CC BY
26
ИЗМЕНЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ЭРИТРОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ С ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНЬЮ ПЕЧЕНИ АЛКОГОЛЬНОГО И НЕАЛКОГОЛЬНОГО ГЕНЕЗА В ДИНАМИКЕ АБСТИНЕНТНОГО СИНДРОМА И СНИЖЕНИЯ МАССЫ ТЕЛА
Кручинина М. В.1, Паруликова М. В.1, Курилович С. А.1- 2, Громов А. А.1, Генералов В. М.3
1 Научно-исследовательский институт терапии и профилактической медицины — филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук»
2 Новосибирский Государственный медицинский университет
3 Федеральное бюджетное учреждение науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Резюме
Кручинина М. В.
Kruchinina M. V. [email protected]
Цель исследования: изучить электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов у пациентов с жировой болезнью печени алкогольного и неалкогольного генеза в динамике абстинентного синдрома и снижения массы тела.
Материалы и методы. Электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов исследованы методом диэлектрофо-реза у 24-х мужчин (возраст 57,2 ± 2,7 года) — с алкогольной жировой болезнью печени в динамике абстинентного синдрома и у 22 мужчин (возраст 56,4 ± 2,2года) с неалкогольной жировой болезнью печени на фоне снижения массы тела. Период наблюдения — 2,5-3 месяца.
Результаты. В динамике абстинентного синдрома у пациентов с жировой болезнью печени алкогольного генеза отмечено достоверное улучшение характеристик эритроцитов (снижение диаметра эритроцитов, обобщенных показателей вязкости, жесткости, электропроводности, индексов деструкции, агрегации и повышение амплитуды деформации клеток, поляризуемости, величины дипольного момента, емкости клеток, смещение равновесной частоты в низкочастотный диапазон, р<0,001-0,05. Выявленные изменения коррелировали со снижением активности трансаминаз, коэффициента де Ритиса, ГГТП, среднего корпускулярного объема эритроцитов. У пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени на фоне снижения веса (на 5-7 % от исходной массы тела) достоверного изменения параметров эритроцитов не отмечено.
Заключение. Различия в динамике изменения параметров эритроцитов на фоне абстиненции и снижения массы тела у пациентов с жировой болезнью печени могут быть использованы для дифференциальной диагностики алкогольного и неалкогольного генеза заболевания.
Ключевые слова: жировая болезнь печени, алкогольный, неалкогольный генез, эритроциты, электрические, вязкоупругие параметры, динамика абстиненции
Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология 2017; 145 (9): 106-115
The purpose of the work was to study the electrical and viscoelastic parameters of erythrocytes in patients with fatty liver disease of alcoholic and non-alcoholic genesis in the dynamics of withdrawal symptoms and weight loss.
Materials and methods. The electrical and viscoelastic parameters of erythrocytes have been studied by the method of dielectrophoresis in 22 men (56,4 ± 2,2 years) with nonalcoholic and 24 with fatty liver of alcoholic genesis (57,2 ± 2,7 years) in the dynamics of withdrawal syndrome and weight loss (within 2,5-3 months).
Results. In the dynamics of the abstinence syndrome in patients with fatty liver disease of alcoholic genesis a significant decrease in the diameter of erythrocytes, summarized viscosity, rigidity, electrical conductivity, indexes of destruction, aggregation and increase of the amplitude of cell deformation, polarizability, magnitude of the dipole moment, cell capacitance were determined; the crossover frequency was shifted to the low-frequency range (p<0,001-0,05). The revealed changes correlated with a decrease of the transaminase activity, de Ritis coefficient, GGTP, the average corpuscular volume of erythrocytes. In patients with fatty liver disease of non-alcoholic genesis at the background of weight loss (5-7 % of the initial body weight) there was no significant change in erythrocyte parameters.
Conclusion. Differences in the dynamics of erythrocyte parameters at the background of abstinence and weight loss in patients with fatty liver disease can be used for differential diagnosis of alcoholic and non-alcoholic genesis of the disease.
Key words: fatty liver disease, alcoholic, nonalcoholic genesis, erythrocytes, electrical, viscoelastic parameters, dynamics of withdrawal
Eksperimental'naya i Klinicheskaya Gastroenterologiya 2017; 145 (9): 106-115
Summary
Введение
Жировая болезнь печени (ЖБП) представляет собой гетерогенную группу заболеваний, значительно различающихся по совокупности этиопатогене-тических факторов, скорости прогрессирования и прогнозу. Распространенность жировой болезни печени растет во всем мире, приводя к тяжелым инвалидизирующим последствиям [1,2], в среднем она наблюдается у 20-33 % взрослого населения. По материалам, полученным в рамках эпидемиологического исследования ВОЗ MONICA в Новосибирске, распространенность ЖБП по данным ультразвукового исследования в сибирской популяции среди мужчин и женщин близка (20 и 19 %, соответственно) и сопоставима с данными в популяциях Европы, Северной Америки и Азии [3]. У мужчин частота вариантов алкогольной жировой болезни печени (АЖБП), неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) и других причин составила 6,2; 6,2 и 7,8 %. Эпидемиологическое соотношение АЖБП/НАЖБП составляет 10-15:1 [4].
Важным критерием отличия НАЖБП от АЖБП, служит отсутствие употребления пациентами алкоголя в гепатотоксичных дозах. У большинства больных НАЖБП ассоциирована с метаболическим синдромом (МС) [5]. При этом, в патогенезе алкогольной (АЖБП) и неалкогольной (НАЖБП) жировой болезни печени, возникшей на фоне метаболического синдрома, отмечено совпадение большей части метаболических путей, что создает
сложности в дифференциальной диагностике [4, 6]. В то же время, установление генеза болезни является важным как для определения тактики ведения пациента, так и прогноза. Тем более, что жировой гепатоз алкогольного генеза подвергается обратному развитию на фоне абстиненции [7, 8].
Гипотеза настоящего исследования состояла в том, что алкоголь и его метаболит - ацетальдегид являются универсальными мембранотропными соединениями [9], поэтому подход, позволяющий выявить это токсическое действие на уровне мембран и клеток в целом (в данном случае - эритроцитов), окажется полезным в плане дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза.
Данные литературе свидетельствуют, что эритроцит является высокочувствительной клеткой к воздействию со стороны внешних и внутренних факторов, в ответ на которые наступают глубокие изменения, коренным образом трансформирующие электрические и вязкоупругие характеристики клетки в целом [10, 11].
Цель работы: изучить электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов у пациентов с жировой болезнью печени алкогольного и неалкогольного генеза в динамике абстинентного синдрома и выполнения рекомендаций по снижению массы тела. для возможного использования в дифференциальной диагностике.
