CC BY
16
УДК 619:616.61-089.67:619:616.612
А.И. Сидельников, А.Н. Квочко, А.Ю. Криворучко, Е.В. Шаламова A.I. Sidelnikov, A.N. Kvochko, A.Yu. Krivoruchko, Ye.V. Shalamova
ИЗМЕНЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ЯДРЫШКОВЫХ ОРГАНИЗАТОРОВ В КЛЕТКАХ ПОЧЕЧНЫХ КАНАЛЬЦЕВ ПОСЛЕ ЧАСТИЧНОЙ НЕФРЭКТОМИИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ДЛЯ УШИВАНИЯ ОПЕРАЦИОННОЙ РАНЫ НИТЕЙ КЕТГУТА
THE CHANGE IN THE PARAMETERS OF NUCLEOLAR ORGANIZER IN THE CELLS OF THE RENAL TUBULES AFTER PARTIAL NEPHRECTOMY WHEN USING CATGUT THREADS
FOR SURGICAL WOUND SUTURING
Ключевые слова: кролики, почки, хирургия, нефрэктомия, шовный материал, кетгут, почечные канальцы, клетка, ядрышковые организаторы, рибосомальная РНК, регенерация.
С помощью методики выявления областей яд-рышковых организаторов (АдЯО) нитратом серебра изучены параметры АдЯО в клетках почечных канальцев после частичной нефрэктомии с использованием для ушивания операционной раны почки нитей кетгута. Исследования показали, что АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев кроликов имеют округлую или близкую к ней форму, а количество АдЯО находится в пределах от одного до четырех. Установлено, что наибольшее количество АдЯО в ядрах выявлено на двенадцатые сутки в зоне, близкой к рубцу (2,36±0,06), а наименьшее — на восемнадцатые сутки вдали от рубца (1,69± 0,05). Максимальное повышение суммарной площади АдЯО зафиксировано в зоне, близкой к рубцу, на шестые сутки (4,66±0,15 мкм2), а минимальное значение — на шестидесятые сутки вдали от рубца (1,99±0,08 мкм2). Полученные данные по динамике количества АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев после частичной нефрэктомии имеют волнообразный характер и частично совпадают с динамикой изменения суммарной площади АдЯО. Результаты исследования указывают на активацию регенеративных процессов в клетках почечных канальцев уже на третьи сутки (вдали от рубца), однако в зоне, близкой к рубцу, этот параметр достигает максимальных значений лишь на шестые сутки с последующим постепенным снижением в обеих зонах исследования до шестидесятых суток, но остается выше данных дооперационных значений. Результаты исследований свидетельствуют о том, что при использовании нитей кетгута для ушивания операционной раны почки после выполнения нефрэктомии в почечных канальцах наблюдается изменение количества и суммарной площади АдЯО в зависимости от близости к операционному рубцу, что, по нашему мнению, отра-
жает различный пролиферативный потенциал клеток почечных канальцев и состояние клеточной дифференцировки.
Keywords: rabbits, kidney, surgery, nephrectomy, suture material, catgut, renal tubules, cell, nucleolar organizers, ribosomal RNA, regeneration.
By using the technique of nucleolar organizer regions identification (AgNO3) with silver nitrate, the AGNO parameters were studied in the cells of the renal tubules after partial nephrectomy when the wound was closed with a catgut thread. The studies have shown that AGNO in the nuclei of cells of renal tubules of rabbits have a rounded or close to rounded shape, and the number of AGNO is in the range from one to four. The greatest number of AGNO in the nuclei was found on the twelfth day in the area close to the cicatrix (2.36 ± 0.06) and the smallest number on the eighteenth day away from the cicatrix (1.69 ± 0.05). The maximum increase of the total area of AGNO was recorded in the area close to the cicatrix on the sixth day (4.66 ± 0.15 ^m2), and the minimum value on the sixtieth day away from the cicatrix (1.99±0.08 ^m2). The findings on the dynamics of the AGNO number in the nuclei of cells of renal tubules after partial nephrectomy have a wavy character, and partly coincide with the dynamics of change of the total area of AGNO. The findings show the activation of regenerative processes in the kidney tubular cells on the third day (away from the cicatrix), however, in the zone close to the cicatrix this parameter reaches the maximum values only on the sixth day followed by a gradual decrease in both zones up to the sixtieth day, but remains above the preoperative data values. It has been found that when using catgut threads to suture the surgical wound of the kidney after nephrectomy in the renal tubules, there is a change in the number and total area of AGNO depending on the proximity to a surgical cicatrix; we believe that reflects a different pro-liferative potential of the cells of the renal tubules and the state of cellular differentiation.
