. . канд. мед. наук. Саранск; 2009.
20. Заспа Е.А. Свободнорадикальные процессы у больных железодефицитной анемией на фоне лечения препаратами железа. Автореф. дис. . канд. мед. наук. М; 2006.
21. Granger S. Have liposomes, will travel. Dairy Industries International 1999; 64(10): 29.
22. Айвазян Г.Г. Влияние комбинированного применения препаратов железа с антиоксидантами на показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в крови экспериментальных животных. Авто-реф. дис. ... канд. мед. наук. Саранск; 2009.