Материал и методы исследования
Обследовано 22 мужчины (56,4±2,2 года) с неалко- i
гольной и 24 - с жировой болезнью печени алкоголь- i
ного генеза (57,2±2,7 года) в динамике абстинентного i
синдрома и выполнения рекомендаций по снижению ( массы тела для пациентов с НАЖБП в течение 2,5-3
месяцев. Все пациенты заполнили стандартные ан- I
кеты по потреблению алкоголя (AUDIT), уровню л
тревоги и образу жизни. Выполнены стандартные п клинические, биохимические и инструментальные
исследования для оценки состояния печени (вклю- с
чая ультрасонографию, непрямую эластометрию, j
у части -компьютерную томографию). У всех паци- п
ентов отмечено увеличение размеров печени и нали- i
чие стеатоза, степень фиброза печени у большинства з
ценена как F0-F1. Вирусная этиология заболевания Д
исключена на основании отсутствия серологических i
и вирусологических маркеров. j
Группу сравнения составили практически здоро- с
вые лица сходного возраста (20 мужчин, средний воз- к
раст 55,7±3,3 года), ведущие здоровый образ жизни С
и употребляющие алкоголь не чаще 1-2-х раз в месяц о
в малых дозах (не более 30 г в пересчете на чистый j
этанол), у которых при клиническом, лабораторном ч
и инструментальном обследовании не выявлено н
признаков заболевания печени и другой патологии о
внутренних органов. з
В обеих группах (пациенты и группа сравнения) и
выполнен диэлектрофорез эритроцитов в неоднород- п
ном переменном электрическом поле (НПЭП). Клетки е красной крови получали из цельной крови пациентов,
взятой из вены. Подробно методика описана в монографии [12]. Для компьютерной обработки данных использовался пакет оригинальных программ CELLFIND. Ошибка воспроизводимости метода - 7-12 %.
Обследование выполнено с одобрения Комитета Биомедицинской Этики НИИ Терапии и профилактической медицины (протокол от 01.11.2016), все пациенты подписали информированное согласие.
Статистическая обработка данных выполнена с использованием программы SPSS, ver. 17. Определяли характер распределения количественных признаков методом Колмогорова-Смирнова. В случае нормального распределения вычислялось среднее значение (М) и стандартная ошибка среднего (m). Достоверность различия показателей оценивали по критерию Стьюдента, Пирсона (при нормальном распределении), в случаях отклонения распределения от нормального использовали непараметрические критерии (U-критерий Манна-Уитни, Колмогорова-Смирнова, хи-квадрат). Связи между признаками оценивались путем вычисления коэффициента корреляции Спирмена (r). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой гипотезы (p) принимался равным 0,05. Для оценки значимости параметров эритроцитов с точки зрения дифференциальной диагностики алкогольной и неалкогольной жировой болезни печени был использован ROC-анализ с помощью построения приемных характеристических кривых (ROC-кривые) для различных характеристик клеток красной крови.
Результаты исследования
У пациентов с НАЖБП не выявлено прошлого и настоящего употребления алкоголя в токсических дозах: 12 человек (54,5 %) не употребляли алкоголь в течение жизни по религиозным или этическим причинам, 10 мужчин (45,5 %) употребляли спиртные напитки (преимущественно не крепкие) не чаще 1 раза в 2-3 месяца в дозах, не превышающих 20 г в пересчете на чистый этанол.
В группе с НАЖБП у всех отмечены проявления метаболического синдрома [13]. У 86,4 % ИМТ был > 30 кг/м2, с центральным типом ожирения (с окружностью талии 107±8,6 см). Артериальная гипертензия II степени (АД>130/85 мм рт. ст.) обнаружена у всех обследованных, повышение уровня триглицеридов (>1,7 ммоль/л) у 91 % пациентов, снижение уровня ХС липопротеидов высокой плотности - ЛПВП (<1,0 ммоль/л) у 77,3 %, повышение уровня ХС ЛПНП (>3,0 ммоль/л) у 68,2 %, гипергликемия натощак (глюкоза в плазме крови натощак 6,1 ммоль/л и более) у 59 % и инсулиноре-зистентность - у 91 %. Атерогенная дислипидемия наблюдалась у всех обследованных: в 18,2 % - ДЛП 2А, 81,8 % - ДЛП 2Б. У 77,3 % пациентов была выявлена гиперурикемия.
При этом, биохимическая активность отсутствовала (табл 1), что однако не исключало наличие морфологической активности (стеатогепатита).
Среди обследованных с АЖБП преобладали мужчины с частым потреблением алкоголя (от 1 до нескольких раз в неделю или ежедневным) длительное время (17,3±4,5 лет), средняя недельная доза алкоголя в пересчете на чистый этанол составила 366,4±65,3 г, разовая доза составила 76,1±6,1 г, доза, принятая во время последнего алкогольного эксцесса - 78,6±10,7 г. Среди этих пациентовв не выявлено лиц с центральным типом ожирения (окружность талии составила в среднем 88,2±6,4 см). Но у большей части (п= 18, 75 %) выявлена артериальная гипертензия (САД 135,4±7,2 мм. рт. ст., ДАД 84,2±3,4 мм. рт. ст.), как и у пациентов с НАЖБП.
При этом в группе с АЖБП чаще, чем при НАЖБ наблюдались нарушения ритма и проводимости сердца (р=0,02). У пациентов с АЖБП также выявлены отклонения в липидном спектре сыворотки крови, однако они были менее выражены (табл. 1). Гипергликемия натощак выявлена у 16 человек (66,7 %), что не отличалось от группы с НАЖБП. При этом, уровни трансаминаз, ГГТП, ЩФ, АМК, общего билирубина находились в пределах референтных значений, но достоверно превышали таковые в группе сравнения и при НАЖБП. У пациентов обеих групп с жировой болезнью печени обнаружены отклонения в уровнях мочевой кислоты, креатинина, мочевины, железа сыворотки крови по сравнению со здоровыми лицами (р<0,001-0,05), не различаясь при АЖБП и НАЖБП. Показатели белкового обмена у пациентов с жировой болезнью печени различного генеза находились в пределах нормальных значений.
Таким образом, у пациентов с жировой болезнью печени неалкогольного генеза выявлены изменения в биохимических показателях, отражающие наличие метаболического синдрома, а у больных с алкогольной жировой болезнью печени - маркеры систематического потребления алкоголя.
При исследовании общего анализа крови большая часть показателей достоверно не различалась между группами. Однако, у больных с АЖБП достоверно выше оказался уровень ретикулоцитов по сравнению с группой с НАЖБП и контролем, как и уровень СОЭ (р=0,02-0,05). Кроме того, у пациентов с АЖБП более высоким оказался средний корпускулярный объем эритроцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците и относительная ширина распределения эритроцитов по объему (р<0,001-0,05).
Пациенты с АЖБП в динамике были обследованы в ранние сроки абстиненции (1-5 день), и в отдаленные сроки абстиненции - через 2,5-3 месяца. Пациенты с НАЖБП - через 2,5-3 месяца
Рисунок 1.
ROC-кривые электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов в дифференциальной диагностике алкогольной и неалкогольной жировой болезни печени.