Сидельников Александр Игоревич, аспирант, каф. физиологии, хирургии и акушерства, Ставропольский государственный аграрный университет. E-mail: [email protected].
Квочко Андрей Николаевич, д.б.н., проф., зав. каф. физиологии, хирургии и акушерства, Ставропольский государственный аграрный университет. E-mail: [email protected].
Sidelnikov Aleksandr Igorevich, post-graduate student, Chair of Physiology, Surgery and Obstetrics, Stavropol State Agricultural University. E-mail: [email protected].
Kvochko Andrey Nikolayevich, Dr. Bio. Sci., Prof., Head, Chair of Physiology, Surgery and Obstetrics, Stavropol State Agricultural University. E-mail: [email protected].
Криворучко Александр Юрьевич, д.б.н., проф., каф. физиологии, хирургии и акушерства, руководитель, Научно-диагностический и лечебный ветеринарный центр, Ставропольский государственный аграрный университет. E-mail: [email protected].
Шаламова Екатерина Васильевна, к.в.н., зав. ветеринарной клиникой «Колибри», г. Ставрополь. E-mail: [email protected].
Krivoruchko Aleksandr Yuryevich, Dr. Bio. Sci., Prof., Chair of Physiology, Surgery and Obstetrics, Head, Research and Diagnostic, Treatment Veterinary Center, Stavropol State Agricultural University. E-mail: [email protected].
Shalamova Yekaterina Vasilyevna, Cand. Vet. Sci., Head, Animal Clinic "Kolibri", Stavropol. E-mail: [email protected].
Введение
Исследование репаративных процессов в органах мочевыделения после хирургических вмешательств являются актуальным направлением в фундаментальной ветеринарной медицине, поскольку позволяет глубже понять процессы их функционирования на клеточном уровне.
Разработка технологий адекватного заживления раны почки и восстановления ее целостности относится к одной из серьезных проблем регенеративной хирургии и урологии [1, 2]. До настоящего времени не разработаны эффективные методы оптимизации заживления ран почки (послеоперационной, травматической и т.д.) [1, 3, 4], восстановления ее тканей для обеспечения анатомической целостности органа и достижения гемостаза раневой поверхности [2-4].
Известные в хирургии способы органосо-храняющих операций при травматических разрывах тканей почек не всегда эффективны, так как паренхима почки рыхлая и чрезвычайно непрочная, а ее капсула очень тонкая. Исходя из этого, во время ушивания раны традиционным способом наблюдается прорезывание швов и может возникнуть вторичное кровотечение [3], к тому же трудно достигается восстановление целостности поврежденного органа [1, 2, 5].
Существует группа жизненно важных генов, которые контролируют весь биосинтез белка в клетке — комплекс генов рДНК. В результате их функциональной активности в ядре формируется такая структура, как ядрышко [6].
Район ядрышкового организатора (АдЯО) — это участок хромосомной ДНК, кодирующей рибосомную РНК (цистроны рДНК) и представленный множественными (несколько сотен) копиями генов рРНК: на каждом из которых синтезируются высокомолекулярные РНК-предшественники, которые превращаются в короткие молекулы РНК, входящие в состав субъединиц рибосом [7-9].
В рутинных гистологических и цитологических исследованиях применяется метод серебрения, который визуализирует материал белковой или липопротеидной природы ассоциированный с АдЯО и принимающий участие в их функционировании. Техника окрашивания коллоидным серебром для выявления белков,
ассоциированных с АдЯО, высокоспецифична, и данный метод получил общепринятое название АдЯОР [7, 8].