Iг
0,6 -
0,4 -
0,2
степень деформации при 0,5 х 106 Гц (Аис = 0,798)
— /Средний диаметр (0,719)
обобщенная жесткость (0,790) '= обобщенная вязкость (0,811)
— дипольный момент (0,831)
- поляризуемость при 106 Гц (0,828)
амплитуда деформации при 106 Гц (0,857)
0,2 0,4 0,6
1 - Специфичность
0
1-я группа (АЖБП), n=24
2-я группа (НАЖБП), n=22
Показатели сравнения ранние отдаленные через 2,5-3 месяца
n=20 сроки абстиненции сроки абстиненции исходно
Общий холестерин, мг/дл 174,2 ± 5,7 205,9 ± 7,3* 199,2 ± 6,1* 233,2± 7,1**л 229,2 ± 8,4*л2
Холестерин ЛПВП, мг/дл 53,0 ± 1,5 52,3 ± 1,2 45,2 ± 1,6*1 41,8 ± 1,7*л 42,9 ± 2,5*л
Холестерин ЛПНП, мг/дл 110,3 ± 3,5 138,6 ± 2,6* 142,4 ± 3,0* 162,6 ± 2,1**лл 158,5 ± 3,7**лл2
Триглицериды, мг/дл 142,5 ± 10,8 219,9 ± 11,5** 183,5 ± 9,2** 226,3 ± 14,3 ** 217,5 ± 16,7**2
Глюкоза крови натощак, ммоль/л 4,8 ± 0,8 6,0 ± 0,3** 5,6 ± 0,8* 6,2 ± 0,4** 6,4 ± 0,5**2
Общий белок, г/л 72,7 ± 0,9 70,1 ± 0,8 68,9 ± 1,2 69,1 ± 0,9 70,5 ± 0,8
Альбумин, г/л 44,6 ± 0,8 42,5 ± 0,9 41,8 ± 0,7 43,4 ± 0,6 42,9 ± 0,9
АЛТ, U/l 14,8 ± 1,9 36,5 ± 3,6** 18,2 ± 4,11 26,7 ± 2,9 *лл 24,5 ± 3,0 *лл2
АСТ, U/l 13,9 ± 2,5 38,9 ± 4,7** 19,7 ± 5,31 23,2 ± 3,2**лл 24,8 ± 2,2**лл
АСТ/АЛТ 0,93 ± 0,10 1,07 ± 0,10 1,02 ± 0,09 0,86 ± 0,12 0,88 ± 0,10
ГГТП, U/l 15,9 ± 3,7 51,7 ± 6,1** 19,9 ± 4,8**' 35,2 ± 5,8 **лл 36,7 ± 4,5 **лл2
ЩФ, U/l 142,8 ± 10,3 188,2 ± 10,3** 160,7 ± 9,1**1 179,5 ± 11,9** 168,2 ± 10,5**
АМК, U/l 51,3 ± 5,2 64,8 ± 7,2 60,1 ± 6,8 62,8 ± 10,7 67,9 ± 12,5
Общий билирубин, мкмоль/л 11,5 ± 0,8 17,2 ± 2,1* 14,1 ± 1,9 12,5 ± 1,4 л 13,7 ± 2,1
Прямой билирубин, мкмоль/л 3,8 ± 0,9 5,6 ± 1,9* 4,3 ± 1,3 4,8 ± 0,8* 4,0 ± 0,7
Мочевая кислота, мг/дл 170,2 ± 12,5 430,5 ± 17,8*** 327,8 ± 20,5**1 425,7 ± 19,1*** 400,2 ± 14,3***2
Креатинин, мкмоль/л 61,5 ± 2,1 83,9 ± 2,3** 85,2 ± 3,1** 78,45 ± 2,8** 77,21 ± 3,7*
Мочевина, ммоль/л 5,3 ± 1,8 6,3 ± 2,0* 5,7 ± 3,1 6,5 ± 2,1* 6,6 ± 3,7*
Железо сыворотки, мкмоль/л 10,9 ± 1,7 21,8 ± 2,1** 16,3 ± 3,5 17,2 ± 1,8** 16,4 ± 2,2**
ОЖСС, мг/дл 43,7 ± 6,5 53,4 ± 4,0 51,7 ± 5,2 51,9 ± 6,7 52,2 ± 5,5
Количество эритроцитов, х1012/л 4,59 ± 0,10 4,51 ± 0,11 4,54 ± 0,15 4,57 ± 0,06 4,60 ± 0,12
Уровень гемоглобина, г/л 153,2 ± 2,5 147,7 ± 2,0 145,9 ± 3,1 150,2 ± 3,9 147,5 ± 4,1
Цветовой показатель 0,95 ± 0,04 0,95 ± 0,02 0,94 ± 0,03 0,96 ± 0,03 0,95 ± 0,04
Ретикулоциты,% 0,6 ± 0,05 1,2 ± 0,1** 0,7 ± 0,071 0,9 ± 0,04*л 0,8 ± 0,02л
СОЭ, мм/ч 10,2 ± 1,7 18,8 ± 2,1** 9,5 ± 3,01 20,0 ± 1,4** 15,1 ± 1,9*2
Количество тромбоцитов, х109/л 229,6 ± 10,5 224,8 ± 11,8 214,6 ± 9,3 218,1 ± 9,1 205,3 ± 10,7
Количество лейкоцитов, х109/л 5,5 ± 0,32 6,91 ± 0,48 6,01 ± 0,53 6,70 ± 0,30 7,24 ± 0,64
Гематокрит,% 42,41 ± 0,58 43,6 ± 1,0 44,7 ± 0,83 42,5 ± 0,9 43,7 ± 0,7
Средний корпускулярный объем эритроцита (MCV), fl 93,7 ± 0,52 99,5 ± 0,68** 90,2 ± 0,511 91,4 ± 0,55лл 92,7 ± 0,62лл
Среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците (MCH), пг 31,21 ± 0,29 32,98 ± 0,31* 31,5 ± 0,24 30,40 ± 0,31*л 31,1 ± 0,40л
Приблизительная концентрация
имеющегося гемоглобина в кро- 333,11 ± 2,12 331,79 ± 2,2 330,3 ± 3,1 333,0 ± 3,94 329,7 ± 4,51
ви (MCHC), г/л
Ширина распределения эритроцитов по объему (RDW-CV),% 13,84 ± 0,08 14,14 ± 0,14 14,5 ± 0,10 14,21 ± 0,12 14,7 ± 0,21
Относительная ширина распре-
деления эритроцитов по объему 50,43 ± 0,36 53,45 ± 0,62* 49,92 ± 0,57 49,53 ± 0,45лл 50,61 ± 0,51
(RDW-SD), fl
Таблица 1.
Биохимические показатели, параметры красной крови групп обследуемых исходно и в динамике абстинентного синдрома (у пациентов с АЖБП) и снижения массы тела (у больных с НАЖБП).
Примечание:
М - среднее значение, т -средняя ошибка, *- достоверность (р) отличия от группы сравнения (* - р<0,05, ** - р<0,01, *** -р<0,001);
Л - достоверность (р) отличия от 1-й группы в ранние сроки абстиненции (л - р<0,05, лл - р<0,01, ллл-р<0,001).
1 - различия достоверны в сравнении с исходными данными этой же группы (р<0,05)
2 - различия достоверны в сравнении с данными 1 группы в отдаленные сроки абстиненции (р<0,05).
выполнения рекомендаций по снижению массы тела. Состояние абстиненции у пациентов с АЖБП объективно подтверждалось снижением активности трансаминаз, ГГТП, уровня ХС ЛПВП, СКОЭ, мочевой кислоты при обследовании через 2,5-3 месяца (табл. 1). Следует отметить, что у пациентов с НАЖБП динамике снижения массы тела (на 5-7 % от исходной) отмечены лишь тенденции к улучшению биохимических параметров.
В те же сроки у пациентов обеих групп и условно здоровых мужчин были исследованы электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов (табл. 2).
Эритроциты лиц группы сравнения имели преимущественно дискоцитарную форму, клетки обладали значительным поверхностным зарядом,
что отражалось высокими скоростью движения к электродам и дипольным моментом, низкой склонностью к образованию агрегатов и деструкции. На высоких частотах электрического поля эритроциты деформировались в максимальной степени, мембрана клеток обладала низкой электропроводностью, умеренной емкостью, высокой поляризуемостью на всех частотах.
При ЖБП, независимо от генеза, по сравнению с контролем, отмечено преобладание деформированных эритроцитов, повышенный уровень сфероцитарных форм, снижена способность к деформации на высоких частотах (106Гц, 0,5х106Гц), клетки обладали сниженной резистентностью, приводящей к гемолизу на различных частотах, легко образовывали агрегаты.
Таблица 2.
Электрические и вязкоупру-гие параметры эритроцитов групп обследуемых исходно и в динамике абстинентного синдрома (у пациентов с АЖБП) и снижения массы тела (у больных с НАЖБП).
Примечание:
М - среднее значение, т -средняя ошибка, *- достоверность (р) отличия от группы сравнения (* - р<0,05, ** - р<0,01, *** -р<0,001);
Л - достоверность(р) отличия от 1-й группы в ранние сроки абстиненции (л - р<0,05, лл - р<0,01, ллл-р<0,001).
1 - различия достоверны в сравнении с исходными данными этой же группы (р<0,05)
2 - различия достоверны в сравнении с данными 1 группы в отдаленные сроки абстиненции (р<0,05).
1-я группа (АЖБП), n=24
2-я группа (НАЖБП), n=22
Показатели сравнения, n=20 ранние сроки абстиненции отдаленные сроки абстиненции исходно через 2,5-3 месяца
Средний диаметр эритроцита [мкм] 7,51 ± 0,03 7,62 ± 0,02* 7,48 ± 0,031 7,50 ± 0,03Л 7,49 ± 0,02
Преобладающая форма Ег, п (%): сфероциты, дискоциты 0 (0 00) 20 (100 %) 7 (29,2 %) 17 (70,8 %)* 3 (12,5 %) 21 (87,5 %) « 4 (18,2 %) 18 (81,8 00) * 3 (13,6 %) 18 (86,4 %) *2
Бугристые, шиповидные Ег, п (%) 1 (5 %) 21 (87,5 %) *** 12 (50 %) ***1 10 (45,5 00) **Л 9 (40,9 %) **
2,2*10-6 ± 0,0940-6 0,5440-6 0,6110-6 0,6540-6 0,6440-6
Амплитуда деформации [м] при 106 Гц ± 0,00840-6 *** ± 0,0110-6 **1 ± 0,0240-6 ***ЛЛ ± 0,0340-6 ***
Степень деформации при 0,5х106 Гц (%) 88,5 ± 2,7 38,4 ± 1,9**** 62,2 ± 2,1**1 55,4 ± 2,0****ЛЛ 58,9 ± 2,8***
Доля пациентов с низким уровнем амплитуды деформации Ег, п (%) 0 (0 00) 22 (91,7 %)**** 5 (20,8 о/»)****1 9 (40,9 %)***ЛЛ 7 (31,8 %)***2
Обобщенный показатель жесткости [Н/м] 4,7-10-6 ± 0,7-10-6 10,2-10-6 ± 0,0540-7 **** 7,840-6 ± 0,0840-7 *** 8,45- 10-6 ± 0,0740-7 ****ЛЛЛ 7,96- 10-6 ± 0,0940-7 ***
Обобщенный показатель вязкости [Па. с] 0,35 ± 0,04 0,79 ± 0,007**** 0,65 ± 0,005****1 0,70 ± 0,008 ****ЛЛЛ 0,68 ± 0,01 ****2
Индекс агрегации Ег [усл.ед.] 0,45 ± 0,03 0,71 ± 0,01*** 0,64 ± 0,008**1 0,68 ± 0,008 ***Л 0,67 ± 0,01**
Индекс деструкции Ег [%] при 106 Гц 1,0 ± 0,4 4,8 ± 0,5 *** 1,8 ± 0,6 1 2,0 ± 0,2 *Л 1,9 ± 0,4
Индекс деструкции Ег [%] при 0,5х106 Гц 0,6 ± 0,02 4,6 ± 0,4*** 1,6 ± 0,3' 2,6 ± 0,4**ЛЛ 1,2 ± 0,3*
Индекс деструкции Ег [%] при 0,1х106 Гц 0,4 ± 0,04 3,5 ± 0,5*** 1,2 ± 0,7*! 2,2 ± 0,5**Л 1,0 ± 0,8
Индекс деструкции Ег [%] при 0,5х105Гц 0,3 ± 0,03 3,2 ± 0,6 *** 1,2 ± 0,9 * 1,9 ± 0,3 **ЛЛ 0,9 ± 0,4
4,0-1015 ± 0,9-10-15 0,43940-15 0,47440-15 0,47840-15 0,48140-15
Поляризуемость [м3] при 106 Гц ± 0,00940-15 **** ± 0,0110-15 **1 ± 0,00840-15 ****ЛЛЛ ± 0,0110-15
3,110-5 ± 0,440-5 7,540-5 5,940-5 7,040-5 6,340-5
Электропроводность [См/м] ± 0,340-5 **** ± 0,840-5 **1 ± 0,2640-5 ****ЛЛ ± 0,940-5 **
7,4 40-14 ± 0,840-14 3,640-14 5,440-14 4,94014 5,340-14
Емкость клеточной мембраны [Ф] ± 0,640-14 *** ± 0,840-14 **1 ± 0,540-14 ***Л ± 0,740-14 **
Скорость движения Ег к электродам [мкм/с] 12,5 ± 1,7 4,5 ± 0,3*** 7,8 ± 0,7*** 5,3 ± 0,2**Л 6,7 ± 0,9**
0,49406 ± 0,08406 1,40-106 0,67406 0,7406 0,69406
Равновесная частота [Гц] ± 0,19106 **** ± 0,09406 **1 ± 0,25406 **ЛЛ ± 0,08406 **
Дипольный момент [Клм] 1,5-1021 ± 0,440-21 0,3440-21 ± 0,0840-21 **** 0,6740-21 ± 0,1-10-21 **1 0,5440-21 ± 0,0940-21 ****ЛЛЛ 0,6040-21 ± 0,1240-21 **
Однако, выявлены и различия в поведении эритроцитов, связанные с генезом жировой болезни печени. Эритроциты пациентов с НАЖБП после перевода в раствор сахарозы преимущественно имели дискоцитарную форму, 18,2 % клеток приобретали форму «спущенного мяча» или сферо-цитарную. Уровень недискоцитарных форм у больных с АЖБП возрастал до 29,2 % (р=0,04), кроме того, большая часть клеток отличалась бугристой, шиповидной поверхностью (87,5 % против 45,5 % при НАЖБП, р=0,025). Клетки красной крови при АЖБП имели больший диаметр, чем при неалкогольном генезе заболевания (р<0,05) (табл. 2).