Размеры ядрышкового организатора характеризуют синтез рибосомальной РНК и позволяют оценить белково-синтетическую функцию клетки [10], а также могут отражать пролиферативный потенциал клеток и состояние клеточной дифференцировки [11].
Морфология ядрышка и число Ад-позитивных АдЯО в клетках, в нормальных условиях, генетически обусловлены и зависят от типа изучаемой ткани, уровня ее диффе-ренцировки, уровня ее пролиферативной активности и фазы клеточного цикла [7, 12-14], но могут изменяться при адаптивной или патологической трансформации клеток или действии на клетки ряда биологически активных веществ [14, 15].
Аргирофильные белки, ассоциированные с ядрышкообразующими районами (АдЯО-белки), являются маркером скорости клеточного цикла. Эти белки выявляются в ядрах клеток на протяжении всего клеточного цикла, количественно увеличиваясь в S- и в2-фазы [16].
Таким образом, аргентофильные белки могут служить маркером активно функционирующих и потенциально активных рибо-сомных генов [17-20].
Цель исследования — изучить параметры областей ядрышковых организаторов в клетках канальцев почек после выполнения частичной нефрэктомии и ушивания операционной раны кетгутом.
Материал и методика
Объектом исследования служили самцы кроликов породы шиншилла в возрасте 6-8 мес. и массой тела 3-4 кг.
В эксперименте было использовано 18 кроликов. Проводили частичную нефрэк-томию с ушиванием операционной раны кетгутом (HELM, Германия).
Для изучения микроморфометрических показателей элементов нефрона проводили эвтаназию кроликов в соответствии с Директивой 2010/63/EU ЕВРОПЕЙСКОГО ПАРЛАМЕНТА И СОВЕТА ЕВРОПЕЙСКОГО СОЮЗА по охране животных, используемых в научных целях, и проводили отбор тканей почек для гистохимического исследования.
Материал, взятый для гистохимического исследования, фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина, проводили через спирты возрастающей крепости и ксилол, затем заливали в гистологическую среду «Гистомикс» с использованием гистологического процессора замкнутого типа Tissue-Tek VIP™ 5 Jr. производства Sakura (Япония).
Для изучения параметров ядрышковых организаторов клеток почечных канальцев препараты окрашивали нитратом серебра по методике Хоуэлла и Блэка [6]. Подготовленные срезы помещали в раствор KCl (0.57 г KCl на 100 мл дистиллированной H2O) на 20 мин., а после промывки дистиллированной водой — в смесь 50%-ного раствора азотнокислого серебра (раствор «А») и 2%-ного раствора желатины на 1%-ном растворе муравьиной кислоты (раствор «В»), приготовленных extempore. Растворы «А» (5 мл) и «В» (5 мл) смешивали в темноте и в полученной смеси выдерживали гистосрезы в течение 20 мин. в темноте при 37°С. Затем погружали на 2-3 с в дистиллированную воду, выдерживали дважды по 8 мин. в 5%-ном растворе тиосульфата Na (в темноте при 37°С), после чего промывали водопроводной, затем дистиллированной водой. Затем заключали в канадский бальзам.
Исследование гистологических срезов проводили с помощью светового микроскопа OLYMPUS-BX 43 (Япония) и фотоаппарата OLYMPUS С 300 (Япония). На каждом гисто-срезе фотографировали 10 случайно выбранных полей зрения с использованием объективов х 40 (для обзорных целей) и х 100 (для морфометрических исследований). На цифровых изображениях анализировали такие показатели, как количество и суммарная площадь АдЯО в клетках почечных канальцев в зоне, близкой к рубцу, и вдали от нее (в 20 ядрах на каждом снимке, итого проводили по 200 измерений АдЯО для каждой особи).
Морфометрические исследования проводили с использованием программы VideoTesTMaster 4.0 для Windows.
Анализ полученных числовых показателей проводили с помощью однофакторного дисперсионного анализа и критерия Ньюмена-Кейлса в программе PrimerofBiostatics 4-03 для Windows. Достоверными считали различия при р<0,05.