Эритроциты пациентов с АЖБП имели более низкий поверхностный заряд по сравнению с клетками красной крови больных с НАЖБП, что отражали более низкие уровни скорости движения
к электродам, величины дипольного момента (р<0,001-0,05). При алкогольной жировой болезни печени способность клеток к деформации на высоких частотах оказалась достоверно ниже, чем при неалкогольном генезе заболевания (р<0,01). Доля лиц, имеющих минимальную пластичность при алкогольном генезе, оказалась максимальной (91,7 % против 40,9 % в группе с НАЖБП, р<0,0001). Низкая деформабельность при АЖБП отмечена на фоне максимально высоких обобщенных показателей вязкости (г= -0,68, р=0,003) и жесткости (г= -0,75, р<0,001).
Мембраны клеток красной крови при АЖБП имели высокую электропроводность, большую толщину (отражаемую емкостью клеток) по сравнению с больными с НАЖБП (р<0,001-0,01). Отмечено резкое смещение равновесной частоты
в высокочастотный диапазон при АЖБП в отличие от НАЖБП (р=0,02). Показатель поляризуемости, отражающий жизнеспособность клеток, оказался достоверно ниже при алкогольном генезе по сравнению с НАЖБП (р<0,0001). Это сказалось на повышении индекса деструкции клеток на всех частотах, и, как следствие, нарастании индекса агрегации.
Дифференцирующими параметрами вязкоупру-гих и электрических свойств эритроцитов между пациентами с алкогольной и неалкогольной жировой болезнью печени оказались: средний диаметр эритроцита, амплитуда деформации при частоте 106Гц, степень деформации при 0,5х106Гц, обобщенные показатели вязкости и жесткости, поляризуемость при частоте 106Гц, величина диполь-ного момента (р<0,0001-0,001), что подтверждено ROC-анализом с помощью построения приемных характеристических кривых (ЯОС-кривые) для различных характеристик клеток красной крови, результаты которого представлены на рисунке 1. Получены высокие уровни АиС для наиболее значимых параметров эритроцитов (0,719-0,857), свидетельствующие о достаточно высоких уровнях чувствительности и специфичности в качестве диагностических маркеров алкогольной и неалкогольной жировой болезни печени.
Наиболее явно различия между пациентами с АЖБП и НАЖБП выявились при исследовании параметров эритроцитов в динамике абстинентного синдрома (для пациентов с АЖБП) и выполнения рекомендаций по снижению веса (для больных с НАЖБП) в течение 2,5-3 месяцев.
На фоне воздержания от приема алкоголя (что было подтверждено объективно биохимическими показателями) отмечена явная положительная динамика у пациентов с АЖБП: уменьшился диаметр эритроцитов, количество деформированных форм с измененной поверхностью, возрос поверхностный заряд, поляризуемость на всех частотах, достоверно снизилась электропроводность, увеличилась емкость клеток (таблица 2). Произошло достоверное увеличение деформабельности эритроцитов на фоне снижения обобщенных показателей вязкости и жесткости. Существенно снизился гемолиз клеток крови и агрегатообразование. Отмечено смещение равновесной частоты в низкочастный диапазон (р<0,001-0,05). Следует отметить, что ряд параметров эритроцитов «отреагировал» на состояние абстиненции в более ранние сроки (3-4 недели) - это положение равновесной частоты, поляризуемость, емкость клеток, величина ди-польного момента, электропроводность, скорость движения к электродам. Такие же показатели, как амплитуда деформации, обобщенные показатели вязкости, жесткости, индексы деструкции, агрегации изменились в более отдаленный период (р=0,004-0,02).
У пациентов с НАЖБП к сроку второго обследования удалось достичь снижения веса на 5-7 % от исходного. Следует отметить, что достоверного изменения показателей клеток красной крови не выявлено. По ряду параметров (амплитуда деформации, индекс деструкции на разных частотах, величина дипольного момента) отмечены
положительные тенденции, не достигающие, однако, уровня достоверности (таблица 2).
Выявленные корреляции электрических и вязко-упругих параметров эритроцитов с клинико-био-химическими показателями у пациентов с жировой болезнью печени представлены в таблице 3.
Поскольку изменения электрических и вязкоу-пругих параметров эритроцитов в значительной степени отражают токсическое действие этанола и его метаболитов, неудивительны выявленные связи со стилем потребления алкоголя (таблица 3). Следует отметить большое количество корреляций характеристик эритроцитов с днем абстиненции. Дозы принятого алкоголя (во время последнего эксцесса, разовая) коррелировали с диаметром клеток, долей деформированных, сфероцитарных эритроцитов, индексом агрегации, электропроводностью, а частота потребления оказалась ассоциирована с параметрами, характеризующими пластичность клеток красной крови. Недельная же доза выпитого алкоголя коррелировала лишь с уровнем электропроводности мембран (г=+0,49, р=0,02).
Большая часть вязкоупругих и электрических параметров эритроцитов у больных с АЖБП оказалась ассоциирована с уровнями общего холестерина и триглицеридов, которые прямо коррелировали с обобщенными показателями вязкости, жесткости, электропроводностью, уровнем сфероцитарных форм, индексом агрегации и обратно- с амплитудой деформации клеток на высоких частотах, скоростью движения эритроцитов к электродам, величиной дипольного момента, емкостью мембраны, величиной поляризуемости (таблица 3). Уровень мочевины также сказывался на доле сфероцитарных форм и отрицательно влиял на дефор-мабельность клеток. Повышенный уровень железа сыворотки оказывал влияние на величину поверхностного заряда клеток, что отразилось в корреляциях со значением дипольного момента, уровнем агрегации, положением равновесной частоты, но вместе с тем сказался на структуре мембран (ассоциации с электропроводностью и степенью деформации на частоте 0,5х106Гц). В группе пациентов с АЖБП величина среднего диаметра эритроцитов оказалась прямо ассоциированной с уровнем ХС ЛПВП (г=+0,48, р=0,024).
С большей частью печеночных проб у пациентов с АЖБП коррелировали отдельные параметры эритроцитов, причем часть - на уровне тенденций. Так, величина среднего диаметра эритроцита оказалась прямо связанной с активностью ГГТП (г=+0,528, р<0,05), ЩФ (г=+0,54, р=0,046); повышенный уровень сфероцитарных форм ассоциирован с уровнем прямого билирубина (г=+0,63, р=0,036); уровень активности АЛТ - с величиной индекса агрегации (г=+0,395, р<0,05); АСТ - с положением равновесной частоты, но в виде тенденции (г=+0,35, р=0,07). В большей части на равновесную частоту влиял уровень креатинина (г=+0,486, р=0,014), который коррелировал и с емкостью мембран эритроцитов (г= -0,373, р=0,06).
У пациентов с НАЖБП по большей части параметров эритроцитов выявились корреляции с показателями липидного, белкового обмена. Именно
Таблица 3.
Корреляции вязкоупругих и электрических характеристик эритроцитов у больных с алкогольной и неалкогольной жировой болезнью печени с клинико-биохими-ческими показателями.
Примечание.