Результаты исследований
На фиксированных и окрашенных гисто-срезах изучение параметров АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев кроликов проводили с учетом срока после выполнения операции и зоны повреждения органа (вблизи рубца или вдали от него).
Исследования показали, что АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев кроликов имеют округлую или близкую к ней форму. Количество АдЯО находится в пределах от одного до четырех (рис.).
Показателем активности АдЯО служит количество гранул серебра, которое соответствует количеству функционирующих в клетке РНК-полимераз, а изменение состояния ядрышка и количества аргирофильных структур является своеобразным маркером активности зон ядрышка и степени активности клетки в целом [21]. При анализе количества АдЯО (табл. 1) в ядрах клеток почечных канальцев кроликов после частичной нефрэк-томии установлено, что к третьим суткам значение этого параметра достоверно (р<0,05) повышается в зоне, близкой к рубцу, на 15,07%, а вдали от него — на 12,68%. С третьих по шестые сутки отмечено достоверное (р<0,05) снижение количества АдЯО вдали от рубца на 11,74%. На двенадцатые и пятнадцатые сутки достоверных (р<0,05) отличий с более ранним сроком исследования не установлено. В период с пятнадцатых по восемнадцатые сутки количество АдЯО достоверно (р<0,05) уменьшилось как в зоне, близкой к рубцу, так и вдали от него на 11,5 и 19,14% соответственно. К шестидесятым суткам по сравнению с предыдущим сроком исследования количество АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев достоверно (р<0,05) возросло как в зоне, близкой к рубцу (на 17,89%), так и вдали от него (на 16,34%).
При сопоставлении зон исследования установлено, что количество АдЯО вдали от рубца остается достоверно (р<0,05) меньшим на шестые, двенадцатые и восемнадцатые сутки, по сравнению с данными в зоне, близкой к рубцу.
Средняя суммарная площадь АдЯО (табл. 2) в ядрах клеток почечных канальцев кроликов после частичной нефрэктомии достоверно (р<0,05) увеличивается на третьи сутки в зоне, близкой к рубцу, на 52,83%, а вдали от него — на 48,32%. С третьих по шестые сутки отмечено достоверное (р<0,05) повышение этого параметра на 9,01% в зоне, близкой к рубцу. По сравнению с шестыми сутками, на двенадцатые сутки происходит достоверное (р<0,05) снижение суммарной площади АдЯО в зоне близкой к рубцу на 13,09%. К пятнадцатым суткам установлено достоверное (р<0,05) снижение данного параметра вдали от рубца на 13,33%. С пятнадцатых по восемнадцатые сутки после проведения операции отмечено достоверное (р<0,05) снижение суммарной площади АдЯО в зоне, близкой к рубцу, на 12,72%. К шестидесятым суткам, в сравнении с восемнадцатыми сутками после частичной нефрэктомии, суммарная площадь АдЯО достоверно (р<0,05) сни-
зилась как зоне, близкой к рубцу, так и вдали от него на 24,78 и 29,68% соответственно.
При сопоставлении зон исследования нами установлено, что суммарная площадь АдЯО
остается достоверно ^<0,05) меньше с шестых по шестидесятые сутки вдали от рубцовой зоны, чем в зоне, близкой к рубцу.
Рис. Области ядрышковых организаторов в ядрах клеток почечных канальцев кролика после частичной нефрэктомии с ушиванием операционной раны кетгутом (зона вблизи рубца) на шестые сутки (импрегнация серебром, х 1000)
Количество AgЯО в ядрах клеток почечных канальцев кроликов после частичной нефрэктомии с применением кетгута
Таблица 1
Сроки исследования, сут. Кетгут, М± т
в зоне, близкой к рубцу (п=300) вдали от рубца (п=300)
Во время операции 1,86±0,04
3-и 2,19±0,08* 2,13±0,05*
6-е 2,25±0,05 1,88±0,05*&
12-е 2,36±0,06 1,96±0,04&
15-е 2,26±0,05 2,09±0,05
18-е 2,00±0,03* 1,69±0,05*&
60-е 2,35±0,06* 2,02±0,05*
Примечание. Статистическая значимость различий с более ранним сроком исследования: *р<0,05; между разными зонами одного срока исследования: & — р<0,05.