В круглых скобках указан показатель достоверности данного коэффициента корреляции, н - корреляция статистически незначима. Прямым шрифтом представлены корреляции у пациентов с АЖБП, наклонным -у пациентов с НАЖБП.
m с; Ф
о S о
с; ш s ^ ^ X ф X S н о ф L_ го Ф с
го го го ^ о . н .0 X го го го а ф с KJ ф Ю Ф . н
о ш о о о
1= . m =1 го d с m 1=
Преобладающая форма Er, n (%): сфероциты, дискоциты
S
5 а
о го т о_
3 g
vo § О х
т о 11
0,428 (0,003) н
0,262 (0,05) н
-0,476 (0,016) н
-0,363 (0,074) н
о а.
о
х д
S с;
fc °
ГО 5
ш г
а £
it S
Средний н 0,391 н 0,359 -0,507 н н н н
диаметр (0,007) (0,013) (0,01)
эритроцита н н н н -0,38 -0,373 н н 0,444
[мкм] (0,081) (0,087) (0,038)
Бугристые, шиповидные Er, n (%)
-0,305 (0,037) н
0,304 (0,038) н
0,291 (0,047) н
Амплитуда деформации н н -0,496 н -0,525 н н н н
н н (0,000) н н (0,007) -0,53 н н н -0,521
[м] при 106 Гц (0,011) (0,013)
Степень н н -0,512 н -0,530 н -0,410 -0,566 н
деформации (0,000) (0,006) (0,05) (0,07)
при 0,5х106 н н н н -0,402 н н н -0,363
Гц (%) (0,064) (0,097)
Обобщенный н н 0,421 н 0,520 н 0,364 н н
показатель (0,02) (0,008) (0,096)
жесткости, н н н н 0,493 н н н 0,547
[Н/м] (0,02) (0,008)
Обобщенный н н 0,552 н 0,480 н 0,396 н н
показатель (0,03) (0,015) (0,068)
вязкости, н н н н 0,471 н н н 0,448
[Па. с] (0,027) (0,037)
Индекс агрегации Ег, [усл.ед.]
-0,292 (0,046) н
0,354 (0,015) н
0,288 (0,05) н
0,435 (0,03) 0,519 (0,013)
0,396 (0,05) н
0,524 (0,09) н
Поляризуемость, [м3], при 106 Гц
0,32 (0,029) н
-0,277 (0,057) н
-0,436 (0,029) н
Электропроводность, [См/м]
-0,289 (0,048) н
0,354 (0,015) н
0,357 (0,014) н
0,373 (0,066) н
0,34 (0,096) н
0,597 (0,05) н
0,453 (0,034)
Емкость 0,324 н н н -0,355 н н н -0,373
клеточной (0,026) (0,08) (0,066)
мембраны, н н н н -0,411 н н н -0,401
[Ф] (0,058) (0,064)
Скорость движения Ег, [мкм/с]
-0,354 (0,04) н
-0,55 (0,004) н
-0,415 (0,039) н
-0,369 0,451 н н н н н 0,564 0,486
Равновесная (0,012) (0,002) (0,07) (0,014)
частота, [Гц] н н н н 0,575 н н н 0,381
(0,005) (0,08)
Дипольный 0,670 -0,504 н -0,612 -0,42 -0,48 -0,40 -0,47
(0,001) (0,001) (0,04) (0,02) (0,019) (0,047) (0,038)
н н н н -0,352 н н н -0,524
[Клм] (0,05) (0,01)
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
н
в данной группе выявлены обратные ассоциации уровня общего белка и доли сфероцитарных форм (г= -0,525, р=0,012), индекса агрегации эритроцитов (г= -0,42, р<0,05). Установлены корреляции уровня мочевой кислоты со склонностью клеток к агрегации (г=0,375, р=0,03), долей эритроцитов с деформированной поверхностью (г=0,42, р<0,05). Только у мужчин с неалкогольным генезом жировой болезни печени определена связь скорости движения клеток к электродам с уровнем гликемии (г= -0,498, р=0,018). Активность ГГТП в данной группе влияла на долю деформированных эритроцитов (г=0,672, р=0,023).
В группе с АЖБП выявлены корреляции традиционных параметров красной крови с вязко-упругими характеристиками, преимущественно с поляризуемостью на разных частотах (для частоты 106 Гц - для количества эритроцитов г=0,419, р=0,037, для уровня гемоглобина г=0,478, р=0,016,
для гематокрита - г=0,433, р=0,031), с емкостью мембран - для гематокрита г=0,342, р=0,04. Степень деформации эритроцитов оказалась связанной с уровнем гемоглобина (г= -0,42, р<0,05), величиной цветового показателя (г= -0,54, р=0,009), уровнем гематокрита (г= -0,377, р=0,04). Уровень ретикулоцитов прямо коррелировал со степенью гемолиза (для 106Гц г=0,32, р=0,002, для 0,5х106Гц г=0,28, р=0,04) и обратно - с поляризуемостью на высоких частотах (для 106Гц г= -0,61, р=0,014, для 0,5х106Гц г= -0,54, р=0,02). СКОЭ в этой же группе больных был ассоциирован с показателями пластичности эритроцитов (с амплитудой деформации на частоте 106Гц г= -0,52, р=0,006, на 0,5х106Гц г= -0,486, р=0,001, обобщенной вязкостью г=0,579, р=0,002, обобщенной жесткостью г=0,566, р=0,018). В группе пациентов с НАЖБП вышеописанные корреляции отсутствовали или носили характер тенденций.
Обсуждение полученных результатов
Выявленные в настоящем исследовании различия в электрических и вязкоупругих параметрах эритроцитов у пациентов с жировой болезнью печени алкогольного и неалкогольного генеза связаны с хроническим воздействием универсального мембранотропного фактора - этанола при АЖБП. Известно воздействие этанола и его метаболита, ацетальдегида, как на поверхностные структуры мембран, так и на внутренние структуры клеток крови, что приводит к значительным изменениям их функциональных характеристик [14]. Не случайно проведено исследование параметров эритроцитов в динамике абстинентного синдрома, которое позволяет объективно оценить степень токсического воздействия этанола. Вместе с тем, подобный подход перспективен в плане дифференциальной диагностики АЖБП и НАЖБП.
Устранение мембранотропного токсина - этанола - существенным образом сказалось на изменении электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов. С одной стороны, налицо были токсические эффекты этанола при изучении параметров эритроцитов в ранние сроки абстиненции - в виде резкого смещения равновесной частоты в высокочастотный диапазон, значительного снижения поверхностного заряда клеток (низкие уровни скорости движения эритроцитов к электродам, дипольного момента), что связано с модификацией поверхности мембран (снижение уровня сиаловых кислот, увеличение плотности карбоксильных групп, экстернализация фосфа-тидилсерина, усиление микровезикуляции с поверхности мембран, образование этиловых эфиров жирных кислот, аномального фосфолипида - фос-фатидилэтанола) [14, 15, 16, 17]. Вероятно, уменьшение количества мембрано-связанных гликанов модифицирует наружную поверхность мембран в области взаимодействия этанола с полярными группами фосфолипидов. С другой стороны, этанол, ацетальдегид вызвали изменение самой структуры мембран - повышение уровня холестерина, насыщенных жирных кислот при резком
снижении ненасыщенных как результат активации ПОЛ, окислительного фосфорилирования [16, 18]. Эти изменения существенным образом повлияли на работу встроенных в мембрану белков, ферментов, активность которых определяется липидным микроокружением [10]. Образование «микропор» в мембранах эритроцитов, «сшивок» с гемоглобином изнутри мембран [11] сказалось на способности клеток проводить электрический ток, что отразилось в нарастании электропроводности мембран эритроцитов пациентов с АЖБП. Модификация структуры мембран сказалась на ее толщине, соответственно, показателе емкости, уровень которого был низок в ранние сроки абстиненции.