Таблица 2
Суммарная площадь AgЯО в ядрах клеток почечных канальцев кроликов после частичной нефрэктомии с применением кетгута, мкм2
Сроки исследования, сут. Кетгут, М± т
в зоне, близкой к рубцу (п=300) вдали от рубца (п=300)
Во время операции 2,00±0,06
3-и 4,24±0,18* 3,87± 0,10*
6-е 4,66±0,15* 3,69±0,12&
12-е 4,05±0,13* 3,45±0,09&
15-е 3,93±0,12 2,99±0,09*&
18-е 3,43±0,09* 2,83±0,11&
60-е 2,58±0,08* 1,99±0,08*&
Примечание. Статистическая значимость различий с более ранним сроком исследования: *р<0,05; между разными зонами одного срока исследования: & — р<0,05.
Выводы
Таким образом, установлено, что наибольшее количество АдЯО в ядрах выявлено на двенадцатые сутки в зоне, близкой к рубцу (2,36±0,06), а наименьшее — на восемнадцатые сутки вдали от рубца (1,69±0,05); наибольшая суммарная площадь АдЯО в ядрах клеток канальцев почек установлена в зоне, близкой к рубцу, на шестые сутки (4,66±0,15 мкм2), а минимальная — на шестидесятые сутки вдали от рубца (1,99±0,08 мкм2).
Полученные нами данные по динамике количества АдЯО в ядрах клеток почечных канальцев после частичной нефрэктомии имеют волнообразный характер и частично совпадают с динамикой изменения суммарной площади АдЯО, что, по нашему мнению, обусловлено способностью ядрышковых организаторов разных хромосом сливаться при новообразовании ядрышек в процессе деления в одну общую структуру. Подобные результаты были получены в исследованиях Ю.С. Ченцова [22].
Так как площадь АдЯО напрямую свидетельствует о функциональном состоянии клетки в целом и трансляционной активности [23], то полученные результаты указывают на активацию регенеративных процессов в клетках почечных канальцев уже на третьи сутки (вдали от рубца), однако в зоне, близкой к рубцу, этот параметр достигает максимальных значений лишь на шестые сутки с последующим постепенным снижением в обеих зонах исследования до шестидесятых суток, но остается выше данных дооперационных значений, что, по нашему мнению, свидетельствует о затяжном регенеративном процессе.
Результаты исследований свидетельствуют о том, что при использовании нитей кетгута для ушивания операционной раны почки после выполнения нефрэктомии в ядрах клеток почечных канальцев наблюдается изменение количества и суммарной площади АдЯО в зависимости от близости к операционному рубцу, что, по нашему мнению, отражает различный пролиферативный потенциал клеток почечных канальцев и состояние клеточной дифференцировки.
Библиографический список
1. Способ хирургического лечения раны почки: патент 2354305; Российская Федерация. опубл. 10.05.2009; Бюл. № 13.
2. Нигматуллин Р.Т. Очерки трансплантации тканей: курс лекций для врачей. — Уфа, 2003. — 160 с.
3. Казихинуров А.А. Методы гемостаза при операциях на почке с применением алло-генных трансплантантов: автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Уфа, 2003. — 43 с.
4. Сафиуллин Р.И. Аллогенные трансплантаты в урологии: автореф. дис. ... докт. мед. наук. — Саратов, 2009. — 40 с.
5. Муслимов С.А. Морфологические аспекты регенеративной хирургии. — Уфа: Здравоохранение Башкортостана, 2000. — 168 с.
6. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleus organizer regions with a protective colloidal developer: 1-step method // Experientia. — 1980. — Vol. 36 (8). — P. 1014-1015.
7. Демин С.Ю., Стефанова В.Н. Дифференциация интерфазных ядрышковых организаторов в клетках эмбриональной почки свиньи (линия СПЭВ) // Цитология. — 2006. — Т. 48. — № 4. — С. 320-331.
8. Крокер Джен. Районы ядрышкового организатора и фибриллярные центры. Молекулярная клиническая диагностика (Методы) / под ред. С. Херрингстона и Дж. Макги. — М.: Мир, 1999. — С. 260-279.
9. Елисеев В.Г., Афанасьев Ю.И., Юри-на Н.А. Гистология. — М.: Медицина, 1983. — 590 с.
10. Cooper G.M. The Cell. A Molecular approach / 2nd ed. Sunderland (MA): Sinauer Associates, 2000. — 625 p.
11. Райхлин Н.Т. и др. Аргирофильные белки областей ядрышковых организаторов — маркеры скорости клеточной пролиферации // Архив патологии. — 2006. — T. 68. — № 3.
— C. 47-51.
12. Жарская О.О., Зацепина О.В. Динамика и механизмы реорганизации ядрышка в митозе // Цитология. — 2007. — Т. 49. — № 5. — С. 355-369.
13. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е. Структура и функция ядрышкообразующих районов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты // Цитология. — 1992.
— Т. 34. — № 10. — С. 3-25.
14. Юрко А.С., Кавцевич Н.Н. Районы организаторов ядрышка лимфоцитов гренландских тюленей (Pagophilus groenlandicus Erxleben, 1777) разного возраста // Морские млекопитающие Голарктики. — 2006. — С. 576-580.
15. Bauer N.B., Zervos D., Moritz A. Argy-rophilic nucleolar organizing regions and Ki67 equally reflect proliferation in fine needle aspirates of normal, hyperplastic, inflamed, and ne-oplastic canine lymph nodes (n = 101) // J. Vet. Intern. Med. — 2007. — Vol. 21 (5). — P. 928-935.
16. Sirri V., Roussel P., Hernandez-Verdun D. The AgNOR proteins: qualitative and quantitative changes during the cell cycle // Micron. — 2000. — Vol. 31 (2). — P. 121-126.
17. Минина В.И., Савченко Я.А., Ахматья-нова В.Р. Влияние производственной среды на функциональную активность генов рДНК у
рабочих салаирского горно-обогатительного комбината // Современные проблемы науки и образования. — 2006. — № 3. — С. 105.
18. Сабанеева Е.В. Специфичность окрашивания ядрышковых организаторов азотнокислым серебром // Цитология. — 1989. — Т. 31. — № 1. — С. 5-13.
19. Hernandez-Verdun D. The nucleolus today // J. Cell. Sci. — 1991. — Vol. 99 (3). — P. 465-471.
20. Olson M.O.J. The role of proteins in nucleolar structure and function. In: "The Eukariotic Nucleus" (P.R. Strauss, S.H. Wilson, eds.), Vol. 2, pp. 519-559. Telford Press, Caldwell, NJ. 1990.
21. McNicol A.M., et al. Nucleolar organiser regions in pituitary adenomas // Acta Neuro-pathol. — 1989. — Vol. 77 (5). — P. 547-549.
22. Ченцов Ю.С. Введение в клеточную биологию. — Изд. 4-е, перераб. и доп. — М.: Академкнига, 2004. — 495 с.
23. Derenzini M., et al. Nucleolar size indicates the rapidity of cell proliferation in cancer tissues // J. Pathol. — 2000. — Vol. 191 (2). — P. 181-186.
References
1. Sposob khirurgicheskogo lecheniya rany pochki: patent 2354305; Ros. Federatsiya. opubl. 10.05.2009; Byul. № 13.
2. Nigmatullin R.T. Ocherki transplantatsii tkanei: kurs lektsii dlya vrachei. — Ufa, 2003. — 160 s.
3. Kazikhinurov A.A. Metody gemostaza pri operatsiyakh na pochke s primeneniem allgen-nykh transplantantov: avtoref. dis. ... kand. med. nauk. — Ufa, 2003. — 43 s.
4. Cafiullin R.I. Allogennye transplantaty v urologii: avtoref. dis. ... d-ra med. nauk. — Saratov, 2009. — 40 s.
5. Muslimov S.A. Morfologicheskie aspekty regenerativnoi khirurgii. — Ufa: Zdra-vookhranenie Bashkortostana, 2000. — 168 s.
6. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleus organizer regions with a protective colloidal developer: 1-step method // Experientia. — 1980. — Vol. 36 (8). — P. 1014-1015.
7. Demin S.Yu., Stefanova V.N. Different-siatsiya interfaznykh yadryshkovykh organiza-torov v kletkakh embrional'noi pochki svin'i (lini-ya SPEV) // Tsitologiya. — 2006. — T. 48. — № 4. — S. 320-331.
8. Kroker Dzhen. Raiony yadryshkovogo or-ganizatora i fibrillyarnye tsentry. Molekulyarnaya klinicheskaya diagnostika (metody) / pod red. S. Kherringstona i Dzh. Makgi. — M.: Mir, 1999. — S. 260-279.
9. Eliseev V.G., Afanas'ev Yu.I., Yurina N.A. Gistologiya. — M.: Meditsina, 1983. — 590 s.
+
10. Cooper G.M. The Cell. A Molecular approach / 2nd ed. Sunderland (MA): Sinauer Associates, 2000. 625 p.
11. Raikhlin N.T. i dr. Argirofil'nye belki ob-lastei yadryshkovykh organizatorov — markery skorosti kletochnoi proliferatsii // Arkhiv patologii. — 2006. — T. 68. — № 3. — C. 47-51.
12. Zharskaya O.O., Zatsepina O.V. Dina-mika i mekhanizmy reorganizatsii yadryshka v mitoze // Tsitologiya. — 2007. — T. 49. — № 5. — S. 355-369.
13. Mamaev N.N., Mamaeva S.E. Struktura i funktsiya yadryshkoobrazuyushchikh raionov khromosom: molekulyarnye, tsitologicheskie i klinicheskie aspekty // Tsitologiya. — 1992. — T. 34. — № 10. — S. 3-25.
14. Yurko A.S., Kavtsevich N.N. Raiony or-ganizatorov yadryshka limfotsitov grenlandskikh tyulenei (Pagophilus groenlandicus Erxleben, 1777) raznogo vozrasta // Morskie mlekopitayushchie Golarktiki. — 2006. — S. 576-580.
15. Bauer N.B., Zervos D., Moritz A. Argy-rophilic nucleolar organizing regions and Ki67 equally reflect proliferation in fine needle aspirates of normal, hyperplastic, inflamed, and ne-oplastic canine lymph nodes (n = 101) // J. Vet. Intern. Med. — 2007. — Vol. 21 (5). — P. 928-935.
16. Sirri V., Roussel P., Hernandez-Verdun D. The AgNOR proteins: qualitative and quantitative changes during the cell cycle // Micron. — 2000. — Vol. 31 (2). — P. 121-126.
17. Minina V.l., Savchenko Ya.A., Akh-mat'yanova V.R. Vliyanie proizvodstvennoi sredy na funktsional'nuyu aktivnost' genov rDNK u rabochikh salairskogo gorno-obogatitel'nogo kombinata // Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. — 2006. — № 3. — S. 105.
18. Sabaneeva E.V. Spetsifichnost' okra-shivaniya yadryshkovykh organizatorov azotnokislym serebrom // Tsitologiya. — 1989. — T. 31. — № 1. — S. 5-13.
19. Hernandez-Verdun D. The nucleolus today // J. Cell. Sci. — 1991. — Vol. 99 (3). — P. 465-471.
20. Olson M.O.J. The role of proteins in nucleolar structure and function. In: "The Eukariotic Nucleus" (P.R. Strauss, S.H. Wilson, eds.), Vol. 2, pp. 519-559. Telford Press, Caldwell, NJ. 1990.
21. McNicol A.M., et al. Nucleolar organiser regions in pituitary adenomas // Acta Neuro-pathol. — 1989. — Vol. 77 (5). — P. 547-549.
22. Chentsov Yu.S. Vvedenie v kletochnuyu biologiyu / izd. 4-e, pererab. i dop. — M.: Akademkniga, 2004. — 495 s.
23. Derenzini M., et al. Nucleolar size indicates the rapidity of cell proliferation in cancer tissues // J. Pathol. — 2000. — Vol. 191 (2). —
P. 181-186. +