Установлены дестабилизирующие эффекты этанола и ацетальдегида на клетки красной крови, приводящие к гемолизу [19]. В нашем исследовании данный факт подтверждается избыточным лизисом эритроцитов на различных частотах электрического поля у пациентов с АЖБП, особенно в ранние сроки абстиненции. Это обстоятельство ассоциировано со значительно сниженной поляризуемостью, отражающую резистентность клеток. Описанные протромботические эффекты свободного гемоглобина и гема, как и способность измененных эритроцитов стимулировать образование тромбина посредством презентирования фосфа-тидилсерина на наружной поверхности мембран являются факторами повышенного агрегатообра-зования [20, 21].
В динамике абстинентного синдрома отмечена достоверная положительная динамика электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов, что можно рассматривать как диагностический критерий алкогольного генеза жировой болезни печени. В клинической практике изменение активности трансаминаз, ГГТП в короткие сроки (7-10 дней) при воздержании от алкоголя считается весьма характерным маркером хронического потребления этанола [22]. То же относится к среднему корпускулярному объему, однако, сроки изменения данного параметра несколько больше (в пределах
2,5-3 месяцев). Вместе с тем, известно, что чувствительность и специфичность этих маркеров невелика [22].
Следует отметить, что исследуемые параметры эритроцитов изменялись в разные сроки абстиненции, что, вероятно, связано с разной скоростью реагирования различных структур клетки на внешние воздействия, как и способностью к восстановлению. Очевидно, что для изменения способности к деформации необходимо изменение параметров большей части клеток эритроцитарно-го пула, что происходит в более отдаленные сроки по сравнению с показателями, отражающими непосредственное токсическое воздействие этанола. Косвенно данное обстоятельство подтверждается выявленными корреляциями амплитуды деформации клеток со СКОЭ.
У пациентов с НАЖБП параметры клеток красной крови не продемонстрировали существенной динамики в ходе выполнения рекомендаций по здоровому образу жизни. Хотя, по данным Е^оп-^ А. е! а1. [23] в мембранах эритроцитов отмечено изменение состава жирных кислот, ассоциированное с изменением липидемического профиля сыворотки крови при снижении массы тела пациентов с НАЖБП на 21 %. Подобные сдвиги, очевидно, скажутся на функциональных свойствах клеток красной крови. Но следует отметить, что в нашей работе снижение массы тела не превышало 5-7 % от исходного веса, что недостаточно как для обратного развития стеатоза печени [1, 6], так, очевидно, для положительной динамики вязкоупругих параметров эритроцитов.
В настоящем исследовании дифференциальная диагностика жировой болезни печени различного генеза усложнилась тем, что уровни большей части биохимических параметров находились в пределах референтных значений, как и индексы эритроцитов, используемых в клинической практике. Поскольку стадия гепатоза, сопровождаемая избыточным накоплением триглицеридов в гепато-цитах, но без реакции со стороны мезенхимальной ткани, ассоциирована с минимальной биохимической активностью.
Поэтому результаты однократного исследования биохимии, рутинных показателей красной крови пациента с жировой болезнью печени с учетом возможного нежелания сообщать о потреблении алкоголя не позволяют с уверенностью высказаться
об этиологии заболевания. В связи с этим информация об особенностях электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов, тем более в динамике наблюдения за пациентами приобретает весьма важное диагностическое значение.
Диагностические сложности при верификации диагноза «жировая болезнь печени» связаны с перекрестом патогенетических путей при алкогольном и неалкогольном генезе заболевания. Это подразумевает, что при разных «пусковых» факторах в последующем прослеживаются однотипные звенья патогенеза: активация ПОЛ, окислительный стресс, поражение фосфолипидов мембран митохондрий, нарушение системного и клеточного звеньев липидного обмена. Также можно предположить «перекрест» предрасполагающих факторов: ожирения, инсулинорезистентности, гиперлипиде-мии, нарушения кишечного микробиоценоза. Это объясняет сложности в процессе дифференциальной диагностики, поскольку данные осмотра, анкетирования, биохимических и инструментальных методов исследования, включая биопсию печени, на уровне стеатоза печени дают сходные результаты [4, 6].
Следует отметить, что, несмотря на многолетнее употребления алкоголя в неблагоприятном в отношении соматических осложнений стиле в группе пациентов с АЖБП развился стеатоз печени со степенью фиброза, не превышающую И. Подобный факт, вероятно, связан с индивидуальной органной чувствительностью к этанолу (в том числе, полиморфизмом алкогольметаболизирующих ферментов). Но, с другой стороны, может быть обусловлен участием эритроцитов в метаболизме этанола, поскольку известно, что в клетках красной крови содержится фермент каталаза, способный окислительно метаболизировать этанол до ацеталь-дегида [24-26]. Скорость каталазной активности эритроцитов составляет около 600 мкмоль / мин на мл крови [26], что было бы достаточно для превращения до 85 мМ этанола во внутриклеточный ацетальдегид за 60 мин, окисляемый до ацетата эритроцитарной ацетальдегиддегидрогеназой [25, 28]. Таким образом, вероятно, эритроциты берут на себя часть «метаболического бремени» по детокси-кации этанола. Это объясняет более выраженные сдвиги в электрических и вязкоупругих параметрах эритроцитов по сравнению с более деликатными изменениями в гепатоцитах.
Заключение
Таким образом, проведенное исследование выявило наличие достоверных различий в электрических и вязкоупругих параметрах эритроцитов у пациентов с жировой болезнью печени различного генеза: средний диаметр, электропроводность, индексы деструкции и агрегации, обобщенные показатели вязкости и жесткости, доля деформированных, сфероцитарных форм оказались выше, а амплитуда деформации клеток на высоких частотах электрического поля, скорость движения клеток к электродам, величина дипольного момента, емкость мембран, как и поляризуемость клеток - ниже
у пациентов с алкогольной жировой болезнью печени, чем таковые при неалкогольном генезе и у здоровых мужчин, что является отражением токсического действия этанола и его метаболитов.
В динамике абстинентного синдрома (2,5-3 месяца) отмечена достоверная положительная динамика большей части параметров эритроцитов у пациентов с АЖБП, в отличие от НАЖБП в динамике выполнения рекомендаций по снижению массы тела, что может служить дифференциально-диагностическим критерием при жировой болезни печени.
Наиболее значимыми для диагностики АЖБП в ранние сроки абстиненции оказались средний диаметр эритроцита, амплитуда деформации при частоте 106Гц, степень деформации при 0,5х106Гц, обобщенные показатели вязкости и жесткости, поляризуемость при частоте 106Гц, величина диполь-ного момента (АиС 0,719-0,857).
Выявлены корреляции электрических и вязко-упругих параметров эритроцитов со стилем потребления алкоголя, маркерами систематического потребления этанола в группе пациентов с АЖБП, с показателями метаболического синдрома у больных с НАЖБП, что отражает различия в пусковом этиологическом факторе заболеваний.
«Работа выполнена в рамках бюджетной темы № 0324-2018-0002 «Эпидемиологический мониторинг состояния здоровья населения и изучение молекулярно-генетических и молекулярно-биологических механизмов развития распространенных терапевтических заболеваний в Сибири для совершенствования подходов к их диагностике, профилактике и лечению».
Литература
1. Метаболический синдром / Под ред. чл.- корр. РАМН Г.Е. Ройтберга. - М.: Медпресс-информ, 2007. - 224 с.
2. Bellentani S, Scaglioni F., Marino M., Bedogni G. Epidemiology of non-alcoholic fatty liver disease // Dig Dis.,
2010, Vol. 28, No. 1, P. 155-61.
3. Курилович С. А., Решетников О. В. Эпидемиология заболеваний органов пищеварения в Западной Сибири, Новосибирск, 2000. - 165 с.
4. Махов В. М. Алкогольная болезнь печени и неалкогольная жировая болезнь печени - общность и различия // Лечащий врач, 2012, Т. 7, С. 22-28.
5. Fan J. G., Saibara T., Chitturi S., B.I. Kim B. I., Sung J. J., Chutaputti A. What are the risk factors and settings for non-alcoholic fatty liver disease in Asia-Pacific? // J. Gastroenterol. Hepatol., 2007, Vol. 22, No. 6., P. 794800.
6. Драпкина О. М., Смирин В. И., Ивашкин В. Т. Патогенез, лечение и эпидемиология НАЖБП - что нового? Эпидемиология НАЖБП в России // РМЖ, 2011, Т. 28, С. 1717-1721.
7. Morgan M. Y. The prognosis and outcome of alcoholic liver disease. // Alcohol. Alcohol., 1994, Vol. 2, Suppl., P. 335-43.
8. Rich H. G. Resolution of focal fatty infiltration of the liver // South Med. J., 1996, Vol. 89, No. 10, P. 1024-27.
9. Хомерики С. Г., Хомерики Н. М. Алкогольная болезнь печени: механизмы развития, морфологические проявления, дифференциальная диагностика и патогенетические подходы к терапии // Consilium medicum. Гастроэнтерология, 2012, Т. 1, С. 27-34.
10. Новицкий В. В., Рязанцева Н. В., Степовая Е. А. Физиология и патофизиология эритроцита. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 2004. - 202 c.
11. Шиффман Ф. Дж. Патофизиология крови / Пер с англ. Жибурта Е. Б., Токарева Ю. Н. - М.-СПб.: «Издательство БИНОМ» - «Невский диалог», 2000. - 448 с.
12. Генералов В. М., Кручинина М. В., Дурыманов, А.Г., Медведев А. А., Сафатов А. С., Сергеев А. Н., Бу-ряк Г. А., Курилович С. А., Громов А. А. Диэлектрофо-рез в диагностике инфекционных и неинфекционных заболеваний. - Новосибирск: Изд-во «ЦЭРИС»,
2011. - 172 с.
13. Рекомендации экспертов Всероссийского научного общества кардиологов по диагностике и лечению метаболического синдрома. Второй пересмотр // Кардиоваскулярная терапия и профилактика, 2009, № 6., С. 1-29.
14. Сторожок С. А., Панченко Л. Ф.,. Филиппович Ю.Д, Глушков В. С. Изменения физико-химических свойств биологических мембран при развитии толерантности к этанолу // Вопросы медицинской химии, 2001, № 2, С. 42-51.
15. Laposata M. Fatty acid ethyl esters: nonoxidative ethanol metabolites with emerging biological and clinical significance // Lipids. 1999, Vol. 34, P. S 281-S 285.
16. Gurtovenko A. A., Anwar J. Interaction of ethanol with biological membranes: The formation of non-bilayer structures within the membrane interior and their significance // J. Phys. Chem. B., 2009, Vol. 113, P. 1983-1992.
17. Varga A., Alling C. Formation of phosphatidylethanol in vitro in red blood cells from healthy volunteers and chronic alcoholics // J. Lab. Clin. Med., 2002, Vol. 140, No. 2, P. 79-83.
18. Tyulina, O. V., Prokopieva V.D, Dodd R. D., Hawkins J. R., Clay S. W., Wilson D. O., Boldyrev A. A., Johnson P. In vitro effects of ethanol, acetaldehyde and fatty acid ethyl esters on human erythrocytes // Alcohol. Alcohol., 2002, Vol. 37, No. 2, P. 179-86.
19. Chi L. M., Wu W. G. Mechanism of hemolysis of red blood cell mediated by ethanol // Biochim. Biophys. Acta, 1991, Vol. 1062, P. 46-50.
20. Litvinov R. I., Weisel J. W. Role of red blood cells in hae-mostasis and thrombosis // ISBT Sci Ser., 2017, Vol. 12, No. 1, P. 176-183.
21. Rabai M., Detterich R. J., Wenby A. B., K. Toth K., Meiselman H. J. Effects of ethanol on red blood cell rheological behavior // Clin. Hemorheol. Microcirc, 2014, Vol. 56, No. 2, P. 87-99.
22. Peterson K. Biomarkers for Alcohol Use and Abuse // Alcohol Research & Health, 2004/2005, Vol. 28, No. 1, P. 30-37.
23. Elizondo A., Aray J., RodrigoR., Signorini C., Sgherri C., Com-porti M., Poniachik J., Videla L. A. Effects of weight loss on liver and erythrocyte polyunsaturated fatty acid pattern and oxidative stress status in obese patients with non-alcoholic fatty liver disease // Biol. Res. - 2008. - Vol. 41, No. 1. - P. 59-68.
24. Oshino N., Oshino R., Chance B. The characteristics of the 'peroxidatic' reaction of catalase in ethanol oxidation // Biochem. J., 1973, Vol. 131, P. 555-567.
25. Zorzano A., Ruiz del Arbol L., Herrera E. Effect of liver disorders on ethanol elimination and alcohol and aldehyde dehydrogenase activities in liver and erythrocytes // Clin. Sci. - 1989. - Vol. 76. - P. 51-57.
26. Hamby-Mason R., Chen J. J., Schenker S., Perez A., Henderson G. I. Catalase mediates acetaldehyde formation from ethanol in fetal and neonatal rat brain // Alcohol. Clin. Exp. Res., 1997, Vol. 21, P. 1063-1072.
27. Tephly T. R., Mannering G. J., Parks R. E. Studies on the mechanism of inhibition of liver and erythrocyte catalase activity by 3-amino-1,2,4-triazole (AT) // J. Pharmacol. Exp. Ther., 1961, Vol. 133, P. 77-82.
28. Meier-Tackmann D., Leonhardt R. A., Agarwal, D.P., Goedde H. W. Effect of acute ethanol drinking on alcohol metabolism in subjects with different ADH and ALDH genotypes // Alcohol., 1990, Vol. 7, P. 413-418.
